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谷氨酰胺tRNA合成酶的克隆、表达、纯化及活性测定
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作者 张银山 韩宏岩 许维岸 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期6-8,共3页
为了研究谷氨酰胺tRNA合成酶的结构和性质,人工合成谷氨酰胺tRNA合成酶基因,构建原核表达载体p PET-28a-His-GlnRS和p PIDTp SMART-tRNAGln表达载体,共转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,分离纯化谷氨酰胺tRNA合成酶,测定其活性... 为了研究谷氨酰胺tRNA合成酶的结构和性质,人工合成谷氨酰胺tRNA合成酶基因,构建原核表达载体p PET-28a-His-GlnRS和p PIDTp SMART-tRNAGln表达载体,共转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,分离纯化谷氨酰胺tRNA合成酶,测定其活性。结果显示,共转化到大肠杆菌BL21(DE3)获得了可溶性的、有活性的目的蛋白,谷氨酰胺对谷氨酰胺tRNA合成酶没有底物抑制作用。 展开更多
关键词 谷氨酰胺trna合成酶 原核表达 酶活性
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细胞转录组学和代谢组学整合策略表征突变影响谷氨酰胺合成酶酶活的关键代谢通路 被引量:1
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作者 凌婷 石京 +3 位作者 冯婷泽 裴劭君 李思怿 朴海龙 《色谱》 北大核心 2025年第3期207-219,共13页
谷氨酰胺合成酶(GS)是细胞中唯一可以从头合成谷氨酰胺的酶,在癌症代谢中扮演着重要角色。GS酶活缺陷突变往往导致严重的代谢疾病甚至是死亡。理解GS酶活降低对生理功能的影响可能为靶向治疗提供新的方向,同时对其内在机制的探索可以为... 谷氨酰胺合成酶(GS)是细胞中唯一可以从头合成谷氨酰胺的酶,在癌症代谢中扮演着重要角色。GS酶活缺陷突变往往导致严重的代谢疾病甚至是死亡。理解GS酶活降低对生理功能的影响可能为靶向治疗提供新的方向,同时对其内在机制的探索可以为治疗干预开辟新的途径。已报道的GS酶活缺陷突变包括R324C(第324位精氨酸突变为半胱氨酸)和R341C(第341位精氨酸突变为半胱氨酸)等,本研究新发现了GS的另一个酶活缺陷突变位点K241(第241位赖氨酸)。为了探究GS酶活缺陷突变带来的影响,本研究利用双组学技术对GS的酶活缺陷突变R324C和K241R(第241位赖氨酸突变为精氨酸)在肺癌细胞中的功能进行研究,通过对转录组和代谢组数据的整合揭示了GS酶活缺陷突变对一些重要生物过程的显著影响。GS的缺陷突变阻碍了细胞周期和多种氨基酸代谢途径。除了谷氨酰胺合成受到抑制,精氨酸-脯氨酸代谢、甘氨酸-丝氨酸-酪氨酸代谢以及天冬氨酸-谷氨酸-丙氨酸代谢在GS突变的细胞中表现出更强的活力,同时,氨酰-tRNA的生物合成途径也显著被激活。进一步的研究发现,GS酶活缺陷带来氨基酸代谢的改变源自谷氨酸的重新定向和相关代谢酶的表达变化,同时,氨酰-tRNA生物合成的激活源自谷氨酰胺在GS酶活缺陷细胞中带来的能量应激激活了特定蛋白的表达,如转录因子4(ATF4)。此外,细胞表型实验表明,GS酶活缺陷细胞的迁移能力低于野生型细胞。以上结果揭示了GS酶活缺陷突变体细胞中的代谢重编程现象,突出了癌细胞代谢的复杂性和适应性。 展开更多
关键词 谷氨酰胺合成酶突变 转录组学 代谢组学 肺癌 谷氨酰胺
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重组靛蓝色素合成酶快速定量检测L-谷氨酰胺
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作者 袁天慧 李晗 +7 位作者 张怡婷 赵钰 成琦 韩雨洁 徐得磊 朱天择 罗兵 朱益波 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第4期163-172,共10页
