C-X3-C趋化因子配体1与新生儿中枢神经系统感染的相关性 被引量：5

1

作者 李晓晓 杨旻 +3 位作者 于翔 周文浩 汪吉梅 胡黎园 《中国循证儿科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第1期60-63,共4页

目的探讨血浆或脑脊液中的C-X3-C趋化因子配体1(CX3CL1)是否可作为判断中枢神经系统感染的指标。方法以2015年12月至2016年5月复旦大学附属儿科医院新生儿病房中疑诊中枢神经系统感染行腰椎穿刺检查的新生儿为感染组,根据临床表现,脑脊... 目的探讨血浆或脑脊液中的C-X3-C趋化因子配体1(CX3CL1)是否可作为判断中枢神经系统感染的指标。方法以2015年12月至2016年5月复旦大学附属儿科医院新生儿病房中疑诊中枢神经系统感染行腰椎穿刺检查的新生儿为感染组,根据临床表现,脑脊液常规、生化和培养结果分为中枢感染亚组、败血症亚组和非败血症亚组。以同一时期复旦大学附属妇产科医院产科病房健康新生儿为对照组,根据出生体重分为<2 000、~2 500、~3 000、~3 500和>3 500 g亚组,根据孕周分为<33、~35、~37、~39和>39周亚组。对照组取新生儿在出生后的脐带血;感染组于急性期或稳定期行腰椎穿刺检查,24 h后取静脉血标本。采用Luminex技术检测血或脑脊液标本中的CX3CL1水平,比较各组及其亚组间的差异。结果对照组69例,感染组24例。中枢感染(化脓性脑膜炎)亚组8例,败血症亚组10例,非败血症亚组6例(脑积水2例,泌尿系统感染1例,新生儿惊厥2例、高胆红素血症伴食管气管瘘1例)。对照组脐血CX3CL1水平为(97.8±13.3)pg·mL^(-1),脐血CX3CL1水平在不同体重亚组以及不同孕周亚组间差异无统计学意义,P均>0.05。CX3CL1水平在感染组血浆(95.1±8.2)pg·mL^(-1)和对照组脐血比较差异无统计学意义(P=0.299)。CX3CL1水平感染组脑脊液中(210.0±11.9)pg·mL^(-1)高于血浆,差异有统计学意义(P<0.001)。感染组中的中枢感染亚组、败血症亚组和非败血症亚组脑脊液CX3CL1水平分别为(243.1±13.3)、(208.2±20.1)和(168.7±20.6)pg·mL^(-1),3组间差异有统计学意义(P=0.046);中枢感染亚组与非败血症亚组比较,差异有统计学意义(P=0.016);败血症亚组与非败血症亚组比较(P=0.180)、中枢感染亚组与败血症亚组比较(P=0.169),差异均无统计学意义。结论健康新生儿脐带血和感染新生儿外周血CX3CL1表达水平相对稳定,不适宜作为判断是否存在感染的指标,CSF中CX3CL1作为辅助诊断中枢感染和判断感染严重程度的分子标志物还需进一步扩大样本量加以证实。 展开更多

关键词 c-x3-c趋化因子配体1 炎症 胶质细胞 中枢神经系统感染

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沉默CX3CL1基因对骨髓间充质干细胞生长及其趋化效应的影响 被引量：4

2

作者 郝磊 田洪 +4 位作者 牟长河 张玉波 周虎传 宋川 刘磊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期34-41,共8页

