-
题名Caco-2细胞体外吸收模型的建立及验证
被引量：19
- 1
-
-
作者
吕晓君
曹易丹
何开勇
-
机构
湖北省药品监督检验研究院
湖北中医药大学
-
出处
《医药导报》
CAS
北大核心
2018年第11期1311-1315,共5页
-
文摘
目的建立Caco-2细胞体外吸收模型并对其进行验证,以利于药物吸收转运的研究。方法 Caco-2细胞接种于Transwell 24孔微孔滤膜培养板上,培养3,6,9,12,15,18,21 d,通过观察细胞形态、绘制生长曲线、测定跨膜电阻值(TEER),比较低、中、高细胞浓度(5×10~4,1×10~5,2×10~5·mL^(-1))对细胞单层完整性的影响,以确定细胞接种密度和培养时间;通过测定荧光黄的跨膜通透性、细胞膜顶侧(AP)、基底侧(BL)及细胞内的碱性磷酸酶活性验证细胞单层通透性和极性分化特征。结果低、中、高浓度细胞接种后分别在15,12,9 d形成单层膜结构,吸光度达高峰,但生长后期高、中浓度组细胞出现成团、死亡,且TEER值小于低浓度组。低浓度细胞接种15 d TEER值达到300Ω·cm^2,15～21 d基本稳定;选择低浓度(5×10~4·mL^(-1))为合适的浓度接种细胞,培养21 d后,荧光黄的表观渗透系数(Papp)为3.57×10^(-7)cm·s^(-1),低于通透实验规定的5.0×10^(-7)cm·s^(-1);细胞内碱性磷酸酶活性增加,膜两侧碱性磷酸酶活性比值(AP/BL)增高5倍多,细胞形成极性分化。结论所建立的Caco-2细胞模型完整性、通透性与极性分化特征通过验证,可作为模拟小肠药物转运过程的体外模型。
-
关键词
CACO-2细胞
吸收
体外
跨膜电阻值
碱性磷酸酶
渗透性
-
Keywords
Caco-2 cell；Absorption
in vitro
Transepithelial electrical resistance （TEER）；Alkaline phosphates；Permeability
-
分类号
R965
[医药卫生—药理学]
-