【目标】快速、经济且准确地检测复杂样品中L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)的浓度。【方法】利用重组大肠杆菌(Escherichia coli)表达的靛蓝色素合成酶(blue pigment synthetaseA,BpsA),开发快速精确定量Gln的方法。通过对脱辅基BpsA(apo-... 【目标】快速、经济且准确地检测复杂样品中L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)的浓度。【方法】利用重组大肠杆菌(Escherichia coli)表达的靛蓝色素合成酶(blue pigment synthetaseA,BpsA),开发快速精确定量Gln的方法。通过对脱辅基BpsA(apo-BpsA)进行体外活化及测定条件优化获得BpsA全酶(holo-BpsA)。【结果】所获holo-BpsA可在适宜条件下于30 min内完成对Gln的定量测定,该方法检测限为10.46μmol/L,定量限为31.68μmol/L,板间标准偏差为1.41μmol/L,板内标准偏差为0.85μmol/L;针对5种常用培养基的平均加标回收率为94.7%~106.6%,其标准偏差基本在5%以下。holo-BpsA在-20℃下保存2个月后,酶活力未见显著变化。【结论】作者开发的基于BpsA快速检测Gln的方法操作简便、专一性强、耗时短,具有较高灵敏度和准确度。 展开更多
关键词 L-谷氨酰胺 靛蓝色素合成酶 快速定量检测
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硼对大白菜谷氨酰胺合成酶家族基因影响研究 被引量:1
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作者 冯德玉 徐卫红 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期17-30,共14页
大白菜(Brassica pekinensis(Lour.)Rupr.)对硼的需求量较高且对低硼胁迫很敏感,常出现硼缺乏症.目前国内外对硼调控蔬菜风味品质的研究较为缺乏.采用盆栽试验研究了不同硼肥用量对大白菜生长发育、风味以及谷氨酰胺合成酶(Glutamine Sy... 大白菜(Brassica pekinensis(Lour.)Rupr.)对硼的需求量较高且对低硼胁迫很敏感,常出现硼缺乏症.目前国内外对硼调控蔬菜风味品质的研究较为缺乏.采用盆栽试验研究了不同硼肥用量对大白菜生长发育、风味以及谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GLN)家族基因表达的影响,初步探讨了硼对大白菜风味品质的调控机理.结果显示,施用硼肥提高了大白菜必需氨基酸占氨基酸总量的比例.主成分分析表明,蛋氨酸和半胱氨酸是大白菜的第一限制氨基酸,鲜味氨基酸中的天门冬氨酸和谷氨酸对大白菜风味贡献最大.施用硼肥后大白菜根GLN1.2和GLN2的表达量上调,GLN1.1和GLN1.4的表达量下调.‘华良早5号’叶柄GLN1.1和GLN1.4的表达量上调,‘脆甜白2号’叶柄GLN2表达量上调,GLN1.2表达量下调;叶片GLN家族基因表达量总体上调.大白菜地上部半胱氨酸质量分数与叶柄GLN1.4极显著正相关,酪氨酸质量分数与叶片GLN1.4显著负相关.不同大白菜品种对高硼的耐受能力存在差异,‘脆甜白2号’对高硼的耐受能力强于‘华良早5号’. 展开更多
关键词 大白菜 品质调控 氨基酸组分 谷氨酰胺合成酶家族基因
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高等植物谷氨酰胺合成酶研究进展 被引量:53
5
作者 李常健 林清华 张楚富 《生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期1-3,共3页
谷氨酰胺合成酶 (GS)是参与高等植物氨同化过程的关键酶。介绍了高等植物谷氨酰胺合成酶及其同工酶的分布、性质。
关键词 谷氨酰胺合成酶 高等植物 同工酶 GS
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不同氮源对大豆硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性及蛋白质含量的影响 被引量:79
6
作者 陈煜 朱保葛 +1 位作者 张敬 梁宗锁 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期143-146,共4页
利用硝态氮 (NO3- -N)、铵态氮 (NH4 + -N )及混合态氮对 4个栽培大豆品种结荚期植株进行诱导处理 ,研究不同氮源对叶片硝酸还原酶 (NR)、谷氨酰胺合成酶 (GS)活性以及子粒蛋白质含量的影响。结果表明 ,NO3- -N增加 4个品种NR活性效果最... 利用硝态氮 (NO3- -N)、铵态氮 (NH4 + -N )及混合态氮对 4个栽培大豆品种结荚期植株进行诱导处理 ,研究不同氮源对叶片硝酸还原酶 (NR)、谷氨酰胺合成酶 (GS)活性以及子粒蛋白质含量的影响。结果表明 ,NO3- -N增加 4个品种NR活性效果最好 ,其次是混合态氮 ,而NH4 +-N的效果较差。从 4个品种叶片的GS活性看 ,混合态氮和NH4 + -N的处理效果好 ,而NO3--N的效果差 ;三种氮源处理 4个基因型的子粒蛋白质含量都有不同程度的增加 ,增加的顺序与提高NR活性的顺序相同。说明施用三种氮肥能增加大豆品种子粒的蛋白质含量 ,而以施用硝酸钾的效果最佳。相关分析表明 ,大豆叶片NR活性与子粒蛋白质含量之间呈极显著正相关 (r =0 .6 6 3 ) ,可以把结荚期叶片的硝酸还原酶活性作为选择高蛋白大豆材料的参考指标之一。 展开更多
