基于TGF-β1/Smad3通路探究苦参碱对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的改善作用及机制

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作者 雷灵倩 戴周丽 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1401-1406,共6页

目的:基于转化生长因子-β1(TGF-β1)/信号传导蛋白Smad3通路探究苦参碱(Mat)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠炎症和肺纤维化的改善作用及机制。方法:采用烟熏联合脂多糖(LPS)法建立COPD模型大鼠,将大鼠分为COPD组、Mat组(100 mg/kg)... 目的:基于转化生长因子-β1(TGF-β1)/信号传导蛋白Smad3通路探究苦参碱(Mat)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠炎症和肺纤维化的改善作用及机制。方法:采用烟熏联合脂多糖(LPS)法建立COPD模型大鼠,将大鼠分为COPD组、Mat组(100 mg/kg)、Mat+TGF-β1组(100 mg/kg Mat+1.25μg/kg TGF-β1),每组15只,另设置造模前随机选取的15只大鼠作为对照组(control)。肺功能分析仪检测大鼠肺功能;HE染色观察大鼠肺组织病理学变化;ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)上清中TNF-α、IL-1β、TGF-β1的含量;TUNEL染色观察肺组织细胞凋亡;免疫组化检测肺组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cas-pase-3)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达;Western blot检测TGF-β/Smad通路相关蛋白表达。结果:与control组比较,COPD组大鼠肺组织出现明显的炎症细胞浸润和细胞脱落,FVC、FEV0.1/FVC、FEV0.3/FVC明显下降(P<0.05),TNF-α、IL-1β、TGF-β1水平、细胞凋亡数目、caspase-3、MMP-9、TGF-β1、p-Smad3、纤维连接蛋白(Fibronectin)、胶原蛋白(CollagenⅠ)和肌动蛋白(α-SMA)表达明显上升(P<0.05);与COPD组比较,Mat组大鼠肺组织病理损伤明显好转,FVC、FEV0.1/FVC、FEV0.3/FVC明显上升(P<0.05),TNF-α、IL-1β、TGF-β1水平、细胞凋亡数目、caspase-3、MMP-9、TGF-β1、p-Smad3、Fibronectin、CollagenⅠ和α-SMA表达明显下降(P<0.05);与Mat组比较,Mat+TGF-β1组明显逆转了Mat对COPD大鼠的改善作用。结论:Mat可改善COPD大鼠肺部炎症和纤维化,可能与抑制TGF-β1/Smad3通路激活有关。 展开更多

关键词 苦参碱 慢性阻塞性肺疾病 转化生长因子-β1/信号传导蛋白smad3通路 肺纤维化

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疏肝平喘方通过转化生长因子-β_(1)/Smad信号通路对哮喘小鼠免疫平衡的影响 被引量：3

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作者 顾静雯 朴香 +3 位作者 傅伟 程克文 董晨洁 沈毅韵 《世界中医药》 CAS 2023年第14期1974-1978,1985,共6页

目的:阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)/叉头框蛋白P3(Foxp3)以及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的干预作用,对转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路的影响。方法:建立空白对照组、哮喘... 目的:阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)/叉头框蛋白P3(Foxp3)以及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的干预作用,对转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路的影响。方法:建立空白对照组、哮喘模型组、疏肝平喘组及地塞米松组实验动物模型。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)和TGF-β_(1)水平,流式细胞仪检测肺组织中Th17/Treg细胞量,蛋白质印迹法检测肺组织中RORγt、Foxp3的蛋白表达,以及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果:疏肝平喘方能够降低哮喘小鼠肺组织IL-6、TGF-β_(1),与地塞米松比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),调节IL-10、IL-17A,与地塞米松组相当(均P>0.05);Th17/Treg细胞量,RORγt、Foxp3的蛋白表达量,与地塞米松相当(均P>0.05)。与哮喘模型组比较,疏肝平喘方组、地塞米松组的TGF-β_(1)、Smad2、Smad3的mRNA表达水平下降,而Smad7的mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:疏肝平喘方在改善气道炎症方面,和地塞米松疗效相当,是通过TGF-β_(1)/Smad信号通路,从而调节哮喘小鼠的Th17/Treg免疫平衡。 展开更多

