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乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究被引量：9: 1; 作者汤德元王凤 +5 位作者马萍罗险峰李春燕曾智勇徐健刘建《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1330-1336,共7页; 收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计... 展开更多; 关键词乙型脑炎病毒贵州分离株 E基因原核表达免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽腺病毒贵州分离株HS-1的核酸酶切分析与蛋白抗原鉴定被引量：1: 2; 作者吴彤韩丽珍 +1 位作者周碧君李永明《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第1期5-8,共4页; 本研究利用 10 % SDS- PAGE及 Western- Blotting技术鉴定 3株不同的减蛋综合征病毒 (贵州株 HS- 1、南京分离毒GC2 、国际标准毒 AV- 12 7)的蛋白抗原性 ,结果表明 ,3株毒的蛋白多肽分子量均在 10 6～ 12 KD范围内 ,但各条多肽的组成... 展开更多; 关键词鸡禽腺病毒贵州分离株HS-1 核酸酶切分析蛋白抗原性鉴定减蛋综合征; 在线阅读下载PDF 职称材料

K_(88)^+产肠毒素大肠杆菌贵州分离株的生物学特性被引量：2: 3; 作者苟万里周碧君 +1 位作者吴彤稽辛勤《山地农业生物学报》 1999年第2期74-80,共7页; 应用溶血性试验、抗Ｄ－甘露糖微量血凝试验（ＭＲＭＨ）、玻板凝集、体外细胞粘附试验、透射电镜和兔肠结扎试验，首次对大肠杆菌贵州分离株的生物学特性进行了全面研究。结果表明，该细菌是一株血清型为Ｏ６０∶Ｋ８８、不溶血、产肠... 展开更多; 关键词肠毒素大肠杆菌贵州分离株仔猪生物学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒贵州分离株gE基因主要抗原表位区真核表达研究: 4; 作者郝飞汤德元 +2 位作者李春燕曾智勇罗险峰《山地农业生物学报》 2013年第6期484-488,共5页; 收集贵州省思南县某猪场送检的哺乳仔猪病料,采用Vero细胞盲传、核酸鉴定及测序分离到1株伪狂犬病病毒贵州分离株。扩增其gE基因主要抗原表位区,构建pcDNA3.1(+)-gE重组真核表达质粒,将其转染Vero细胞,采用间接免疫荧光(IFA)检测基因在V... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒贵州分离株真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达的研究: 5; 作者王彬汤德元 +4 位作者李春燕王凤曾智勇张晓杰甘振磊《猪业科学》 2011年第6期94-97,共4页; 通过对PRRSV贵州分离株(Guizhou-1)RNA的提取和RT-PCR方法扩增得到ORF5基因,成功构建原核表达载体pET-32a-ORF5,转化至宿主菌BL21(DE3)中,诱导蛋白表达,并对诱导表达蛋白的SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析,得到了约42.9ku左右的表... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株 ORF5基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛支原体贵州分离株P33基因的克隆及遗传进化分析被引量：1: 6; 作者韩帅博成虹松 +5 位作者王婕万芝灵罗怡泓盛伊果牟真权程振涛《贵州畜牧兽医》 2023年第4期51-54,共4页; 为了解牛支原体贵州分离株的遗传进化情况,对其P33基因进行PCR扩增,扩增产物克隆至pMD19-T载体,筛选阳性克隆质粒进行基因序列和同源性分析,构建遗传进化树。结果:牛支原体贵州株P33基因PCR产物长度约690 bp(命名为GZ-Mb),与湖北株HB080... 展开更多; 关键词牛支原体贵州分离株 P33基因克隆遗传进化; 在线阅读下载PDF 职称材料

马立克氏病病毒贵州株meq基因的克隆及遗传进化分析被引量：5: 7; 作者张喜懿温贵兰 +7 位作者欧德渊陈广张小波汪德生文明胡璇孙芸刘蔓蔓《贵州畜牧兽医》 2020年第6期40-44,共5页; 为了解从贵阳市某养殖场矮脚黄鸡病料中分离的马立克氏病病毒(MDV)的遗传变异情况及meq基因的分子特征,试验对临床病料进行MDV meq基因PCR检测、克隆及序列分析。结果:从检测样品中扩增出1020 bp MDV meq基因片段(命名为MDV GZ 2019 me... 展开更多; 关键词马立克氏病病毒贵州分离株 MEQ基因克隆遗传进化分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究被引量：9: 1; 作者汤德元王凤马萍罗险峰李春燕曾智勇徐健刘建; 机构贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病预防控制中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1330-1336,共7页; 基金 2006年贵州省高层次人才科研条件特助经费项目(TZJF-2006年01号) 贵州省2011年农业攻关项目[黔科合NY字(2011)3103号] 贵州省2010年农业科技攻关项目[黔科合NY字(2010)3042号]; 文摘收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET-32a-E转化至宿主菌BL21(DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,得到了约59ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体。