目的构建大鼠趋化因子CX3C的配体1(chemokine CX3C ligand 1,CX3CL1)基因慢病毒RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,观测其沉默CX3CL1基因对骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,b MSCs)生长及其趋化效应的... 目的构建大鼠趋化因子CX3C的配体1(chemokine CX3C ligand 1,CX3CL1)基因慢病毒RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,观测其沉默CX3CL1基因对骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,b MSCs)生长及其趋化效应的影响。方法首先分离、培养大鼠骨髓b MSCs,并予以流式细胞术检测鉴定。针对CX3CL1基因mRNA序列,筛选3个小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)靶点并予以合成。把合成的siRNA导入b MSCs,Western blot检测其对靶基因编码蛋白的抑制效应,以此明确最佳siRNA。设计与合成针对最佳siRNA序列的短发夹RNA(short hair RNA,shRNA),连入CD513B-1慢病毒载体,构建CD513B-1/CX3CL1 shRNA慢病毒,并行测序鉴定。测序正确者用293T细胞包装成具有高效感染力的CD513B-1/CX3CL1 shRNA重组慢病毒,该重组病毒用于感染b MSCs。分离培养大鼠脾巨噬细胞,将其与被感染的b MSCs共培养。倒置显微镜下观测被感染b MSCs的绿色荧光蛋白(GFP)的表达情况;CCK-8检测被感染b MSCs的生长变化;Real-time PCR检测被感染b MSCs的CX3CL1与核抗原PCNA基因的表达变化;Western blot检测被感染b MSCs的CX3CL1和PCNA蛋白,与被感染的b MSCs共培养的脾巨噬细胞的趋化因子M-CSF和IL-8的表达变化。结果大鼠b MSCs得以分离、培养和鉴定。筛检得CX3CL1基因的最佳干扰序列:CTCTATGAGCAATTATTTA;测序证实,成功构建重组慢病毒载体CD513B-1/CX3CL1 shRNA。荧光观察表明,被CD513B-1/CX3CL1shRNA病毒感染的b MSCs明显表达GFP。CCK-8检测结果显示,与对照细胞比较,沉默CX3CL1的b MSCs的生长减慢,48 h开始更为明显(P<0.01);Real-time PCR、Western blot检测结果证实,CX3CL1基因的shRNA慢病毒能有效沉默b MSCs的CX3CL1,并下调其核抗原基因PCNA及其蛋白的表达,沉默CX3CL1的b MSCs能下调与其共培养的脾巨噬细胞的趋化因子M-CSF、IL-8的表达。结论成功构建CX3CL1基因RNAi重组慢病毒载体。该病毒载体能有效沉默b MSCs的CX3CL1基因,使b MSCs的生长减慢并下调其核抗原PCNA基因及其编码蛋白的表达。沉默CX3CL1的b MSCs能下调与其共培养的脾巨噬细胞的趋化因子M-CSF、IL-8的表达。 展开更多

关键词 趋化因子CX3C的配体1基因 短发夹RNA 骨髓间充质干细胞 慢病毒 趋化效应

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CX3CL1/fractalkine通过激活Wnt/β-catenin信号通路抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7细胞凋亡 被引量：2

3

作者 巩奇明 姜艳 +1 位作者 潘秀虹 尤燕舞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期110-115,共6页

目的 研究CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡的机制。方法 用含红色荧光蛋白的过表达或敲低FKN的慢病毒质粒感染以及LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞;使用流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡,Western... 目的 研究CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡的机制。方法 用含红色荧光蛋白的过表达或敲低FKN的慢病毒质粒感染以及LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞;使用流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡,Western blot法检测RAW264.7细胞FKN、 Wnt4、β联蛋白(β-catenin)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 c-caspase-9、 B细胞淋巴瘤因子2相关X蛋白(BAX)和细胞色素C(CytC)的蛋白水平,免疫荧光细胞化学染色检测c-caspase-3和c-caspase-9在RAW264.7细胞的表达和定位。结果 与空白对照组相比,LPS组的细胞凋亡率,FKN、 Wnt4、β-catenin、 c-caspase-3、 c-caspase-9、 BAX和CytC蛋白含量明显升高;与LPS组相比,FKN过表达联合LPS组细胞凋亡率明显下降,FKN、 Wnt4、β-catenin蛋白含量增加,而c-caspase-3、 c-caspase-9、 BAX和CytC蛋白含量降低,c-caspase-3和c-caspase-9在细胞质中的定位减弱;FKN敲低联合LPS组则结果相反。结论 CX3CL1/FKN激活Wnt/β-catenin信号通路减少线粒体凋亡途径关键蛋白的表达减轻LPS诱导的RAW264.7细胞凋亡。 展开更多

关键词 CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN) 巨噬细胞 细胞凋亡 Wnt β联蛋白(β-catenin)

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脑白质高信号患者血清CX3CL1水平与认知功能障碍的关系 被引量：10

4

作者 李琼 赵建华 +9 位作者 刘昊 王凡 李青 陈希妍 蔡瑞艳 吴清武 张健 吉四辈 路承彪 李少敏 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期6-12,共7页

