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一种质粒DNA标准物质的定值数据统计及不确定度评定
被引量：
7
1
作者
许丽
梁文
+3 位作者
李妍
任淑贞
丁敏
刘刚
《中国测试》
CAS
北大核心
2014年第S1期9-13,共5页
为研制一种质粒DNA标准物质,应用紫外分光光度法(UV)和高分辨电感耦合等离子体质谱法(HR-ICPMS)对质粒DNA标准物质候选物的浓度进行测定,统计定值结果,并对测量的不确定度进行评定。最终,质粒DNA标准物质的浓度表示为(75.1±2.1)ng/...
为研制一种质粒DNA标准物质,应用紫外分光光度法(UV)和高分辨电感耦合等离子体质谱法(HR-ICPMS)对质粒DNA标准物质候选物的浓度进行测定,统计定值结果,并对测量的不确定度进行评定。最终,质粒DNA标准物质的浓度表示为(75.1±2.1)ng/μL(k=2)。
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关键词
质粒dna标准物质
紫外分光光度法
高分辨电感耦合等离子体质谱法
不确定度
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职称材料
转基因检测标准物质研制关键环节质量控制研究
被引量：
2
2
作者
高芳瑞
王颢潜
+6 位作者
李瑞环
刘娜
王永
武玉花
李亮
赵新
梁晋刚
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2022年第5期1125-1134,共10页
在转基因产品检测方法开发、身份鉴定和产品成分定性、定量检测过程中,标准物质是不可缺少的物质基础。本研究对标标准物质申报要求,着重对比了基体标准物质、基因组DNA标准物质、质粒标准物质三种类型转基因检测标准物质的研制过程,提...
在转基因产品检测方法开发、身份鉴定和产品成分定性、定量检测过程中,标准物质是不可缺少的物质基础。本研究对标标准物质申报要求,着重对比了基体标准物质、基因组DNA标准物质、质粒标准物质三种类型转基因检测标准物质的研制过程,提出关键环节的质量控制要求,为促进转基因检测标准物质研制过程标准化、提升研制报告编制质量、提高申报通过率提供技术支撑。
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关键词
转基因检测
基体
标准
物质
质粒dna标准物质
基因组
dna
分子
标准
物质
关键环节
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职称材料
即食果蔬制品中致泻大肠埃希氏菌检测微滴数字PCR系统的建立
3
作者
张雪
马丽侠
+4 位作者
叶德萍
易艳
姜展樾
周李华
谢贞建
《食品工业科技》
北大核心
2025年第21期357-365,共9页
传统的致泻大肠埃希氏菌检验方法耗时较长,为缩短检测时间,构建了含致泻大肠埃希氏菌bfpB、ipaH、stp特征基因的质粒DNA标准物质候选物,针对bfpB、ipaH、stp基因建立一套可实现快速检测的微滴式数字PCR系统。用微滴数字PCR(Droplet Digi...
传统的致泻大肠埃希氏菌检验方法耗时较长,为缩短检测时间,构建了含致泻大肠埃希氏菌bfpB、ipaH、stp特征基因的质粒DNA标准物质候选物,针对bfpB、ipaH、stp基因建立一套可实现快速检测的微滴式数字PCR系统。用微滴数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)进行引物探针浓度和退火温度等体系优化后,以梯度稀释的质粒DNA为模板评估方法的线性相关性和精密度,添加非目标基因invE、sth为模板验证方法特异性,并将构建的ddPCR方法用于即食果蔬制品的实际检测。结果表明,bfpB、ipaH、stp质粒DNA最优引物终浓度均为400 nmol/L,最优探针终浓度分别为200、100、200 nmol/L;bfpB、ipaH、stp质粒DNA最优退火温度分别为60、58、58℃;特征基因bfpB、ipaH、stp分别在8.87~38700.00、3.33~36533.33、6.57~61833.33 copies/μL浓度范围呈线性相关,浓度梯度的线性相关系数r值均大于0.99;bfpB、ipaH、stp基因的定量限分别为15.33、7.97、15.00 copies/μL,检出限分别为8.87、3.33、6.57 copies/μL;方法精密度小于5%,特异性良好;实际样品检测结果显示,未加标样品未检出,而加标样品及阳性对照均可检出,ddPCR方法检测结果与国标方法检测结果一致。建立的方法可大大缩短致泻大肠埃希氏菌的检测时间,为食品中致泻大肠埃希氏菌的快速检测提供技术参考。
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关键词
致泻大肠埃希氏菌
毒力因子
微滴式数字PCR
质粒dna标准物质
候选物
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职称材料
题名
一种质粒DNA标准物质的定值数据统计及不确定度评定
被引量：
7
1
作者
许丽
梁文
李妍
任淑贞
丁敏
刘刚
机构
上海市计量测试技术研究院
出处
《中国测试》
CAS
北大核心
2014年第S1期9-13,共5页
基金
自然科学基金青年基金(21205079
21305091)
+4 种基金
上海市自然科学基金青年基金(11R21420800)
上海市青年科技启明星项目(13QB1402900)
国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2012QK273
2013QK132)
上海市质量技术监督局科研项目(2012-04)
文摘