关键词 哮喘 转化生长因子-β_(1)/smad信号通路 辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫平衡 疏肝平喘方 维甲酸相关核孤儿受体γt 叉头框蛋白P3 气道炎症

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转化生长因子-β／Smads信号转导通路的泛素化调节在糖尿病视网膜病变中的作用 被引量：3

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作者 苟文军(综述) 吕红彬(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期902-904,共3页

糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见和严重的并发症之一，参与的细胞因子和调节因子众多，其发病机制一直是DR防治研究的热点。研究证实，转化生长因子-β（TGF-β）参与了DR的发生和发展，Smads蛋白则能介导TGF-β／Smads信号通路的... 糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见和严重的并发症之一，参与的细胞因子和调节因子众多，其发病机制一直是DR防治研究的热点。研究证实，转化生长因子-β（TGF-β）参与了DR的发生和发展，Smads蛋白则能介导TGF-β／Smads信号通路的激活，进而参与DR的病理过程，而泛素一蛋白酶体途径（UPP）中的泛素连接酶Smurf则参与了TGF-β／Smads信号通路的降解调节。目前，相关研究已经取得了较大进展，就UPP对TGF-β／Smads信号转导通路的降解调节在DR中的作用进行综述。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 泛素一蛋白酶体途径 转化生长因子-β smads信号传导通路

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大承气汤通过调节TGF-β1/Smad3信号通路减轻大鼠急性肝损伤及全身炎症反应 被引量：10

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作者 潘广涛 刘宇寒 +3 位作者 周方园 章梦琪 张臻 杨胜兰 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第2期663-669,共7页

目的观察大承气汤对盲肠结扎穿刺(cecum ligation and puncture,CLP)诱导的脓毒症大鼠急性肝损伤的保护作用及对全身炎症的影响,并探讨其可能的作用机制。方法30只雄性SPF级SD大鼠(Sprague-Dawley rats)随机分为假手术对照组、模型对照... 目的观察大承气汤对盲肠结扎穿刺(cecum ligation and puncture,CLP)诱导的脓毒症大鼠急性肝损伤的保护作用及对全身炎症的影响,并探讨其可能的作用机制。方法30只雄性SPF级SD大鼠(Sprague-Dawley rats)随机分为假手术对照组、模型对照组、大承气汤2.5 g/kg组、大承气汤5 g/kg组、大承气汤10 g/kg组5个小组,每组6只(n=6)。运用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察大鼠肝组织病理学改变,检测大鼠肝脏组织中天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)和丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)的变化;采用Elisa检测大鼠血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平;通过免疫组织化学(IHC)观察大鼠肝脏中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3的蛋白表达差异;最后运用免疫印迹试验(Western Blot)检测肝脏组织中TGF-β1和Smad3的蛋白表达情况。结果与假手术对照组相比,模型对照组大鼠肝脏组织病理损伤明显,肝功能显著上升(P<0.01),大鼠全身促炎细胞因子分泌显著增加(P<0.01),转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3的蛋白表达显著上升(P<0.01);与模型对照组相比,大承气汤给药后,肝脏组织病理损伤逐渐减轻,肝功能显著下降(P<0.01),大鼠全身促炎细胞因子分泌明显降低(P<0.05),转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3的蛋白表达显著下降(P<0.01),且呈浓度梯度。结论大承气汤可以对盲肠结扎穿刺诱导的脓毒症相关的急性肝损伤发挥保护作用,改善其肝功能,抑制大鼠全身炎症反应,其作用机制可能通过调节TGF-β1/Smad3信号通路实现。 展开更多

