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谷胱甘肽过氧化酶4激动剂Fer-1对睡眠碎片化的老年小鼠术后认知功能障碍防治作用观察
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作者 周银 侍崇龙 金文杰 《山东医药》 CAS 2023年第30期34-38,共5页
目的 观察谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)激动剂Ferrostatin-1(Fer-1)对睡眠碎片化的老年雄性小鼠术后认知功能障碍(POCD)的防治作用,并探讨其可能作用机制。方法 (1)睡眠碎片化老年雄性小鼠POCD观察及GPX4、线粒体呼吸链相关指标检测:取24只... 目的 观察谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)激动剂Ferrostatin-1(Fer-1)对睡眠碎片化的老年雄性小鼠术后认知功能障碍(POCD)的防治作用,并探讨其可能作用机制。方法 (1)睡眠碎片化老年雄性小鼠POCD观察及GPX4、线粒体呼吸链相关指标检测:取24只老年C57BL/6雄性小鼠随机分为实验组和对照组,每组各12只。实验组小鼠于多平台水环境睡眠碎片化饲养3天,对照组小鼠正常睡眠3天,第4天时两组均行胫骨骨折加髓内固定术(TFS,POCD动物模型制备方法),术后第3天分别采用逃避恐惧实验和Y-maze迷宫实验评估两组小鼠的逃避恐惧能力、短期记忆能力。随后处死两组小鼠,取小鼠海马组织检测海马组织谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、线粒体呼吸链复合物Ⅰ(ComplexⅠ)及活性氧簇(ROS),取小鼠脑组织测算线粒体呼吸链功能相关指标线粒体基础呼吸率、ADP激发呼吸率及最大呼吸率。(2)加入Fer-1的睡眠碎片化老年小鼠POCD观察及海马组织ROS检测:另取12只老年雄性小鼠分为1、2组,每组各6只。两组均于多平台水环境睡眠碎片化饲养3天,1组小鼠在睡眠碎片化同时腹腔注射10 mg/kg的Fer-1,1次/天,连续3天;2组腹腔注射同体积的生理盐水,1次/天,连续3次。第4天时两组行TFS手术,TFS术后第3天采用逃避恐惧实验测试和Y-maze实验评估小鼠的逃避恐惧能力和短期记忆能力,利用线粒体荧光探针Mito SOX测算海马组织ROS。结果 与对照组比较,术后第3天实验组小鼠僵直反应时间短、进入新颖臂百分比低、海马组织GPX4相对表达量低(P均<0.05);与对照组比较,术后第3天实验组小鼠脑组织线粒体基础呼吸率低、ADP激发呼吸率低、最大呼吸率低,海马组织ComplexⅠ活性低、ROS含量高(P均<0.05)。与2组比较,术后第3天1组小鼠僵直反应时间长、进入新颖臂百分比高、海马组织ROS含量低(P均<0.05)。结论 腹腔注射Fer-1可改善睡眠碎片化的老年雄性小鼠POCD。睡眠碎片化可能通过抑制小鼠海马组织GPX4及ROS表达、抑制线粒体呼吸链功能,促进POCD的发生发展。Fer-1可能通过提高小鼠海马组织GPX4的表达,降低海马组织ROS,减轻POCD。 展开更多
关键词 谷胱甘肽过氧化酶4 睡眠碎片化 术后认知功能障碍 线粒体呼吸链 线粒体呼吸链复合物Ⅰ
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大黄素调控p53/GPX4通路对中性粒细胞外诱捕网形成和糖尿病肾病的影响
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作者 胡昱月 黄蕾 +1 位作者 姚立山 王卫娜 《安徽医学》 2025年第1期1-9,共9页
目的 探讨大黄素调控肿瘤蛋白p53/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)对糖尿病肾病(DN)的影响。方法 使用高糖(HG,30 mM)处理人肾小球内皮细胞(hrGECs)在体外构建DN肾损伤模型,并使用不同浓度大黄素处理hrGECs。CCK8检测细胞活力,TUNEL检测细胞凋... 目的 探讨大黄素调控肿瘤蛋白p53/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)对糖尿病肾病(DN)的影响。方法 使用高糖(HG,30 mM)处理人肾小球内皮细胞(hrGECs)在体外构建DN肾损伤模型,并使用不同浓度大黄素处理hrGECs。CCK8检测细胞活力,TUNEL检测细胞凋亡,试剂盒检测氧化应激标记物-超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。Western blot检测中性粒细胞外诱捕网(NETs)标记物瓜氨酸组蛋白-3(H3Cit)和髓过氧化物酶(MPO)的表达。