为研制一种质粒DNA标准物质,应用紫外分光光度法(UV)和高分辨电感耦合等离子体质谱法(HR-ICPMS)对质粒DNA标准物质候选物的浓度进行测定,统计定值结果,并对测量的不确定度进行评定。最终,质粒DNA标准物质的浓度表示为(75.1±2.1)ng/μL(k=2)。
关键词
质粒dna标准物质
紫外分光光度法
高分辨电感耦合等离子体质谱法
不确定度
Keywords
plasmid
dna
reference material
UV spectrophotometry
high resolution inductively coupled plasma mass spectrometry
uncertainty
分类号
Q523 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
转基因检测标准物质研制关键环节质量控制研究
被引量：
2
2
作者
高芳瑞
王颢潜
李瑞环
刘娜
王永
武玉花
李亮
赵新
梁晋刚
机构
天津市农业科学院种质资源与生物技术研究所
农业农村部科技发展中心
中国农业科学院油料作物研究所
中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
出处
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2022年第5期1125-1134,共10页
基金
转基因生物重大专项(2016ZX08012003-007)
农业科研杰出人才培养计划(2021年)。
文摘
在转基因产品检测方法开发、身份鉴定和产品成分定性、定量检测过程中,标准物质是不可缺少的物质基础。本研究对标标准物质申报要求,着重对比了基体标准物质、基因组DNA标准物质、质粒标准物质三种类型转基因检测标准物质的研制过程,提出关键环节的质量控制要求,为促进转基因检测标准物质研制过程标准化、提升研制报告编制质量、提高申报通过率提供技术支撑。
关键词
转基因检测
基体
标准
物质
质粒dna标准物质
基因组
dna
分子
标准
物质
关键环节
Keywords
GMO test
primary reference material
plasmid
dna
material
genome
dna
material
key tache
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
即食果蔬制品中致泻大肠埃希氏菌检测微滴数字PCR系统的建立
3
作者
张雪
马丽侠
叶德萍
易艳
姜展樾
周李华
谢贞建
机构
成都大学食品与生物工程学院
中国测试技术研究院
出处
《食品工业科技》
北大核心
2025年第21期357-365,共9页
基金
国家重点研发计划项目(2021YFF0701905)。
文摘
传统的致泻大肠埃希氏菌检验方法耗时较长,为缩短检测时间,构建了含致泻大肠埃希氏菌bfpB、ipaH、stp特征基因的质粒DNA标准物质候选物,针对bfpB、ipaH、stp基因建立一套可实现快速检测的微滴式数字PCR系统。用微滴数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)进行引物探针浓度和退火温度等体系优化后,以梯度稀释的质粒DNA为模板评估方法的线性相关性和精密度,添加非目标基因invE、sth为模板验证方法特异性,并将构建的ddPCR方法用于即食果蔬制品的实际检测。结果表明,bfpB、ipaH、stp质粒DNA最优引物终浓度均为400 nmol/L,最优探针终浓度分别为200、100、200 nmol/L;bfpB、ipaH、stp质粒DNA最优退火温度分别为60、58、58℃;特征基因bfpB、ipaH、stp分别在8.87~38700.00、3.33~36533.33、6.57~61833.33 copies/μL浓度范围呈线性相关,浓度梯度的线性相关系数r值均大于0.99;bfpB、ipaH、stp基因的定量限分别为15.33、7.97、15.00 copies/μL,检出限分别为8.87、3.33、6.57 copies/μL;方法精密度小于5%,特异性良好;实际样品检测结果显示,未加标样品未检出,而加标样品及阳性对照均可检出,ddPCR方法检测结果与国标方法检测结果一致。建立的方法可大大缩短致泻大肠埃希氏菌的检测时间,为食品中致泻大肠埃希氏菌的快速检测提供技术参考。
关键词
致泻大肠埃希氏菌
毒力因子
微滴式数字PCR
质粒dna标准物质
候选物
Keywords
diarrheagenic Escherichia coli
virulence factors
droplet digital PCR
plasmid
dna
standard candidate
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种质粒DNA标准物质的定值数据统计及不确定度评定
许丽
梁文
李妍
任淑贞
丁敏
刘刚
《中国测试》
CAS
北大核心
2014
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
转基因检测标准物质研制关键环节质量控制研究
高芳瑞
王颢潜
李瑞环
刘娜
王永
武玉花
李亮
赵新
梁晋刚
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2022
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
即食果蔬制品中致泻大肠埃希氏菌检测微滴数字PCR系统的建立
张雪
马丽侠
叶德萍
易艳
姜展樾
周李华
谢贞建
《食品工业科技》
北大核心
2025
0
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参考文献
引证文献
统计分析
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