大肠埃希菌中质粒AmpC型β内酰胺酶基因型的检测 被引量：45

1

作者 陈轶兰 王辉 +1 位作者 吴伟元 陈民钧 《中国抗感染化疗杂志》 2002年第3期158-161,共4页

目的 :研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC型 β内酰胺酶的基因型。 方法 :收集对头孢西丁不敏感的 4 2株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,用酶提取物三维试验检测AmpC酶 ;用等电聚焦电泳、接合试验、聚合酶链反应 (PCR)确定AmpC型酶的表型... 目的 :研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC型 β内酰胺酶的基因型。 方法 :收集对头孢西丁不敏感的 4 2株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,用酶提取物三维试验检测AmpC酶 ;用等电聚焦电泳、接合试验、聚合酶链反应 (PCR)确定AmpC型酶的表型和基因型。结果 :16株菌高产AmpC酶 ,其中 11株同时产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ;这 16株菌对亚胺培南敏感 ,5株只产AmpC酶的菌对头孢吡肟敏感 ;等电聚焦电泳发现这 16株菌产生 2～ 5种酶 ,且都有一个能为氯唑西林抑制的、等电点>7.8的酶带 ;1株大肠埃希菌通过接合试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌 ;PCR扩增和测序证实其为质粒介导的ACT 1型AmpC酶。 结论 :2 0 0 0年我院分离的对头孢西丁不敏感的 4 2株革兰阴性杆菌中证实有 15株大肠埃希菌和 1株肺炎克雷伯菌产AmpC酶 ,并在国内首次发现 1株大肠埃希菌产ACT 1型质粒AmpC酶。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 质粒 ampc型β内酰胺酶 基因型

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质粒介导AmpC型β-内酰胺酶的基因型和检测方法 被引量：3

2

作者 冯福英 胡望平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期175-178,共4页

关键词 质粒介导ampc酶 新基因型 Β-内酰胺酶 检测 革兰氏阴性杆菌 C型 公共卫生问题 耐药性 发生率

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鲍曼不动杆菌ADC型AmpC β-内酰胺酶基因研究 被引量：9

3

作者 黄支密 储秋菊 +4 位作者 糜祖煌 单浩 杨海燕 仵蕾 秦玲 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期369-374,383,共7页

目的了解浙江湖州解放军第98医院自临床分离的鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）中ADC型AmpC β-内酰胺酶基因（blaADC）存在状况。方法收集2000年7月-2002年12月所分离到的60株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应及序列分析的方法... 目的了解浙江湖州解放军第98医院自临床分离的鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）中ADC型AmpC β-内酰胺酶基因（blaADC）存在状况。方法收集2000年7月-2002年12月所分离到的60株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析blaADC基因。结果60株中有59株blaADC基因呈阳性（98．3％），序列分析表明4号菌株（原始编号HZB3944）blaADC基因为-新亚型，其核酸序列已登录GenBank（注册号EF569589）。结论鲍曼不动杆菌中blaADC基因阳性率很高，产ADC型AmpC β-内酰胺酶是本组菌株对β-内酰胺类抗生素耐药的重要原因之一。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 ADC型 ampc Β-内酰胺酶

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质粒介导的AmpC β-内酰胺酶 被引量：10

4

作者 宋玮 唐英春 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期72-78,共7页

质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶是近十余年来发现的一种新型C类β-内酰胺酶。根据与染色体C类酶氨基酸序列的同源性,将其分为6组。此类酶对第一、二、三代头孢菌素、头霉素、氨曲南耐药,外膜蛋白丢失的菌株甚至出现对碳青霉烯类的耐药。质... 质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶是近十余年来发现的一种新型C类β-内酰胺酶。根据与染色体C类酶氨基酸序列的同源性,将其分为6组。此类酶对第一、二、三代头孢菌素、头霉素、氨曲南耐药,外膜蛋白丢失的菌株甚至出现对碳青霉烯类的耐药。质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶耐药基因在质粒间及质粒与染色体间的转移主要是通过转座子或整合子为工具实现的。与染色体介导AmpC酶不同,除DHA型外,大多数质粒介导的AmpC酶的产生是不可诱导的。 展开更多

