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高强度间歇运动训练上调APP/PS1转基因阿尔兹海默病小鼠海马线粒体自噬的研究 被引量:11
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作者 张子怡 康伟民 +1 位作者 张晟 薄海 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期670-675,共6页
目的:观察高强度间歇运动训练干预是否能改善APP/PS1转基因AD小鼠病理表现,并探讨线粒体自噬在其间的生物学效应。方法:8月龄雄性APP/PS1转基因小鼠分为转基因模型安静组(SED-Tg)和转基因模型+高强度间歇运动训练组(HIIT-Tg),C57BL/6野... 目的:观察高强度间歇运动训练干预是否能改善APP/PS1转基因AD小鼠病理表现,并探讨线粒体自噬在其间的生物学效应。方法:8月龄雄性APP/PS1转基因小鼠分为转基因模型安静组(SED-Tg)和转基因模型+高强度间歇运动训练组(HIIT-Tg),C57BL/6野生型小鼠纳入野生型安静组(SED-Wt)。HIIT-Tg组动物进行12周高强度间歇运动训练。避暗被动回避实验检测学习记忆能力,JC-1荧光探针检测海马线粒体膜电位,二氯荧光素探针检测海马线粒体ROS,Western Blot法检测脑海马Aβ-42、BDNF、AMPK、PINK1、Parkin、Bnip3蛋白表达。结果:①SED-Tg组与SED-Wt组比较,逃避潜伏期、线粒体膜电位、BDNF、AMPK、PINK1、Parkin和Bnip3蛋白表达显著降低(P<0.05—0.01),线粒体ROS产生速率和Aβ-42蛋白表达显著升高(P<0.01)。②HIIT-Tg组与SED-Tg组比较,逃避潜伏期、线粒体膜电位、BDNF、AMPK、PINK1和Parkin蛋白表达显著升高(P<0.01),线粒体ROS产生速率和Aβ-42蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:高强度间歇运动训练可通过上调AMPK-PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,改善线粒体功能,减少APP/PS1转基因AD小鼠脑海马Aβ积聚,提高记忆和学习能力。 展开更多
关键词 APP/PS1转基因 阿尔兹海默 高强度间歇运动训练 线粒体自噬 脑海马
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淀粉样前体蛋白转基因痴呆模型小鼠视网膜和视神经纤维层病理改变 被引量:2
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作者 卢艳 董海莲 +1 位作者 张丽娜 王蓉 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第9期810-813,共4页
目的观察淀粉样前体蛋白(amyloid precusor protein,APP)转基因痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠视网膜组织病理和视神经纤维记数的改变。方法本实验采用6只10月龄的C57BL/6JAPP转基因雄性小鼠模型作为模型组,6只同月龄的C57BL/6... 目的观察淀粉样前体蛋白(amyloid precusor protein,APP)转基因痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠视网膜组织病理和视神经纤维记数的改变。方法本实验采用6只10月龄的C57BL/6JAPP转基因雄性小鼠模型作为模型组,6只同月龄的C57BL/6J正常雄性小鼠作为正常对照组。处死小鼠,完整取出眼球分离视网膜,进行视网膜常规HE染色,同时取球后视神经制作半薄切片,甲苯胺蓝染色,光镜观察视神经形态,行图像分析和轴突纤维计数。结果视神经横断面模型组小鼠与正常对照组相比:神经纤维组织疏松,排列较紊乱,染色深浅不均,间质增多,部分轴突水肿。与正常对照组(1.77±0.04)×106相比,模型组小鼠视神经纤维数量(2.28±0.06)×106明显减少,视神经纤维密度正常对照组和模型组分别为(0.3836±0.0697)μm-2和(0.2701±0.0517)μm-2,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组神经细胞平均光密度值无明显变化,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组小鼠视网膜神经节细胞层细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),两组内颗粒层和外颗粒层细胞数量无明显变化,差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论 APP转基因AD模型小鼠视网膜神经节细胞数减少,视神经纤维数明显减少而且受损,提示APP转基因AD模型小鼠视网膜和视神经存在退行性病变。 展开更多