目的探究脑白质高信号(white matter hyperintensity,WMH)患者血清趋化因子C-X3-C配体1(chemokine C-X3-C-motif ligand 1,CX3CL1),也被称作分形趋化因子(fractalkine,Fkn)的水平与认知功能障碍的相关性。方法纳入2020年3月至2022年8月... 目的探究脑白质高信号(white matter hyperintensity,WMH)患者血清趋化因子C-X3-C配体1(chemokine C-X3-C-motif ligand 1,CX3CL1),也被称作分形趋化因子(fractalkine,Fkn)的水平与认知功能障碍的相关性。方法纳入2020年3月至2022年8月于新乡医学院第一附属医院神经内科影像学表现有WMH的脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)住院患者,收集患者一般临床资料、头颅核磁常规序列、生化指标,测定CX3CL1水平及评估简易认知量表(Mini-mental State Examination,MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,MoCA),分析血清CX3CL1水平与WMH及认知功能的相关性。结果共纳入152例受试者,根据MMSE结果分为认知功能正常组(77例)及认知功能障碍组(75例),平均年龄分别为(59.60±8.84)岁和(62.91±7.99)岁。相关性分析结果显示CX3CL1水平与视空间与执行功能、注意力、定向力分别呈负相关性(r=-0.227,P=0.008、r=-0.186,P=0.030、r=-0.172,P=0.046)。回归分析结果显示CX3CL1水平、白质高信号严重程度及深部白质病变是认知功能障碍的危险因素。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析提示CX3CL1水平对认知障碍可能具有潜在的预测价值。结论血清CX3CL1水平、WMH与认知功能具有相关性,且血清CX3CL1水平升高是认知功能障碍发生的危险因素。 展开更多

关键词 趋化因子c-x3-c配体1 脑白质高信号 认知功能 脑小血管病

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“三法三穴”推拿手法对坐骨神经损伤大鼠痛觉功能和脊髓背角CX3CL1/CX3CR1表达的调节 被引量：16

5

作者 莫岩君 张羽墨 +4 位作者 于天源 邵帅 沈熠 罗宇婷 吕桃桃 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2020年第2期189-196,共8页

目的通过观察脊髓背角趋化因子(C-X3-C基元)配体1(CX3CL1)/趋化因子(C-X3-C基元)受体1(CX3CR1)蛋白和mRNA表达变化,探讨"三法三穴"推拿手法对坐骨神经损伤大鼠痛觉功能改善的作用机制。方法74只雄性Sprague-Dawley大鼠,随机... 目的通过观察脊髓背角趋化因子(C-X3-C基元)配体1(CX3CL1)/趋化因子(C-X3-C基元)受体1(CX3CR1)蛋白和mRNA表达变化,探讨"三法三穴"推拿手法对坐骨神经损伤大鼠痛觉功能改善的作用机制。方法74只雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为正常组(n=12)、假手术组(n=24)、模型组(n=25)和三法三穴组(n=13)。模型组和三法三穴组制作坐骨神经损伤模型。假手术组仅暴露坐骨神经。三法三穴组造模后第7天起用按摩推拿手法模拟仪按摩殷门、承山、阳陵泉三穴。分别于造模后7 d、干预20 d进行光热耐痛阈测定;造模后7 d、干预10 d、干预20 d进行累积疼痛评分测定;并于造模后7 d和干预20 d取材,对脊髓背角CX3CL1/CX3CR1表达进行Western blotting和RT-PCR检测,干预20 d对脊髓背角小胶质细胞进行免疫荧光观察。结果造模后7 d,与正常组比较,模型组和假手术组光热耐痛阈升高(P<0.05);与假手术组比较,模型组和三法三穴组累积疼痛评分升高(P<0.05);干预10 d后,三法三穴组累积疼痛评分低于模型组(P<0.05);干预20 d后,三法三穴组光热耐痛阈和累积疼痛评分均低于模型组(P<0.05)。造模后7 d和干预20 d后,各组CX3CL1/CX3CR1蛋白和mRNA的表达变化均无显著性差异(P>0.05)。干预20 d后模型组小胶质细胞呈部分活化或完全活化状态,三法三穴组呈未活化或部分活化状态。结论"三法三穴"推拿手法对坐骨神经损伤大鼠痛觉功能有改善,可能是通过CX3CL1/CX3CR1以外的途径调节小胶质细胞实现的。 展开更多

关键词 坐骨神经损伤 痛觉 推拿 趋化因子(c-x3-c基元)配体1/趋化因子(c-x3-c基元)受体1 大鼠

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miR⁃143⁃3p通过调控CX3CL1/CX3CR1信号通路对脂多糖诱导肺泡上皮细胞损伤的影响 被引量：4

