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农杆菌介导的花生遗传转化研究 被引量:9
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作者 庄东红 邹湘辉 +6 位作者 周敏 郑奕雄 钟名其 胡忠 曹军 陈贤友 陈芳群 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期47-51,共5页
对影响花生遗传转化效率的PPT筛选压、根癌农杆菌的侵染浓度、侵染及共培养时间等因素进行研究,采用农杆菌转化花生叶片,成功地将抗虫基因豇豆蛋白酶抑制基因(CpTI)和耐除草剂基因(Bar)导入花生。实验结果表明,外植体在 MS+3mg/L BA+0.8... 对影响花生遗传转化效率的PPT筛选压、根癌农杆菌的侵染浓度、侵染及共培养时间等因素进行研究,采用农杆菌转化花生叶片,成功地将抗虫基因豇豆蛋白酶抑制基因(CpTI)和耐除草剂基因(Bar)导入花生。实验结果表明,外植体在 MS+3mg/L BA+0.8mg/L NAA+2mg/L AgNO_3+6mg/L Gln培养基上预培养 3d,于 OD_(600)为0.3 的农杆菌菌液中浸泡 5~7min后培养 2d,再转移至含有 3mg/L BA+0.8mg/L NAA+2mg/L AgNO_3+6mg/LGln+500mg/L Cb+300mg/L Cef+0.25mg/L PPT 的MS培养基诱导筛选培养,3个月后得到 24个再生株系。经PCR初步检测,有7个株系显示了310bp的CpTI基因核酸片段,Southern杂交证实了5个株系有外源基因的整合。 展开更多
关键词 农杆菌介导 花生 遗传转化 耐除草剂基因 豇豆蛋白 酶抑制基因
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修饰的cpti基因在转基因棉花后代中的表达及其抗虫性分析 被引量:2
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作者 陈宛新 王伟 +2 位作者 吴茜 常团结 朱祯 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第6期21-25,共5页
对转修饰cpti基因 (即sck基因 )的抗虫棉T3 代进行了分子检测和抗虫性检测。PCR ,Southern杂交证明外源基因已稳定遗传给后代植株。抑制剂活性检测表明转sck基因后代比转未修饰cpti基因后代具有更强的胰蛋白酶抑制剂活性。抗虫性分析表... 对转修饰cpti基因 (即sck基因 )的抗虫棉T3 代进行了分子检测和抗虫性检测。PCR ,Southern杂交证明外源基因已稳定遗传给后代植株。抑制剂活性检测表明转sck基因后代比转未修饰cpti基因后代具有更强的胰蛋白酶抑制剂活性。抗虫性分析表明 ,转基因后代对棉铃虫的生长发育具有明显的抑制作用。结果进步说明 ,将外源蛋白细胞内靶向定位的策略应用于棉花抗虫基因工程 ,可以提高外源蛋白在细胞内的积累量 。 展开更多
关键词 CPTI基因 转基因棉花 修饰基因 豇豆蛋白酶抑制剂 抗虫棉 陆地棉 抗虫性分析 基因表达
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农杆菌介导抗虫CpTI基因的花生遗传转化及转基因植株的再生 被引量:23
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作者 徐平丽 单雷 +4 位作者 柳展基 王芳 张斌 毕玉平 张传坤 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期5-8,共4页
通过农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)Ti质粒介导途径,将抗虫CpTI基因转入花生,经过诱导分化获得转基因再生植株。PCR检测及Southern杂交鉴定结果表明,外源CpTI基因已整合到大部分再生花生植株的基因组中。通过抗虫性检测试验,转基因... 通过农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)Ti质粒介导途径,将抗虫CpTI基因转入花生,经过诱导分化获得转基因再生植株。PCR检测及Southern杂交鉴定结果表明,外源CpTI基因已整合到大部分再生花生植株的基因组中。通过抗虫性检测试验,转基因花生具有一定的抗虫性。 展开更多
关键词 花生 遗传转化 农杆菌介导 抗虫CpTI基因 转基因植株 植株再生 抗虫性 豇豆蛋白酶抑制剂基因
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国槐离体再生及抗虫基因sck的转导 被引量:6
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作者 张晓英 王华芳 +2 位作者 朱祯 王天祥 尹伟伦 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期34-38,F0003,共6页
以国槐叶片作为外植体,筛选出诱导不定芽分化的最佳培养基;利用根癌农杆菌介导法将经过修饰的广谱抗虫基因豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck(Signal-CpTI-KDEL)导入国槐。国槐叶片与农杆菌共培养结束后,转移至筛选培养基MS+BA3 mg·L-1+IA... 以国槐叶片作为外植体,筛选出诱导不定芽分化的最佳培养基;利用根癌农杆菌介导法将经过修饰的广谱抗虫基因豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck(Signal-CpTI-KDEL)导入国槐。国槐叶片与农杆菌共培养结束后,转移至筛选培养基MS+BA3 mg·L-1+IAA0·05 mg·L-1+G418 8 mg·L-1+Cef 500 mg·L-1上。不定芽在培养基1/2MS+IBA1·0 mg·L-1+G418 10 mg·L-1+Cef 100 mg·L-1上进一步培养获得完整再生植株。通过PCR和Southern blotting检测证明,修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck已成功导入国槐细胞。 展开更多
关键词 国槐 根癌土壤农杆菌 豇豆蛋白酶抑制剂基因sck 基因转导
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