关键词 氮源 大豆 硝酸还原酶 谷氨酰胺合成酶 活性 蛋白质含量 生物固氮
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小麦叶片谷氨酰胺合成酶的分离纯化及鉴定 被引量:10
7
作者 王小纯 安帅 +4 位作者 熊淑萍 程振云 陈新建 孟凡荣 马新明 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期83-86,共4页
为了解谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)同工酶在小麦中的种类、活性及亚基组成状况,利用盐析、凝胶过滤、阴离子交换层析等技术对小麦苗期叶片中的GS同工酶进行了分离纯化及鉴定。通过测定GS活性跟踪GS的纯化过程,利用Native-P... 为了解谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)同工酶在小麦中的种类、活性及亚基组成状况,利用盐析、凝胶过滤、阴离子交换层析等技术对小麦苗期叶片中的GS同工酶进行了分离纯化及鉴定。通过测定GS活性跟踪GS的纯化过程,利用Native-PAGE结合活性染色技术检测GS的纯化效果,利用SDS-PAGE鉴定GS的亚基组成。结果表明,在小麦幼苗叶片中检测到3种GS同工酶GS1、GS2和GSx,其中Gsx含量少,但活性高。从小麦幼苗叶片中纯化得到2个GS同工酶即GS1和GS2。GS1由39 kD的亚基组成,GS2由45 kD的亚基组成,没有纯化得到GSx。 展开更多
关键词 小麦 幼苗叶片 谷氨酰胺合成酶 纯化和鉴定
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水稻灌浆成熟期籽粒谷氨酰胺合成酶活性变化及其与稻米品质关系的初步研究 被引量:30
8
作者 金正勋 钱春荣 +1 位作者 杨静 刘海英 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期103-106,共4页
选用稻米蒸煮食味品质有显著差异的4个粳稻品种,通过盆栽试验对水稻灌浆成熟期籽粒谷氨酰胺合成酶活性变化及其与稻米蒸煮食味品质关系进行了初步研究。结果表明,水稻灌浆过程中籽粒谷氨酰胺合成酶活性随灌浆进程逐渐增加,达到峰值... 选用稻米蒸煮食味品质有显著差异的4个粳稻品种,通过盆栽试验对水稻灌浆成熟期籽粒谷氨酰胺合成酶活性变化及其与稻米蒸煮食味品质关系进行了初步研究。结果表明,水稻灌浆过程中籽粒谷氨酰胺合成酶活性随灌浆进程逐渐增加,达到峰值后叉逐渐下降,呈单峰曲线变化;抽穗15d以前蛋白质含量高的品种谷氨酰胺合成酶活性大于蛋白质含量低的品种,而以后与之相反;灌浆前期,籽粒谷氨酰胺合成酶活性与味度值、最高黏度、崩解值间呈负相关,灌浆中、后期呈正相关。而与籽粒最终蛋白质含量和黏滞峰消减值在灌浆前期呈正相关,灌浆中、后期呈负相关,而且相关程度随灌浆时段而发生变化;抽穗后15~20d是籽粒谷氨酰胺合成酶活性与味度值、RVA谱特性间的相关性质发生变化的转折时期。 展开更多
关键词 水稻 灌浆期 谷氨酰胺合成酶 蒸煮食昧品质 淀粉黏滞性 相关性
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不同形态氮素对大豆硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性及蛋白质含量的影响 被引量:20
9
作者 胡润芳 张广庆 +1 位作者 滕振勇 林国强 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期31-35,共5页