网络药理学分析大黄素的靶点并进行KEGG通路富集分析和蛋白相互作用分析。使用蛋白酶体抑制(MG132)处理hrGECs,Western blot检测p53/GPX4的表达。构建p53过表达模型,验证大黄素在DN中作用的机制。链脲佐菌素(STZ)诱导DN大鼠模型,使用大黄素治疗。测量空腹血糖、24小时尿蛋白,血尿素氮(SUN)和血肌酐(Scr)水平。苏木伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变,Masson染色检测肾纤维化程度;Western blot检测H3Cit、MPO、p53、GPX4的蛋白表达。结果 与NG组相比,HG组hrGECs细胞活力减低,细胞凋亡增多,SOD水平下调,MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α、H3Cit、MPO的表达水平下调(P均<0.05);与HG组相比,大黄素处理增强hrGECs细胞活力,减少细胞凋亡,上调SOD的表达并抑制MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α、H3Cit、MPO的表达,并且呈剂量依赖性(P均<0.05)。网络药理学分析p53是大黄素治疗DN的核心靶点。进一步研究显示,大黄素能够抑制p53表达并且上调GPX4的表达。过表达p53减弱大黄素在DN中的治疗作用,抑制细胞活力,促进凋亡,加剧氧化应激和炎症反应,促进NETs的形成(P均<0.05)。动物实验结果显示,大黄素治疗能够降低DN大鼠空腹血糖,改善大鼠肾功能,肾组织病理学改变和纤维化,抑制DN大鼠肾组织中IL-6、IL-1β、TNF-α、H3Cit、MPO、p53的高表达,促进GPX4蛋白表达(P均<0.05)。结论 大黄素通过调控p53/GPX4的表达改善DN肾损伤。 展开更多
关键词 大黄素 中性粒细胞外诱捕网 糖尿病肾病 肿瘤蛋白p53 谷胱甘肽过氧化酶4
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GPX4介导铁死亡在上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中的作用 被引量:2
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作者 葛树杰 胡永全 +1 位作者 周晓静 袁超 《华夏医学》 CAS 2023年第4期42-46,共5页
目的:探讨谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)介导铁死亡在上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中的作用。方法:以CCK8技术检测SKOV3细胞转染pcDNA3.l-GPX4及pcDNA3.l-NC后在不同浓度DDP中的药物耐受性(IC50);对SKOV3/DDP细胞分别进行RSL3(2μg/ml)、RSL3(2... 目的:探讨谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)介导铁死亡在上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中的作用。方法:以CCK8技术检测SKOV3细胞转染pcDNA3.l-GPX4及pcDNA3.l-NC后在不同浓度DDP中的药物耐受性(IC50);对SKOV3/DDP细胞分别进行RSL3(2μg/ml)、RSL3(2μg/ml)+DDP(5μg/ml)和RSL3(2μg/ml)+DDP(5μg/ml)+Fer-l(lμmol/L)处理,以蛋白质印记技术检测相关蛋白表达变化;对SKOV3/DDP细胞转染pcDNA3.l-GPX4及pcDNA3.l-NC后分别进行RSL3(2μg/ml)+DDP(5μg/ml)和RSL3(2μg/ml)+DDP(5μg/ml)+Fer-l(lμmol/L)处理,测量荧光强度。结果:SKOV3(GPX4)细胞对DDP的IC50明显增高。分别进行RSL3和RSL3+DDP处理的SKOV3/DDP细胞中的xCT和GPX4下降;给Fer-l与DDP、RSL3同时处理时,SKOV3/DDP细胞中的xCT和GPX4逆转上升;与SKOV3/DDP(阴性对照)细胞相比,SKOV3/DDP(GPX4)细胞中的RSL3+DDP组和Fer-l+RSL3+DDP组荧光强度降低,以上组间比较均有统计学差异(P<0.05)。在SKOV3/DDP(阴性对照)和SKOV3/DDP(GPX4)细胞中,Fer-l+RSL3+DDP组与RSL3+DDP组的荧光强度均降低(P<0.05)。结论:GPX4可以提高SKOV3细胞对于DDP的耐受性,且在上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中可以靶向抑制铁死亡。 展开更多