关键词 大承气汤 炎症 急性肝损伤 转化生长因子-β1/smad3(TGF-β1/smad3)信号通路

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胰腺上皮内瘤变和胰腺癌组织中TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达 被引量：4

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作者 郑建明 朱明华 +3 位作者 倪灿荣 刘晓红 黄玲 李兆申 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期327-331,共5页

目的探讨转化生长因子(TGF)β/Smad信号传导通路中Smad相关蛋白、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体在胰腺上皮内瘤变(PanIN)和胰腺癌组织中表达的意义。方法用免疫组化EnVision法和SP法检测266灶不同级别PanINs和121例胰腺癌组织中Smad相关蛋白、... 目的探讨转化生长因子(TGF)β/Smad信号传导通路中Smad相关蛋白、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体在胰腺上皮内瘤变(PanIN)和胰腺癌组织中表达的意义。方法用免疫组化EnVision法和SP法检测266灶不同级别PanINs和121例胰腺癌组织中Smad相关蛋白、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体的表达,并联系临床病理学指标进行相关分析。结果高级别PanIN病灶Smad4表达率(60.6%,20/33)低于低级别PanINSmad4表达率(79.8%,186/233)(P<0.05);而高级别PanIN中Smad7,TGFβ1,TGFβRⅡ表达率明显高于低级别PanIN(P<0.05)。胰腺癌组织中,Smad4蛋白表达率在淋巴结转移组和神经受累组低于各自对照组(P<0.05);Smad7、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体的表达率在淋巴结转移组和神经受累组则分别高于各自对照组(P<0.05)。PanIN和胰腺癌组织中Smad2、4、7蛋白,TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体表达率的差异具有显著性(P<0.01)。结论从低级别PanINs到高级别PanINs再到胰腺癌中,Smad4蛋白表达率逐渐降低,而Smad7、TGFβ1及其Ⅰ、Ⅱ型受体表达率逐渐升高,支持胰腺癌形成的分子模型。 展开更多

关键词 胰腺上皮内瘤变 胰腺癌组织 smad信号通路 TGF-β1 smad4 smad7 Ⅱ型受体 蛋白表达率 信号传导通路 转化生长因子 Vision TGF-βR 相关蛋白 神经受累 病理学指标 smad2 免疫组化 S-P法 相关分析 分子模型 对照组 转移组

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反义Smad3抑制3T3细胞增殖和TGF-β_1基因表达 被引量：4

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作者 王丹茹 刘伟 +3 位作者 刘德莉 刘方军 曹谊林 张涤生 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第3期203-205,共3页

目的 研究反义Smad3对转化生长因子-β1(TGF-β1)基因表达的调控和对3T3细胞增殖的影响。方法 构建反义Smad3质粒,以脂质体介导转染NIH3T3细胞,进行细胞计数,并用RT-PCR方法观察TGF-β1 mRNA的表达。 结果 反义Smad3能下调TGF-β1 mRNA... 目的 研究反义Smad3对转化生长因子-β1(TGF-β1)基因表达的调控和对3T3细胞增殖的影响。方法 构建反义Smad3质粒,以脂质体介导转染NIH3T3细胞,进行细胞计数,并用RT-PCR方法观察TGF-β1 mRNA的表达。 结果 反义Smad3能下调TGF-β1 mRNA的表达,并抑制3T3细胞增殖。 结论 可以通过阻断TGF-β1细胞内信号传导调控TGF-β1基因的表达并抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 反义smad3 转化生长因子-β1 细胞增殖 脂质体 RT-PCR 信号传导调控基因 瘢痕

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肠炎清对溃疡性结肠炎大鼠TGF-β_(1)/Smad3/ERK通路的影响 被引量：7

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作者 詹原泉 丛龙玲 +4 位作者 吕永慧 黄雅静 谢英杰 周婉妃 吴宇金 《世界中医药》 CAS 2022年第14期1990-1994,2001,共6页

