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小豆Dirigent基因家族鉴定及锈菌侵染对不同成员表达的影响 被引量:4
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作者 柯希望 苑梦琦 +3 位作者 徐晓丹 殷丽华 郭永霞 左豫虎 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2774-2785,共12页
为明确Dirigent (DIR)基因在小豆抗锈病中的作用,采用生物信息学方法,对小豆DIR基因家族(VaDIRs)进行了全基因组鉴定,结果发现小豆中共有33个DIR基因,其中29个成员分别定位在8条染色体上,系统进化分析表明,VaDIRs包括DIR-a、DIR-b/d、DI... 为明确Dirigent (DIR)基因在小豆抗锈病中的作用,采用生物信息学方法,对小豆DIR基因家族(VaDIRs)进行了全基因组鉴定,结果发现小豆中共有33个DIR基因,其中29个成员分别定位在8条染色体上,系统进化分析表明,VaDIRs包括DIR-a、DIR-b/d、DIR-e和DIR-f四个亚家族,对VaDIRs成员启动子区顺式作用元件的分析发现,VaDIRs启动子区均包含激素、病原体应答等元件。对小豆抗锈病品种接种后不同时间的转录组数据分析发现,差异表达基因中共有17个VaDIRs成员,其中6个于接种后24 h显著上调,2个于接种后24 h和48 h均高量表达。进一步应用qRT-PCR技术对上述8个基因在抗、感品种中应答锈菌侵染的表达分析表明,高抗品种中VaDIR14、VaDIR16和VaDIR33的表达量在锈菌侵染不同阶段均显著高于感病品种。上述结果表明,VaDIRs家族成员可作为正调节因子参与小豆对锈病的抗性。 展开更多
关键词 小豆(Vigna angularis) 小豆锈病 豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae) DIR基因 基因家族
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小豆WRKY基因家族鉴定及应答锈菌侵染的表达分析 被引量:3
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作者 滑艳敏 杨阳 +4 位作者 孙伟娜 殷丽华 柯希望 穆娟微 左豫虎 《黑龙江八一农垦大学学报》 2022年第6期36-44,共9页
为明确小豆WRKY转录因子在抗锈病中的功能,研究采用生物信息学方法,对小豆基因组中WRKY基因家族进行了分析,结果表明,小豆基因组中共包含90个WRKY转录因子(VaWRKYs),其中82个成员分别定位于小豆的11条染色体上。依据WRKY基因家族高度保... 为明确小豆WRKY转录因子在抗锈病中的功能,研究采用生物信息学方法,对小豆基因组中WRKY基因家族进行了分析,结果表明,小豆基因组中共包含90个WRKY转录因子(VaWRKYs),其中82个成员分别定位于小豆的11条染色体上。依据WRKY基因家族高度保守的WRKY七肽域和锌指结构对小豆WRKY家族进行分类,发现VaWRKYs包含GroupⅠ(17个)、GroupⅡ(61个)和GroupⅢ(12个)等3个亚家族,进一步的系统发育分析表明,GroupⅡ亚家族还包括Ⅱ-a(6个)、Ⅱ-b(16个)、Ⅱ-c(21个)、Ⅱ-d(7个)和Ⅱ-e(11个)5个亚组。蛋白序列特征分析发现,VaWRKYs成员在七肽域和锌指结构上存在多个氨基酸位点的变异。利用课题组前期获得的抗病小豆品种接种后24和48 h的转录组数据对VaWRKYs成员的表达进行分析,共检测到82个成员不同水平表达,且多达67个成员的表达水平受锈菌侵染的影响,暗示小豆WRKY基因家族在小豆抗锈病过程中起重要的调控作用。 展开更多
关键词 WRKY转录因子 小豆 豇豆单胞锈菌 基因表达
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红小豆锈病菌夏孢子萌发条件研究 被引量:4
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作者 韩冬 张洪臣 +1 位作者 柯希望 左豫虎 《黑龙江八一农垦大学学报》 2017年第4期11-15,共5页