关键词 ampc Β-内酰胺酶 β-内酰胺耐药性 分子生物学 质粒介导 抗生素

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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌质粒ampC基因检测和耐药性分析 被引量：2

5

作者 汪雅萍 应春妹 +2 位作者 张灏旻 叶杨芹 于嘉屏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期114-115,共2页

目的检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的质粒ampC基因,并检测其对抗生素的耐药性,了解大肠埃希菌在院内的流行情况,指导临床合理用药。方法在产ESBLs的大肠埃希菌中筛选出头孢西丁耐药菌株30株,通过热裂解法进行DNA抽提,对6组a... 目的检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的质粒ampC基因,并检测其对抗生素的耐药性,了解大肠埃希菌在院内的流行情况,指导临床合理用药。方法在产ESBLs的大肠埃希菌中筛选出头孢西丁耐药菌株30株,通过热裂解法进行DNA抽提,对6组ampC特异引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳区分PCR产物,进一步DNA测序确定其基因型。结果5株同时产ampC酶和ESBLs大肠埃希菌的耐药性与195株只产ESBLs的相似,对β内酰胺类抗生素耐药强(P<0.01),符合ESBLs特点;同时符合ampC酶的特点,对头孢西丁和β-内酰胺酶抑制剂耐药(P<0.01),对四代头孢菌素和碳青霉烯类敏感。30株试验菌中有5株为阳性,基因型分别为CIT型2株,DHA型2株,EBC型1株。结论大肠埃希菌可同时产ESBLs和AmpC酶菌株,由于其为质粒介导,具高传播性,易爆发院内感染,须高度重视。 展开更多

关键词 质粒介导 产超广谱Β-内酰胺酶 ampc基因 多重PCR 耐药性

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大肠埃希菌中共存两种携带ampC和/或超广谱β-内酰胺酶基因的质粒 被引量：1

6

作者 邵海枫 王锦娜 +3 位作者 王卫萍 艾冬琴 张小卫 史利宁 《医学研究生学报》 CAS 2006年第10期867-870,共4页

目的：探讨从临床分离的大肠埃希菌（E．coli）中，由质粒编码的ampC和／或超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因质粒携带方式。方法：三维实验证实产AmpC酶的42株E．coli，用E．coliC600作为接合受体菌，采用头孢曲松和头孢他啶／头孢噻... 目的：探讨从临床分离的大肠埃希菌（E．coli）中，由质粒编码的ampC和／或超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因质粒携带方式。方法：三维实验证实产AmpC酶的42株E．coli，用E．coliC600作为接合受体菌，采用头孢曲松和头孢他啶／头孢噻肟／棒酸两步淘筛法，进行对第三代头孢菌素耐药性的传递实验：用PCR法扩增质粒编码的ampC和ESBLs基因、三维酶实验和抗生素敏感实验对供体菌和接合子进行对比。结果：接合实验显示，有37侏供体菌对第三代头孢菌素的耐药性可传递，传递频率为10^-7～10^-5。其中23株菌仅传递了ESBLs耐药性，3株菌仅传递AmpC耐药性，11株菌传递了AmpC／ESBLs两种耐药性11株菌中，7株菌的AmpC／ESBLs耐药性携带在同一质粒上；另有4株菌各得到两种接合子，其中2株均得到携带ESBL耐药性和AmpC／ESBLs耐药性的2类接合子，2株均得到携带AmpC耐药性和ESBL耐药性的2类接合子结论：在同时表达AmpC和ESBLs两种酶的E．coli中，有些菌不能通过接合传递实验将两种耐药性分开传递，有些可分开传递。当AmpC和／或ESBLs耐药性基因在同一细菌中南2个质粒携带时，可在接合实验中得到两种不同的接合子。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 质粒 ampc酶 超广谱β-内酰胺酶