目的:观察肠炎清对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的保护作用及对TGF-β_(1)/Smad3/ERK信号通路的调控作用。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、美沙拉嗪组、肠炎清低剂量组和肠炎清高剂量组,除空白对照组外,其余大鼠均采用2... 目的:观察肠炎清对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的保护作用及对TGF-β_(1)/Smad3/ERK信号通路的调控作用。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、美沙拉嗪组、肠炎清低剂量组和肠炎清高剂量组,除空白对照组外,其余大鼠均采用2,4,6三硝基苯磺酸(TNBS)诱导,建立UC模型。造模24 h后,模型组、空白对照组分别用0.9%生理盐水灌胃;美沙拉嗪对照组以30 mg/kg艾迪莎混悬液灌胃;肠炎清高剂量组以147.2 g/kg肠炎清灌胃;肠炎清低剂量组以36.8 g/kg肠炎清灌胃;1次/d,时间固定,持续7 d。检测结肠黏膜组织中转化生长因子(TGF)-β_(1)、Smad3、胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的水平及TGF-β_(1)信号通路活化的程度。结果:模型组ERK表达水平最低,低于溶媒对照组、美沙拉嗪组、肠炎清高剂量组和低剂量组,肠炎清剂量组该指标水平随剂量升高而上升,且高剂量肠炎清组ERK表达水平显著高于模型组。模型组TGF-β_(1)和Smad3高于美沙拉嗪组组、空白对照组和肠炎清低剂量组及高剂量组。结论:肠炎清对UC大鼠肠黏膜具有保护作用,其机制可能与通过下调TGF-β_(1)-Smad3通路,提高ERK表达有关。 展开更多

关键词 肠炎清 大鼠 转化生长因子-β_(1) 信号传导蛋白-3 细胞外信号调节激酶 作用机制 溃疡性结肠炎 信号通路

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野菊花提取物对慢性支气管炎大鼠肺组织病理的影响及对TGF⁃β1/Smad3通路的调控机制 被引量：5

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作者 李向峰 陈文霞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2336-2341,共6页

目的观察野菊花提取物对慢性支气管炎大鼠肺组织病理的影响,并探讨其对肺组织转化生长因子-β1(TGFβ1)/信号传导蛋白Smad3通路的调控机制。方法取60只成年健康SD大鼠,除正常组外均建模,低、中、高浓度组予以0.7、1.4、2.8 g/kg野菊花... 目的观察野菊花提取物对慢性支气管炎大鼠肺组织病理的影响,并探讨其对肺组织转化生长因子-β1(TGFβ1)/信号传导蛋白Smad3通路的调控机制。方法取60只成年健康SD大鼠,除正常组外均建模,低、中、高浓度组予以0.7、1.4、2.8 g/kg野菊花提取物灌胃,每天1次;阳性组予以50 mg/kg N-乙酰半胱氨酸灌胃,每天1次。观察干预前后血清TGF-β1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平变化,肺组织病理改变,肺组织TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达。结果干预前,模型组血清TGF-β1、TNF-α、IL-6较正常组升高(P<0.01)。干预后,模型组依然升高(P<0.01),野菊花提取物组和阳性组均较干预前水平降低(P<0.05),且低于模型组(P<0.01);正常组肺组织无明显改变,模型组呈病理改变,野菊花提取物组和阳性组均较模型组减轻,且高浓度组与正常组最为接近;各组病变评分比较,模型组均高于正常组(P<0.01),野菊花提取物组和阳性组均低于模型组(P<0.01);各组肺组织TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达比较,模型组均高于正常组(P<0.01),野菊花提取物组和阳性组均低于模型组(P<0.01)。结论野菊花提取物可减轻慢性支气管炎大鼠的炎症反应和肺组织病理变化,推测与下调TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白有关。 展开更多

