文摘目的 :构建人转化生长因子 β 型受体胞外区 (s TGFβR )基因的真核表达载体 ,转染真核细胞 CHO以表达 s TGFβR 蛋白 ,并检测其生物学活性。方法 :以 TGFβR 的重组质粒为模板 ,用 PCR方法扩增得到人TGFβR 胞外区 (1- 15 9位氨基酸 )的 c DNA,将该 c DNA重组到真核表达载体 p CDNA3.1/myc- his(- ) B(p CDNA)的 Eco R 和 Hind 多克隆位点上 ,构建成 p CDNA- s TGFβR 重组质粒。经双酶切和核酸测序鉴定 ,将该重组质粒转染 CHO细胞 ,用 Western blotting法检测 s TGFβR 的表达 ,并测定其生物学活性。结果 :CHO细胞转染 p CD-NA- s TGFβR 重组质粒后 ,其培养上清经 Western blotting分析 ,显示有特异性的蛋白条带 ,所表达的蛋白能明显抑制 TGFβ1对貂肺上皮细胞的增殖抑制作用。结论 :成功克隆了 s TGFβR 基因 ,并获得有生物学活性的 s TGFβR 蛋白。
