目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组...目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组)和空载体(p-EGFP-C1组),同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂。Western blot法检测转染后细胞中FOXO4蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Caspase-3、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、Caspase-9、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt1表达水平。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂作用于转染p-EGFP-C1/FOXO4后的喉癌细胞(激活剂组),检测细胞增殖、凋亡情况。结果 FOXO4在喉癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞中FOXO4表达水平明显高于未转染组(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞存活率及β-catenin、Wnt1水平明显低于未转染组(P=0.002,P=0.004,P=0.006),细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Caspase-3、Cleaved Caspase-9、C a s p a s e-9表达水平均明显高于未转染组(P=0.0 0 2,P=0.001,h P<0.05,P=0.004,j P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路激活剂可以部分逆转FOXO4抑增殖和促凋亡作用。结论 FOXO4能够促进人喉癌细胞凋亡,抑制喉癌细胞增殖,作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。展开更多
乳蛋白是乳汁的主要成分之一,具有极高的营养价值,含有人体所需的必需氨基酸。作者主要介绍了乳蛋白合成的相关通路:氨基酸转运系统(amino acid transport system)、蛋白酪氨酸激酶-2信号转导子和转录激活子-5(Janus tyrosine kinase 2-...乳蛋白是乳汁的主要成分之一,具有极高的营养价值,含有人体所需的必需氨基酸。作者主要介绍了乳蛋白合成的相关通路:氨基酸转运系统(amino acid transport system)、蛋白酪氨酸激酶-2信号转导子和转录激活子-5(Janus tyrosine kinase 2-signal transducer and activator of transcription 5,Jak2-Stat5)信号转导途径和雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的调控。氨基酸转运系统为乳蛋白形成提供前体原料,信号转导子和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,Stat)家族是调控乳蛋白表达的信号传导因子,特别是Stat5对于乳蛋白的合成有重要作用,而mTOR信号通路整合了催乳素、胰岛素等激素及EIF4E、AKT等细胞因子来调控蛋白相关基因的表达,此外还涉及乳蛋白合成,对于提高乳汁营养价值具有重要意义。展开更多
文摘目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组)和空载体(p-EGFP-C1组),同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂。Western blot法检测转染后细胞中FOXO4蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Caspase-3、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、Caspase-9、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt1表达水平。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂作用于转染p-EGFP-C1/FOXO4后的喉癌细胞(激活剂组),检测细胞增殖、凋亡情况。结果 FOXO4在喉癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞中FOXO4表达水平明显高于未转染组(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞存活率及β-catenin、Wnt1水平明显低于未转染组(P=0.002,P=0.004,P=0.006),细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Caspase-3、Cleaved Caspase-9、C a s p a s e-9表达水平均明显高于未转染组(P=0.0 0 2,P=0.001,h P<0.05,P=0.004,j P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路激活剂可以部分逆转FOXO4抑增殖和促凋亡作用。结论 FOXO4能够促进人喉癌细胞凋亡,抑制喉癌细胞增殖,作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。
文摘乳蛋白是乳汁的主要成分之一,具有极高的营养价值,含有人体所需的必需氨基酸。作者主要介绍了乳蛋白合成的相关通路:氨基酸转运系统(amino acid transport system)、蛋白酪氨酸激酶-2信号转导子和转录激活子-5(Janus tyrosine kinase 2-signal transducer and activator of transcription 5,Jak2-Stat5)信号转导途径和雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的调控。氨基酸转运系统为乳蛋白形成提供前体原料,信号转导子和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,Stat)家族是调控乳蛋白表达的信号传导因子,特别是Stat5对于乳蛋白的合成有重要作用,而mTOR信号通路整合了催乳素、胰岛素等激素及EIF4E、AKT等细胞因子来调控蛋白相关基因的表达,此外还涉及乳蛋白合成,对于提高乳汁营养价值具有重要意义。