关键词 淀粉样前体蛋白转基因痴呆模型小鼠 阿尔兹海默 视网膜神经节细胞
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APPswe/PS1dE9/TAU三转基因阿尔兹海默病大鼠模型的建立 被引量:1
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作者 张丽 陈炜 +2 位作者 张旭 孙彩显 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第3期61-66,I0008,共7页
目的大鼠的大脑比小鼠更大,是研究神经系统的重要模型。建立APPswe/PS1dE9/TAU三转基因大鼠,发展能更全面表现人类阿尔兹海默病表型的动物模型。方法构建人PrP-hAPP695 K595N/M596L、PrPhPS1dE9和PDGF-TAU转基因表达载体,显微注射法制... 目的大鼠的大脑比小鼠更大,是研究神经系统的重要模型。建立APPswe/PS1dE9/TAU三转基因大鼠,发展能更全面表现人类阿尔兹海默病表型的动物模型。方法构建人PrP-hAPP695 K595N/M596L、PrPhPS1dE9和PDGF-TAU转基因表达载体,显微注射法制备转基因大鼠。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Western blot检测转基因大鼠脑组织中人APP、PS1和TAU蛋白的表达。Morris水迷宫检测6月龄三转基因大鼠学习记忆能力改变。APP、PHF-TAU免疫组织化学染色观察三转基因大鼠脑组织APP及TAU的表达。结果得到1个同时高表达人APP、PS1和TAU三个基因的转基因大鼠品系。转基因大鼠6月龄已经出现显著的行为学改变:学习记忆能力下降,病理学改变表现为过度磷酸化TAU增多和神经元胞浆内Aβ表达异常增加。结论成功建立了APPswe/PS1dE9/TAU三转AD大鼠,可做为新一代工具动物模型用于基础医学和AD转化医学研究。 展开更多
关键词 转基因 微管相关蛋白Tau 阿尔兹海默 神经纤维缠结 大鼠
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跑步锻炼对APP/PS1双转基因AD模型小鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的作用 被引量:3
4
作者 周春妮 蒋林 +7 位作者 张毅 张蕾 晁凤蕾 罗艳敏 王飞飞 谭川雪 陈林木 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-7,共7页
目的:运用新的体视学方法定量研究跑步锻炼对APP/PS1双转基因模型小鼠行为学、大脑白质及白质内有髓神经纤维的作用。方法:将6月龄雌性APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠分为对照组(n=7)和跑步组(n=12),跑... 目的:运用新的体视学方法定量研究跑步锻炼对APP/PS1双转基因模型小鼠行为学、大脑白质及白质内有髓神经纤维的作用。方法:将6月龄雌性APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠分为对照组(n=7)和跑步组(n=12),跑步组给予4个月的跑步锻炼干预。跑步后运用Morris水迷宫实验检测小鼠的空间学习和记忆能力;用精确的三维体视学方法来定量测定小鼠白质总体积、白质内有髓神经纤维总长度,白质内有髓纤维、髓鞘和轴突的总体积。结果:经过4个月的跑步锻炼后,跑步组小鼠的定位航行实验显示其平均逃避潜伏期明显短于对照组(P=0.000),空间探索实验表明跑步组穿台次数和平台所在象限时间百分比明显大于对照组(P=0.000,P=0.009)。与对照组小鼠比较,跑步组小鼠白质总体积、白质内有髓纤维总体积和轴突的总体积明显增加(P=0.026,P=0.042,P=0.027),而白质内有髓神经纤维总长度和有髓神经纤维髓鞘总体积差异无统计学意义(P=0.259,P=0.901)。结论:跑步锻炼对白质体积和有髓神经纤维的作用可能是跑步锻炼延缓AD学习和记忆力下降的重要结构基础之一。 展开更多
关键词 转基因阿尔兹海默病小鼠 跑步锻炼 白质 有髓神经纤维 体视学
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阿尔兹海默病小鼠模型的磁共振影像学分析 被引量:4
5
作者 朱皓 高凯 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第12期48-53,共6页