利用硝态氮(NO3--N)、铵态氮(NH4+-N)和混合态氮对3个栽培大豆品种花荚期植株进行诱导处理,研究不同形态氮素对功能叶片硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)活性以及籽粒蛋白质含量的影响。结果表明,NH4+-N增加3个大豆品种功能叶片NR活... 利用硝态氮(NO3--N)、铵态氮(NH4+-N)和混合态氮对3个栽培大豆品种花荚期植株进行诱导处理,研究不同形态氮素对功能叶片硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)活性以及籽粒蛋白质含量的影响。结果表明,NH4+-N增加3个大豆品种功能叶片NR活性效果最好,其次是混合态氮,NO3--N效果较差;三种形态的氮素均能明显提高3个大豆品种功能叶片GS活性;在三种形态氮素诱导下,3个大豆品种的籽粒蛋白质含量均有不同程度的提高,且与其功能叶片NR和GS活性呈显著正相关(r=0.520*和0.550*);追施氮素对低蛋白大豆品种功能叶片NR、GS活性和籽粒蛋白质含量具有较好的促进作用。可以把大豆花荚期叶片NR和GS的活性作为高蛋白品种选育的参考指标之一。 展开更多
关键词 大豆 硝酸还原酶 谷氨酰胺合成酶 蛋白质
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硝态氮对黄瓜子叶谷氨酰胺合成酶和谷氨酸脱氢酶活性的影响 被引量:30
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作者 王云华 王志强 +3 位作者 张楚富 周忠新 马敬坤 欧吉权 《武汉植物学研究》 CSCD 2004年第6期534-538,共5页
在硝态氮存在或缺乏的条件下,测定了黄瓜(CucumissativusL.)种子萌发和子叶发育过程中子叶可溶性蛋白质含量以及谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸脱氢酶(NAD(H)-GDH)活性的变化。在子叶发育初期,无论外源氮存在与否,每对子叶可溶性蛋白质含量... 在硝态氮存在或缺乏的条件下,测定了黄瓜(CucumissativusL.)种子萌发和子叶发育过程中子叶可溶性蛋白质含量以及谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸脱氢酶(NAD(H)-GDH)活性的变化。在子叶发育初期,无论外源氮存在与否,每对子叶可溶性蛋白质含量和GS、NADH-GDH、NAD+-GDH活性随发育上升。在外源氮存在下,第4d后,可溶性蛋白质含量虽有所下降,但基本保持恒定;第6d后,GS和NADH-GDH活性逐渐降低,NAD+-GDH却相反增高。但在无外源氮条件下,于第4d后,可溶性蛋白质水平以及GS、NADH-GDH和NAD+-GDH活性都逐渐降低。在子叶发育的整个过程中,外源氮对GS和NAD+-GDH活性有促进作用,尤其是在子叶发育的后期对NAD+-GDH活性的促进更为明显。 展开更多
关键词 谷氨酰胺合成酶 谷氨酸脱氢酶 硝态氮 黄瓜子叶 发育
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氮素用量对春玉米功能叶片谷氨酰胺合成酶活性及产量的影响 被引量:23
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作者 杨亮 赵宏伟 刘锦红 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期320-324,共5页
试验以东农250、四单19、丰禾10为材料,研究了不同氮素用量对黑龙江省春玉米谷氨酰胺合成酶活性影响,揭示了不同氮素用量对春玉米氮代谢及产量的影响。结果表明,①玉米功能叶片谷氨酰胺合成酶活性峰值出现在孕穗期或抽雄期;②三个品种... 试验以东农250、四单19、丰禾10为材料,研究了不同氮素用量对黑龙江省春玉米谷氨酰胺合成酶活性影响,揭示了不同氮素用量对春玉米氮代谢及产量的影响。结果表明,①玉米功能叶片谷氨酰胺合成酶活性峰值出现在孕穗期或抽雄期;②三个品种整个生育过程中各处理功能叶片谷氨酰胺合成酶活性均以N200处理较高,对三个品种来说,N200处理是最佳的氮素处理;③在拔节后各处理谷氨酰胺合成酶活性快速升高并相继达到峰值,拔节前追肥可促进后期谷氨酰胺合成酶活性提高;④七叶期和成熟期叶片谷氨酰合成酶活性与子粒产量呈显著正相关。 展开更多
关键词 春玉米 谷氨酰胺合成酶(GS) 氮素用量 产量
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原位氮饥饿发酵工艺中梯度补氮对谷氨酰胺合成酶的调控 被引量:7
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作者 李春 刘雨磊 +2 位作者 陈奎发 杨艳 曹竹安 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第1期155-159,共5页
