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GSTO1抑制TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化
1
作者
张彤
谢赛阳
+1 位作者
邓伟
唐其柱
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期656-662,共7页
目的:研究谷胱甘肽S-转移酶ω1(GSTO1)在转化生长因子β(TGFβ)诱导心脏成纤维细胞增殖与活化中的作用。方法:分离乳大鼠心脏成纤维细胞并进行体外培养。采用含绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒质粒构建对照(Ad-GFP)或GSTO1过表达(Ad-GST...
目的:研究谷胱甘肽S-转移酶ω1(GSTO1)在转化生长因子β(TGFβ)诱导心脏成纤维细胞增殖与活化中的作用。方法:分离乳大鼠心脏成纤维细胞并进行体外培养。采用含绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒质粒构建对照(Ad-GFP)或GSTO1过表达(Ad-GSTO1)质粒并转染心脏成纤维细胞,再用大鼠TGFβ(rTGFβ)刺激细胞24 h,实验分为4组:Ad-GFP+PBS、Ad-GFP+rTGFβ、Ad-GSTO1+PBS和Ad-GSTO1+rTGFβ。运用qPCR和免疫荧光染色确定转染的有效性;Western blot检测GSTO1蛋白表达;划痕实验和EdU掺入实验评估细胞迁移和增殖;CCK-8实验评估细胞活力;Western blot和细胞免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)和纤连蛋白(FN)的表达水平,并检测心脏成纤维细胞内P38 MAPK和Smad3信号通路相关蛋白水平。结果:与Ad-GFP+rTGFβ组相比,GSTO1过表达抑制TGFβ诱导的心脏成纤维细胞增殖(P<0.05),降低TGFβ刺激后α-SMA、Col I和FN的表达水平(P<0.05),抑制P38 MAPK/Smad3信号通路激活(P<0.05)。结论:GSTO1过表达通过抑制P38 MAPK/Smad3信号通路而阻遏TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化。
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关键词
心肌
纤维
化
谷
胱
甘
肽
S
-
转移酶ω1
心脏
成
纤维
细胞
转化
生长因子
Β
细胞增殖
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职称材料
融合蛋白GSH-bFGF的构建、表达及体外活性检测
被引量:
1
2
作者
陈霖
周天鸿
邹奕
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期108-113,共6页
目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF...
目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF,并通过镍柱亲和层析、阳离子交换层析纯化该目的蛋白.通过CCK-8试剂盒检测GSH-b FGF对鼠源成纤维细胞NIH-3T3的促增殖活性.同时,经总抗氧化检测试剂盒检测GSH-b FGF的抗氧化能力.结果:克隆表达并纯化获得融合蛋白GSH-b FGF.CCK-8促增殖结果显示质量浓度为20 ng/m L的GSH-b FGF可显著促进鼠源成纤维细胞NIH-3T3增殖.体外抗氧化结果显示GSH-b FGF有显著的抗氧化活性,纯化得到的GSHb FGF蛋白的GSH浓度约为(0.06±0.02)μmol/L,抗氧化能力为(0.56±0.23)mmol/g.结论:新型融合蛋白GSHb FGF有显著的体外促增殖能力及抗氧化活性.
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关键词
谷胱甘肽-碱性成纤维生长因子
促增殖能力
抗氧化活性
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职称材料
用苹果辅助逆转大鼠肝纤维化的实验性研究
被引量:
2
3
作者
祝娟娟
程明亮
穆茂
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期285-289,共5页
目的:研究苹果对实验性肝纤维化大鼠的辅助逆转作用,并探讨其对肝纤维化的影响机制。方法:雄性SD大鼠42只分为正常组、CCl4肝纤维化模型组、自然恢复组、丹芍化纤治疗组、丹芍化纤+苹果试验组。除正常组以外,其余大鼠均采用CCl4、饮酒...