目的分析和研究阿尔兹海默病(AD)转基因模型小鼠(APP/PS1)活体脑部影像学特征。方法本研究利用7.0 T高场强磁共振成像(MRI)技术,对1、3、5、7、9和11月龄AD转基因小鼠模型及对照组活体脑组织的微观结构变化进行对比研究。定量分析了脑... 目的分析和研究阿尔兹海默病(AD)转基因模型小鼠(APP/PS1)活体脑部影像学特征。方法本研究利用7.0 T高场强磁共振成像(MRI)技术,对1、3、5、7、9和11月龄AD转基因小鼠模型及对照组活体脑组织的微观结构变化进行对比研究。定量分析了脑组织顶叶皮层及海马区的横向弛豫时间(T2)、表观扩散系数(ADC)和各向异性分数(FA)随AD小鼠年龄变化情况。结果从9月龄开始AD转基因小鼠顶叶皮层及海马区可见散点状低信号区,并且随年龄增长逐渐增多;AD转基因小鼠顶叶皮层和海马区的T2磁豫时间在1~9月龄过程中有减小趋势,但与对照组无显著性差异;顶叶皮层及海马区ADC值的计算结果表明,7~11月龄AD转基因小鼠的ADC值明显下降(P≤0.05);同样APP/PS1小鼠的FA值从5月龄就开始降低(P≤0.05),并且这种差异一直持续到11月龄。结论高场强MRI能够显示AD病变出现早期小鼠顶叶皮层及海马区FA值的明显改变,揭示FA值对早期痴呆症临床诊断具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 阿尔兹海默 小鼠模型 磁共振成像 各向异性分数
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心脏特异表达人源FAM55A转基因小鼠的建立
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作者 张丽 全雄志 +4 位作者 董伟 高翔 刘宁 徐艳峰 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第9期1-5,F0003,共6页
目的建立心脏特异表达的人源FAM55A转基因小鼠,为研究该基因在心肌病发病中的作用提供模型。方法 Western blot检测FAM55A在野生型小鼠与cTnTR141W转基因小鼠心脏组织中的表达变化及其在野生小鼠的组织表达谱。克隆人源FAM55A基因入α-... 目的建立心脏特异表达的人源FAM55A转基因小鼠,为研究该基因在心肌病发病中的作用提供模型。方法 Western blot检测FAM55A在野生型小鼠与cTnTR141W转基因小鼠心脏组织中的表达变化及其在野生小鼠的组织表达谱。克隆人源FAM55A基因入α-MHC启动子下游构建a-MHC-FAM55A表达载体,显微注射法建立FAM55A转基因小鼠。PCR鉴定转基因首建鼠的基因型。Western blot鉴定人源FAM55A在转基因小鼠心脏中的表达,超声检测转基因小鼠心脏的几何构型和功能。HE染色检测转基因小鼠心脏的病理改变。结果 FAM55A在野生型小鼠心脏中有少量表达,在扩张型心肌病小鼠的心脏中表达增加。建立了1个心脏组织特异表达人源FAM55A转基因小鼠品系。与野生型小鼠相比,FAM55A转基因小鼠的心脏收缩期和舒张期左室前壁从1月龄到5月龄持续增厚,3月龄转基因小鼠心脏射血分数和短轴缩短率稍有增强,1月龄和5月龄转基因小鼠心脏功能则与同龄野生型小鼠相比无变化。组织学检测显示,转基因小鼠心脏左室心肌细胞不均匀肥大,但不发生紊乱。结论 FAM55A在扩张型心肌病小鼠的心脏中表达上调,建立了心脏特异表达的人源FAM55A转基因小鼠,为进一步和心肌病小鼠模型杂交,研究该基因在心肌病发病中的作用提供了工具。 展开更多
关键词 FAM55A 转基因 小鼠 心肌
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肝素结合性表皮生长因子转基因小鼠的建立和功能研究
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作者 彭健豪 邸冉 +1 位作者 董伟 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第4期187-191,I0001,共6页
目的建立肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF在心脏功能中的作用。方法构建α-MHC-HB-EGF表达载体,将目的片段注射到受精卵的雄原核中,使其发育成携带有HB-EGF的转基因小鼠。通过PCR的方法... 目的建立肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF在心脏功能中的作用。方法构建α-MHC-HB-EGF表达载体,将目的片段注射到受精卵的雄原核中,使其发育成携带有HB-EGF的转基因小鼠。通过PCR的方法鉴定转基因的首建鼠。采用Western blotting方法鉴定HB-EGF在心脏中的表达,取HB-EGF在心脏中特异性高表达的阳性转基因小鼠的F1代与同窝阴性对照小鼠的心脏做BrdU免疫组化和Masson染色。结果得到了两只HB-EGF阳性的首建鼠,Western blotting发现16号小鼠中HB-EGF在心脏中的表达与同窝阴性对照小鼠相比蛋白表达明显增加。转基因小鼠心脏BrdU标记的阳性细胞数明显多于阴性对照组的阳性细胞数,Masson染色胶原纤维明显少于同窝阴性对照的小鼠。结论HB-EGF的高表达可以促进心肌细胞的增殖,减少胶原纤维生成,抑制心肌的纤维化。 展开更多
