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葵花盘中黄嘌呤氧化酶抑制活性成分识别与活性分析
1
作者
闫昊前
张扬
+7 位作者
邢芳毓
高建萍
张天阳
李晓静
宋默微
孙冰冰
马莉
张贵锋
《生物学杂志》
北大核心
2025年第2期66-74,共9页
从葵花盘中筛选具有黄嘌呤氧化酶(XO)抑制活性的天然产物。以XO为载体,从葵花盘提取物中特异性吸附分离候选化合物,通过高分辨液质谱联用技术对其进行鉴定,研究XO抑制活性成分及其作用机理。从葵花盘醇提物中筛选出咖啡醇等13种化合物,...
从葵花盘中筛选具有黄嘌呤氧化酶(XO)抑制活性的天然产物。以XO为载体,从葵花盘提取物中特异性吸附分离候选化合物,通过高分辨液质谱联用技术对其进行鉴定,研究XO抑制活性成分及其作用机理。从葵花盘醇提物中筛选出咖啡醇等13种化合物,其中,咖啡醇(IC 50=47.49μg/mL,P<0.0001)具有XO抑制活性,为竞争性可逆抑制剂。采用分子对接技术模拟咖啡醇与XO特异结合性能,通过紫外可见光谱、荧光光谱及圆二色谱技术证明咖啡醇可与XO有效结合,并降低其活性。咖啡醇与酶FAD区域的结合阻碍了底物氧化反应过程中的电子转移,使酶的结构更加致密,底物难以定位到活性腔中,导致其催化活性下降。咖啡醇对酶的猝灭机制属于静态猝灭,主要驱动力为疏水作用,且咖啡醇在XO活性腔上只有单一或一类结合位点。咖啡醇是一种潜在抑制XO活性的成分,为治疗高尿酸血症天然产物的筛选提供依据。
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关键词
葵花盘
黄嘌呤氧化酶
咖啡醇
超滤
-
质谱
联用
技术
尿酸
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职称材料
基于阿尔茨海默病的茯苓中三萜类活性成分筛选、分离及鉴定研究
被引量：
1
2
作者
吴桐
刘春明
李赛男
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期571-578,共8页
建立了以活性为导向的快速筛选分离及鉴定茯苓中活性成分的分析方法。以茯苓总三萜得率为评价指标,应用星点设计-效应面法选取茯苓石油醚提取的最佳条件为:1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([Bmim][BF 4])浓度为0.4 mol/L,用量为10%,液料比...
建立了以活性为导向的快速筛选分离及鉴定茯苓中活性成分的分析方法。以茯苓总三萜得率为评价指标,应用星点设计-效应面法选取茯苓石油醚提取的最佳条件为:1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([Bmim][BF 4])浓度为0.4 mol/L,用量为10%,液料比为30∶1,提取时间为35 min,提取次数为3次;利用超滤-质谱技术(UF-LC-MS)共筛选得到5个潜在的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂和3个潜在的5-脂氧合酶(5-LOX)抑制剂。以活性为导向,经高速逆流色谱(HSCCC)结合半制备高效液相色谱(Semi-preparative HPLC)技术联合分离,从200 mg茯苓提取物中,分离制备得到2.36 mg 3-表去氢土莫酸、3.54 mg去氢茯苓酸,8.57 mg茯苓酸、5.34 mg松苓新酸、4.32 mg 3-氢化松苓酸,经高效液相色谱(HPLC)分析其纯度均达到90.0%以上;并采用超高效液相色谱-高分辨质谱仪及核磁共振波谱技术对单体活性成分进行鉴定。本研究所建立的方法简单、快速、高效,分离样品纯度高,适用于茯苓中三萜类活性化合物的分离纯化及鉴定研究,为天然药物的开发与应用提供了理论基础和技术支持。
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关键词
茯苓
星点设计
-
效应面法
超滤-质谱技术
高速逆流色谱
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职称材料
题名
葵花盘中黄嘌呤氧化酶抑制活性成分识别与活性分析
1
作者
闫昊前
张扬
邢芳毓
高建萍
张天阳
李晓静
宋默微
孙冰冰
马莉
张贵锋
机构
成都中医药大学药学院
中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室
天新福(北京)医疗器材股份有限公司
哈尔滨医科大学附属第一医院
首都医科大学中医药学院
