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转基因克隆牛胎盘中印迹基因PEG10的DNA甲基化水平 被引量:8
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作者 苏建民 许文兵 +3 位作者 李艳艳 王丽君 王勇胜 张涌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期533-538,共6页
低效率的体细胞核移植技术显著制约着该技术在转基因动物生产上的广泛应用。目前认为供体细胞核不能被受体卵母细胞胞质完全的表观重编程是其效率低下的最主要原因,而DNA甲基化是基因表观修饰的主要方式之一。为了探求转基因克隆牛的死... 低效率的体细胞核移植技术显著制约着该技术在转基因动物生产上的广泛应用。目前认为供体细胞核不能被受体卵母细胞胞质完全的表观重编程是其效率低下的最主要原因,而DNA甲基化是基因表观修饰的主要方式之一。为了探求转基因克隆牛的死亡是否与其胎盘中印迹基因的甲基化的重编程程度相关,文章通过亚硫酸氢盐测序法(Bisulfite sequencing PCR,BSP)和亚硫酸氢盐联合限制性内切酶分析法(Combined bisulfite restriction analysis,COBRA),对印迹基因PEG10在围产期死亡且存在发育缺陷的转基因克隆牛的胎盘(死亡组)和存活的转基因克隆牛的胎盘(存活组)与正常对照牛胎盘(对照组)的DNA甲基化水平进行了详细的比较。结果发现,与对照组相比,PEG10基因在死亡组上表现出异常的超甲基化水平,而存活组与对照组相比无显著性差异。研究结果显示,胎盘中印迹基因的DNA甲基化表观重编程不彻底可能是导致转基因克隆牛发育异常进而死亡的主要原因之一。 展开更多
关键词 DNA甲基化 PEG10 体细胞核移植 转基因克隆
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转基因克隆动物的发展及其应用 被引量:4
2
作者 骆继怀 独军政 常惠芸 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第7期103-106,共4页
转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应... 转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应器方面的应用,存在的问题与安全性评价等方面做了较系统的阐述,并预测了转基因克隆动物应用的发展前景及其给社会带来的深远影响。 展开更多
关键词 转基因克隆动物 异体器官移植 抗病育种 乳腺生物反应器
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转基因克隆猪与人类异种器官移植 被引量:4
3
作者 俞远京 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第1期50-53,共4页
利用猪的器官来解决当前人源器官严重短缺 ,为解决移植器官短缺的可行的途径 ,直接并准确地对α- 1,3半乳糖苷转移酶 (α - 1,3GT)基因进行同源重组 ,使α- 1,3GT失活 ,再结合猪体细胞克隆技术 ,对其进行人源化改造 ,减弱或消除排异反... 利用猪的器官来解决当前人源器官严重短缺 ,为解决移植器官短缺的可行的途径 ,直接并准确地对α- 1,3半乳糖苷转移酶 (α - 1,3GT)基因进行同源重组 ,使α- 1,3GT失活 ,再结合猪体细胞克隆技术 ,对其进行人源化改造 ,减弱或消除排异反应。然而 ,猪内源性逆转录病毒 (porcineendogenousretrovirus,PERV)为异种器官移植的主要障碍。因此 ,既要剔除导致人类排异反应的排斥基因 。 展开更多
关键词 转基因克隆 人类 异种器官移植 PERV Α-半乳糖苷酶 治疗 免疫学
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一例转基因克隆水牛主要脏器组织结构观察
4
作者 卢俊求 胡巍堃 +1 位作者 周悦 王晓丽 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第21期5251-5252,5261,共3页
应用石蜡切片及HE染色技术观察转基因克隆水牛牛犊的心脏、肝、肾、胰腺、睾丸等主要脏器组织结构,并使用激光共聚焦显微镜对其心脏、肝、肾、睾丸冰冻组织切片进行荧光观察。结果表明,转基因克隆水牛心脏结构异常,心肌纤维间隙过大,闰... 应用石蜡切片及HE染色技术观察转基因克隆水牛牛犊的心脏、肝、肾、胰腺、睾丸等主要脏器组织结构,并使用激光共聚焦显微镜对其心脏、肝、肾、睾丸冰冻组织切片进行荧光观察。结果表明,转基因克隆水牛心脏结构异常,心肌纤维间隙过大,闰盘结构不明显,出现炎症、出血等病理现象;肝、肾、胰腺、睾丸结构完整,细胞形态、分布均正常。激光共聚焦显微镜下各冰冻组织切片中均可见较均匀绿色荧光,初步证实绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因成功整合到了水牛体内。 展开更多