目的:研究苹果对实验性肝纤维化大鼠的辅助逆转作用,并探讨其对肝纤维化的影响机制。方法:雄性SD大鼠42只分为正常组、CCl4肝纤维化模型组、自然恢复组、丹芍化纤治疗组、丹芍化纤+苹果试验组。除正常组以外,其余大鼠均采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合因素刺激制备大鼠肝纤维化模型共8周。确认造模成功后再将剩余模型组大鼠随机分为丹芍化纤+苹果试验组、丹芍化纤治疗组及自然恢复组,共观察8周。结果:丹芍化纤+苹果试验组与模型组、自然恢复组及丹芍化纤治疗组比较:肝脏指数、血清ALT及AST显著下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01);RT-PCR中核因子相关因子2(NF-E2-relatedfactor 2,Nrf-2)mRNA及血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)mRNA在丹芍化纤+苹果试验组中的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组升高(P<0.05),丹芍化纤+苹果试验组中肝组织TGF-β1的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组降低(P<0.05)、而MMP-2在丹芍化纤+苹果试验组中的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组升高(P<0.05);GSH有所升高,MDA有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:苹果在实验性肝纤维化大鼠的逆转过程中起到了有效的辅助作用,辅助逆转的机制可能与其上调Nrf-2表达,从而增强HO-1表达,增强其抗氧化功能,抑制脂质过氧化作用在丹芍化纤胶囊的治疗基础上进一步抑制了TGF-β1的表达;从而促进细胞外基质的降解,这可能是苹果辅助逆转肝纤维化的机制之一。
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关键词
苹果
丹芍化纤胶囊
肝
纤维
化
核
因子
相关
因子
-
2
血红素加氧酶
-
1
转化
生长因子
Β1
基质金属蛋白酶
丙二醛
谷
胱
甘
肽
在线阅读
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职称材料
雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化的干预作用
被引量:
6
4
作者
战炳炎
杜发茂
高芬
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期838-839,共2页
关键词
肺间质
纤维
化
雪莲
谷
胱
甘
肽
过氧化物酶
羟脯氨
酸
转化
生长因子
-
Β1
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职称材料
题名
GSTO1抑制TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化
1
作者
张彤
谢赛阳
邓伟
唐其柱
机构
武汉大学人民医院心血管内科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期656-662,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.82170245,No.U22A20269)。
文摘
目的:研究谷胱甘肽S-转移酶ω1(GSTO1)在转化生长因子β(TGFβ)诱导心脏成纤维细胞增殖与活化中的作用。方法:分离乳大鼠心脏成纤维细胞并进行体外培养。采用含绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒质粒构建对照(Ad-GFP)或GSTO1过表达(Ad-GSTO1)质粒并转染心脏成纤维细胞,再用大鼠TGFβ(rTGFβ)刺激细胞24 h,实验分为4组:Ad-GFP+PBS、Ad-GFP+rTGFβ、Ad-GSTO1+PBS和Ad-GSTO1+rTGFβ。运用qPCR和免疫荧光染色确定转染的有效性;Western blot检测GSTO1蛋白表达;划痕实验和EdU掺入实验评估细胞迁移和增殖;CCK-8实验评估细胞活力;Western blot和细胞免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)和纤连蛋白(FN)的表达水平,并检测心脏成纤维细胞内P38 MAPK和Smad3信号通路相关蛋白水平。结果:与Ad-GFP+rTGFβ组相比,GSTO1过表达抑制TGFβ诱导的心脏成纤维细胞增殖(P<0.05),降低TGFβ刺激后α-SMA、Col I和FN的表达水平(P<0.05),抑制P38 MAPK/Smad3信号通路激活(P<0.05)。结论:GSTO1过表达通过抑制P38 MAPK/Smad3信号通路而阻遏TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化。
关键词
心肌
纤维
化
谷
胱
甘
肽
S
-
转移酶ω1
心脏
成
纤维
细胞
转化
生长因子
Β
细胞增殖
Keywords
myocardial fibrosis
glutathione S
-
transferase omega 1
cardiac fibroblasts
transforming growth factorβ
cell proliferation
分类号
R542.23 [医药卫生—心血管疾病]
R363.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
融合蛋白GSH-bFGF的构建、表达及体外活性检测
被引量:
1
2
作者
陈霖
周天鸿
邹奕
机构
暨南大学生命科学技术学院生物工程系
出处
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期108-113,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31301190)
广东省省级科技计划项目(2013B051000023)
文摘
目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF,并通过镍柱亲和层析、阳离子交换层析纯化该目的蛋白.通过CCK-8试剂盒检测GSH-b FGF对鼠源成纤维细胞NIH-3T3的促增殖活性.同时,经总抗氧化检测试剂盒检测GSH-b FGF的抗氧化能力.结果:克隆表达并纯化获得融合蛋白GSH-b FGF.CCK-8促增殖结果显示质量浓度为20 ng/m L的GSH-b FGF可显著促进鼠源成纤维细胞NIH-3T3增殖.体外抗氧化结果显示GSH-b FGF有显著的抗氧化活性,纯化得到的GSHb FGF蛋白的GSH浓度约为(0.06±0.02)μmol/L,抗氧化能力为(0.56±0.23)mmol/g.结论:新型融合蛋白GSHb FGF有显著的体外促增殖能力及抗氧化活性.