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作者 荆忻 邵萍 李学莉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第21期2649-2656,共8页

目的探讨miR⁃143⁃3p通过调控趋化因子(C⁃X3⁃C基元)配体1/趋化因子(C⁃X3⁃C基元)受体1(CX3CL1/CX3CR1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞损伤的影响。方法收集急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)患者及健康体检者外周血血清,... 目的探讨miR⁃143⁃3p通过调控趋化因子(C⁃X3⁃C基元)配体1/趋化因子(C⁃X3⁃C基元)受体1(CX3CL1/CX3CR1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞损伤的影响。方法收集急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)患者及健康体检者外周血血清,标记为ALI/ARDS组和Normal组。双荧光素酶实验证实miR⁃143⁃3p与CX3CL1的靶向关系。体外培养人肺泡上皮细胞A549,并将细胞分成Con⁃trol组、LPS组、LPS+NC mimic组(转染NC mimic)、LPS+miR⁃143⁃3p mimic组(转染miR⁃143⁃3p mimic)、LPS+miR⁃143⁃3p mimic+pcDNA组(共转染miR⁃143⁃3p mimic和pcDNA)、LPS+miR⁃143⁃3p mimic+pc⁃CX3CL1组(共转染miR⁃143⁃3p mimic和pc⁃CX3CL1)。qRT⁃PCR检测miR⁃143⁃3p和CX3CL1、CX3CR1 mRNA表达水平;Western blot检测CX3CL1、CX3CR1蛋白表达;MTT和流式细胞术检测细胞活力和凋亡;ELISA分析肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白介素⁃1β(IL⁃1β)、白介素⁃6(IL⁃6)、血管内皮生长因子(VEGF)和降钙素原(PCT)水平。结果与Normal组相比,ALI/ARDS组患者外周血中miR⁃143⁃3p表达(0.52±0.05)降低,CX3CL1、CX3CR1的mRNA(1.79±0.08)、(1.65±0.06)和蛋白(1.03±0.15)、(0.98±0.12)表达升高(P<0.05)。与Control组比较,LPS组A549细胞中miR⁃143⁃3p表达减小,细胞活力降低,凋亡率[(23.56±0.85)%]及TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6、VEGF、PCT含量增加(P<0.05)。miR⁃143⁃3p过表达后,细胞活力升高,凋亡率[(13.74±0.69)%]及TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6、VEGF、PCT含量降低(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR⁃143⁃3p直接负调控CX3CL1表达。CX3CL1过表达可明显逆转miR⁃143⁃3p过表达对LPS诱导的A549细胞损伤的影响和对CX3CR1 mRNA和蛋白表达的抑制作用(P<0.05)。结论miR⁃143⁃3p通过抑制CX3CL1/CX3CR1信号通路,减轻LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 miR⁃143⁃3p 趋化因子(C⁃X3⁃C基元)配体1 趋化因子(C⁃X3⁃C基元)受体1 脂多糖 肺泡上皮细胞

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CX3CL1通过抑制小胶质细胞焦亡改善阿尔茨海默病小鼠的神经元功能

7

作者 杜娟 郎红梅 +4 位作者 严娜 黄昶荃 王宾友 赵宝玉 张兴平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1229-1237,共9页

目的:通过外源性注射趋化因子(C-X3-C基序)配体1(Fractalkine,CX3CL1)探索其对阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)小鼠神经元功能的影响及机制。方法:采用APP/PS1双转基因小鼠建立AD模型。将小鼠随机分为4组:对照组、AD模型组、AD+PB... 目的:通过外源性注射趋化因子(C-X3-C基序)配体1(Fractalkine,CX3CL1)探索其对阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)小鼠神经元功能的影响及机制。方法:采用APP/PS1双转基因小鼠建立AD模型。将小鼠随机分为4组:对照组、AD模型组、AD+PBS溶剂组、AD+CX3CL1组。AD+CX3CL1组颅内给予CX3CL1。AD+PBS溶剂组注射等容积的PBS溶剂。采用旷场实验和Morris水迷宫测试小鼠认知行为,免疫荧光染色、TUNEL染色、尼氏染色、蛋白质印迹和RT-PCR技术对小鼠海马组织进行分析。结果:①AD小鼠接受CX3CL1注射后增加了移动距离,但没有显著差异(P=0.189);在水迷宫测试中,AD+CX3CL1组寻找水下平台的移动距离显著缩短(P=0.001);②AD模型组中GSDMD(Gasdermin D)蛋白和炎症相关蛋白表达显著升高(P<0.05),而CX3CL1注射能显著降低这些蛋白的表达水平(P<0.05);③AD模型组的尼氏体数量、突触相关蛋白25 kDa(synaptosomal-associated protein of 25 kDa,SNAP25)、突触后致密区蛋白95(post synaptic density protein 95,PSD95)和囊泡相关膜蛋白1(vesicle-associated membrane protein 1,VAMP1)表达水平显著降低,而CX3CL1组尼氏体数量(P=0.001)和SNAP25、PSD95、VAMP1蛋白的表达增加(P=0.043,P=0.026,P=0.003)。结论:外源性CX3CL1注射能够通过调节炎症因子和减少细胞焦亡来改善AD小鼠的神经元功能,保护神经元免受损伤。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 趋化因子(c-x3-c基序)配体1 炎性小体 细胞焦亡 神经保护

