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谷胱甘肽过氧化物酶4在保山猪中的转录调控
1
作者 袁清婷 林万 +5 位作者 赵桂英 赵加鼎 龚绍荣 富国文 王配 霍金龙 《云南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期32-41,共10页
【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)基因在保山猪中的序列特征、分子结构和表达调控模式。【方法】利用前期保山猪公猪睾丸转录组测序结果定量GPX4基因的表达水平,并对其蛋白质的一级结构、二级结构及三... 【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)基因在保山猪中的序列特征、分子结构和表达调控模式。【方法】利用前期保山猪公猪睾丸转录组测序结果定量GPX4基因的表达水平,并对其蛋白质的一级结构、二级结构及三级结构特征进行分析;构建多物种氨基酸序列进化树和蛋白互作网络图,分析各物种间的保守同源性和互作蛋白的功能;构建竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络分析图,并进行KEGG和GO功能注释。【结果】GPX4的编码序列长594 bp,编码197个氨基酸,位于猪的2号染色体上,含有7个外显子和6个内含子。疏水性分析结果发现该蛋白质N端和C端都疏水,其二级和三级结构中无规则卷曲占比为36.55%,高于其他结构域。系统进化分析表明:GPX4的氨基酸序列在哺乳动物中较为保守,尤其与偶蹄目的山羊和绵羊亲缘关系最近。蛋白互作网络发现了多个与GPX4互作的蛋白,如GSR、PRDX6、GRSF1、CHAC1、HSPA5,这些蛋白主要在甲状腺激素合成、铂类药物耐药性、肝细胞癌、铁死亡等相关通路中发挥作用。基因功能分析发现:GPX4基因主要参与精子发生、抗氧化、抗铁死亡等过程。ceRNA调控网络分析发现:保山猪GPX4基因受ssc-miR-214-3p靶向调控。GPX4的qPCR结果显示:GPX4在保山猪睾丸中的相对表达量最高,且其表达量随着保山猪年龄的增长而增加。【结论】研究结果为深入研究GPX4在保山猪精子发生过程中的转录调控作用奠定了基础。 展开更多
关键词 保山猪 谷胱甘肽过氧化物酶4(gpx4) 精子发生 转录调控
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突变型p53通过下调谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达和增加脂质活性氧产生促进人结肠癌和肺癌细胞的铁死亡 被引量：7
2
作者 雎转 张瑞 +1 位作者 杨安钢 尹会龙 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期522-527,共6页
目的探究突变型p53对肿瘤细胞铁死亡的影响。方法利用点突变构建突变型p53-R175H、p53-R273H的质粒,通过慢病毒包装、感染和药物筛选,建立稳定过表达突变型p53的肿瘤细胞系,并采用Western blot法对稳定过表达效果进行验证;通过碘化丙啶(... 目的探究突变型p53对肿瘤细胞铁死亡的影响。方法利用点突变构建突变型p53-R175H、p53-R273H的质粒,通过慢病毒包装、感染和药物筛选,建立稳定过表达突变型p53的肿瘤细胞系,并采用Western blot法对稳定过表达效果进行验证;通过碘化丙啶(PI)染色、脂质活性氧(ROS)的检测观察突变型p53对铁死亡的影响;通过Western blot法检测稳定过表达突变型p53细胞系中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的蛋白水平。结果成功建立稳定过表达p53-R175H、p53-R273H的HCT116和A549细胞系;与对照组相比,稳定过表达p53-R175H、p53-R273H细胞的铁死亡明显增加,ROS积聚明显增加,细胞GPX4表达水平明显下调。结论突变型p53通过下调GPX4表达、产生过量脂质ROS促进肿瘤细胞的铁死亡。 展开更多
关键词 突变型P53 铁死亡 脂质过氧化 谷胱甘肽过氧化物酶4(gpx4)
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葱谷胱甘肽过氧化物酶(NH_4)_2SO_4盐析范围的选取 被引量：2
3
作者 朱继玲 吴珍龄 《贵州农业科学》 CAS 2006年第1期21-22,共2页
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）具有防止畸变、延缓衰老、清除自由基等重要生理功能，对其资源的开发和利用有重要意义。以谷胱甘肽过氧化物酶酶活性较高的6种新鲜植物为材料，选取酶活性最高的葱为（NH4）2SO4盐析材料，实验结果表明... 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）具有防止畸变、延缓衰老、清除自由基等重要生理功能，对其资源的开发和利用有重要意义。以谷胱甘肽过氧化物酶酶活性较高的6种新鲜植物为材料，选取酶活性最高的葱为（NH4）2SO4盐析材料，实验结果表明：谷胱甘肽过氧化物酶主要在40%-80%饱和度（NH4）2SO4内析出。 展开更多