关键词 水牛 转基因克隆 脏器 组织结构
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转基因克隆动物研究现状
5
作者 陆会宁 《畜牧兽医科技信息》 2014年第7期12-13,共2页
对于生物领域来说,转基因克隆动物的出现,可谓是掀起了一股新的研究热潮,不仅体现了极高的科学意义,而且还存在着极强的应用价值。转基因克隆动物最引人注目的时期是在1997年的英国,克隆绵羊“多莉”的出世,使转基因克隆动物的研... 对于生物领域来说,转基因克隆动物的出现,可谓是掀起了一股新的研究热潮,不仅体现了极高的科学意义,而且还存在着极强的应用价值。转基因克隆动物最引人注目的时期是在1997年的英国,克隆绵羊“多莉”的出世,使转基因克隆动物的研究在全球生物领域风起云涌。那么到底当前转基因克隆动物的研究现状如何呢?笔者在本文中简单介绍了转基因克隆动物的含义、方法与应用发展领域,并总结了一系列亟需我们不断探索与完善的问题。 展开更多
关键词 转基因克隆动物 方法 应用领域 问题
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1例转基因克隆牛脑和免疫器官组织形态观察报告 被引量:1
6
作者 徐金霞 张羽 +3 位作者 王勇胜 边珍 卿素珠 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第6期35-40,46,共7页
【目的】对1例新生死亡的转基因克隆牛的脑和免疫器官进行观察,分析和评价克隆牛脑和免疫器官的发育状况。【方法】采用病理解剖、组织学常规石蜡切片-HE染色技术,对转基因克隆牛的脑部和免疫器官的组织结构进行系统观察与分析。【结果... 【目的】对1例新生死亡的转基因克隆牛的脑和免疫器官进行观察,分析和评价克隆牛脑和免疫器官的发育状况。【方法】采用病理解剖、组织学常规石蜡切片-HE染色技术,对转基因克隆牛的脑部和免疫器官的组织结构进行系统观察与分析。【结果】该克隆牛体格偏大,头颅骨质较一般犊牛坚硬,免疫器官外观无明显变化。镜下观察显示,大脑皮质层次清晰,有轻度充血和1处明显的点状出血;小脑皮质可分为明显的3层结构,蛛网膜有轻度充血;脾脏红髓轻度淤血并有散在含铁血黄素沉着;白髓中央动脉周围淋巴鞘清晰可见,脾小体数量较多,但脾小体和动脉周围淋巴鞘内淋巴细胞数量较少;淋巴结被膜薄,小梁不发达,皮质淋巴细胞多而密集,但典型的具有生发中心的淋巴小结较少;髓索不明显,髓质部毛细血管扩张充血;胸腺被膜和小梁上血管可见充血现象;皮质部淋巴细胞丰富,可见散布的胸腺细胞;髓质淋巴细胞密集,细胞间可见数量较多的巨噬细胞;嗜酸性胸腺小体易于辨认,但发育不完全。【结论】该例克隆牛脑发育较为成熟,但免疫器官发育不均衡。 展开更多
关键词 转基因克隆 免疫器官 组织学
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人α-乳清蛋白转基因克隆牛外源基因拷贝数的分析 被引量:2
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作者 王洁雯 王敬姣 +3 位作者 赵姝君 李宁 李世杰 张萃 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期183-187,共5页
为了探讨转基因克隆动物外源基因拷贝数及拷贝数在传代过程中的变化,本研究应用实时荧光定量PCR检测人α-乳清蛋白(human alpha-lactalbumin,HLA)转基因克隆牛及其子代共5头牛中外源基因的拷贝数,其中K060923为亲代,172、081、189、隆... 为了探讨转基因克隆动物外源基因拷贝数及拷贝数在传代过程中的变化,本研究应用实时荧光定量PCR检测人α-乳清蛋白(human alpha-lactalbumin,HLA)转基因克隆牛及其子代共5头牛中外源基因的拷贝数,其中K060923为亲代,172、081、189、隆娃为子代。HLA基因在亲代转基因克隆牛K060923中的拷贝数为1.145,在子代转基因克隆牛172、081、189和隆娃中分别为0.998、1.107、0.891和0.842。结果表明,5头牛中外源基因拷贝数都在1左右,说明人α-乳清蛋白基本以单拷贝形式整合到宿主基因组中,且稳定遗传。 展开更多
关键词 人α-乳清蛋白基因 转基因克隆 实时荧光定量PCR 拷贝数
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人转铁蛋白转基因克隆牛整合位点检测 被引量:1
8
作者 刘宇 朱怡文 +1 位作者 许淼 黄英 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期60-63,共4页