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CX3CL1、CXCL10及CXCL5在慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者中的表达及其预后评估价值 被引量：8

8

作者 李玄丹 李材忠 +1 位作者 唐咏婕 蔡潇阳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期2523-2527,2533,共6页

目的:探讨CX3趋化因子配体1(CX3CL1)、CX趋化因子配体10(CXCL10)及CXCL5在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中的表达及其预后评估价值。方法:选取2018年1月至2021年6月儋州市人民医院收治的226例慢性阻塞性肺疾病患者(COPD组)和6... 目的:探讨CX3趋化因子配体1(CX3CL1)、CX趋化因子配体10(CXCL10)及CXCL5在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中的表达及其预后评估价值。方法:选取2018年1月至2021年6月儋州市人民医院收治的226例慢性阻塞性肺疾病患者(COPD组)和60例健康志愿者(对照组),根据COPD患者病情严重程度分为稳定期COPD组(124例)和AECOPD组(102例),并根据AECOPD患者发病入院后28 d的死亡情况,将其分为存活组(64例)和死亡组(38例)。比较各组血清CX3CL1、CXCL10及CXCL5表达水平。应用多因素Logistic回归分析影响AECOPD预后的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CX3CL1、CXCL10及CXCL5对AECOPD患者预后评估的价值。Pearson相关分析探究AECOPD患者血清CX3CL1、CXCL10及CXCL5间的相关性。结果:AECOPD组血清CX3CL1[(370.52±102.16)pg/ml vs(274.18±84.35)pg/ml、(108.52±27.36)pg/ml]、CXCL10[(115.73±34.60)pg/ml vs(73.26±25.17)pg/ml、(21.45±8.10)pg/ml]及CXCL5[(226.48±75.20)pg/ml vs(153.62±58.74)pg/ml、(87.20±31.15)pg/ml]水平均明显高于COPD组和对照组(P<0.001)。死亡组血清CX3CL1[(426.73±126.35)pg/ml vs(327.18±96.70)pg/ml]、CXCL10[(139.42±41.15)pg/ml vs(95.84±30.16)pg/ml]及CXCL5[(270.83±81.46)pg/ml vs(191.25±67.30)pg/ml]水平均明显高于存活组(P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示病程[OR(95%CI)=2.103(1.361~4.217)]、CX3CL1[OR(95%CI)=3.195(2.116~9.215)]、CXCL10[OR(95%CI)=2.328(1.480~5.942)]及CXCL5[OR(95%CI)=2.719(1.895~8.416)]是影响AECOPD预后的危险因素。ROC曲线显示CX3CL1、CXCL10及CXCL5三项联合评估AECOPD患者预后的曲线下面积为0.937(95%CI:0.874~0.986),敏感度为96.8%,特异度为84.5%。相关分析显示,AECOPD患者血清CX3CL1、CXCL10及CXCL5水平均呈正相关(P<0.001)。结论:血清CX3CL1、CXCL10及CXCL5水平在AECOPD患者中明显升高,三项联合检测对AECOPD患者预后评估具有较好的价值。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 CX3趋化因子配体1 CX趋化因子配体10 CX趋化因子配体5 预后评估

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CXCL1通过促进蛋白激酶B磷酸化导致bEND.3小鼠脑微血管内皮细胞骨架收缩和通透性增加 被引量：1