关键词 谷胱甘肽过氧化物酶 酶活性 (NH4)2SO4盐析
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以透明质酸为骨架的新型谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)模拟酶的制备及性质研究 被引量：4
4
作者 陈佳 张博珣 +5 位作者 安洋 洪水声 姜广志 冯德日 房向阳 刘兰英 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期2110-2113,共4页
用修饰法合成以透明质酸为骨架的两种新型GPX模拟酶:硒化透明质酸SeHA及碲化透明质酸TeHA.用红外光谱和核磁共振波谱对模拟酶的结构进行研究,证明其修饰位点位于透明质酸的N-乙酰氨基葡萄糖的—CH2OH.用二硫代双硝基苯甲酸(DTNB)法测定... 用修饰法合成以透明质酸为骨架的两种新型GPX模拟酶:硒化透明质酸SeHA及碲化透明质酸TeHA.用红外光谱和核磁共振波谱对模拟酶的结构进行研究,证明其修饰位点位于透明质酸的N-乙酰氨基葡萄糖的—CH2OH.用二硫代双硝基苯甲酸(DTNB)法测定模拟酶的硒含量为1.2%.通过模拟酶对3种不同底物过氧化氢(H2O2)、过氧化氢正丁烷(t-BuOOH)和过氧化氢异丙苯(CuOOH)的催化活性的研究结果表明CuOOH为该反应的最佳底物.研究模拟酶催化谷胱甘肽(GSH)还原3种过氧化物的动力学发现,反应速率与底物浓度的双倒数曲线均为平行的直线,说明模拟酶反应的动力学机制与天然GPX相同,为乒乓机制.用2,4二-叔丁基甲基苯酚(BHT)法证明了该催化反应为非自由基机理,且模拟酶不易被碘乙酸抑制. 展开更多
关键词 透明质酸 谷胱甘肽过氧化物酶(gpx) 模拟酶 制备 性质
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谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)抑制过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及机制 被引量：6
5
作者 谢光洪 黄梅 +6 位作者 袁路 林华 胡颖 彭珊珊 姜友军 田雨 田锦勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期434-440,共7页
目的探讨谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)对过氧化氢(H2O2)氧化损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的影响及其作用机制。方法将pcDNA 3.1-GPX1表达载体转染至HUVEC并用500μmol/L H2O2处理8h,实时定量PCR检测HUVEC的GPX1 mRNA水平、Western b... 目的探讨谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)对过氧化氢(H2O2)氧化损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的影响及其作用机制。方法将pcDNA 3.1-GPX1表达载体转染至HUVEC并用500μmol/L H2O2处理8h,实时定量PCR检测HUVEC的GPX1 mRNA水平、Western blot法检测GPX1蛋白水平、流式细胞术检测细胞凋亡, 2′, 7′-二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH-DA)荧光定量法检测活性氧(ROS)含量、相应试剂盒检测过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果 500μmol/L H2O2处理可抑制HUVEC中GPX1表达并诱导细胞凋亡,降低细胞POD、SOD活力,提高细胞ROS含量。抑制miR-373-5p表达可提高GPX1的表达,降低H2O2诱导的细胞凋亡,增强细胞POD和SOD活力,降低ROS含量。结论GPX1能降低H2O2诱导的HUVEC凋亡,增强细胞POD、SOD的活力及抗ROS的能力。 展开更多
关键词 谷胱甘肽过氧化物酶1(gpx1) 过氧化氢 凋亡 过氧化物酶 超氧化物歧化酶(SOD)
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硒代β-环糊精模拟谷胱甘肽过氧化物酶的研究——6-位硒桥联β-环糊精的合成、性质及表征 被引量：24
6
作者 刘俊秋 沈家骢 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第9期1446-1448,共3页
谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ，Ｅｃ１．１１．１．９）属抗氧化应激酶系，它以还原型谷胱甘肽为底物，催化还原氢过氧化物［１］．它能消除体内自由基，防止脂质过氧化，对治疗和预防克山病、心血管病、炎症及癌症等有明显效果．随着对... 谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ，Ｅｃ１．１１．１．９）属抗氧化应激酶系，它以还原型谷胱甘肽为底物，催化还原氢过氧化物［１］．它能消除体内自由基，防止脂质过氧化，对治疗和预防克山病、心血管病、炎症及癌症等有明显效果．随着对ＧＰＸ催化机制及活性部位结构的深入... 展开更多
关键词 硒 环糊精 模拟酶 谷胱甘肽 过氧化物酶 gpx
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谷胱甘肽过氧化物酶模拟物6-CySeCD对过氧化氢诱导小鼠成纤维细胞损伤的保护作用 被引量：3
7
作者 徐亚维 闫岗林 +4 位作者 龚平生 牟颖 罗贵民 杨佳 吕绍武 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期329-332,共4页
考察不同剂量的H2O2作用于小鼠成纤维细胞(NIH3T3)后,细胞脂质过氧化、存活率、DNA片段化的变化情况,并研究谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的模拟物6A,6B-环己胺-6A′,6B′-硒桥联-β-CD(6-CySeCD)抗H2O2诱导小鼠成纤维细胞损伤的能力.结果表... 考察不同剂量的H2O2作用于小鼠成纤维细胞(NIH3T3)后,细胞脂质过氧化、存活率、DNA片段化的变化情况,并研究谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的模拟物6A,6B-环己胺-6A′,6B′-硒桥联-β-CD(6-CySeCD)抗H2O2诱导小鼠成纤维细胞损伤的能力.结果表明:H2O2对NIH3T3细胞有严重损伤;6-CySeCD能有效保护细胞,防止紫外线引起的损伤. 展开更多
关键词 谷胱甘肽过氧化物酶(gpx) 模拟物 6-CySeCD 过氧化氢 成纤维细胞
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麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶高效可溶性表达及其部分酶学性质 被引量：2
8
作者 王晶晶 张新笑 +4 位作者 卞欢 耿志明 李鹏鹏 王道营 徐为民 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1120-1126,共7页
[目的]克隆麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因(GPx4)并在大肠杆菌中表达,分析其酶学特性,为研究GPx4功能及其在羟基脂肪酸形成过程中的调节机制打下基础。[方法]采用RT-PCR克隆麻鸭GPx4(DGPx4)的编码基因,利用定点突变的方法构建半胱氨... [目的]克隆麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因(GPx4)并在大肠杆菌中表达,分析其酶学特性,为研究GPx4功能及其在羟基脂肪酸形成过程中的调节机制打下基础。[方法]采用RT-PCR克隆麻鸭GPx4(DGPx4)的编码基因,利用定点突变的方法构建半胱氨酸突变体DGPx4表达载体pMBP-DGPx4(48Sec→ Cys),并在大肠杆菌中通过添加His标签进行可溶性表达,经Ni-NTA亲和层析和离子交换层析纯化得到融合蛋白DGPx4;采用总谷胱甘肽过氧化物酶活性检测试剂盒检测DGPx4活力以研究其酶学性质。[结果]克隆获得的DGPx4基因编码序列全长516 bp,编码172个氨基酸,编码蛋白分子量约20 kD,理论等电点(pI)为8.9。构建的突变体基因原核表达载体pMBP-DGPx4(48Sec→Cys)可在大肠杆菌中成功诱导表达获得融合蛋白DGPx4,经Ni-NTA亲和层析和离子交换层析即获得高纯度的DG-Px4。以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)为底物时,DGPx4的最适反应温度为32 ℃,最适pH为8.0,对NaCl浓度较敏感;Cu^2+和Ni^2+对DGPx4活力有较高的促进作用,Mg^2+和Mn^2+对DGPx4活力有一定的抑制作用,Ca^2+和Zn^2+对DG-Px4活力则无明显的促进或抑制作用。[结论]从鸭肝细胞中克隆获得的DGPx4基因序列经定点突变后可在原核细胞中高效表达,且纯化后的高纯度融合蛋白DGPx4具有GPx4活力,能在抗脂质氧化过程中发挥作用。 展开更多
关键词 麻鸭 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(gpx4) 原核表达 纯化 酶学性质