为检测外源基因整合在转基因克隆牛染色体上的定位情况,通过优化染色体荧光原位杂交技术,成功对4头人转铁蛋白转基因克隆牛的整合位点进行定位。每头牛分析中期分裂相40个以上,杂交率在53.1%~86.8%之间,且杂交信号分别位于转基因克隆牛... 为检测外源基因整合在转基因克隆牛染色体上的定位情况,通过优化染色体荧光原位杂交技术,成功对4头人转铁蛋白转基因克隆牛的整合位点进行定位。每头牛分析中期分裂相40个以上,杂交率在53.1%~86.8%之间,且杂交信号分别位于转基因克隆牛的11号、15号和19号染色体的相应位置;另外采用定量PCR方法对杂交信号强弱不同的转基因克隆牛个体进行整合位点拷贝数的检测,结果显示拷贝数的多少与杂交信号强弱直接有关。 展开更多
关键词 荧光原位杂交 人转铁蛋白转基因克隆 整合位点 拷贝数
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因传染性胃肠炎死亡的转基因克隆仔猪的临床病理分析和初步分子鉴定
9
作者 赵雪艳 洪渊 +9 位作者 赵科伟 王小鹏 杨强 王成斌 何小芳 邱青松 程玉柱 崔磊磊 任军 幸宇云 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期504-511,共8页
观察记录6头因传染性胃肠炎死亡的转基因克隆大白仔公猪的临床和病理症状,比较这些猪和普通大白猪多个部位器官的脏器系数;通过常规PCR和Long PCR对转基因仔猪所导入的外源载体p EF-BMPRIB(CDS)-Neo进行扩增,利用实时荧光定量PCR(RT-PCR... 观察记录6头因传染性胃肠炎死亡的转基因克隆大白仔公猪的临床和病理症状,比较这些猪和普通大白猪多个部位器官的脏器系数;通过常规PCR和Long PCR对转基因仔猪所导入的外源载体p EF-BMPRIB(CDS)-Neo进行扩增,利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)绝对定量的方法检测外源载体中标记基因NEO的拷贝数。结果显示:患病死亡的转基因个体均表现出腹泻及粪便异常的症状,部分个体伴有发烧、咳嗽等不同症状,解剖后发现所有个体均表现出小肠肿胀和胃内充有凝乳,部分个体伴有小肠充血的症状;脏器系数分析结果表明,转基因克隆公猪与普通大白公猪之间除肾脏系数存在差异(P<0.05)外,其余脏器系数差异均不显著(P>0.05);分子鉴定结果显示,6头克隆猪均为转基因阳性个体,但外源载体序列在不同的部位出现丢失或断裂的现象,其中4头在外源载体的关键启动子和CDS区出现断裂或丢失,外源载体中NEO的拷贝数在6头转基因猪克隆猪中分别为1、2、2、3、4、5。综上所述,因传染性胃肠炎死亡的转基因克隆仔猪在临床和病理症状方面除表现出该病的典型特症外无其它异常,且这些仔猪和普通大白仔猪之间的脏器系数仅有微小差异,研究中没有证据表明转基因克隆技术导致克隆仔猪出现明显的异常;分子鉴定表明该批转基因克隆猪均为阳性个体,但外源基因并未完整转入宿主基因组中。 展开更多
关键词 转基因克隆 大白猪 分子鉴定 临床和病理症状 脏器系数
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转基因克隆牛外源基因整合位点的检测
10
作者 王敬姣 张明月 +5 位作者 谭贝贝 张萃 李冬杰 戴蕴平 李宁 李世杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期553-558,共6页
确定外源基因的整合位点是获得转基因动物后的首要任务。本试验应用TAIL-PCR得到了2头转入人溶菌酶基因克隆牛外源基因的整合位点,结果表明:2头转基因个体中外源基因均整合在受体基因组上,其中WS个体外源基因整合在牛24号染色体的基因... 确定外源基因的整合位点是获得转基因动物后的首要任务。本试验应用TAIL-PCR得到了2头转入人溶菌酶基因克隆牛外源基因的整合位点,结果表明:2头转基因个体中外源基因均整合在受体基因组上,其中WS个体外源基因整合在牛24号染色体的基因组克隆(NW<sub>0</sub>03104566.1)中。YW个体中外源基因整合在牛16号染色体的基因组克隆(NW<sub>0</sub>03104440.1)中,整合位点位于LOC10030和RGL1基因之间。综上表明,在WS和YW个体中,外源基因的整合分别造成受体染色体238和228bp核苷酸的缺失。4个整合片段(InS1<sup>I</sup>nS4)的末端均与拓扑异构酶I作用位点的共有序列相连。在WS个体中外源基因与染色体的整合连接处(InS1<sup>I</sup>nS3)存在1nt的同源序列。在整合片段InS2、InS3、InS4中表现出共同的相似处,即均存在具有间隔的短的同源序列。 展开更多
关键词 转基因克隆 TAIL-PCR 整合位点
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转基因克隆牛 被引量:1
11
作者 秦春圃 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第4期53-53,共1页
关键词 转基因克隆 细胞核移植技术 电穿孔法 核源
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世界首例转基因克隆兔诞生——体内可发绿色荧光 具备繁衍后代能力
12
《实验室研究与探索》 CAS 2008年第1期I0001-I0001,共1页