关键词 野菊花提取物 慢性支气管炎 肺组织 病理 转化生长因子-β1 信号传导蛋白smad3 炎症因子

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香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎大鼠的治疗作用机制研究 被引量：1

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作者 闫欣 陈永祥 张秀芝 《世界中医药》 北大核心 2025年第7期1112-1118,共7页

目的:探讨香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠的治疗作用及其机制。方法:将72只SD大鼠简单随机化分为对照组(16只)、模型组(16只)、维酶素组(10只)、香砂六君子汤低剂量组(10只)、香砂六君子汤中剂量组(10只)、香砂六君子汤高剂量组... 目的:探讨香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠的治疗作用及其机制。方法:将72只SD大鼠简单随机化分为对照组(16只)、模型组(16只)、维酶素组(10只)、香砂六君子汤低剂量组(10只)、香砂六君子汤中剂量组(10只)、香砂六君子汤高剂量组(10只)。除对照组外,其余各组采用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍溶液联合饥饱失常饮食控制法制备CAG模型,连续造模16周。造模16周后,对照组、模型组给予生理盐水(10 mL/kg)灌胃,维酶素组给予维酶素溶液(50 mg/kg)灌胃,香砂六君子汤低、中、高剂量组分别给予6、12、24 g/kg,每天1次,连续8周。观察大鼠一般状况,取材后采用苏木精-伊红染色法观察胃组织病理学,酶联免疫吸附试验法检测血清胃动素(MTL)、胃泌素(Gas)、生长抑素(SS)以及胃组织中白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),实时荧光定量聚合酶链式反应检测胃组织中转化生长因子β1(TGF-β1)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关mRNA表达,蛋白质免疫印迹法检测胃组织TGF-β1、PI3K/p-PI3K和AKT/p-AKT蛋白表达。结果:与模型组比较,各观察组大鼠一般状况、胃黏膜腺体萎缩程度以及炎症细胞浸润程度得到不同程度的改善。与对照组比较,模型组大鼠血清MTL水平高,Gas、SS水平低(均P<0.01)。与模型组比较,维酶素组和香砂六君子汤组血清MTL水平低,Gas、SS水平高(均P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠胃组织中IL-6、IL-1β、TNF-α水平高(均P<0.01)。与模型组比较,维酶素组和香砂六君子汤组胃组织中IL-6、IL-1β、TNF-α水平低(均P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠胃组织中TGF-β1、PI3K、AKT mRNA表达高(均P<0.01)。与模型组比较,维酶素组和香砂六君子汤组胃组织中TGF-β1、PI3K、AKT mRNA表达低(均P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠胃组织中TGF-β1蛋白表达量及PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT高(均P<0.01);与模型组比较,维酶素组和香砂六君子汤组中TGF-β1蛋白表达量及PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT低(均P<0.01)。香砂六君子汤高剂量组以上指标变化最为明显。结论:香砂六君子汤可有效改善CAG大鼠症状,其机制可能与抑制TGF-β1/PI3K/AKT信号通路激活有关。 展开更多

关键词 香砂六君子汤 慢性萎缩性胃炎 胃黏膜病理变化 炎症 转化生长因子β1 磷脂酰肌醇-3-激酶 蛋白激酶B信号通路 作用机制

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二甲双胍抑制大鼠胆管成纤维细胞胶原生成的分子信号机制 被引量：2

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作者 卢家美 张晶晶 +3 位作者 吕毅 王博 贾丽娜 师建华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期640-646,共7页