关键词 模型 动物 转基因 肝素结合性 表皮生长因子 ERBB 扩张性心肌 小鼠
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MG53蛋白联合hUC-MSCs移植对阿尔兹海默病小鼠行为和情绪失调的改善作用 被引量:3
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作者 周馨魁 马珊珊 +7 位作者 黄团结 李喆 崔渊博 王亚苹 刘腾飞 周建康 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第6期793-797,共5页
目的:研究MG53蛋白联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠行为和情绪失调的改善作用。方法:将3月龄AD小鼠随机分为APP+组、MG53组、hUC-MSCs组和联合组,每组8只。APP+组小鼠尾静脉注射0.1 mL生理盐水,hUC-MSCs组... 目的:研究MG53蛋白联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠行为和情绪失调的改善作用。方法:将3月龄AD小鼠随机分为APP+组、MG53组、hUC-MSCs组和联合组,每组8只。APP+组小鼠尾静脉注射0.1 mL生理盐水,hUC-MSCs组同法注射0.1 mL细胞密度为1×10^7个/mL的hUC-MSCs悬液,MG53组按3 mg/kg注射0.1 mL rhMG53,联合组小鼠尾静脉注射含hUC-MSCs和rhMG53的混合液,1次/d,连续3 d。治疗3 d后,DHE染色法检测小鼠(n=3)脑内ROS含量;治疗后第26-28天,采用旷场实验、新事物识别实验和新奇抑制喂养实验(n=4)评价小鼠的记忆、认知能力和抑郁情绪;治疗后第29天,进行脑组织尼氏染色(n=4),硫磺素S染色法检测Aβ斑块面积(n=4),Western blot法检测Nrf2通路相关蛋白Nrf2、NQO1和Keap-1的表达(n=1)。结果:MG53和hUC-MSCs移植单独应用均可增加AD小鼠脑内尼氏小体数量,降低ROS含量,减小Aβ斑块面积,改善小鼠的学习记忆能力和焦虑情绪(P均<0.05)。二者联用有协同增效的作用(P均<0.05)。MG53和hUC-MSCs移植可以促进AD小鼠脑组织中Nrf2、NQO1蛋白的表达,降低Keap-1蛋白的表达。结论:MG53蛋白联合hUC-MSCs移植可以激活Nrf2通路,在一定程度上改善AD小鼠的行为能力。 展开更多
关键词 MG53蛋白 人脐带间充质干细胞 Nrf2通路 阿尔兹海默 小鼠
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转人APP基因小鼠视网膜视神经细胞超微结构改变 被引量:1
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作者 卢艳 董海莲 王蓉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第4期41-43,共3页
目的观察转人APP基因AD模型小鼠视网膜各层细胞超微结构的改变。方法实验采用C57BL/6J转人APP基因小鼠6只,采用同背景10个月龄的C57 BL/6J正常小鼠6只做为对照。灌注处死小鼠,完整取出右眼球分离视网膜,制作电镜标本观察视网膜各层细胞... 目的观察转人APP基因AD模型小鼠视网膜各层细胞超微结构的改变。方法实验采用C57BL/6J转人APP基因小鼠6只,采用同背景10个月龄的C57 BL/6J正常小鼠6只做为对照。灌注处死小鼠,完整取出右眼球分离视网膜,制作电镜标本观察视网膜各层细胞超微结构改变。结果与对照组相比,模型组视网膜各层细胞异常明显:膜盘排列结构模糊,局部间隙溶解、甚至消失;外核层细胞体干枯变形,染色质聚集浓缩;内核层可见固缩细胞;神经节细胞胞膜不完整,线粒体水肿,并可见染色质聚集。结论转人APP基因AD模型小鼠视网膜各层神经细胞超微结构存在明显病理改变。 展开更多
关键词 APP转基因小鼠 阿尔兹海默 电镜 视网膜神经细胞
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小鼠神经细胞p35^(nck5a)基因5′非编码区基因表达调控功能初步研究