关键词 绿色荧光蛋白基因 转基因克隆 转基因 世界 体内 能力 后代 繁衍
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英国培育出新型转基因克隆猪
13
作者 王艳红 《四川畜牧兽医》 2002年第12期58-58,共1页
关键词 英国 培育 转基因克隆 乳糖转移酶基因
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转基因克隆仔猪的健康和存活状况
14
作者 汪开治 《生物技术通报》 CAS CSCD 2004年第1期53-53,共1页
关键词 转基因克隆仔猪 健康 存活状况 体细胞核移植
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“鸡胚胎干细胞与转基因克隆兔研究”通过科技成果鉴定
15
《中国家禽》 北大核心 2010年第2期68-68,共1页
由国家自然科学基金和北京自然科学基金资助,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所主持完成的“鸡胚胎干细胞与转基因克隆兔研究”于2009年12月3日在北京通过了农业部科教司组织的成果鉴定。
关键词 科技成果鉴定 转基因克隆 胚胎干细胞 国家自然科学基金 畜牧兽医研究所 中国农业科学院
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让转基因技术造福人类 中国工程院院士 动物基因组学与转基因克隆专家李宁
16
《湖北农业科学》 北大核心 2011年第24期F0002-F0002,共1页
李宁院士,1962年7月出生于江西南昌,1982年毕业于江西农业大学牧医系获动物科学学士学位,1988年79于北京农业大学(现为中国农业大学)畜牧系毕业获动物遗传育种硕士学位;1988年9月~1990年7月赴爱尔兰Dublin大学遗传系进行博士联... 李宁院士,1962年7月出生于江西南昌,1982年毕业于江西农业大学牧医系获动物科学学士学位,1988年79于北京农业大学(现为中国农业大学)畜牧系毕业获动物遗传育种硕士学位;1988年9月~1990年7月赴爱尔兰Dublin大学遗传系进行博士联合培养;1990年8月~1991年12月在北京农业大学畜牧系学习,获分子遗传学博士学位。 展开更多
关键词 动物遗传育种 中国工程院院士 转基因技术 转基因克隆 基因组学 江西农业大学 北京农业大学 人类
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科学家培育出转基因克隆猪
17
《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第3期192-192,共1页
关键词 转基因克隆 异种器官移植 基因工程 排异反应
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牧医系教师保健护理的转基因克隆牛犊生长发育良好
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《北京农业职业学院学报》 2012年第6期69-69,共1页
11月5日,畜牧兽医系动物医学专业侯引绪教授会同北京农学院兽医专家,在北京金维牛业对2012年7月19日诞生的第一批2头转基因克隆牛犊进行了健康检查和健康评估。目前,这2头转基因克隆牛犊生长发育良好。
关键词 转基因克隆 生长发育 牛犊 北京农学院 护理 保健 教师 动物医学专业
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内蒙古大学科学家“转基因克隆绒山革”研究取得突破
19
《生物学教学》 北大核心 2010年第9期70-70,共1页
据中国军网2010年4月20日援引新华社呼和浩特4月20日电,由内蒙古大学生命科学学院实验动物研究中心研究员刘东军带领的研究小组,在中国工程院院士旭日干的指导下,成功育成了国际上规模最大的一批转基因克隆绒山羊,标志我国绒山羊现... 据中国军网2010年4月20日援引新华社呼和浩特4月20日电,由内蒙古大学生命科学学院实验动物研究中心研究员刘东军带领的研究小组,在中国工程院院士旭日干的指导下,成功育成了国际上规模最大的一批转基因克隆绒山羊,标志我国绒山羊现代生物育种技术又迈上了新的台阶。 展开更多
关键词 转基因克隆 内蒙古大学 绒山羊 中国工程院院士 科学家 生命科学学院 呼和浩特 实验动物
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我国科学家成功培育出世界首例转基因克隆兔
20
《生物学教学》 北大核心 2008年第7期75-75,共1页
据2007年12月13日《科技日报》消息,本研究是由上海交通大学医学院附属新华医院发育生物学研究中心与中国农业科学院北京畜牧兽医研究所国家家畜分子遗传育种中心合作完成的。
关键词 转基因克隆 科学家 畜牧兽医研究所 中国农业科学院 世界 培育 《科技日报》 上海交通大学
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