关键词
谷胱甘肽-碱性成纤维生长因子
促增殖能力
抗氧化活性
Keywords
glutathione
-
basic fibroblast growth factor
proliferation
antioxidant ability
分类号
Q599 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
用苹果辅助逆转大鼠肝纤维化的实验性研究
被引量:
2
3
作者
祝娟娟
程明亮
穆茂
机构
贵阳医学院附属医院感染科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期285-289,共5页
文摘
目的:研究苹果对实验性肝纤维化大鼠的辅助逆转作用,并探讨其对肝纤维化的影响机制。方法:雄性SD大鼠42只分为正常组、CCl4肝纤维化模型组、自然恢复组、丹芍化纤治疗组、丹芍化纤+苹果试验组。除正常组以外,其余大鼠均采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合因素刺激制备大鼠肝纤维化模型共8周。确认造模成功后再将剩余模型组大鼠随机分为丹芍化纤+苹果试验组、丹芍化纤治疗组及自然恢复组,共观察8周。结果:丹芍化纤+苹果试验组与模型组、自然恢复组及丹芍化纤治疗组比较:肝脏指数、血清ALT及AST显著下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01);RT-PCR中核因子相关因子2(NF-E2-relatedfactor 2,Nrf-2)mRNA及血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)mRNA在丹芍化纤+苹果试验组中的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组升高(P<0.05),丹芍化纤+苹果试验组中肝组织TGF-β1的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组降低(P<0.05)、而MMP-2在丹芍化纤+苹果试验组中的表达较丹芍化纤治疗组与模型组、自然恢复组升高(P<0.05);GSH有所升高,MDA有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:苹果在实验性肝纤维化大鼠的逆转过程中起到了有效的辅助作用,辅助逆转的机制可能与其上调Nrf-2表达,从而增强HO-1表达,增强其抗氧化功能,抑制脂质过氧化作用在丹芍化纤胶囊的治疗基础上进一步抑制了TGF-β1的表达;从而促进细胞外基质的降解,这可能是苹果辅助逆转肝纤维化的机制之一。
关键词
苹果
丹芍化纤胶囊
肝
纤维
化
核
因子
相关
因子
-
2
血红素加氧酶
-
1
转化
生长因子
Β1
基质金属蛋白酶
丙二醛
谷
胱
甘
肽
Keywords
apple
danshao Huaxian powder
liver fibrosis
NF
-
E2
-
related factor 2(Nrf2)
Heme oxygenase
-
1(HO
-
1)
transfer growth factorβ1
matrix metalloproteinase
malondialdehyde(MDA)
glutathion(GSH)
分类号
R51 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化的干预作用
被引量:
6
4
作者
战炳炎
杜发茂
高芬
机构
青海大学医学院
青海大学附属医院呼吸科
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期838-839,共2页
关键词
肺间质
纤维
化
雪莲
谷
胱
甘
肽
过氧化物酶
羟脯氨
酸
转化
生长因子
-
Β1
Keywords
pulmonary fibrosis
Xuelian
GSH
-
Px
HYP
transfor
-
ming growth factor
-
β1
分类号
R-332 [医药卫生]
R282.71 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GSTO1抑制TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化
张彤
谢赛阳
邓伟
唐其柱
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
在线阅读
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职称材料
2
融合蛋白GSH-bFGF的构建、表达及体外活性检测
陈霖
周天鸿
邹奕
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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下载PDF
职称材料
3
用苹果辅助逆转大鼠肝纤维化的实验性研究
祝娟娟
程明亮
穆茂
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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下载PDF
职称材料
4
雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化的干预作用
战炳炎
杜发茂
高芬
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
6
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职称材料
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引证文献
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