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阴沟肠杆菌AmpC β-内酰胺酶由诱导型转变为组成型的机制 被引量：1

7

作者 涂婉 赵虎 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期189-193,共5页

目的研究质粒传播和ampD基因突变两种机制对阴沟肠杆菌AmpC β-内酰胺酶由诱导型转变为组成型的影响作用和比率。方法收集医院感染患者标本,将诱导型阴沟肠杆菌和其转变后的组成型阴沟肠杆菌分为一组。对每组细菌的质粒ampC基因和染色质... 目的研究质粒传播和ampD基因突变两种机制对阴沟肠杆菌AmpC β-内酰胺酶由诱导型转变为组成型的影响作用和比率。方法收集医院感染患者标本,将诱导型阴沟肠杆菌和其转变后的组成型阴沟肠杆菌分为一组。对每组细菌的质粒ampC基因和染色质ampD基因进行扩增、测序和序列比对。结果195例感染拟似诱导型阴沟肠杆菌患者中,25例(12.82%)的菌株转变为组成型。其中,10组菌株的阳性转变为单纯的质粒传播所致,10组为单纯的ampD基因突变所致,1组既有质粒传播又存在ampD基因突变,另外4组则两者全无。12株转变的组成型阴沟肠杆菌ampD基因存在有意义的突变位点,其中7株存在移码突变,另外5株为点突变。结论阴沟肠杆菌由诱导型转变为组成型已经达到较高的比率,质粒传播和染色质突变均为引起这种转变的重要原因。质粒介导的AmpC酶已经跨种、跨区域传播,染色质ampD基因的突变率也远远高于其自然突变率,这两种机制均应在临床医疗中得到足够的重视。 展开更多

关键词 ampcΒ-内酰胺酶 组成型 质粒传播 染色质突变 ampD基因

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头孢吡肟对质粒介导产AmpC β-内酰胺酶大肠埃希菌的接种效应研究 被引量：1

8

作者 段金菊 刘卓拉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期671-673,共3页

目的本实验研究了临床分离的质粒介导AmpC β-内酰胺酶大肠埃希菌,在两种接种浓度下(标准浓度105CFU/ml和高浓度107CFU/ml)测定头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的MIC值。方法19株血培养的质粒介导的AmpC β-... 目的本实验研究了临床分离的质粒介导AmpC β-内酰胺酶大肠埃希菌,在两种接种浓度下(标准浓度105CFU/ml和高浓度107CFU/ml)测定头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的MIC值。方法19株血培养的质粒介导的AmpC β-内酰胺酶大肠埃希菌,其中10株单产ACT型,5株单产DHA型,4株产ACT+DHA型。采用琼脂稀释法测定头孢吡肟等5种抗生素在两种接种浓度下的MIC值。高接种浓度下测得的MIC值较标准接种浓度下的MIC值≥8倍时定义为有接种效应。结果在标准接种浓度下,亚胺培南的敏感率为100%,头孢吡肟也有84.2%的高敏感率,头孢哌酮/舒巴坦的敏感率为5.3%,头孢噻肟和头孢他啶的敏感率为0。在两种接种浓度下,头孢吡肟MIC值增加从32倍到100多倍不等,100%有接种效应,而亚胺培南几乎没有接种效应。结论头孢吡肟有明显的接种效应,尽管本文结果为实验室的体外实验结果,但仍建议:头孢吡肟不推荐为临床上治疗由质粒介导AmpC β-内酰胺酶大肠埃希菌引起的严重感染的药物。 展开更多

关键词 质粒介导的ampc Β-内酰胺酶 接种效应 头孢吡肟

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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌质粒谱与基因型的相关性

9

作者 张志坚 郭小兵 +1 位作者 张傅山 张钦宪 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期733-735,共3页

