目的研究资木瓜总苷对小鼠骨髓来源的肥大细胞(BMMC)脱颗粒影响。方法从C57BL/6小鼠股骨获得骨髓细胞,用含100 m L/L胎牛血清、20 ng/m L IL-3和40 ng/m L干细胞因子(SCF)的RPMI1640培养基,培养4周;流式细胞术检测CD117、FcεRIα双阳...目的研究资木瓜总苷对小鼠骨髓来源的肥大细胞(BMMC)脱颗粒影响。方法从C57BL/6小鼠股骨获得骨髓细胞,用含100 m L/L胎牛血清、20 ng/m L IL-3和40 ng/m L干细胞因子(SCF)的RPMI1640培养基,培养4周;流式细胞术检测CD117、FcεRIα双阳性细胞的比例,甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度。资木瓜总苷与诱导成功的BMMC共培养,CCK-8法检测资木瓜总苷对BMMC的毒性作用,荧光分光光度法定量检测β-己糖胺酶释放量,并计算其释放率,ELISA检测类胰蛋白酶释放量。结果原代培养诱导4周后,CD117和FcεRIα双阳性细胞比例大于95%,且核被染蓝色,胞质为紫红色,呈现肥大细胞特性。(0.01、0.03、0.10)mg/m L的资木瓜总苷作用12 h,对BMMC无毒性作用。与空白对照组相比,资木瓜总苷与交联牛血清白蛋白的二硝基苯半抗原(DNP-BSA)、A23187刺激的BMMC作用后,细胞的β-己糖胺酶释放率和类胰蛋白酶的释放量均显著降低。结论资木瓜总苷对不同抗原刺激原代培养的小鼠BMMC脱颗粒具有显著抑制作用,且存在量效关系。展开更多
文摘目的研究资木瓜总苷对小鼠骨髓来源的肥大细胞(BMMC)脱颗粒影响。方法从C57BL/6小鼠股骨获得骨髓细胞,用含100 m L/L胎牛血清、20 ng/m L IL-3和40 ng/m L干细胞因子(SCF)的RPMI1640培养基,培养4周;流式细胞术检测CD117、FcεRIα双阳性细胞的比例,甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度。资木瓜总苷与诱导成功的BMMC共培养,CCK-8法检测资木瓜总苷对BMMC的毒性作用,荧光分光光度法定量检测β-己糖胺酶释放量,并计算其释放率,ELISA检测类胰蛋白酶释放量。结果原代培养诱导4周后,CD117和FcεRIα双阳性细胞比例大于95%,且核被染蓝色,胞质为紫红色,呈现肥大细胞特性。(0.01、0.03、0.10)mg/m L的资木瓜总苷作用12 h,对BMMC无毒性作用。与空白对照组相比,资木瓜总苷与交联牛血清白蛋白的二硝基苯半抗原(DNP-BSA)、A23187刺激的BMMC作用后,细胞的β-己糖胺酶释放率和类胰蛋白酶的释放量均显著降低。结论资木瓜总苷对不同抗原刺激原代培养的小鼠BMMC脱颗粒具有显著抑制作用,且存在量效关系。