目的探讨二甲双胍是否通过活化腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的大鼠胆管成纤维细胞胶原生成并揭示其分子信号机制。方法取雌雄各半的SD大鼠共50只(体质量150~200 g),CO2窒息法处死后,无菌条件下分离并培... 目的探讨二甲双胍是否通过活化腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的大鼠胆管成纤维细胞胶原生成并揭示其分子信号机制。方法取雌雄各半的SD大鼠共50只(体质量150~200 g),CO2窒息法处死后,无菌条件下分离并培养大鼠胆管成纤维细胞,倒置显微镜观察所培养的细胞,发现不同体质量及性别的大鼠所获取的细胞形态及活性无差异。采用随机数字表法进行随机分组,分别设置对照组、TGF-β1组、Smad3 siRNA干预组、结缔组织生长因子(CTGF)siRNA干预组、二甲双胍干预组、Compound C干预组,每组3个样本。设置对照组:大鼠胆管成纤维细胞正常培养;TGF-β1组:10 ng/mL TGF-β1孵育细胞;Smad3 siRNA干预组:Smad3 siRNA转染24 h后+10 ng/mL TGF-β1孵育细胞;CTGF siRNA干预组:CTGF siRNA转染24 h后+10 ng/mL TGF-β1孵育细胞;二甲双胍干预组:10 mmol/L二甲双胍+10 ng/mL TGF-β1孵育细胞;Compound C干预组:10μmol/L Compound C+10 mmol/L二甲双胍+10 ng/mL TGF-β1孵育细胞。以TGF-β1刺激大鼠胆管成纤维细胞分泌胶原,以Smad3 siRNA或CTGF siRNA转染细胞以抑制Smad3或CTGF蛋白的表达,以二甲双胍孵育细胞以激活AMPK,以Compound C预处理细胞以抑制AMPK的活性。采用ELISA或Western-blot的方法检测CTGF、胶原I(Col I)蛋白水平;Western-blot的方法检测p-Smad3/t-Smad3、p-AMPK/t-AMPK、CTGF水平。结果TGF-β1以时间和剂量依赖的方式刺激胆管成纤维细胞胶原I生成,二甲双胍激活的AMPK也剂量依赖性抑制TGF-β1诱导的胶原I生成;AMPK抑制剂Compound C预孵育细胞,可显著逆转二甲双胍激活的AMPK抑制胶原I生成的作用(P<0.01)。进一步发现,二甲双胍激活的AMPK对TGF-β1刺激的Smad3磷酸化无抑制作用,却可抑制其下游的CTGF蛋白表达(P<0.01)及胶原I生成(P<0.01),而AMPK抑制剂可逆转二甲双胍对CTGF及胶原I的上述作用。结论二甲双胍通过激活AMPK抑制TGF-β1/Smad3信号通路诱导的CTGF蛋白表达,进而抑制胆管成纤维细胞胶原I生成。 展开更多

关键词 转化生长因子-β1 腺苷酸激活蛋白激酶 TGF-β1/smad3信号通路 胆管成纤维细胞 胶原

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NRP1基因敲除对放射性肺纤维化进程的影响及其作用机制 被引量：3

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作者 董卓 李嘉乐 +4 位作者 陈肖逸 王蕊 衣峻萱 魏新锋 金顺子 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期26-34,I0001,I0002,共11页