目的:探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌质粒谱与ESBLs基因型的相关性。方法:收集郑州大学第一附属医院检验科2007年至2008年临床分离产ESBLs大肠埃希菌46株,采用琼脂糖凝胶电泳进行质粒谱分析,采用PCR技术检测ESBL基因型,分析... 目的:探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌质粒谱与ESBLs基因型的相关性。方法:收集郑州大学第一附属医院检验科2007年至2008年临床分离产ESBLs大肠埃希菌46株,采用琼脂糖凝胶电泳进行质粒谱分析,采用PCR技术检测ESBL基因型,分析同一菌株所携带质粒条带数与其携带ESBLs基因型别数的相关性。结果:产ESBLs大肠埃希菌有5种质粒谱型(分别为携带单一21000bp质粒、21000bp+2500bp2种质粒、21000bp+2500bp+3000bp3种质粒、21000bp+2500bp+3000bp+7000bp4种质粒以及21000bp+2500bp+3000bp+7000bp+9000bp5种质粒)和5种ESBLs基因型(1种型别10株,2种型别15株,3种型别12株,4种型别8株,5种型别1株),同一菌株质粒谱与其ESBLs基因型无相关性(rs=0.091,P=0.548)。结论:多种ESBLs表达基因可定位于同一质粒上。 展开更多

关键词 超广谱Β-内酰胺酶 质粒谱 基因型

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产“超-超广谱”β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药表型及基因分析 被引量：14

10

作者 余娴 袁斌 雷军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期56-59,共4页

目的首次分析本地区产超-超广谱β-内酰胺酶(Super-spectrum β-lactamase,SSBLs)菌株的耐药性及分子流行病学现状。方法收集自2008年1月～2009年6月本院从临床分离的对头孢西丁和头孢他啶耐药的革兰阴性杆菌105株,采用改良三维试验与... 目的首次分析本地区产超-超广谱β-内酰胺酶(Super-spectrum β-lactamase,SSBLs)菌株的耐药性及分子流行病学现状。方法收集自2008年1月～2009年6月本院从临床分离的对头孢西丁和头孢他啶耐药的革兰阴性杆菌105株,采用改良三维试验与质粒结合实验筛选产SSBLs菌株,通过药敏试验鉴定其耐药表型,运用PCR扩增检测其ESBLs基因型与AmpC酶基因型。结果筛选出的2株产SSBLs菌株(1株阴沟肠杆菌和1株大肠埃希菌)均表现为多重耐药,仅对亚胺培南敏感。阴沟肠杆菌质粒编码的ESBLs基因型为TEM、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT;大肠埃希菌质粒编码的ESBLs基因型为SHV、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT。结论本院存在产SSBLs革兰阴性杆菌引起的感染,但此类菌株尚未在本院传播流行,ACT型是SSBLs菌株质粒AmpC酶主要基因型。 展开更多

关键词 超-超广谱β-内酰胺酶 超广谱Β-内酰胺酶 ampc酶 质粒 耐药性 基因型

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同时产PER-1型和TEM-1型β内酰胺酶铜绿假单胞菌的检出 被引量：10

11

作者 侯天文 尹晓琳 +4 位作者 王永祥 陈兴 李烛 张林 李玮 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期295-298,共4页

目的　分析多重耐药铜绿假单胞菌临床株 (编号 0 10 7)对 β内酰胺类抗生素耐药情况及其原因。 方法　用改良三维试验分析 0 10 7株产生的 β内酰胺酶表型 ,以碱裂解法提取质粒 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增质粒的酶基因型别 ,并对阳... 目的　分析多重耐药铜绿假单胞菌临床株 (编号 0 10 7)对 β内酰胺类抗生素耐药情况及其原因。 方法　用改良三维试验分析 0 10 7株产生的 β内酰胺酶表型 ,以碱裂解法提取质粒 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增质粒的酶基因型别 ,并对阳性产物测序。结果　 0 10 7号铜绿假单胞菌临床株产生超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ,携有blaPER - 1基因 ,同时还有blaTEM - 1型基因。结论　 0 10 7号菌株耐 β内酰胺类抗生素耐药的可能原因是产生PER - 1型的ESBLs和TEM - 1型的广谱酶。 展开更多