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玉米谷胱甘肽过氧化物酶的生物信息学分析 被引量：2
9
作者 隋欣 周宜君 +3 位作者 高飞 刘楠 陈静 张孜宸 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第11期2675-2680,共6页
对植物基因组数据库和过氧化物酶数据库中玉米谷胱甘肽过氧化物酶(Zea mays Glutathione per-oxidase,ZmGPXs)进行查找和比对,确定了6个ZmGPXs,采用生物信息学方法对其进行了理化性质、亚细胞定位、结构域、高级结构、外显子和内含子构... 对植物基因组数据库和过氧化物酶数据库中玉米谷胱甘肽过氧化物酶(Zea mays Glutathione per-oxidase,ZmGPXs)进行查找和比对,确定了6个ZmGPXs,采用生物信息学方法对其进行了理化性质、亚细胞定位、结构域、高级结构、外显子和内含子构成等分析。结果表明,尽管6个ZmGPXs序列的氨基酸数量不同,但均属于碱性蛋白质,具有6个外显子和5个内含子,其中5个ZmGPXs高级结构表现为二聚体,具有植物GPXs的特征基序。亚细胞定位分析发现ZmGPXs主要定位于线粒体、叶绿体、过氧化物酶体和细胞质中。结构域分析表明ZmGPXs属于硫氧还蛋白超家族。 展开更多
关键词 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase gpx) 玉米(Zea mays) 生物信息学
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马钱苷通过调控NFE2L2-FTH1-GPX4影响谷氨酰胺代谢介导的宫颈癌细胞生物学行为
10
作者 雷燕 冯春 +3 位作者 邹倩 董毅 廉红梅 杜欣 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第7期583-589,共7页
目的探讨马钱苷(Log)通过调控核因子红细胞2相关因子2(NFE2L2)-铁蛋白重链多肽1(FTH1)-谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)影响谷氨酰胺代谢介导的宫颈癌。方法通过生物信息学分析Log、谷氨酰胺代谢及宫颈癌的共同靶点。将Hela细胞分为空白(Bla... 目的探讨马钱苷(Log)通过调控核因子红细胞2相关因子2(NFE2L2)-铁蛋白重链多肽1(FTH1)-谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)影响谷氨酰胺代谢介导的宫颈癌。方法通过生物信息学分析Log、谷氨酰胺代谢及宫颈癌的共同靶点。将Hela细胞分为空白(Blank)组、对照(Ctrl)组、Log组、顺铂(DDP)组、NFE2L2激活剂(TBHQ)组、NFE2L2抑制剂(ML385)组和TBHQ+Log组,检测细胞生物学行为、谷氨酰胺代谢以及NFE2L2、FTH1、GPX4蛋白表达。构建宫颈癌异种移植瘤小鼠模型,探究Log对于体内宫颈癌进展的影响。结果生物信息学分析结果显示,NFE2L2可能是Log治疗宫颈癌的靶点。Log和DDP均能抑制Hela细胞增殖与侵袭,促进凋亡,减少谷氨酰胺与谷氨酸含量、谷氨酰胺酶(GLS1)与谷氨酸脱氢酶(GLUD1)蛋白表达(P<0.05)。NFE2L2激活剂TBHQ得到相反效果,而ML385则与Log效果相似,且Log能抑制NFE2L2、FTH1与GPX4蛋白表达(P<0.05)。动物实验结果显示,Log能够明显抑制宫颈癌进展(P<0.05)。结论Log通过抑制NFE2L2-FTH1-GPX4信号通路影响谷氨酰胺代谢介导的宫颈癌进展。 展开更多
关键词 马钱苷 核因子红细胞2相关因子2 铁蛋白重链多肽1 谷胱甘肽过氧化物酶4 谷氨酰胺代谢 宫颈癌
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用RT—PCR扩增人谷胱甘肽过氧化物酶的cDNA
11
作者 李广元 闫小君 +2 位作者 任瑛云 杜晓阳 李信民 《西安医科大学学报》 CSCD 1992年第3期203-205,共3页
本文应用反转录-聚合酶链反应成功的扩增了人谷胱甘肽过氧化物酶的互补脱氧核糖核酸(cDNA)。该法首先从人肝癌细胞中提取信使核糖核酸,在反转录酶的作用下生成cDNA,以此CDNA作为PCR的模板,利用人工合成的两个特异引物,进行35次循环的扩... 本文应用反转录-聚合酶链反应成功的扩增了人谷胱甘肽过氧化物酶的互补脱氧核糖核酸(cDNA)。该法首先从人肝癌细胞中提取信使核糖核酸,在反转录酶的作用下生成cDNA,以此CDNA作为PCR的模板,利用人工合成的两个特异引物,进行35次循环的扩增。电泳结果表明,扩增片段的大小约为600 bp,与文献结果一致,为该酶基因的表达及生产奠定了基础。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 克山病 gpx