The effects of uniform and gradient fed nitrogen on glutamine synthetase(GS),glutamate dehydrogenase(GDH)and glutamate synthase(GOGAT)were investigated in glutamine production by fermentation of Corynebacterium glutam... The effects of uniform and gradient fed nitrogen on glutamine synthetase(GS),glutamate dehydrogenase(GDH)and glutamate synthase(GOGAT)were investigated in glutamine production by fermentation of Corynebacterium glutamicum NS611 after 3h of in-situ nitrogen starvation. It was shown that the strain in the later growth phase entered naturally into in-situ nitrogen starvation by controlling the initial concentration of urea and the biomass was slightly decreased. The pH value reached 6.5 again in the culture system, which confirmed the beginning of nitrogen starvation in the culture system. After 3h nitrogen starvation the activity of GS was increased over two folds and the time of high activity of GS persisted three folds longer in the gradient fed nitrogen system than that in the normal fed batch. The higher activity of GDH was also maintained. The glutamine production increased by 72% than the original technology of nitrogen starvation and the time of fermentation was shortened by above 12h. 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌NS611 谷氨酰胺 原位氮饥饿 梯度补氮 谷氨酰胺合成酶
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谷氨酰胺合成酶活性与水稻杂种优势预测 被引量:13
13
作者 孙国荣 朱鹏 +1 位作者 刘文芳 肖翊华 《武汉植物学研究》 CSCD 1994年第2期149-153,共5页
从杂种优势预测生理指标需具备的3个基本条件入手,对杂交水稻及其亲本生长发育过程中的谷氨酰胺合成酶(GS,EC6、3、1、2)活性进行研究,结果表明:水稻GS活性在整个生育期中的变化呈现一定的规律性,并且杂种酶活性是由... 从杂种优势预测生理指标需具备的3个基本条件入手,对杂交水稻及其亲本生长发育过程中的谷氨酰胺合成酶(GS,EC6、3、1、2)活性进行研究,结果表明:水稻GS活性在整个生育期中的变化呈现一定的规律性,并且杂种酶活性是由其双亲遗传性所决定的;同时,GS活性与多个生理性状及产量性状具有一定的相关性;在孕穗期和抽穗期与产量性状的关系尤为密切,因此,在生殖生长期GS活性在一定程度上可以反映产量性状的优势水平,可望作为水稻杂种优势预测的一个辅助指标。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 合成酶 杂种优势 水稻
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菠菜叶中存在两种谷氨酰胺合成酶同工酶 被引量:10
14
作者 周忠新 王云华 +2 位作者 张楚富 袁永泽 马敬坤 《武汉植物学研究》 CSCD 2004年第6期572-574,共3页
运用非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳结合活性染色的方法,在菠菜(SpinaciaoleraceaL.)生长发育过程中,观察到叶片中至少存在2种谷氨酰胺合成酶(GS),其中一种GS的活性随发育进程而逐渐升高,而另一种GS的活性逐渐降低。在不同来源的成熟的菠菜... 运用非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳结合活性染色的方法,在菠菜(SpinaciaoleraceaL.)生长发育过程中,观察到叶片中至少存在2种谷氨酰胺合成酶(GS),其中一种GS的活性随发育进程而逐渐升高,而另一种GS的活性逐渐降低。在不同来源的成熟的菠菜叶片中同样观察到2种GS的存在。 展开更多