关键词 PER-1型 TEM-1型 β内酰胺酶 铜绿假单胞菌 质粒 基因型

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阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶基因检测及耐药性分析 被引量：6

12

作者 周铁丽 郑佳音 +1 位作者 李超 黄海霞 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期615-619,共5页

目的了解阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的产生情况,研究β-内酰胺酶的基因型别,并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法用酶提取三维试验检测ESBLs和AmpC酶,聚合酶链反应(PCR)扩增β-内酰胺酶的基因;VITEK全自动药敏分... 目的了解阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的产生情况,研究β-内酰胺酶的基因型别,并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法用酶提取三维试验检测ESBLs和AmpC酶,聚合酶链反应(PCR)扩增β-内酰胺酶的基因;VITEK全自动药敏分析系统和KB法检测细菌耐药性。结果101株阴沟肠杆菌中,检出ESBLs阳性株39株,高产AmpC酶阳性株53株,其中16株ESBLs和AmpC酶均阳性,非产酶菌25株;12株AmpC酶阳性菌中,7株扩增出blaDHA基因,8株扩增出blaMIR基因,其中5株同时携带blaDHA和blaMIR基因,1株同时携带blaMIR和blaFOX基因,4株三维试验阴性菌株blaMIR基因阳性;16株ESBLs阳性菌中,8株扩增出blaTEM基因,2株ESBLs三维试验阴性菌株blaTEM基因阳性,未检出blaSHV基因。阴沟肠杆菌对多种抗生素高度耐药,产酶菌株的耐药性明显高于非产酶株。结论阴沟肠杆菌中ESBLs和AmpC酶检出率均很高,AmpC酶以blaDHA、blaMIR基因型为主。产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要原因。 展开更多

关键词 阴沟肠杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 ampc酶 基因型 耐药性

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肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶及AmpC酶分析研究 被引量：15

13

作者 李耘 李家泰 《中国抗感染化疗杂志》 2004年第3期146-149,共4页

目的 :研究目前我国肺炎克雷伯菌中超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)及质粒介导AmpC酶产生情况。 方法 :以美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)推荐纸片扩散法确证试验检测肺炎克雷伯菌产ESBLs情况 ,以三维试验检测其产质粒介导AmpC酶情况... 目的 :研究目前我国肺炎克雷伯菌中超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)及质粒介导AmpC酶产生情况。 方法 :以美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)推荐纸片扩散法确证试验检测肺炎克雷伯菌产ESBLs情况 ,以三维试验检测其产质粒介导AmpC酶情况。等电聚焦电泳测定所产粗酶的等电点。聚合酶链反应 (PCR)检测 β内酰胺酶亚型。DNA序列测定判断质粒介导AmpC酶的种类。结果 :检出产ESBLs肺炎克雷伯菌 37株 ,检出率 17.5 % (37/ 2 12 )。三维试验检测出产质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌 2株 ,检出率 0 .9% (2 / 2 12 ) ,此 2株菌均同时产ESBLs。在所产ESBLs中 ,CTX M型占 83.8% (31/ 37) ,其中CTX M 1组占 5 4 .1% (2 0 / 37) ,Toho 2组占 2 9.7% (11/ 37) ,CTX M 1组∶Toho 2组为 1.8∶1;SHV型占 2 4 .3% (9/ 37)。DNA测序结果 ,1株肺炎克雷伯菌所产质粒介导AmpC酶为DHA 1。结论 :①肺炎克雷伯菌中ESBLs以CTX M型为主。②在肺炎克雷伯菌中发现 1株质粒介导AmpC酶为DHA 1。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 超广谱β内酰胺酶 质粒介导ampc酶

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大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶现状和基因型研究 被引量：17

14

作者 彭少华 刘素玲 +2 位作者 程文娟 顾剑 李从荣 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第2期73-76,共4页

