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黄芪甲苷联合大黄素通过Smads通路抑制TGF-β1诱导的足细胞凋亡 被引量:13
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作者 王宇晖 童孟立 杨汝春 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第5期1089-1093,共5页
目的:探讨黄芪甲苷联合大黄素是否通过Smads通路抑制转化生长因子-β1(TGF—β1)诱导小鼠足细胞株凋亡。方法:①体外培养小鼠足细胞株。②应用不同浓度TGF—β1(10^-1~10^4ng/L)诱导小鼠足细胞凋亡。③TGF—β1不同刺激时间(12... 目的:探讨黄芪甲苷联合大黄素是否通过Smads通路抑制转化生长因子-β1(TGF—β1)诱导小鼠足细胞株凋亡。方法:①体外培养小鼠足细胞株。②应用不同浓度TGF—β1(10^-1~10^4ng/L)诱导小鼠足细胞凋亡。③TGF—β1不同刺激时间(12、24、48h)诱导小鼠足细胞凋亡。④黄芪甲苷、大黄素联用抑制TGF—β1诱导小鼠足细胞凋亡,实验分为正常组、TGF—β1组、黄芪甲苷+TGF—β1组(黄芪甲苷组)、大黄素+TGF—β1组(大黄素组)、黄芪甲苷+大黄素+TGF—β1组(黄芪甲苷+大黄素组)。⑤采用流式细胞仪检测AnnexinV、Caspase3。⑥实时定量PCR及Western印迹法检测Smad2、Smad3mRNA及蛋白质表达。结果:①随着TGF—β1浓度增加(10^-1~10^4ng/L)、刺激时间增加,足细胞凋亡比率增多(P〈0.05),足细胞Smad2、Smad3mRNA表达增加。TGF—β1 10^3ng/L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24h为最佳诱导凋亡时间。(2)TGF—β1组与正常组相比Caspase3阳性细胞比率增加(P〈0.01);Smad2、Smad3蛋白质表达明显增加(P〈0.01)。③黄芪甲苷+大黄素组与TGF—β1组、黄芪甲苷组、大黄素组比较:足细胞凋亡比率明显减少(P〈0.05);Caspase3阳性细胞比率减少(P〈0.05);Smad2、Smad3蛋白质表达减少(P〈0.05)。④黄芪甲苷+大黄素组较TGF—β1组Smad2、Smad3mRNA表达减少。结论:(1)TGF—β1能通过Smads通路诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性。②黄芪甲苷联合大黄素能通过Smads通路阻断足细胞凋亡,其机制可能与减少TGF—β1的表达,阻止其激活Smads蛋白,从而阻止Caspase家族诱导的足细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷联合大黄素 SMADS 通路 TGF—β 足细胞凋亡
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小檗碱对高糖诱导足细胞凋亡的干预作用及其相关调控机制研究 被引量:9
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作者 李超 关锡梅 +1 位作者 倪伟建 唐丽琴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1681-1687,共7页
目的研究高糖对小鼠肾小球足细胞凋亡的影响及其特点,探讨小檗碱对高糖诱导足细胞凋亡的干预作用及可能机制。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,观察足细胞在不同浓度高糖和不同培养时间的形态学变化,CCK-8法测定足细胞的活性,Hoechst染色... 目的研究高糖对小鼠肾小球足细胞凋亡的影响及其特点,探讨小檗碱对高糖诱导足细胞凋亡的干预作用及可能机制。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,观察足细胞在不同浓度高糖和不同培养时间的形态学变化,CCK-8法测定足细胞的活性,Hoechst染色、Annexin V-FITC/PI双染法检测足细胞的凋亡水平,激光共聚焦显微镜观察caspase-3的表达,Western blot法检测caspase-3、6、7、8、9与Bcl-2的表达。结果高糖(15、20、25、30 mmol·L^-1)培养分别在72、48、36、24 h时诱发足细胞凋亡;小檗碱能增加高糖培养的足细胞活力,明显减少高糖诱导的足细胞凋亡,不同程度的下调高糖诱导的caspase-3、6、7、8和9的表达,提高Bcl-2表达。结论研究不同高糖环境在不同时间诱发足细胞凋亡的特点,为进行足细胞凋亡与肾脏损伤的干预治疗提供重要的时间参考;小檗碱缓解高糖诱发的足细胞凋亡,其作用机制可能与caspase-8/caspase-3和Bcl-2/caspase-9/caspase-3凋亡通路相关。 展开更多
关键词 小檗碱 糖尿病肾病 高糖 足细胞凋亡 信号通路 干预作用
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温肾潜阳汤改善激素抵抗型肾病综合征机制研究 被引量:1
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作者 王刚 艾望 +1 位作者 刘涛 曹继刚 《世界中医药》 北大核心 2025年第8期1319-1325,共7页
目的:探究温肾潜阳汤对激素抵抗型肾病综合征(SRNS)的治疗效果及其相关机制。方法:大鼠注射阿霉素构建SRNS模型,分组给予不同剂量的温肾潜阳汤治疗。采用苏木精-伊红(HE)染色法评估肾组织损伤情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肾功能相... 目的:探究温肾潜阳汤对激素抵抗型肾病综合征(SRNS)的治疗效果及其相关机制。方法:大鼠注射阿霉素构建SRNS模型,分组给予不同剂量的温肾潜阳汤治疗。采用苏木精-伊红(HE)染色法评估肾组织损伤情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肾功能相关指标,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡情况,免疫荧光检测肾脏组织中Yes相关蛋白(YAP)表达水平。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、足糖萼蛋白(PODXL)、埃兹蛋白(Ezrin)、自噬相关5(Atg5)、自噬相关7(Atg7)及微小核糖核酸let-7a-5p的转录水平。蛋白免疫印迹检测YAP蛋白表达水平。结果:与模型组比较,温肾潜阳汤治疗后,SRNS大鼠肾脏病理损伤明显减轻,肾功能指标显著改善,细胞凋亡率降低(均P<0.05)。温肾潜阳汤下调let-7a-5p、促凋亡基因Bax和自噬相关基因Atg5、Atg7的表达,上调YAP、抗凋亡基因Bcl-2和足细胞损伤相关基因PODXL、Ezrin的表达(均P<0.05)。结论:温肾潜阳汤通过调控let-7a-5p/YAP通路抑制足细胞凋亡、损伤及自噬进而改善SRNS。 展开更多
关键词 温肾潜阳汤 激素抵抗型肾病综合征 Yes相关蛋白 微小核糖核酸let-7a-5p 足细胞凋亡 自噬 糖萼蛋白 埃兹蛋白
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