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基于Nrf2/GPX4铁死亡途径探讨甘露清瘟方对急性肺损伤大鼠的保护作用 被引量：2
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作者 李江涛 李争 +3 位作者 李翔鹏 梁倩倩 廖春燕 李风森 《中成药》 北大核心 2025年第2期596-600,共5页
目的探讨甘露清瘟方对急性肺损伤大鼠的保护作用。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组和甘露清瘟方低、中、高剂量组(0.9、1.8、3.6 g/kg)。正常组、模型组灌胃给予生理盐水,其余组灌胃给予相应药物,每天1次,连续给药3 d。第... 目的探讨甘露清瘟方对急性肺损伤大鼠的保护作用。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组和甘露清瘟方低、中、高剂量组(0.9、1.8、3.6 g/kg)。正常组、模型组灌胃给予生理盐水,其余组灌胃给予相应药物,每天1次,连续给药3 d。第4天,除正常组气管滴注无菌PBS外,其余组气管滴注LPS建立急性肺损伤炎症模型,24 h后收集血清及肺组织,ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,HE染色观察肺组织病理变化,生化法检测肺组织Fe^(2+)、MDA、GSH水平,Western blot、RT-qPCR法检测肺组织Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平、肺组织病理损伤评分、Fe^(2+)、MDA水平升高(P<0.05),肺组织GSH水平、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA表达降低(P<0.05);与模型组比较,甘露清瘟方中、高剂量组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平、肺组织病理损伤评分、Fe^(2+)、MDA水平降低(P<0.05),肺组织GSH水平、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA表达均升高(P<0.05)。结论甘露清瘟方可通过改善大鼠体内炎症反应及氧化应激,保护LPS诱导的急性肺损伤,其作用机制可能与激活Nrf2/GPX4信号通路、抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 甘露清瘟方 急性肺损伤 核因子E2相关因子2(Nrf2) 谷胱甘肽过氧化物4(gpx4) 铁死亡
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具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：1
13
作者 张国利 刘子 +4 位作者 冯书章 吴广谋 郭学军 罗贵民 高姝娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期293-294,共2页
对自由基的研究表明，多种疾病的发生和发展，如缺血性心脏病、脑缺血、肿瘤、白内障、各种炎症及生理衰老等，都与自由基代谢紊乱有密切联系［１］。谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）是一种重要的抗氧化药物，它能阻断原发性自由基造成的... 对自由基的研究表明，多种疾病的发生和发展，如缺血性心脏病、脑缺血、肿瘤、白内障、各种炎症及生理衰老等，都与自由基代谢紊乱有密切联系［１］。谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）是一种重要的抗氧化药物，它能阻断原发性自由基造成的损伤，或使已受自由基损伤的组织免遭... 展开更多
关键词 gpx 谷胱甘肽 过氧化物酶 单克隆抗体 制备
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家蚕谷胱甘肽-S-转移酶E4基因的组织表达和序列特征及重组蛋白的酶活性分析 被引量：2
14
作者 谭祥 聂红毅 +5 位作者 刘春 胡晓明 陈全梅 刘茹凤 赵萍 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期624-633,共10页