目的调查临床分离大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶株的分布情况、基因型特征及耐药现状。方法收集临床分离大肠埃希菌,对头孢西丁耐药株以酶提取物改良三维试验筛选高产AmpC酶株;PCR和DNA测序分析质粒ampC基因型;碱裂解法提取质粒,并用质粒... 目的调查临床分离大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶株的分布情况、基因型特征及耐药现状。方法收集临床分离大肠埃希菌,对头孢西丁耐药株以酶提取物改良三维试验筛选高产AmpC酶株;PCR和DNA测序分析质粒ampC基因型;碱裂解法提取质粒,并用质粒接合试验确证ampC基因是否位于可接合质粒上;最后用K-B法测定菌株对12种常用抗菌药物的敏感度。结果114株大肠埃希菌中共检出产质粒AmpC酶株10株(8.7%)。各质粒ampC基因型中EBC5株,DHA4株,CIT2株,EBC和DHA同时阳性1株。1株EBC阳性株和1株CIT阳性株测序证实为新的ampC基因型。10株菌均含有1个约54.2kb的大质粒,其中7株质粒接合试验阳性。产酶株对除头孢吡肟和亚胺培南外的大多数β内酰胺类抗生素高度耐药。结论大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶检出率已较高,并存在多种基因型,产酶株的多重耐药和交叉耐药现象十分严重,应高度重视产质粒介导AmpC酶细菌的监测与控制。 展开更多

关键词 基因型 耐药性 质粒ampc介导酶 大肠埃希菌

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武汉市儿童医院临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中产质粒介导AmpC酶和ESBLs的研究 被引量：5

15

作者 虞涛 李长振 +2 位作者 鲍连生 杨劳荣 游上游 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第6期448-451,共4页

目的研究武汉市儿童医院临床分离高产质粒AmpC酶和超超广谱β内酰胺酶(SSBL)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的分子流行病学特征。方法收集我院2005年8月—2006年8月住院患儿临床分离的头孢西丁中介或耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌161株。... 目的研究武汉市儿童医院临床分离高产质粒AmpC酶和超超广谱β内酰胺酶(SSBL)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的分子流行病学特征。方法收集我院2005年8月—2006年8月住院患儿临床分离的头孢西丁中介或耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌161株。采用三维试验检测AmpC酶,表型确认试验检测ESBLs,质粒转化试验定位耐药基因;采用PCR技术扩增质粒AmpC与CTX-M基因;使用限制性片段长度多态性(RFLP)技术确定CTX-M基因簇的特征;利用基因测序确定AmpC酶及CTX-M的基因亚型。结果DHA-1型和ACT-1型为主要的质粒AmpC酶基因型,发现1种新的ACT型质粒AmpC酶,其与ACT-1的同源性仅为84%。CTX-M-14型和CTX-M-3型为主要的ESBLs基因型。最常见的大肠埃希菌SSBL基因组合为CTX-M-14+DHA-1+ACT-1型,肺炎克雷伯菌的为CTX-M-3+DHA-1+ACT-1。结论我院临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中,产SSBL菌株所占比例显著高于单产质粒AmpC酶菌株;CTX-M-14/CTX-M-3+DHA-1+ACT-1是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最常见的SSBL基因型。 展开更多

关键词 质粒ampc型β内酰胺酶 超广谱β内酰胺酶 超超广谱β内酰胺酶 儿童

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全国10所教学医院产ESBLs和质粒AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的研究 被引量：31

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作者 孙宏莉 宁永忠 +2 位作者 廖康 王辉 朱任媛 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2007年第5期323-329,共7页