目的:观察神经菌毛蛋白1 (NRP1)基因对放射性肺纤维化(RIPF)进程的影响,并探讨其在Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路和转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路介导的上皮间质转化(EMT)发生发展过程和细胞外基质(ECM)沉积中的作用。方法... 目的:观察神经菌毛蛋白1 (NRP1)基因对放射性肺纤维化(RIPF)进程的影响,并探讨其在Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路和转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路介导的上皮间质转化(EMT)发生发展过程和细胞外基质(ECM)沉积中的作用。方法:利用Cre-LoxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)特异性敲除NRP1基因的转基因C57BL/6J小鼠并进行鼠尾鉴定,将160只小鼠按照射后不同时间点随机分为4周组、8周组、16周组和24周组,每组小鼠按随机数字表法分为野生型(Con)组、野生型单纯照射(IR)组、NRP1基因特异性敲除(KO-Con)组和NRP1基因特异性敲除+照射(KO+IR)组,每亚组10只。KO-Con和KO+IR组小鼠腹腔注射他莫昔芬特异性敲除AT-Ⅱ细胞NRP1基因,IR组和KO+IR组小鼠采用20Gy全胸照射建立RIPF小鼠模型。模型构建完成后,利用HE染色法和Masson染色法验证模型是否构建成功;利用免疫组织化学(IHC)法检测小鼠肺组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平;Western blotting法检测小鼠肺组织中NRP1、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测小鼠肺组织中NRP1、ColⅠ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1、Smad2、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA表达水平。结果:HE染色和Masson染色显示RIPF小鼠模型构建成功,IR组小鼠肺部主要为放射性肺炎病理形态表现。与Con组比较,随时间的延长,IR组小鼠肺组织中NRP1蛋白和mRNA表达水平逐渐升高(P<0.05),24周时达到最高(P<0.01)。与Con组比较,随时间的延长IR组和KO+IR组小鼠肺组织中ColⅠ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白及mRNA表达水平逐渐升高(P<0.05或P<0.01);与IR组比较,随时间的延长,KO+IR组小鼠肺组织中ColⅠ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),但仍高于Con组(P<0.05或P<0.01)。与Con组比较,随时间的延长,IR组和KO+IR组小鼠肺组织中上皮细胞标志物E-Cadherin mRNA表达水平逐渐降低(P<0.05),间质细胞标志物N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P <0.05或P <0.01),但KO+IR组小鼠肺组织中E-Cadherin mRNA表达水平明显高于IR组(P<0.05或P<0.01),N-Cadherin和Vimentin mRNA表达水平均明显低于IR组(P<0.05或P<0.01)。结论:NRP1基因敲除可抑制RIPF的发生发展,其机制可能与调节小鼠肺组织中Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smads信号通路的表达进而抑制EMT进程有关。 展开更多

关键词 放射性肺纤维化 神经菌毛蛋白1 肺泡Ⅱ型上皮细胞 Wnt/β-连环蛋白信号通路 转化生长因子β1/smads信号通路 上皮-间质转化

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桑叶生物碱对肝纤维化小鼠的改善作用及机制 被引量：8

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作者 王祖文 沈以红 +1 位作者 黄先智 丁晓雯 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第3期173-178,共6页

目的:观察桑叶生物碱对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smads信号通路及基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)mRNA... 目的:观察桑叶生物碱对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smads信号通路及基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)mRNA表达的调节作用,探讨桑叶生物碱改善小鼠肝纤维化的作用机制。方法:采用腹腔注射体积分数10%CCl4橄榄油溶液(5 mL/kg mb)联合高脂饮食诱导小鼠肝纤维化模型。造模8周后,正常对照组和模型组给予蒸馏水,低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/kg mb剂量的桑叶生物碱,阳性药物组给予100 mg/kg mb水飞蓟宾,持续45 d。采用酶联免疫试剂盒测定各组小鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(collagen I,Col I)及III型胶原蛋白(collagen III,Col III)含量;采用实时定量聚合酶链式反应测定肝组织TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、MMP-13、TIMP-1 mRNA表达水平。结果:与模型组比,灌胃高剂量桑叶生物碱(200 mg/kg mb)的小鼠肝组织中α-SMA、Col I、Col III含量分别降低19.55%、19.93%、13.84%(P<0.05);TGF-β1、Smad3、Smad4、TIMP-1 mRNA表达水平分别下降59.04%、56.73%、50.70%、49.09%(P<0.05),Smad7、MMP-13 mRNA表达水平分别上升48.29%、25.72%(P<0.05)。结论:桑叶生物碱能改善小鼠肝纤维化,其机制可能是对TGF-β1/Smads信号通路相关因子和TIMP-1、MMP-13的基因表达具有调控作用。 展开更多

关键词 桑叶生物碱 肝纤维化 转化生长因子-β1/smads信号通路 基质金属蛋白酶-13 基质金属蛋白酶抑制剂-1

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