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作者 朱海英 周常文 +4 位作者 王秀凤 傅继梁 李建秀 王新民 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期147-149,共3页
目的 :观察阿尔茨海默病 (AD)的相关基因 p35 nck5a基因 5′侧翼区指导报告基因表达的能力。方法 :将对本实验室所克隆的 p35 nck5a基因 5′侧翼片段连接于报告基因 β-半乳糖苷酶基因的上游构建表达载体 ,利用体外培养细胞和转基因小... 目的 :观察阿尔茨海默病 (AD)的相关基因 p35 nck5a基因 5′侧翼区指导报告基因表达的能力。方法 :将对本实验室所克隆的 p35 nck5a基因 5′侧翼片段连接于报告基因 β-半乳糖苷酶基因的上游构建表达载体 ,利用体外培养细胞和转基因小鼠实验体系来观察该片段在体内、外基因表达调控的差异。结果 :体外培养细胞中 p35 nck5a基因 5′侧翼序列不具有决定报告基因神经特异性表达的能力 ,但在基因组中整合有相同表达载体的转基因小鼠体内却能够指导报告基因的神经限制性表达。 结论 :这种差异提示进行体内。 展开更多
关键词 p35^nck5a基因 小鼠 转基因 基因表达 调控 神经细胞 AD
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黄连解毒汤通过上调HSP70改善APP/PS1小鼠学习记忆能力 被引量:4
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作者 谭爱华 冉思邈 +1 位作者 石和元 林谦 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第12期4865-4872,共8页
目的观察黄连解毒汤对APP/PS1小鼠认知功能的改善作用及对HSP70蛋白的调控作用,以期为黄连解毒汤防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)找到新的生物学基础。方法将小鼠随机分为空白组、模型组、替普瑞酮组(0.4 g·kg^(-1))、... 目的观察黄连解毒汤对APP/PS1小鼠认知功能的改善作用及对HSP70蛋白的调控作用,以期为黄连解毒汤防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)找到新的生物学基础。方法将小鼠随机分为空白组、模型组、替普瑞酮组(0.4 g·kg^(-1))、黄连解毒汤组(5.2g·kg^(-1)),空白组和模型组小鼠灌服等体积超纯水,连续给药40天。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力、免疫荧光检测各组小鼠皮层和海马区热休克蛋白70(Heat Shock Proteins 70,HSP70)的表达及HSP70和β淀粉样蛋白1-42(beta-amyliod protein,Aβ1-42)、微管相关蛋白总tau蛋白(Microtubule-associated protein tau,T-Tau)共定位表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马中热休克转录因子1(Heat Shock transcription Factor 1,HSF1)、HSP70蛋白含量表达水平。结果与空白组比较,各组小鼠平均游泳速度差异无统计学意义(P>0.05),模型组小鼠游泳总路程和上平台潜伏期明显延长(P<0.01),穿越平台次数明显减少(P<0.01);小鼠皮层和海马区HSP70荧光强度增高,共定位结果显示胞内外均可见由HSP70的红色荧光和Aβ1-42的绿色荧光重叠的黄色荧光,由红色荧光的HSP70和绿色荧光的T-Tau重叠的黄色荧光,几乎都分布在胞外。海马中HSF1、HSP70蛋白表达水平表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠游泳总路程和上平台潜伏期均缩短(P<0.05),穿越平台次数有不同程度的增加(P<0.05);各给药组小鼠皮层和海马各个区域的HSP70荧光数量和强度均有不同程度的增强,CA3区和DG区更为明显;替普瑞酮组HSF1和HSP70蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),黄连解毒汤组小鼠HSF1蛋白表达水平的差异无统计学意义(P>0.05),而HSP70蛋白表达水平表达显著升高(P<0.01)。结论黄连解毒汤改善APP/PS1小鼠认知功能可能是通过上调HSP70表达减轻Aβ1-42、T-Tau对神经元细胞的损害。 展开更多
关键词 阿尔兹海默 黄连解毒汤 热休克蛋白 热休克转录因子 APP/PS1小鼠
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