9

作者 韩雨红 董逸舒 +6 位作者 李雪蒙 熊倩倩 陈晓芬 李柏青 汪洪涛 宋传旺 吴凤娇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期117-123,共7页

目的探讨脓毒症脑病炎症中CXC趋化因子配体1(CXCL1)及其受体CXC趋化因子受体2(CXCR2)对脑内皮细胞骨架重排和通透性的影响及其相关机制。方法野生型小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立脓毒症脑病模型,ELISA检测全脑组织肿瘤坏死因子... 目的探讨脓毒症脑病炎症中CXC趋化因子配体1(CXCL1)及其受体CXC趋化因子受体2(CXCR2)对脑内皮细胞骨架重排和通透性的影响及其相关机制。方法野生型小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立脓毒症脑病模型,ELISA检测全脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和CXCL1含量。使用500 ng/mL LPS和200 ng/mL TNF-α刺激bEND.3脑微血管内皮细胞后,Western blot法检测细胞CXCR2的表达。以150 ng/mL CXCL1刺激bEND.3细胞,免疫荧光染色观察脑内皮细胞骨架纤维型肌动蛋白(F-actin)重排的变化。脑内皮细胞通透性实验中,将bEND.3细胞随机分为PBS对照组、CXCL1组、CXCL1联合选择性CXCR2拮抗剂SB225002组,Transwell^(TM)小室检测各组通透性变化情况。CXCL1刺激bEND.3细胞后,Western blot法检测细胞中蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达。结果腹腔注射LPS导致小鼠全脑组织中TNF-α和CXCL1水平显著升高;LPS和TNF-α刺激可增高bEND.3细胞CXCR2蛋白的表达。CXCL1刺激bEND.3细胞使其细胞骨架收缩,细胞间隙形成增加,且细胞渗透性增加,而CXCR2拮抗剂SB225002预处理可显著抑制CXCL1引起的脑内皮细胞肌动蛋白应力纤维和细胞间隙的形成、以及通透性的增高,同时CXCL1(150 ng/mL)刺激使得脑内皮细胞AKT的磷酸化水平明显升高。结论CXCL1通过AKT磷酸化激活引起脑内皮细胞骨架收缩、细胞通透性增加,CXCR2拮抗剂SB225002可有效抑制CXCL1诱导的细胞骨架收缩和通透性升高。 展开更多

关键词 脂多糖 bEND.3脑微血管内皮细胞 CXC趋化因子配体1(CXCL1) CXC趋化因子受体2(CXCR2) 脑内皮细胞 细胞骨架重排

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基于调控血管生成相关基因表达的理肺消积丸对肺癌小鼠肿瘤的抑制作用研究

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作者 谷雨 刘素晓 +6 位作者 何志远 丁锦泵 孔德琪 黄慧敏 冯素香 刘学芳 李亚 《世界中医药》 北大核心 2025年第10期1672-1678,1685,共8页

目的:探讨理肺消积丸通过调控血管生成相关基因表达对肺癌小鼠肿瘤的抑制作用。方法:将30只C57BL/6小鼠采用皮下接种Lewis细胞方式建立肺癌小鼠模型,按照随机数字表法分为模型组、理肺消积组和顺铂组,每组10只。造模次日起依据分组给药... 目的:探讨理肺消积丸通过调控血管生成相关基因表达对肺癌小鼠肿瘤的抑制作用。方法:将30只C57BL/6小鼠采用皮下接种Lewis细胞方式建立肺癌小鼠模型,按照随机数字表法分为模型组、理肺消积组和顺铂组,每组10只。造模次日起依据分组给药,理肺消积组给予理肺消积丸水溶液205 mg/(kg·d)灌胃,等体积生理盐水腹腔注射;顺铂组每隔1 d腹腔注射顺铂0.5 mg/kg,等体积双蒸水灌胃;模型组给予等体积双蒸水灌胃、生理盐水腹腔注射。2周后处死小鼠,留取肿瘤组织,记录小鼠肿瘤质量和体积,苏木精-伊红(HE)染色法观察肿瘤组织病理学变化,免疫组织化学法检测肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)及微血管密度(MVD),聚合酶链反应阵列(PCR array)筛选血管生成相关差异基因,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肿瘤组织中血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)、趋化因子配体1(CXCL1)、Ⅳ型胶原α3链(COL4A3)基因表达,蛋白质免疫印迹(WB)法检测肿瘤组织ANGPTL3、CXCL1蛋白表达,免疫荧光法检测肿瘤组织COL4A3蛋白表达。结果:与模型组比较,理肺消积丸组、顺铂组肿瘤组织质量、体积显著减少(P<0.01),肿瘤组织病理形态改善,VEGF蛋白表达显著下调,MVD显著减少(P<0.01);与模型组比较,理肺消积组显著上调或下调的差异表达基因共13个,主要包括ANGPTL3、CXCL1、COL4A3等,参与表皮细胞增殖和血管生成相关调控;与模型组比较,理肺消积组小鼠肿瘤组织ANGPTL3、CXCL1和COL4A3基因与蛋白表达均显著下调(P<0.05)。结论:理肺消积丸可通过降低与血管生成相关基因(VEGF、ANGPTL3、CXCL1)的表达抑制肺癌小鼠肿瘤生长。 展开更多