出处
《生物学杂志》
北大核心
2025年第2期66-74,共9页
基金
北京市自然科学基金项目(2244105)。
文摘
从葵花盘中筛选具有黄嘌呤氧化酶(XO)抑制活性的天然产物。以XO为载体,从葵花盘提取物中特异性吸附分离候选化合物,通过高分辨液质谱联用技术对其进行鉴定,研究XO抑制活性成分及其作用机理。从葵花盘醇提物中筛选出咖啡醇等13种化合物,其中,咖啡醇(IC 50=47.49μg/mL,P<0.0001)具有XO抑制活性,为竞争性可逆抑制剂。采用分子对接技术模拟咖啡醇与XO特异结合性能,通过紫外可见光谱、荧光光谱及圆二色谱技术证明咖啡醇可与XO有效结合,并降低其活性。咖啡醇与酶FAD区域的结合阻碍了底物氧化反应过程中的电子转移,使酶的结构更加致密,底物难以定位到活性腔中,导致其催化活性下降。咖啡醇对酶的猝灭机制属于静态猝灭,主要驱动力为疏水作用,且咖啡醇在XO活性腔上只有单一或一类结合位点。咖啡醇是一种潜在抑制XO活性的成分,为治疗高尿酸血症天然产物的筛选提供依据。
关键词
葵花盘
黄嘌呤氧化酶
咖啡醇
超滤
-
质谱
联用
技术
尿酸
Keywords
sunflower calathide
XO
cafestol
UF
-
LC
-
MS
uric acid
分类号
Q946 [生物学—植物学]
R284.1 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
基于阿尔茨海默病的茯苓中三萜类活性成分筛选、分离及鉴定研究
被引量：
1
2
作者
吴桐
刘春明
李赛男
机构
长春中医药大学
长春师范大学中心实验室
出处
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期571-578,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31870336)
吉林省科技发展计划项目(20200404020YY,20200201114JC)。
文摘
建立了以活性为导向的快速筛选分离及鉴定茯苓中活性成分的分析方法。以茯苓总三萜得率为评价指标,应用星点设计-效应面法选取茯苓石油醚提取的最佳条件为:1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([Bmim][BF 4])浓度为0.4 mol/L,用量为10%,液料比为30∶1,提取时间为35 min,提取次数为3次;利用超滤-质谱技术(UF-LC-MS)共筛选得到5个潜在的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂和3个潜在的5-脂氧合酶(5-LOX)抑制剂。以活性为导向,经高速逆流色谱(HSCCC)结合半制备高效液相色谱(Semi-preparative HPLC)技术联合分离,从200 mg茯苓提取物中,分离制备得到2.36 mg 3-表去氢土莫酸、3.54 mg去氢茯苓酸,8.57 mg茯苓酸、5.34 mg松苓新酸、4.32 mg 3-氢化松苓酸,经高效液相色谱(HPLC)分析其纯度均达到90.0%以上;并采用超高效液相色谱-高分辨质谱仪及核磁共振波谱技术对单体活性成分进行鉴定。本研究所建立的方法简单、快速、高效,分离样品纯度高,适用于茯苓中三萜类活性化合物的分离纯化及鉴定研究,为天然药物的开发与应用提供了理论基础和技术支持。
关键词
茯苓
星点设计
-
效应面法
超滤-质谱技术
高速逆流色谱
Keywords
Poria cocos
Central composite design
-
response surface method
Ultrafiltration liquid chromatography mass spectrometry
High
-
speed countercurrent chromatography combined
分类号
O657.72 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
葵花盘中黄嘌呤氧化酶抑制活性成分识别与活性分析
闫昊前
张扬
邢芳毓
高建萍
张天阳
李晓静
宋默微
孙冰冰
马莉
张贵锋
《生物学杂志》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
基于阿尔茨海默病的茯苓中三萜类活性成分筛选、分离及鉴定研究
吴桐
刘春明
李赛男
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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