结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础。; 关键词乙型脑炎病毒贵州分离株 E基因原核表达免疫原性; Keywords Japanese encephalitis virus； Guizhou isolation strain； E gene； prokaryotic expression； immunogenicity; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽腺病毒贵州分离株HS-1的核酸酶切分析与蛋白抗原鉴定被引量：1: 2; 作者吴彤韩丽珍周碧君李永明; 机构贵州大学生物技术学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第1期5-8,共4页; 基金贵州省自然科学基金支持项目; 文摘本研究利用 10 % SDS- PAGE及 Western- Blotting技术鉴定 3株不同的减蛋综合征病毒 (贵州株 HS- 1、南京分离毒GC2 、国际标准毒 AV- 12 7)的蛋白抗原性 ,结果表明 ,3株毒的蛋白多肽分子量均在 10 6～ 12 KD范围内 ,但各条多肽的组成上略有差异 ;它们都具有两条相同的免疫原性多肽 ,分子量分别为 10 6和 10 0 KD。同时 ,运用 Eco R 、Bam H 、Hind 、Pst 和Sm a 等 5种限制性内切酶进行了酶切分析 ,证实 3株 EDS病毒用 Pst 和 Sma 酶切的片段大小及长度略有不同 ,而其它; 关键词鸡禽腺病毒贵州分离株HS-1 核酸酶切分析蛋白抗原性鉴定减蛋综合征; Keywords EDSV anigenicity identification restriction map analysis; 分类号 S858.315.3 [农业科学—临床兽医学] S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名K_(88)^+产肠毒素大肠杆菌贵州分离株的生物学特性被引量：2: 3; 作者苟万里周碧君吴彤稽辛勤; 机构贵州大学生物技术学院动物科学系贵州省食品公司; 出处《山地农业生物学报》 1999年第2期74-80,共7页; 文摘应用溶血性试验、抗Ｄ－甘露糖微量血凝试验（ＭＲＭＨ）、玻板凝集、体外细胞粘附试验、透射电镜和兔肠结扎试验，首次对大肠杆菌贵州分离株的生物学特性进行了全面研究。结果表明，该细菌是一株血清型为Ｏ６０∶Ｋ８８、不溶血、产肠毒素的大肠杆菌；其所产Ｋ８８菌毛抗原，在电镜下呈纤细短小、密布于细菌表面，能介导细菌粘附于仔猪离体肠上皮细胞，使细菌能凝集豚鼠和鸡的红细胞，其凝集作用不被Ｄ－甘露糖抑制。; 关键词肠毒素大肠杆菌贵州分离株仔猪生物学特性; Keywords K 88 fimbriae enterotoxin Escherichia coli Guizhou-strain; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学] S852.612 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒贵州分离株gE基因主要抗原表位区真核表达研究: 4; 作者郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰; 机构贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病预防控制中心; 出处《山地农业生物学报》 2013年第6期484-488,共5页; 基金贵州省科学技术基金项目"猪呼吸道病毒性疫病新型特异诊断技术多重PCR检测的研究"[黔科合J字(2013)2110号] 贵州省2011年农业攻关项目"贵州省规模化猪场主要病毒性疫病的调查及综合防控对策的研究与示范"[黔科合NY字(2011)3103号] 贵州省2010年农业攻关项目"贵州省规模化猪场猪繁殖障碍性疫病防控体系的研究与示范"[黔科合NY字(2010)3042号]; 文摘收集贵州省思南县某猪场送检的哺乳仔猪病料,采用Vero细胞盲传、核酸鉴定及测序分离到1株伪狂犬病病毒贵州分离株。扩增其gE基因主要抗原表位区,构建pcDNA3.1(+)-gE重组真核表达质粒,将其转染Vero细胞,采用间接免疫荧光(IFA)检测基因在Vero细胞中的表达,同时将重组质粒免疫BALB/c小鼠,进行免疫学评价。结果表明:gE基因主要抗原表位区在Vero获得瞬时表达,转染的Vero细胞呈特异性绿色荧光;将构建的重组真核表达质粒免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA和T淋巴细胞亚群含量测定表明,重组质粒具有较好的免疫原性。; 关键词伪狂犬病病毒贵州分离株真核表达; Keywords PRV Guizhou isolate Eukaryotic expression; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达的研究: 5; 作者王彬汤德元李春燕王凤曾智勇张晓杰甘振磊; 机构贵州大学动物科学学院; 出处《猪业科学》 2011年第6期94-97,共4页; 基金贵州省贵阳市2005年畜牧科技专项基金项目资助[编号:(2005)筑科农字第4-11号]; 文摘通过对PRRSV贵州分离株(Guizhou-1)RNA的提取和RT-PCR方法扩增得到ORF5基因,成功构建原核表达载体pET-32a-ORF5,转化至宿主菌BL21(DE3)中,诱导蛋白表达,并对诱导表达蛋白的SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析,得到了约42.9ku左右的表达蛋白,与预期大小相符,表明猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因在大肠杆菌中能表达,并具有一定的生物学活性。