目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61... 目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61株,用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性;采用多重聚合酶链反应(MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。结果武汉、南京、济南等地产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌所占比率相近,均在50%左右;北京产ESBLs大肠埃希菌所占比率低于肺炎克雷伯菌;其他各城市产ESBLs大肠埃希菌所占比率均略高于肺炎克雷伯菌。在产ESBLs菌株中24.4%大肠埃希菌和19.4%肺炎克雷伯菌对头孢西丁耐药。除沈阳无对头孢西丁耐药菌株外,其他医院均存在对头孢西丁耐药株。产ESBLs菌株基因型主要为CTX—M型,其中以CTX-M-9组最为常见,其次为CTX-M-1组。在同时产ESBLs和AmpC的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,且均为CTX-M/ DHA-1型(多为CTX-M-9/DHA-1型)。3株同时产ESBLs和AmpC肺炎克雷伯菌的接合子PCR结果与其供体菌完全相同。结论参与本研究的各所教学医院产ESBLs菌株基因型主要为CTX-M-9组,在同时产ESBLs和AmpC酶的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,多为CTX-M-9/DHA-1型,该酶可通过质粒传播。 展开更多

关键词 超广谱β内酰胺酶 质粒型ampc酶 CTX-M-9组酶 DHA-1型酶

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肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的检测及其质粒分析 被引量：2

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作者 张振 鲍连生 +1 位作者 杨劳荣 郑义 《中国感染控制杂志》 CAS 2007年第5期329-332,共4页

目的了解武汉地区分离的肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的发生率、耐药情况及质粒型耐药基因。方法从该地区3家医院的重症监护病房(ICU)分离获得38株肺炎克雷伯菌,采用E-test法进行最低抑菌浓度(MIC)测定;以美国临床... 目的了解武汉地区分离的肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的发生率、耐药情况及质粒型耐药基因。方法从该地区3家医院的重症监护病房(ICU)分离获得38株肺炎克雷伯菌,采用E-test法进行最低抑菌浓度(MIC)测定;以美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的双纸片协同试验和确证试验检测ESBLs;酶提取物三维试验检测AmpC酶;质粒接合和消除试验检测耐药基因。结果产ESBLs的肺炎克雷伯菌检出率为71.05%(27/38);产AmpC酶的肺炎克雷伯菌检出率为13.16%(5/38);其中同时产ESBLs和AmpC酶的肺炎克雷伯菌检出率为5.26%(2/38)。产酶株对第三代头孢菌素、氨基糖苷类、氟喹诺酮类耐药率均较高,对亚胺培南、厄他培南等碳青霉烯类耐药率最低。通过质粒接合和消除试验,40%(4/10)产ESBLs的肺炎克雷伯菌和20%(1/5)产AmpC酶的肺炎克雷伯菌检测到传播耐药的质粒。结论肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶是其对多种抗菌药物耐药的主要原因,其耐药扩散与细菌质粒的水平传播有关,对这些产酶株的监测和阻止其传播是控制肺炎克雷伯菌感染的重要措施。 展开更多

关键词 超广谱Β-内酰胺酶 ampc酶 微生物敏感性试验 质粒

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大肠埃希菌高产AmpC酶的研究进展 被引量：21

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作者 王锦娜 邵海枫 《医学研究生学报》 CAS 2006年第2期167-171,共5页

大肠埃希菌(E.coli)中的ampC基因与其他革兰阴性细菌不同,染色体上的ampC基因启动子与延胡索酸还原酶(frdABCD)操纵子中的frdD基因重叠,衰减子是延胡索酸还原酶操纵子的转录终止子,缺少ampC调节基因ampR,所以携带野生型基因的E.coliAmp... 大肠埃希菌(E.coli)中的ampC基因与其他革兰阴性细菌不同,染色体上的ampC基因启动子与延胡索酸还原酶(frdABCD)操纵子中的frdD基因重叠,衰减子是延胡索酸还原酶操纵子的转录终止子,缺少ampC调节基因ampR,所以携带野生型基因的E.coliAmpC酶的产量非常低,临床意义不大。但近年来出现了高产AmpC酶的E.coli,对其进行研究发现,ampC基因启动子、衰减子或ampC编码区的突变,或从其他细菌获得强启动子或携带强启动子的序列插入,或从其他细菌获得调节基因ampR等都可能导致染色体型AmpC酶的高产。质粒型ampC基因在E.coli中的出现是AmpC酶高产的另一重要原因。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 ampc酶 启动子 衰减子 质粒型ampc酶

