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转基因玉米ND207转化事件特异性定性PCR检测方法及其标准化 被引量:3
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作者 常丽娟 梁晋刚 +6 位作者 宋君 刘文娟 付成平 代晓航 王东 魏超 熊梅 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1818-1828,共11页
转基因玉米ND207是中国农业大学研发的转mCry1Ab和mCry2Ab基因的抗虫玉米,本研究的目的是建立ND207转化事件特异性定性PCR检测方法。根据研发者提供的引物进行PCR扩增,PCR产物测序分析,获得了5’端旁侧序列262 bp,包括109 bp的载体序列... 转基因玉米ND207是中国农业大学研发的转mCry1Ab和mCry2Ab基因的抗虫玉米,本研究的目的是建立ND207转化事件特异性定性PCR检测方法。根据研发者提供的引物进行PCR扩增,PCR产物测序分析,获得了5’端旁侧序列262 bp,包括109 bp的载体序列和153 bp的玉米基因组序列, 3’端旁侧序列316 bp,包括76 bp的载体序列和240bp的玉米基因组序列。针对两端旁侧序列设计14条引物,组成25对引物组合进行引物筛选,选中3’端一对最佳引物优化PCR反应体系及反应条件,建立ND207的转化事件特异性定性PCR检测方法, PCR产物片段大小为166 bp。经过测试,该方法的检出限为0.1%,相当于20个拷贝的ND207特异分子片段。国内8家转基因生物安全检测机构对本方法进行了特异性测试、检出限测试和再现性测试,循环验证报告显示:该方法符合国家标准方法的各项要求,可在检测行业推广应用。ND207转化事件特异性定性PCR检测方法的建立,为我国ND207及其衍生品系的安全监管提供技术支撑。 展开更多
关键词 转基因玉米 ND207 旁侧序列 转化事件特异性 定性PCR
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转基因甘蔗BtG-2的T-DNA侧翼序列分析及其转化事件特异性检测 被引量:5
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作者 冯翠莲 万玥 +5 位作者 冯小艳 王俊刚 赵婷婷 王文治 沈林波 张树珍 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第9期2468-2477,共10页
转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材... 转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明:Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。 展开更多
关键词 抗虫转基因甘蔗 T-DNA侧翼序列 转化事件特异性检测 染色体步移
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转基因抗虫玉米MON810转化事件的研究及应用 被引量:2
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作者 杨双 《中国种业》 2018年第6期12-14,共3页
目前全球被批准商业化的玉米转化事件达148个,转基因抗虫玉米中MON810转化事件的商业化程度最高,全球有26个国家和地区批准其用于种植或饲料食品加工。我国从2002年开始允许进口MON810品系转基因玉米用于饲料食品的加工原料。鉴于MON81... 目前全球被批准商业化的玉米转化事件达148个,转基因抗虫玉米中MON810转化事件的商业化程度最高,全球有26个国家和地区批准其用于种植或饲料食品加工。我国从2002年开始允许进口MON810品系转基因玉米用于饲料食品的加工原料。鉴于MON810在中国的专利将在2020年过期,为了进一步应用该转化事件,本文综述了有关MON810转化事件的分子生物学特征、检测方法、杀虫效果、安全评价、国内外应用现状,供相关从业者参考。 展开更多
关键词 抗虫玉米 转化事件 MON810
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转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究 被引量:12
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作者 聂淑晶 武玉花 +2 位作者 吴刚 肖玲 卢长明 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期265-271,共7页
采用基因组步移和巢式PCR方法研究了转基因油菜雄性不育恢复系RF1外源基因插入位点序列特征,并根据此特征建立了RF1转化事件特异性检测方法。从RF1基因组DNA中分离到外源基因插入位点的左边界旁侧序列798bp,包括335bp的插入载体序列和46... 采用基因组步移和巢式PCR方法研究了转基因油菜雄性不育恢复系RF1外源基因插入位点序列特征,并根据此特征建立了RF1转化事件特异性检测方法。从RF1基因组DNA中分离到外源基因插入位点的左边界旁侧序列798bp,包括335bp的插入载体序列和463bp的旁侧基因组序列。根据已发表的RF1右边界旁侧序列的信息,发现外源T-DNA在向油菜基因组整合的过程中,在整合位点处有75bp的基因组序列丢失。根据分离的RF1左边界旁侧序列,建立了RF1事件特异性定性检测方法,扩增片断大小为284bp。利用建立起来的RF1事件特异性定性检测方法可以准确的将转基因油菜RF1与其它的转基因油菜品种区分开,检测灵敏度达到5个拷贝(0.013%)。该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因油菜品种RF1的身份识别提供了有效的方法。 展开更多
关键词 GMO 事件特异性检测 定性PCR RF1转化事件 左边界旁侧序列
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转Cry1Ac-2A-gna基因甘蔗BCG-17转化体特异性检测方法的建立 被引量:2
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作者 冯翠莲 万玥 +5 位作者 王俊刚 冯小艳 赵婷婷 王文治 沈林波 张树珍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期248-258,共11页
转基因作物外源T-DNA插入的侧翼序列是转基因事件检测的关键组分,也是转基因作物生物安全评价和监管所必需提供的重要信息。为了明确抗虫转基因甘蔗BCG-17的分子特征和建立其事件特异性检测方法,推进其生物安全性评价工作及未来的监管工... 转基因作物外源T-DNA插入的侧翼序列是转基因事件检测的关键组分,也是转基因作物生物安全评价和监管所必需提供的重要信息。为了明确抗虫转基因甘蔗BCG-17的分子特征和建立其事件特异性检测方法,推进其生物安全性评价工作及未来的监管工作,以其T2代为研究材料,通过Southern 杂交检测外源基因在甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立该转化体的高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明:Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BCG-17株系;经过3-4次的热不对称PCR扩增,分离到510 bp的T-DNA左侧翼序列和915 bp的右侧翼序列;以此为基础,分别设计左右侧翼检测引物,建立了BCG-17株系的转化事件特异性PCR检测方法,左侧翼的PCR检测方法特异性强、灵敏度高,检出极限为0.1%,相当于9个单倍体甘蔗基因组拷贝数。转基因株系BCG-17的分子特征及其转化事件特异性检测的完成,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供了技术依据。 展开更多