关键词 谷氨酰胺合成酶 同工酶 菠菜 发育
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小麦谷氨酰胺合成酶基因克隆与其表达特性分析 被引量:6
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作者 王小纯 张同勋 +3 位作者 李高飞 程振云 刘宁 马新明 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期487-492,共6页
为了研究小麦谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的功能,利用RACE及RT-PCR技术克隆了小麦GS1(GenBank登录号:HQ840647)和GS2(GenBank登录号:JF894116)基因的全长cDNA.小麦GS1的cDNA全长为1 494 bp,GS2的cDNA全长为1 631 bp,并利... 为了研究小麦谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的功能,利用RACE及RT-PCR技术克隆了小麦GS1(GenBank登录号:HQ840647)和GS2(GenBank登录号:JF894116)基因的全长cDNA.小麦GS1的cDNA全长为1 494 bp,GS2的cDNA全长为1 631 bp,并利用生物信息软件对GS1和GS2的基因序列以及所表达的蛋白特性进行了分析.利用半定量PCR和Western-bolt技术分别分析了小麦苗期叶片发育过程中GS同工酶基因转录和表达特点,结果表明,GS1在叶片开始衰老时转录和表达水平较高,GS2从叶片伸长期到定长期转录和表达水平最高. 展开更多
关键词 小麦 谷氨酰胺合成酶 基因克隆 基因转录 基因表达
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谷氨酰胺合成酶及其在植物基因工程中应用研究进展 被引量:5
16
作者 赵凯琴 罗延青 +2 位作者 俎峰 李劲峰 王敬乔 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期435-438,共4页
植物谷氨酰胺合成酶不仅是植物氨同化的关键酶,也是影响植物抗逆性及作物产量的重要因素之一。文章对植物谷氨酰胺合成酶的种类、结构、基因、基因表达及其在植物基因工程中的应用进行综述,认为植物对不同氮源吸收及运输的机制、谷氨酰... 植物谷氨酰胺合成酶不仅是植物氨同化的关键酶,也是影响植物抗逆性及作物产量的重要因素之一。文章对植物谷氨酰胺合成酶的种类、结构、基因、基因表达及其在植物基因工程中的应用进行综述,认为植物对不同氮源吸收及运输的机制、谷氨酰胺合成酶等关键酶不同异构体在植物生长繁育涉及的生理反应中的作用及其调节机制、谷氨酰胺合成酶在利用雄性不育进行杂交育种中可能的应用等仍待进一步研究。 展开更多
关键词 谷氨酰胺合成酶 植物基因工程 应用 研究进展
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水稻谷氨酰胺合成酶同工型基因转录表达量与启动子结构关系分析 被引量:6
17
作者 金正勋 李丹 +6 位作者 李明月 同拉嘎 潘冬 张玉磊 王海微 韩云飞 张忠臣 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1-10,共10页
研究选用籽粒蛋白质含量差异显著的5个品种(系),比较分析品种间GS同工型基因在灌浆过程中籽粒和叶片表达特性及启动子序列与结构特点。结果表明,不同品种间OsGS同工型基因表达量差异显著;OsGS1;1和OsGS1;2基因在籽粒和叶片中大量表达;Os... 研究选用籽粒蛋白质含量差异显著的5个品种(系),比较分析品种间GS同工型基因在灌浆过程中籽粒和叶片表达特性及启动子序列与结构特点。结果表明,不同品种间OsGS同工型基因表达量差异显著;OsGS1;1和OsGS1;2基因在籽粒和叶片中大量表达;OsGS1;3和OsGS2基因分别仅在籽粒和叶片中大量表达;在灌浆过程中籽粒和叶片中OsGS同工型基因m RNA表达量均呈单峰曲线变化,灌浆前期m RNA表达量平稳升高,中期出现峰值,后期快速降低,且高蛋白质含量品种m RNA表达量高于低蛋白质含量品种。籽粒蛋白质含量差异显著品种间OsGS同工型基因启动子序列同源性高达99%以上;品种间有性杂交子代OsGS同工型基因启动子序列可发生碱基变化,但启动子核心元件无变化。在调控元件数量和功能上OsGS同工型基因启动子保守性很强,启动子在结构和功能上不易发生遗传变异,籽粒OsGS同工型基因m RNA表达量变化受OsGS基因启动子调控影响较小。 展开更多