豇豆单胞锈菌是引起红小豆锈病的病原菌。为了明确红小豆锈病菌夏孢子的萌发条件,以红小豆锈病菌ZXL01菌株为材料,研究了培养方法、温度、光照、储存条件和储存时间对红小豆锈病菌夏孢子萌发的影响。结果表明,最适红小豆锈病菌夏孢子萌... 豇豆单胞锈菌是引起红小豆锈病的病原菌。为了明确红小豆锈病菌夏孢子的萌发条件,以红小豆锈病菌ZXL01菌株为材料,研究了培养方法、温度、光照、储存条件和储存时间对红小豆锈病菌夏孢子萌发的影响。结果表明,最适红小豆锈病菌夏孢子萌发的培养方法为水琼脂平板法,夏孢子在水琼脂上2 h即开始萌发,随着培养时间的延长,萌发率逐渐升高,6 h后萌发率趋于稳定,萌发率为75.0%。夏孢子在15~25℃均可萌发,最适萌发温度为20℃。光照可明显抑制夏孢子萌发。夏孢子在4℃条件下储存360 d后已基本丧失萌发能力,而夏孢子在-20℃条件下储存360 d时仍可保持萌发活力。 展开更多
关键词 红小豆锈病 豇豆单胞锈菌 夏孢子 萌发条件
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小豆锈病分子检测体系的构建及应用 被引量:1
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作者 殷丽华 张金鹏 +3 位作者 章国庆 刘国辉 柯希望 左豫虎 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2023年第6期238-244,共7页
由豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae Barclay)引起的小豆锈病是小豆生产中危害最为严重的病害之一,建立早期分子检测技术体系对病害早期诊断和及时防控具有重要意义。本研究以豇豆单胞锈菌ITS序列为依据设计引物,结合已报道的单胞锈菌属特... 由豇豆单胞锈菌(Uromyces vignae Barclay)引起的小豆锈病是小豆生产中危害最为严重的病害之一,建立早期分子检测技术体系对病害早期诊断和及时防控具有重要意义。本研究以豇豆单胞锈菌ITS序列为依据设计引物,结合已报道的单胞锈菌属特异检测引物,以豇豆单胞锈菌为目标菌,以茄链格孢、茄丝核菌、禾谷镰刀菌、稻瘟菌、苹果轮纹病菌、半裸镰刀菌、玉米链格孢菌、尖孢镰刀菌和禾顶囊壳等9种常见植物病原真菌为参照菌,采用CTAB法提取上述各菌株的基因组DNA,应用普通PCR技术筛选出豇豆单胞锈菌的特异性检测引物UV-ITS,在此基础上设计巢式PCR引物UV-MX,构建了基于巢式PCR的高灵敏度小豆锈病分子检测体系。该巢式PCR体系在基因组DNA浓度仅为4×10^(-6)ng·μL^(-1)时仍可实现有效扩增,其灵敏度是普通PCR的10万倍。以感病小豆品种‘宝清红’接种锈菌后不同时间的叶片为材料检验检测体系的应用效果发现,接种后12 h的小豆叶片样本即可扩增出豇豆单胞锈菌的特异性条带。本研究建立的小豆锈病分子检测体系特异性强、灵敏度高,具备对潜伏期病害进行早期诊断的应用潜力,可为小豆锈病的早期快速诊断和及时防控提供重要的技术支撑。 展开更多
关键词 小豆 锈病 豇豆单胞锈菌 分子检测 巢式PCR
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外源ACC通过激活乙烯合成及信号转导诱导小豆抗锈性
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作者 章国庆 殷丽华 +4 位作者 孙治国 何蕊 郭永霞 左豫虎 柯希望 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期67-74,共8页
大量研究表明,乙烯可激发植物对死体营养型真菌的抗性,但我们前期研究发现,乙烯合成前体ACC可提高小豆对活体营养型真菌——锈菌的抗性,为初步明确其机制,本研究分析了ACC处理对小豆乙烯合成及信号转导的影响,结果表明,ACC处理显著提高... 大量研究表明,乙烯可激发植物对死体营养型真菌的抗性,但我们前期研究发现,乙烯合成前体ACC可提高小豆对活体营养型真菌——锈菌的抗性,为初步明确其机制,本研究分析了ACC处理对小豆乙烯合成及信号转导的影响,结果表明,ACC处理显著提高了乙烯合成基因VaACS1及信号通路关键基因VaEIN2、VaEIN3、VaERF5的表达水平。此外,ACC处理后再接种锈菌,小豆锈病的发病程度显著降低。对接种锈菌后不同时间VaPR2和VaPR4的表达分析表明,相比ACC处理后不接种对照,ACC处理后再接种锈菌的处理,接种后1~5 d这两个基因表达量显著升高;与水处理不接种锈菌相比,水处理接种锈菌5~8 d后VaPR2和VaPR4的表达量虽显著上调,但应答时间较ACC处理滞后,且总体表达水平低,表明ACC激活乙烯通路进而诱导防卫反应基因上调表达是其诱导小豆抗锈性的关键。 展开更多
关键词 小豆 豇豆单胞锈菌 诱导抗性 乙烯信号通路 活体营养型真菌
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