昆虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)主要行使对异生或内源有毒物质进行代谢解毒的功能。选择家蚕谷胱甘肽-S-转移酶E4的编码基因Bmgste4为靶标,研究其组织表达谱、序列结构特征及原核表达重组蛋白的酶活性。RT-PCR检测不同组织表达特征... 昆虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)主要行使对异生或内源有毒物质进行代谢解毒的功能。选择家蚕谷胱甘肽-S-转移酶E4的编码基因Bmgste4为靶标,研究其组织表达谱、序列结构特征及原核表达重组蛋白的酶活性。RT-PCR检测不同组织表达特征的结果显示,Bmgste4基因在家蚕5龄第3天幼虫的头部、触角、下颚须、表皮、脂肪体、丝腺以及雄性个体的马氏管和雌性个体的卵巢中均有表达,而在血细胞、中肠以及雄性个体的精巢和雌性个体的马氏管中不表达。多序列比对结果显示BmGSTE4具有完整和保守的GST二级结构特征,N端氨基酸残基保守,特别是谷胱甘肽结合位点。构建插入Bmgste4基因开放阅读框片段的重组表达质粒p28-Bmgste4,并转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞进行原核表达后,利用分光光度法测定重组蛋白对通用底物1-氯-2,4-二硝基苯的酶活参数:Km=0.58 mmol/L,Vmax=24.55μmol/(mg.min)。这些结果为进一步研究家蚕体内解毒和抗药性机制以及开发鳞翅目害虫新型生物防治药剂提供了基础信息。 展开更多
关键词 家蚕 谷胱甘肽-S-转移酶E4 基因表达谱 多序列比对 原核表达 酶活性
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谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4融合蛋白表达载体的构建、鉴定与表达
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作者 陈衍 杨岚 +4 位作者 纪宗玲 朱帮福 田琼 张晓楠 陈苏民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期131-133,共3页
目的　　构建谷胱甘肽转硫酶－血小板因子４　（ＧＳＴ－ＰＦ４）融合蛋白表达载体，并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，从ＨＬ－６０细胞中克隆ＰＦ４　ｃＤＮＡ，然后克隆至载体ｐＵＣ１９中，序列... 目的　　构建谷胱甘肽转硫酶－血小板因子４　（ＧＳＴ－ＰＦ４）融合蛋白表达载体，并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，从ＨＬ－６０细胞中克隆ＰＦ４　ｃＤＮＡ，然后克隆至载体ｐＵＣ１９中，序列测定后把ＰＦ４基因重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－３中，并用ＩＰＴＧ诱导其在大肠杆菌中表达。结果获得了ＰＦ４　ｃＤＮＡ。序列分析表明，该序列与ＧｅｎＢａｎｋ数据库中的序列一致。重组质粒酶切鉴定表明，ＰＦ４基因已正确插入到ｐＧＥＸ－４Ｔ－３中。重组融合蛋白表达载体ＧＳＴ－ＰＦ４经ＩＰＴＧ诱导表达，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后得到１条蛋白表达带，相对分子质量（Ｍｒ）约为３６　０００。结论成功地构建融合蛋白表达载体ＧＳＴ－ＰＦ４，并在大肠杆菌中获得有效表达，为进一步研究打下良好的基础。 展开更多
关键词 血小板因子4 融合基因载体 基因表达 谷胱甘肽转硫酶
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4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达
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作者 耿建华 刘兴国 管泽民 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第5期887-889,共3页
目的:观察大鼠实验性舌癌癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)的表达特点。方法:6周龄雄性SD大鼠42只,随机分为2组。实验组动物(n=30)的饮水中加入体积分数为0.001%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液7mg/(kg·d)。对照组(n=12... 目的:观察大鼠实验性舌癌癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)的表达特点。方法:6周龄雄性SD大鼠42只,随机分为2组。实验组动物(n=30)的饮水中加入体积分数为0.001%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液7mg/(kg·d)。对照组(n=12)则仅给予饮用水。实验第2周、4周、8周、12周、16周和26周末,处死大鼠,其中实验组各5只,对照组各2只。处死动物后,从会厌部至口底前缘整体分离舌体,观察其大体形态,常规组织处理,免疫组化法检测舌黏膜组织内GST-P。结果:对照组大鼠未出现任何舌黏膜病变,舌体标本均呈GST-P阴性。实验第8周末,实验组大鼠舌黏膜开始出现上皮异常增殖,实验第16周末即有1只大鼠发生舌癌,26周实验组大鼠均出现舌癌。2周时实验组大鼠舌黏膜内开始出现GST-P阳性细胞,随着时间的推移,GST-P阳性灶数目和大小逐渐增加。结论:GST-P可能与舌癌的发生有关。GST-P阳性反应早于大鼠舌黏膜的形态学改变,可作为反映癌前细胞代谢特点的良好标记。 展开更多