关键词 理肺消积丸 非小细胞肺癌 血管生成 聚合酶链反应阵列 血管内皮生长因子 血管生成素样蛋白3 趋化因子配体1 Ⅳ型胶原α3链

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BMSCs脑内移植改善AD小鼠学习记忆功能的分子机制研究 被引量：3

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作者 范冲竹 李安 +6 位作者 黄翠芹 甘丹卉 李勤 赵佳仪 王珍 朱丽红 陆大祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1921-1931,共11页

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)脑内移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆能力及病理改变的影响,并对其分子机制进行探讨。方法:将C57/BL6野生型(WT)小鼠和C57/BL6 APP/PS1转基因(Tg)小鼠随机分为4组:WT/PBS组、WT/BMSCs组、Tg/PBS组... 目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)脑内移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆能力及病理改变的影响,并对其分子机制进行探讨。方法:将C57/BL6野生型(WT)小鼠和C57/BL6 APP/PS1转基因(Tg)小鼠随机分为4组:WT/PBS组、WT/BMSCs组、Tg/PBS组及Tg/BMSCs组,侧脑室注射法将PBS或BMSCs注入小鼠脑内。术后第3天起进行持续8 d的Morris水迷宫实验以检测小鼠认知能力。术后第10天取材,组织免疫荧光染色检测小鼠脑内小胶质细胞的激活;real-time PCR检测CX3C趋化因子配体1(CX3CL1)、CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)、IL-1β、TNF-α、Nurr1、YM1、胰岛素降解酶(IDE)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的mRNA表达;ELISA检测脑组织匀浆CX3CL1和Aβ42的含量;Western blot检测突触后致密蛋白95(PSD95)、突触小泡蛋白(SYP)、p85和p110蛋白表达以及Akt磷酸化水平的变化。结果:术后第10天,在APP/PS1小鼠海马区附近观察到移植的BMSCs。水迷宫实验结果显示,与WT/PBS组小鼠相比,Tg/PBS组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),BMSCs移植治疗后APP/PS1小鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);与Tg/PBS组相比,Tg/BMSCs组CX3CL1在海马区的mRNA水平(P<0.01)及皮质区的蛋白水平(P<0.05)明显增加;BMSCs移植可以促进WT和Tg小鼠脑内小胶质细胞的激活,同时M2型小胶质细胞表面标志物YM1的mRNA表达上调(P<0.05)。Tg/PBS组与WT/PBS组相比,皮质区和海马区TNF-α的mRNA表达明显升高(P<0.05),皮质区Nurr1的mRNA表达降低(P<0.01);而与Tg/PBS组相比,Tg/BMSCs组皮质区的TNF-α(P<0.01)mRNA表达降低,CX3CR1和Nurr1的mRNA表达明显上调(P<0.05),海马区TNF-α和IL-1β的mRNA明显下调(P<0.05),CX3CR1和Nurr1的mRNA表达明显增加(P<0.05)。此外,Tg/BMSCs组的PSD95、p85和p110蛋白表达及Akt的磷酸化水平均较Tg/PBS组明显增加(P<0.05)。与Tg/PBS组比,BMSCs移植降低了APP/PS1小鼠脑内Aβ42蛋白的水平(P<0.05),增加了海马区Aβ清除相关酶IDE和MMP9的表达(P<0.05)。结论:BMSCs移植可以调控神经炎症因子分泌,促进神经保护因子和突触蛋白的表达,从而改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力,其分子机制可能是BMSCs移植上调CX3CL1后激活了PI3K/Akt通路。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 CX3C趋化因子配体1 阿尔茨海默病 神经炎症 神经保护

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