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苎麻胞液型谷氨酰胺合成酶基因的克隆和超量表达载体构建
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作者 郑建树 喻春明 +6 位作者 陈平 王延周 谭龙涛 朱涛涛 陈继康 卢凌霄 熊和平 《中国麻业科学》 2014年第2期57-63,共7页
谷氨酰胺合成酶是植物氮代谢途径中的关键酶,分为胞液型(GS1)和质体型(GS2)两种。本文首次从苎麻中克隆了一个胞液型谷氨酰胺合成酶基因BnGS1-1,并利用生物信息学对其序列和结构特征进行了分析。该基因序列全长1205 bp,含有一个1071 bp... 谷氨酰胺合成酶是植物氮代谢途径中的关键酶,分为胞液型(GS1)和质体型(GS2)两种。本文首次从苎麻中克隆了一个胞液型谷氨酰胺合成酶基因BnGS1-1,并利用生物信息学对其序列和结构特征进行了分析。该基因序列全长1205 bp,含有一个1071 bp的ORF区,编码356个氨基酸残基的多肽,pI和Mw分别为5.64和39.19 KDa,具有beta-Grasp和catalytic两个保守功能域;蛋白序列在56、92、249和297位点分别为Asp、Cys、His和Glu。系统进化分析表明BnGS1-1与大豆(Glycine max)、四季豆(Phaseolus vulgaris)、苜蓿(Medicago sativa)、棉花(Gossypium raimondii)在同一个分支上。同时,将BnGS1-1与pBI121载体利用同源重组技术,成功构建了植物超量表达载体。因此,本研究为了解和改善苎麻饲用特性提供了物质和理论基础。 展开更多
关键词 苎麻 GS1 基因克隆 超量表达载体 构建
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马铃薯StERF3超量表达载体转基因植株矮化原因初探 被引量:1
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作者 刘影 田振东 +2 位作者 宋波涛 柳俊 谢从华 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期663-666,共4页
基于马铃薯StERF3超量表达载体转基因株系中出现了部分矮化植株,通过基因表达量检测、组织切片分析和转基因试管苗添加外源生长调节剂等方面对矮化原因进行了初步探讨。结果表明:矮化株中StERF3基因表达比对照降低;矮化株木质部和薄壁... 基于马铃薯StERF3超量表达载体转基因株系中出现了部分矮化植株,通过基因表达量检测、组织切片分析和转基因试管苗添加外源生长调节剂等方面对矮化原因进行了初步探讨。结果表明:矮化株中StERF3基因表达比对照降低;矮化株木质部和薄壁细胞明显变小,栅栏组织和海绵组织较致密;培养基中添加0.5mg/mL GA3能够使矮化株明显增高,但添加IAA效果不明显;转基因矮化株含有3~4个拷贝,多拷贝导致了目标基因的沉默;在干涉株系中StERF3基因表达比对照降低,但并未出现矮化株;推测植株矮化并不是由于StERF3表达量引起,很可能是由于多拷贝插入导致与GA3合成或其调控有关基因受到干扰引起。 展开更多
关键词 马铃薯 转基因 StERF3基因 矮化 超量表达载体 基因沉默
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mASR3基因超量表达载体的构建
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作者 唐志敏 黄士华 +2 位作者 江冬 古远安 杨礼香 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期137-141,共5页
ASR是植物特异的亲水蛋白家族,近来发现它们在植物生长发育、成熟衰老以及非生物胁迫过程中起着重要的作用。而mASR3基因是从植物中发现的一种转录因子,为进一步研究该基因功能,将合成的mASR3基因构建入超表达载体pMD1中,并通过农杆菌... ASR是植物特异的亲水蛋白家族,近来发现它们在植物生长发育、成熟衰老以及非生物胁迫过程中起着重要的作用。而mASR3基因是从植物中发现的一种转录因子,为进一步研究该基因功能,将合成的mASR3基因构建入超表达载体pMD1中,并通过农杆菌将此重组质粒转化入拟南芥,转入目的基因的拟南芥子叶为绿色,下胚轴较长,并具有较长的主根,筛选得到的转基因植株,为该基因的进一步功能研究打下基础。 展开更多
关键词 mASR3 超量表达载体 转基因植株
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谷子SibZIP8超量表达载体的构建
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作者 成亮 刘盼 +1 位作者 邢恒荣 张莉 《山西农业科学》 2018年第8期1235-1238,共4页
为了研究SibZIP8介导谷子抗旱的分子机制,试验根据SibZIP8 cDNA序列设计引物,以晋谷21的cDNA为模板,通过PCR扩增SibZIP8基因的全长cDNA。将所得的cDNA序列与表达载体p CAMBIA1302连接。通过对阳性克隆进行测序筛选,确定pCAMBIA1302-SibZ... 为了研究SibZIP8介导谷子抗旱的分子机制,试验根据SibZIP8 cDNA序列设计引物,以晋谷21的cDNA为模板,通过PCR扩增SibZIP8基因的全长cDNA。将所得的cDNA序列与表达载体p CAMBIA1302连接。通过对阳性克隆进行测序筛选,确定pCAMBIA1302-SibZIP8超量表达载体构建成功。该超量表达载体可用于SibZIP8基因功能的研究。 展开更多
关键词 谷子 bZIP转录因子 超量表达载体 基因功能
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XCRK基因在水稻与细菌性条斑病菌互作中的功能解析
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作者 张玉霞 崔玉超 +2 位作者 李燕 周丹 陈亮 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期201-207,共7页
XCRK(Xoc-associated receptor-like kinase)基因是对水稻细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS)致病菌侵染应答的差异蛋白质组学研究中发现的一个拟抗病基因.生物信息学分析显示该基因位于水稻的1号染色体上,编码一个含有322个氨基... XCRK(Xoc-associated receptor-like kinase)基因是对水稻细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS)致病菌侵染应答的差异蛋白质组学研究中发现的一个拟抗病基因.生物信息学分析显示该基因位于水稻的1号染色体上,编码一个含有322个氨基酸的蛋白激酶.组织表达分析显示XCRK基因在根、茎、叶、花序等组织中均有表达,且其表达受高盐、H2O2和脱落酸(ABA)的诱导.为了探究XCRK基因在水稻BLS中的作用,通过PCR扩增XCRK基因编码区,构建超量表达载体,并转化水稻愈伤组织获得了超量表达XCRK基因的转基因水稻植株;同时构建了RNA干扰(RNAi)表达载体,并获得了抑制表达XCRK基因的转基因水稻植株.对T1代转基因植株进行了BLS抗性分析,结果显示:超量表达XCRK基因明显增强了转基因水稻对BLS致病菌的抗性;相反地,抑制表达XCRK基因的转基因水稻对BLS致病菌的敏感性则略有增强.综上结果表明XCRK基因正调控水稻对BLS的抗性,这为进一步研究该基因的作用机制提供了理论依据. 展开更多
关键词 细菌性条斑病 超量表达载体 RNAi表达载体 转基因水稻
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