关键词 胎盘型谷胱甘肽S-转移酶 舌癌 4-硝基喹啉-1-氧化物 大鼠
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土贝母苷甲通过促进GPX4泛素化降解诱导结直肠癌细胞铁死亡
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作者 王萍 王长福 +2 位作者 韩士林 匡海学 王秋红 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第3期403-410,共8页
本研究旨在探究土贝母苷甲(tubeimoside I,TBMS 1)诱导的结肠癌细胞HCT116细胞铁死亡及分子机制。体外培养结直肠癌HCT116细胞,MTT法检测不同浓度TBMS 1作用HCT116细胞的存活率,并根据此结果进行分组;克隆形成实验检测TBMS 1对HCT116细... 本研究旨在探究土贝母苷甲(tubeimoside I,TBMS 1)诱导的结肠癌细胞HCT116细胞铁死亡及分子机制。体外培养结直肠癌HCT116细胞,MTT法检测不同浓度TBMS 1作用HCT116细胞的存活率,并根据此结果进行分组;克隆形成实验检测TBMS 1对HCT116细胞增殖能力的影响;Western blot法检测细胞中溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达;流式细胞仪及荧光显微镜检测细胞中脂质活性氧(lipid reactive oxygen species,Lipid ROS)水平的变化;丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、亚铁离子(Fe^(2+))试剂盒分别检测细胞中MDA,GSH以及Fe^(2+)的相对水平;免疫共沉淀法检测GPX4蛋白的泛素化水平。研究结果表明随TBMS 1药物浓度的增加,HCT116细胞的存活率逐渐降低,克隆形成能力逐渐降低;细胞中加入TBMS 1后,GSH水平降低,而Fe^(2+)和MDA水平增加;HCT116细胞中加入TBMS 1作用后,细胞中氧化态的Lipid ROS绿色荧光明显增加且Lipid ROS水平明显增加;在细胞中同时加入TBMS 1和铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)能够逆转TBMS 1导致的细胞死亡,且细胞中加入不同浓度的TBMS 1能够抑制GPX4蛋白的表达,而对SLC7A11蛋白的表达几乎没有影响;与对照组相比,单独加入TBMS 1对GPX4蛋白表达的抑制能够被Fer-1所逆转,且蛋白免疫共沉淀结果显示,TBMS 1促进了GPX4蛋白的泛素化和降解。本研究结果发现TBMS 1可能通过促进GPX4蛋白的泛素化和降解诱导结直肠癌HCT116细胞铁死亡并抑制其恶性增殖。 展开更多
关键词 土贝母苷甲 结直肠癌 增殖 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁死亡 泛素化
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由Nrf2/GPX4调控铁死亡探讨从“瘀”论治激素性骨质疏松症
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作者 樊佳煊 张维 +1 位作者 崔瑞 曹林忠 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第1期49-54,共6页
核转录因子-相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)作为胞内关键的抗氧化应激途径,保护多种骨形成相关细胞免受铁死亡的损害,是激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)发病的潜在机制。GIOP因瘀致痹的病机与... 核转录因子-相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)作为胞内关键的抗氧化应激途径,保护多种骨形成相关细胞免受铁死亡的损害,是激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)发病的潜在机制。GIOP因瘀致痹的病机与该系统密切相关,从“瘀”论治的效应可通过该通路轴向调控的微观信息来表达;同时中医治疗GIOP时重视“瘀证”的辨证论治,且临床通常以活血化瘀类、益气活血类中药多见。因此,基于Nrf2/GPX4调控铁死亡探讨从“瘀”论治GIOP的科学性,以“瘀证”为理论指导明确活血化瘀类中药参与Nrf2/GPX4通路调控BMSCs、ECs、OB铁死亡来治疗GIOP,以期为从“瘀”论治GIOP提供科学理论依据,为深入理解GIOP病理生理及临床防治提供新的视角。 展开更多