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产ESBLs液化沙雷氏菌临床分离株的表型和基因型分析 被引量：7

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作者 凌保东 谢勇恩 +4 位作者 张翔 蔡春燕 余娴 李苌青 雷军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期741-743,752,共4页

目的探索液化沙雷氏菌临床分离株CR04对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用琼脂二倍稀释法对临床分离的液化沙雷氏菌CR04株进行MIC检测,提取耐药菌β-内酰胺酶,并测定其酶活性。双纸片法筛选及确证实验鉴别耐药菌的ESBLs表型,进行... 目的探索液化沙雷氏菌临床分离株CR04对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用琼脂二倍稀释法对临床分离的液化沙雷氏菌CR04株进行MIC检测,提取耐药菌β-内酰胺酶,并测定其酶活性。双纸片法筛选及确证实验鉴别耐药菌的ESBLs表型,进行结合传递实验并提取耐药菌质粒,进一步根据常见的质粒介导的β-内酰胺酶基因序列设计两对寡核苷酸引物,以耐药质粒为模板进行PCR扩增,并对其扩增产物进行DNA序列测定和同源性分析。结果头孢他啶对液化沙雷氏菌CR04株的MIC为512μg/ml,其酶活性为837.9U,双纸片法筛选及确证实验证明为产ESBLs耐药菌,结合传递实验表明产酶基因能传递给受体菌,从耐药菌中提取出大小约为10kb的质粒,以质粒DNA为模板进行PCR扩增,对扩增产物DNA测序结果进行分析表明,其核苷酸序列与已知的β-内酰胺酶blaSHV-5、blaSHV-1、blaSHV-2、blaSHV-7、blaSHV-8、blaSHV-12、blaSHV-24、blaSHV-34基因高度同源,其所推导的氨基酸序列与已知的β-内酰胺酶blaSHV-5、blaSHV-1、blaSHV-2、blaSHV-7、blaSHV-8、blaSHV-12、blaSHV-24、blaSHV-34相比较至少有30个氨基酸残基的差异。结论对临床分离的第三代头孢菌素耐药性液化沙雷氏菌CR04株进行详细的表型和基因型分析。 展开更多

关键词 液化沙雷氏菌 质粒 超广谱Β-内酰胺酶 耐药机制 ESBLS 表型 基因型

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鸡源大肠杆菌Bla_(CTX-M-125)型ESBL基因的定位及遗传环境 被引量：2

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作者 王翔宇 宋玉慧 +3 位作者 荆炜 朱晓清 徐倩 杜向党 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期141-145,共5页

采用PCR扩增、测序分析、接合试验、药敏试验、脉冲场凝胶电泳(PFGE)和Southern blot方法,分析了1株兽医临床分离大肠杆菌(sd-3)携带的超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因的状况、分型、定位及遗传环境。结果显示,该株大肠杆菌携带ESBL基因,属... 采用PCR扩增、测序分析、接合试验、药敏试验、脉冲场凝胶电泳(PFGE)和Southern blot方法,分析了1株兽医临床分离大肠杆菌(sd-3)携带的超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因的状况、分型、定位及遗传环境。结果显示,该株大肠杆菌携带ESBL基因,属于bla_(CTX-M-9)亚群的Bla_(CTX-M-125)亚型,系在大肠杆菌中首次检出;接合试验、PFGE和Southern blot证实该基因位于接合型质粒上;Bla_(CTX-M-125)基因的上、下游分别存在插入序列ISEcp1和IS903。这表明插入序列和接合型质粒均可在大肠杆菌Bla_(CTX-M-125)基因的水平转移中发挥重要作用,有必要在肠杆菌科细菌中开展该基因的监视。 展开更多

关键词 Β-内酰胺酶 大肠杆菌 blaCTX-M-125 接合型质粒

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