关键词 抗虫转基因甘蔗 T-DNA侧翼序列 转化事件特异性检测 染色体步移
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转基因玉米MON88017旁侧序列分析及定性PCR检测 被引量:18
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作者 袁磊 孙红炜 +3 位作者 杨崇良 尚佑芬 路兴波 赵蕾 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期361-364,共4页
采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引... 采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引物并进行定性PCR扩增,扩增片段为446bp,建立了转基因玉米MON88017转化体特异性检测方法。该方法特异性强、灵敏度高(0.1%),为转基因玉米品种MON88017进出口检测和标识检测提供了技术基础。 展开更多
关键词 转基因生物 事件特异性检测 定性PCR MON88017转化事件 左边界旁侧序列
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抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C定性PCR检测方法 被引量:13
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作者 李葱葱 谢苹 +5 位作者 董立明 夏蔚 兰青阔 闫伟 龙丽坤 李飞武 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期64-67,共4页
转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C是由北京奥瑞金公司研发的转mG2-aroA基因和mcry1Ah基因抗虫耐除草剂玉米新品系,对玉米螟、粘虫等鳞翅目害虫具有抗性、耐草甘膦除草剂的转基因玉米,在我国具有重要产业化应用前景。本文研发了GH5112... 转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C是由北京奥瑞金公司研发的转mG2-aroA基因和mcry1Ah基因抗虫耐除草剂玉米新品系,对玉米螟、粘虫等鳞翅目害虫具有抗性、耐草甘膦除草剂的转基因玉米,在我国具有重要产业化应用前景。本文研发了GH5112E-117C转基因玉米的定性PCR检测方法,该方法能特异性地检测转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C,在每个反应引物浓度为0.2 μmol/L、Taq DNA 聚合酶0.625 U、DNA模板50 ng,退火温度为58℃的条件下,检测灵敏度可稳定达到0.1%。该方法为转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C的精准检测提供了一种新的技术手段,为农业转基因监管提供技术支撑。 展开更多
关键词 转基因玉米 转化事件 PCR 检测方法
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种植转基因大豆的国家有哪些? 被引量:1
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作者 方义生 陈李淼 周新安 《大豆科技》 2019年第5期59-61,共3页
转基因大豆在国外种植面积逐年增加,不同国家主推的商业化转基因大豆品种不同。中国开展大豆国际贸易,实施进口多元化。文中介绍当前国际上种植转基因大豆的主要国家和商业化的转基因大豆品种特性,以便广大读者了解不同进口来源的转基... 转基因大豆在国外种植面积逐年增加,不同国家主推的商业化转基因大豆品种不同。中国开展大豆国际贸易,实施进口多元化。文中介绍当前国际上种植转基因大豆的主要国家和商业化的转基因大豆品种特性,以便广大读者了解不同进口来源的转基因大豆的特点。 展开更多
关键词 转基因大豆 转化事件 贸易
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Identification of voltage sag source location using S and TT transformed disturbance power 被引量:1
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作者 Hussain Shareef Azah Mohamed Ahmad Asrul Ibrahim 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2013年第1期83-97,共15页
An alternative method was introduced for voltage sag source location based on S and TT transformed disturbance powers. It is done to avoid the wrong and inconclusive detection of conventional disturbance power method ... An alternative method was introduced for voltage sag source location based on S and TT transformed disturbance powers. It is done to avoid the wrong and inconclusive detection of conventional disturbance power method proposed in the literature. Unlike in the case of the traditional method, the proposed method first transforms the recorded voltage and current during the sag event to some special features before calculating the new version of disturbance powers. The effectiveness of the proposed method has been verified through simulation and actual data from an industrial power system. The results show that the presented method can correctly detect the location of voltage sag source. 展开更多
关键词 power quality voltage sag S transform TT transform signal processing
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