关键词 谷胱甘肽过氧化酶4 铁死亡 上皮性卵巢癌 顺铂 耐药细胞
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清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及对铁死亡的影响
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作者 武玉琳 王翠菡 +2 位作者 崔亚萌 周钧 王东浩 《环球中医药》 CAS 2024年第5期801-808,共8页
目的 研究清瘟败毒饮对盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及机制研究。方法 取75只SD健康雄性大鼠,按随机数字表法分为假手术组,模型组,清瘟败毒饮低、中、高剂量组,共5组。假手术组只切开腹... 目的 研究清瘟败毒饮对盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及机制研究。方法 取75只SD健康雄性大鼠,按随机数字表法分为假手术组,模型组,清瘟败毒饮低、中、高剂量组,共5组。假手术组只切开腹壁并缝合,不进行CLP,灌胃等体积生理盐水,其余各组运用CLP建立脓毒症肺损伤大鼠模型。检测治疗后各组大鼠生存率、肺组织的湿干重比、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总蛋白含量、BALF总细胞数、肺组织脂质过氧化水平及肺组织HE染色,研究清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤的治疗作用。运用Western-Blot法,检测各组大鼠肺组织中铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)、铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)、转铁蛋白(transferrin)、谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白表达情况,探讨清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠模型中铁死亡相关因子的影响,初步研究其作用机制。结果 模型组生存率为40.00%,清瘟败毒饮低、中、高剂量组生存率分别为53.33%、60.00%、73.33%;同假手术组相比,模型组能明显增加脓毒症肺损伤大鼠肺湿干重比(W/D)(P<0.01),模型组BALF上清液总蛋白含量显著增多(P<0.01),总细胞数显著增多(P<0.01)。同模型组相比,清瘟败毒饮中、高剂量组能减少脓毒症肺损伤大鼠肺W/D(P<0.05,P<0.01),清瘟败毒饮低、中、高剂量组均能显著减少BALF上清液总蛋白含量(P<0.05,P<0.01),减少总细胞数(P<0.05);同假手术组相比,模型组大鼠白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxide,4-HNE)、总谷胱甘肽(total-glutathione,T-GSH)、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)和二价铁离子(Fe^(2+))水平显著升高(P<0.01)。同模型组相比,清瘟败毒饮中剂量和高剂量组大鼠IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著降低(P<0.01),清瘟败毒饮高剂量组大鼠MDA和4-HNE水平显著降低(P<0.01);清瘟败毒饮各剂量组均能降低GSSG和Fe^(2+)水平,尤其以清瘟败毒饮高剂量组更为显著(P<0.01)。同假手术组相比,模型组大鼠中T-GSH、GSH水平和GSH/GSSG比值明显降低,清瘟败毒饮各剂量组均能显著提高T-GSH、GSH水平和GSH/GSSG比值(P<0.01),模型组大鼠FTH、FTL、Transferrin蛋白表达量显著增加(P<0.01),GPX4蛋白表达明显下降(P<0.01)。同模型组相比,经各剂量清瘟败毒饮干预后FTH、FTL的蛋白表达量显著降低(P<0.01),而中、高剂量清瘟败毒饮干预同样可以降低Transferrin的蛋白表达量(P<0.01);此外,清瘟败毒饮各剂量组可明显升高GPX4蛋白表达(P<0.01)。结论 清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用明确,其治疗机制可能同抑制铁死亡相关。 展开更多
关键词 脓毒症肺损伤 铁死亡 清瘟败毒饮 铁蛋白重链 铁蛋白轻链 转铁蛋白 谷胱甘肽过氧化酶4
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