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出血性大肠杆菌O157：H7 Stx2B-Tir-Stx1B多价融合蛋白表达及免疫原性研究
被引量：
9
1
作者
张雪寒
何孔旺
+10 位作者
卢维彩
赵攀登
温立斌
李彬
郭容利
王小敏
倪艳秀
周俊明
俞正玉
茅爱华
吕立新
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第4期180-185,共6页
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b...
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA。二免后攻击50LD50的EHECO157∶H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短。结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。
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关键词
EHECO157∶H7
转位紧密素受体
志贺毒
素
融合基因
免疫原性
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职称材料
出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与stx1/2B融合基因的构建和表达
被引量：
5
2
作者
张雪寒
何孔旺
+3 位作者
卢维彩
俞正玉
茅爱华
刘亚栋
《内蒙古农业科技》
2009年第3期59-61,共3页
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗具有很大优势。方法:构建表达tir和stxb的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联,构建pET28a-stx2b-Tir295-...
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗具有很大优势。方法:构建表达tir和stxb的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联,构建pET28a-stx2b-Tir295-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达。结果:薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。结论:由于该融合蛋白由Tir、stx1b和stx2b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。
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关键词
EHEC
O157:H7
转位紧密素受体
志贺毒
素
融合基因
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职称材料
题名
出血性大肠杆菌O157：H7 Stx2B-Tir-Stx1B多价融合蛋白表达及免疫原性研究
被引量：
9
1
作者
张雪寒
何孔旺
卢维彩
赵攀登
温立斌
李彬
郭容利
王小敏
倪艳秀
周俊明
俞正玉
茅爱华
吕立新
机构
江苏省农业科学院兽医研究所、农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室、国家兽用生物制品工程技术研究中心
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第4期180-185,共6页
基金
国家支撑计划(2007BAD40B01)
江苏省农业自主创新资金(cx(09)106)
江苏省农业科学院后备人才基金(6510804)
文摘
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA。二免后攻击50LD50的EHECO157∶H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短。结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。
关键词
EHECO157∶H7
转位紧密素受体
志贺毒
素
融合基因
免疫原性
Keywords
EHEC O157∶ H7
Tir
Stx
Fusion gene
Immunogenicity
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与stx1/2B融合基因的构建和表达
被引量：
5
2
作者
张雪寒
何孔旺
卢维彩
俞正玉
茅爱华
刘亚栋
机构
江苏省农业科学院兽医研究所
出处
《内蒙古农业科技》
2009年第3期59-61,共3页
基金
国家支撑计划(2007BAD40B01)
文摘
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗具有很大优势。方法:构建表达tir和stxb的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联,构建pET28a-stx2b-Tir295-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达。结果:薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。结论:由于该融合蛋白由Tir、stx1b和stx2b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。
关键词
EHEC
O157:H7
转位紧密素受体
志贺毒
素
融合基因
Keywords
EHEC O157 ：H7
Tir
stx
Fusion gene
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
出血性大肠杆菌O157：H7 Stx2B-Tir-Stx1B多价融合蛋白表达及免疫原性研究
张雪寒
何孔旺
卢维彩
赵攀登
温立斌
李彬
郭容利
王小敏
倪艳秀
周俊明
俞正玉
茅爱华
吕立新
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010
9
在线阅读
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职称材料
2
出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与stx1/2B融合基因的构建和表达
张雪寒
何孔旺
卢维彩
俞正玉
茅爱华
刘亚栋
《内蒙古农业科技》
2009
5
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职称材料
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