关键词 激素性骨质疏松症 核转录因子-相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁死亡 瘀证 活血化瘀法 中医中药
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温度对南极衣藻ICE-L(Chlamydomonas sp.ICE-L)谷胱甘肽含量及其相关酶活性的影响 被引量：18
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作者 丁燏 缪锦来 +3 位作者 王全富 阚光锋 郑洲 李光友 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期154-161,共8页
采用分光光度法研究了在不同温度下(包括最适温度、低于或高于最适温度)南极衣藻ICE-L(Chlamydomonassp.ICE-L)谷胱甘肽(GSH)含量、蛋白含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性,同时分析了已适... 采用分光光度法研究了在不同温度下(包括最适温度、低于或高于最适温度)南极衣藻ICE-L(Chlamydomonassp.ICE-L)谷胱甘肽(GSH)含量、蛋白含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性,同时分析了已适应高温(16℃)的衣藻重新适应低温(8℃)时这些指标的变化,以期阐明谷胱甘肽系统与南极冰藻低温适应性的关系。结果表明,当温度低于对照组(最适温度8℃)时,蛋白含量降低,而GSH含量、GPx、GST和GR活性上升,已适应高温的衣藻重新适应低温时也出现类似的结果。但当温度高于最适温度时,GSH含量、GST和GPx活性下降,而蛋白含量和GR活力有上升的趋势,GR活力增长幅度比低于最适温度时的变化小。由此可见谷胱甘肽系统在南极衣藻低温适应过程中,GSH、GPx、GR、GST与低温适应呈正相关,同时除GR外其他因子与南极衣藻高温适应呈负相关,GSH及其相关酶在南极冰藻低温适应中具有重要作用。 展开更多
关键词 南极衣藻ICE-L 谷胱甘肽(GSH) 谷胱甘肽过氧化物酶(gpx) 谷胱甘肽还原酶 (GR) 谷胱甘肽硫转移酶(GST) 低温适应
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蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽S_转移酶的部分纯化 被引量：3
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作者 汤方 张常忠 +2 位作者 梁沛 史雪岩 高希武 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-178,共7页
通过用聚乙烯亚胺(PEI)、硫酸铵、聚乙二醇(PEG)沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究.结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果.通... 通过用聚乙烯亚胺(PEI)、硫酸铵、聚乙二醇(PEG)沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究.结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果.通过PEI沉淀去核酸后,再用硫酸铵沉淀,中肠和脂肪体GST活性分布在70%～75%和60%～65%沉淀段,比活力分别为1081.49和596.41 nmol/(min·mg),纯化倍数分别为2.53和2.2.在6种PEG中,PEG10000和PEG20000的纯化效果较好.在中肠和脂肪体中PEG10000沉淀的GST活性峰分别在40%～45%和30%～40%,GST比活力分别为795.11和1 080.18 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.4和3.97.PEG20000沉淀中肠和脂肪体GST的活性峰分别在25%～40%和25%～45%,比活力分别是767.57和945.96 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.81和3.05.用GSH-Sepharose 4B纯化中肠GST,GST比活力达到5 888.44nmol/(min·mg),纯化倍数达到107.38. 展开更多
关键词 棉铃虫 谷胱甘肽S-转移酶 硫酸铵沉淀 聚乙烯亚胺沉淀 聚乙二醇沉淀 GSH—Sephamse 4B亲和柱
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