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大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养及其生物学行为初步探讨
被引量：
14
1
作者
王义宝
刘云会
+2 位作者
刘丽波
王萍
马永会
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期224-228,共5页
本文旨在探讨建立稳定的大鼠原代脑微血管内皮细胞的培养方法,并对其血脑屏障特性进行初步研究。通过匀浆、葡聚糖高速梯度离心提取大鼠脑皮层微血管段,用胶原酶消化后,在37℃,5%CO2孵箱中进行原代及传代细胞培养,以跨内皮阻抗值分析其...
本文旨在探讨建立稳定的大鼠原代脑微血管内皮细胞的培养方法,并对其血脑屏障特性进行初步研究。通过匀浆、葡聚糖高速梯度离心提取大鼠脑皮层微血管段,用胶原酶消化后,在37℃,5%CO2孵箱中进行原代及传代细胞培养,以跨内皮阻抗值分析其血脑屏障特性随传代次数的改变。结果证明:原代培养后7～10d沿微血管段生成单层"铺路石"样细胞,经VIII因子证实95%以上的培养细胞是血管内皮细胞,通过传代可以进一步纯化,得到稳定的脑微血管内皮细胞系,原代培养的脑微血管内皮细胞表现出很强的屏障特性,与内皮细胞株之间有显著差异,随着传代次数的增加脑微血管内皮细胞的跨内皮阻抗减弱。以上结果表明,采用匀浆、梯度离心、胶原酶消化是获取大鼠脑微血管内皮细胞稳定的方法,原代培养的脑微血管内皮细胞是研究血脑屏障的最佳技术手段。
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关键词
脑血管
内皮
细胞
原代培养
跨内皮阻抗
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职称材料
热休克蛋白A12B降低脂多糖诱导的血管内皮细胞通透性
2
作者
康秋香
陈依
+2 位作者
余桂芳
张旭
朱科明
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期483-487,共5页
目的探讨脂多糖诱导下血管内皮细胞热休克蛋白A12B（HSPAl2B）表达的改变及其对血管内皮通透性的影响。方法体外传代培养人脐静脉内皮细胞，并将其分为空白组（未进行任何处理）、脂多糖（1μg／mL）诱导组、脂多糖＋HSPAl2B高表达组（...
目的探讨脂多糖诱导下血管内皮细胞热休克蛋白A12B（HSPAl2B）表达的改变及其对血管内皮通透性的影响。方法体外传代培养人脐静脉内皮细胞，并将其分为空白组（未进行任何处理）、脂多糖（1μg／mL）诱导组、脂多糖＋HSPAl2B高表达组（转染HSPAl2B过表达质粒）和脂多糖＋阴性质粒对照组（转染阴性对照质粒）。采用电阻抗检测仪检测脐静脉内皮细胞的跨内皮电阻抗，流式细胞仪检测血管内皮钙黏素（VE-cadherin）的表达，蛋白质印迹、PCR检测HSPAl2B的表达改变。结果脐静脉内皮细胞经脂多糖诱导后，细胞中HSPAl2B表达在O～12h内上调，12h时达高峰。HSPAl2B能使脐静脉内皮细胞的跨内皮电阻抗值明显升高（P〈O．001），并能完全对抗脂多糖诱导造成的跨内皮电阻抗值的下降（P〈O．001）。HSPAl2B能使脐静脉内皮细胞细胞膜上VE-cadherin的表达上调。结论HSPAl2B可能通过上调VE-cadherin表达降低血管内皮细胞的通透性，从而保护血管内皮的屏障功能。
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关键词
热休克蛋白A12B
脂多糖类
人脐静脉
内皮
细胞
跨
内皮
电
阻抗
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职称材料
题名
大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养及其生物学行为初步探讨
被引量：
14
1
作者
王义宝
刘云会
刘丽波
王萍
马永会
机构
中国医科大学附属第一医院神经外科
中国医科大学基础医学院神经生物学教研室
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期224-228,共5页
基金
国家自然科学基金(Nos.30400145
30070768)资助项目
文摘
本文旨在探讨建立稳定的大鼠原代脑微血管内皮细胞的培养方法,并对其血脑屏障特性进行初步研究。通过匀浆、葡聚糖高速梯度离心提取大鼠脑皮层微血管段,用胶原酶消化后,在37℃,5%CO2孵箱中进行原代及传代细胞培养,以跨内皮阻抗值分析其血脑屏障特性随传代次数的改变。结果证明:原代培养后7～10d沿微血管段生成单层"铺路石"样细胞,经VIII因子证实95%以上的培养细胞是血管内皮细胞,通过传代可以进一步纯化,得到稳定的脑微血管内皮细胞系,原代培养的脑微血管内皮细胞表现出很强的屏障特性,与内皮细胞株之间有显著差异,随着传代次数的增加脑微血管内皮细胞的跨内皮阻抗减弱。以上结果表明,采用匀浆、梯度离心、胶原酶消化是获取大鼠脑微血管内皮细胞稳定的方法,原代培养的脑微血管内皮细胞是研究血脑屏障的最佳技术手段。
关键词
脑血管
内皮
细胞
原代培养
跨内皮阻抗
Keywords
BMEC
primary culture
trans-endothelial electrical resistance
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
热休克蛋白A12B降低脂多糖诱导的血管内皮细胞通透性
2
作者
康秋香
陈依
余桂芳
张旭
朱科明
机构
第二军医大学长海医院麻醉科ICU
上海交通大学医学院附属第三人民医院麻醉科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期483-487,共5页
基金
国家自然科学基金(81270128)~~
文摘
目的探讨脂多糖诱导下血管内皮细胞热休克蛋白A12B（HSPAl2B）表达的改变及其对血管内皮通透性的影响。方法体外传代培养人脐静脉内皮细胞，并将其分为空白组（未进行任何处理）、脂多糖（1μg／mL）诱导组、脂多糖＋HSPAl2B高表达组（转染HSPAl2B过表达质粒）和脂多糖＋阴性质粒对照组（转染阴性对照质粒）。采用电阻抗检测仪检测脐静脉内皮细胞的跨内皮电阻抗，流式细胞仪检测血管内皮钙黏素（VE-cadherin）的表达，蛋白质印迹、PCR检测HSPAl2B的表达改变。结果脐静脉内皮细胞经脂多糖诱导后，细胞中HSPAl2B表达在O～12h内上调，12h时达高峰。HSPAl2B能使脐静脉内皮细胞的跨内皮电阻抗值明显升高（P〈O．001），并能完全对抗脂多糖诱导造成的跨内皮电阻抗值的下降（P〈O．001）。HSPAl2B能使脐静脉内皮细胞细胞膜上VE-cadherin的表达上调。结论HSPAl2B可能通过上调VE-cadherin表达降低血管内皮细胞的通透性，从而保护血管内皮的屏障功能。
关键词
热休克蛋白A12B
脂多糖类
人脐静脉
内皮
细胞
跨
内皮
电
阻抗
Keywords
heat-shock protein A12B lipopolysaccharides human umbilical vein endothelial cells transendothelialelectrical resistance
分类号
R361.3 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养及其生物学行为初步探讨
王义宝
刘云会
刘丽波
王萍
马永会
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
14
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下载PDF
职称材料
2
热休克蛋白A12B降低脂多糖诱导的血管内皮细胞通透性
康秋香
陈依
余桂芳
张旭
朱科明
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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