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跨界基因沉默菌株的快速构建及对靶标基因干扰能力的检测
1
作者
胡琳敏
杨霄旭
+2 位作者
王金
向双林
魏晨曦
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2017年第5期29-35,95,共8页
"跨界基因沉默"是一种利用大肠杆菌在哺乳动物细胞中传递小干扰RNA并引起基因沉默的新颖技术,具有实用、稳定和低成本等优点.该技术通过构建一种能转录出短发夹RNA(shRNA)的大肠杆菌,而这种大肠杆菌产生的shRNA能靶向哺乳动...
"跨界基因沉默"是一种利用大肠杆菌在哺乳动物细胞中传递小干扰RNA并引起基因沉默的新颖技术,具有实用、稳定和低成本等优点.该技术通过构建一种能转录出短发夹RNA(shRNA)的大肠杆菌,而这种大肠杆菌产生的shRNA能靶向哺乳动物细胞中的特定基因,从而引发RNA干扰(RNAi).本文用RecA同源重组的方法将跨界基因沉默质粒的工作元件快速地整合到大肠杆菌的染色体DNA上,构建了跨界基因沉默菌株.通过吖啶橙染色实验证明了跨界基因沉默菌株能够入侵哺乳动物细胞,最后Western blot结果表明跨界基因沉默菌株可以对靶标基因产生干扰作用.该技术的完善将进一步促进工程菌的研发和利用.
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关键词
siRNA传递
跨界基因沉默菌株
RNA干扰
RecA同源重组
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职称材料
题名
跨界基因沉默菌株的快速构建及对靶标基因干扰能力的检测
1
作者
胡琳敏
杨霄旭
王金
向双林
魏晨曦
机构
湖南师范大学生命科学学院动物多肽药物创制国家地方联合工程实验室
湖南中医药大学医学院
出处
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2017年第5期29-35,95,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(30972624)
湖南省教育厅科学研究项目(15C0840)
湖南省生物发育工程及新产品研发协同创新中心(20134486)
文摘
"跨界基因沉默"是一种利用大肠杆菌在哺乳动物细胞中传递小干扰RNA并引起基因沉默的新颖技术,具有实用、稳定和低成本等优点.该技术通过构建一种能转录出短发夹RNA(shRNA)的大肠杆菌,而这种大肠杆菌产生的shRNA能靶向哺乳动物细胞中的特定基因,从而引发RNA干扰(RNAi).本文用RecA同源重组的方法将跨界基因沉默质粒的工作元件快速地整合到大肠杆菌的染色体DNA上,构建了跨界基因沉默菌株.通过吖啶橙染色实验证明了跨界基因沉默菌株能够入侵哺乳动物细胞,最后Western blot结果表明跨界基因沉默菌株可以对靶标基因产生干扰作用.该技术的完善将进一步促进工程菌的研发和利用.
关键词
siRNA传递
跨界基因沉默菌株
RNA干扰
RecA同源重组
Keywords
siRNA delivery
trans-kingdom RNAi bacteria
RNAi
RecA homologous recombination
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
Q939.9 [生物学—微生物学]
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作者
出处
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被引量
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1
跨界基因沉默菌株的快速构建及对靶标基因干扰能力的检测
胡琳敏
杨霄旭
王金
向双林
魏晨曦
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2017
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