关键词 水稻 超亲变异系 谷氨酰胺合成酶基因 转录表达 启动子序列
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不同氮源对刺芹侧耳谷氨酰胺合成酶的酶活力及基因表达影响 被引量:4
18
作者 汪滢 尚俊军 +3 位作者 茅文俊 王莹 鲍大鹏 李燕 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期33-36,共4页
谷氨酰胺合成酶(GS)是真菌氮素代谢的关键酶之一。为探究氮源的类型和浓度对其活性的调控,采用添加单一氮源成分(硫酸铵、硝酸钠、尿素)的基本培养基培养了刺芹侧耳国森一号菌株,并对培养过程中菌丝生物量和谷氨酰胺合成酶的酶活力进行... 谷氨酰胺合成酶(GS)是真菌氮素代谢的关键酶之一。为探究氮源的类型和浓度对其活性的调控,采用添加单一氮源成分(硫酸铵、硝酸钠、尿素)的基本培养基培养了刺芹侧耳国森一号菌株,并对培养过程中菌丝生物量和谷氨酰胺合成酶的酶活力进行了测定。荧光定量PCR结果显示尿素和NH_4^+均可以抑制GS基因表达水平以及GS酶活力; NO_3^-可以提高GS基因表达水平和GS酶活力,但是刺芹侧耳利用NO_3^-氮源生产菌丝生物量的能力较差。 展开更多
关键词 刺芹侧耳 谷氨酰胺合成酶 氮源
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光呼吸和谷氨酰胺合成酶抑制剂对水稻冠层NH3挥发的影响 被引量:4
19
作者 陈明霞 周彩云 +3 位作者 李明军 崔克辉 聂立孝 黄见良 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期206-211,共6页
在营养液培养条件下,对两个不同氮效率基因型水稻品种扬稻6号和武育粳3号采用光呼吸抑制剂异烟肼(INH)和谷氨酰胺合成酶(GS)抑制剂蛋氨酸亚砜亚胺(MSO)处理,研究其对水稻光合速率、光呼吸速率、GS酶活性及冠层的NH3挥发速率的影响。结... 在营养液培养条件下,对两个不同氮效率基因型水稻品种扬稻6号和武育粳3号采用光呼吸抑制剂异烟肼(INH)和谷氨酰胺合成酶(GS)抑制剂蛋氨酸亚砜亚胺(MSO)处理,研究其对水稻光合速率、光呼吸速率、GS酶活性及冠层的NH3挥发速率的影响。结果发现:(1)MSO导致剑叶光合速率下降,光呼吸速率升高;INH导致光呼吸速率显著下降,同时一定程度上引起光合速率降低。(2)MSO处理显著降低了GS酶活性,相应地引起NH3挥发速率增加;INH在一定程度上导致NH3挥发速率降低。(3)扬稻6号NH3挥发速率比武育粳3号低的生理原因是光呼吸速率较低和GS酶活性较高。 展开更多
关键词 水稻 光呼吸速率 谷氨酰胺合成酶 氨挥发速率
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蛋白和核酸合成抑制剂对氮素诱导甜菜谷氨酰胺合成酶基因表达的影响 被引量:4
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作者 陈胜勇 侯静 +3 位作者 李彩凤 马凤鸣 尹春佳 黄兆峰 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期445-451,共7页
谷氨酰胺合成酶(GS)家族是甜菜等高等植物体内氨态氮同化酶,也是氮利用与循环的核心构件。为揭示在氮素诱导下放线菌素D(AMD)和放线菌酮(CHM)对甜菜GS基因调控表达的影响,采用半定量RT-PCR技术,对甜菜的胞液型谷氨酰胺合成酶基因(GS1)... 谷氨酰胺合成酶(GS)家族是甜菜等高等植物体内氨态氮同化酶,也是氮利用与循环的核心构件。为揭示在氮素诱导下放线菌素D(AMD)和放线菌酮(CHM)对甜菜GS基因调控表达的影响,采用半定量RT-PCR技术,对甜菜的胞液型谷氨酰胺合成酶基因(GS1)和质体型谷氨酰胺合成酶基因(GS2)进行mRNA的表达检测,同时进行GS活性的测定。结果表明,甜菜幼苗经过低浓度AMD处理2~6h,GS活性略有增加,9h后,高和低浓度AMD处理下的GS活性都下降,且随着浓度的增加下降幅度加大,同时GS1 mRNA和GS2 mRNA的相对量随浓度的增加而下降。CHM处理甜菜幼苗9h后,随着浓度的增加和处理时间的延长,GS活性下降幅度增加,但GS1 mRNA和GS2 mRNA的相对量在不同CHM浓度处理间变化不显著。 展开更多
关键词 甜菜 谷氨酰胺合成酶 氮素 放线菌素D 放线菌酮
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