动物免疫试验表明纯化蛋白和包涵体均可刺激小鼠产生抗体,纯化蛋白的效果优于包涵体。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株 ORF5基因原核表达; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛支原体贵州分离株P33基因的克隆及遗传进化分析被引量：1: 6; 作者韩帅博成虹松王婕万芝灵罗怡泓盛伊果牟真权程振涛; 机构贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室德江县平原镇农业服务中心畜牧站; 出处《贵州畜牧兽医》 2023年第4期51-54,共4页; 基金 “牛支原体肺炎基因工程疫苗的构建”大学生创新创业训练计划项目[贵大(省)创字2021(087)] “贵州省牛羊支原体肺炎综合防控技术研究与示范”贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2021]一般161号) “动物病原分子特征与致病机理研究”贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才[2021]5646号)。; 文摘为了解牛支原体贵州分离株的遗传进化情况,对其P33基因进行PCR扩增,扩增产物克隆至pMD19-T载体,筛选阳性克隆质粒进行基因序列和同源性分析,构建遗传进化树。结果:牛支原体贵州株P33基因PCR产物长度约690 bp(命名为GZ-Mb),与湖北株HB0801、Hubei-1同源性为99.6%,且在同一进化分支。结论:牛支原体贵州株P33基因与湖北株同源性最高,亲缘关系最近。; 关键词牛支原体贵州分离株 P33基因克隆遗传进化; 分类号 S858.23 [农业科学—临床兽医学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马立克氏病病毒贵州株meq基因的克隆及遗传进化分析被引量：5: 7; 作者张喜懿温贵兰欧德渊陈广张小波汪德生文明胡璇孙芸刘蔓蔓; 机构贵州大学动物科学学院贵州省动物生物制品工程技术研究中心; 出处《贵州畜牧兽医》 2020年第6期40-44,共5页; 基金 “贵州地方品种鸡ALV快速检测与中药控制关键技术研究”贵州省农业科技支撑计划项目(黔科合支撑[2019]2286号) “贵州省科技平台及人才团队计划·贵州省动物生物制品工程技术研究中心(贵州省动物毒种的收集筛选)”(黔科合平台人才[2018]5253) “三氧化二砷对禽白血病Hedgehog信号通路影响的研究”2020年度贵州省基础研究计划(基金)项目(黔科合基础[2020]1Y136)。; 文摘为了解从贵阳市某养殖场矮脚黄鸡病料中分离的马立克氏病病毒(MDV)的遗传变异情况及meq基因的分子特征,试验对临床病料进行MDV meq基因PCR检测、克隆及序列分析。结果:从检测样品中扩增出1020 bp MDV meq基因片段(命名为MDV GZ 2019 meq),将该片段克隆至pMD19-T载体,经测序为1020 bp序列。同源性分析结果显示:该病毒株与国内特超强毒MDV分离株GXY2株的核苷酸序列和推导氨基酸序列同源性最高,分别为99.8%、99.4%;推导氨基酸序列比对结果显示存在5个突变位点,分别为第63位(R→G)、第80位(D→Y)、第139位(T→A)、第176位(P→R)、第217位(P→A)。除第63位突变位点外,其余4个突变位点均与GXY2株一致。结论:本次分离的MDV贵州株与国内特超强毒MDV分离株GXY2株同源性最高,推测其为MDV强毒株。; 关键词马立克氏病病毒贵州分离株 MEQ基因克隆遗传进化分析; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究	汤德元王凤马萍罗险峰李春燕曾智勇徐健刘建	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	禽腺病毒贵州分离株HS-1的核酸酶切分析与蛋白抗原鉴定	吴彤韩丽珍周碧君李永明	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	K_(88)^+产肠毒素大肠杆菌贵州分离株的生物学特性	苟万里周碧君吴彤稽辛勤	《山地农业生物学报》	1999	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	伪狂犬病病毒贵州分离株gE基因主要抗原表位区真核表达研究	郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰	《山地农业生物学报》	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达的研究	王彬汤德元李春燕王凤曾智勇张晓杰甘振磊	《猪业科学》	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	牛支原体贵州分离株P33基因的克隆及遗传进化分析	韩帅博成虹松王婕万芝灵罗怡泓盛伊果牟真权程振涛	《贵州畜牧兽医》	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	马立克氏病病毒贵州株meq基因的克隆及遗传进化分析	张喜懿温贵兰欧德渊陈广张小波汪德生文明胡璇孙芸刘蔓蔓	《贵州畜牧兽医》	2020	5	在线阅读下载PDF 职称材料