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兔抗人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)多克隆抗体的制备及应用
被引量：
3
1
作者
吴少春
刘林
+1 位作者
高艳春
顾玉超
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期651-656,共6页
目的 制备特异性识别人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)的兔多克隆抗体。方法 通过比对GFPT1及其高度同源的同工酶GFPT2的蛋白质序列,针对GFPT1的特异性序列设计并合成2个多肽,多肽与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联作为抗原免疫新西兰大...
目的 制备特异性识别人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)的兔多克隆抗体。方法 通过比对GFPT1及其高度同源的同工酶GFPT2的蛋白质序列,针对GFPT1的特异性序列设计并合成2个多肽,多肽与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联作为抗原免疫新西兰大白兔,3次加强免疫后得到抗血清,采用ELISA检测抗血清效价。构建GFPT1和GFPT2的大肠杆菌表达载体,诱导表达获得GFPT1和GFPT2重组蛋白,通过Western blot法检测GFPT1和GFPT2重组蛋白以验证抗血清的特异性、免疫荧光细胞化学染色检测786-O细胞GFPT1的表达验证获得的抗血清能否识别内源性表达的GFPT1。结果 获得了特异性识别GFPT1的多克隆抗体,效价高达1∶1 458 000,该抗体可用于Western blot法以及免疫荧光细胞化学染色。结论 成功制备了特异性识别GFPT1的兔多克隆抗体。
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关键词
谷氨酰胺
果糖
6
磷酸
氨基
转移
酶
1(
gfpt
1)
重组蛋白
多克隆抗体
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职称材料
题名
兔抗人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)多克隆抗体的制备及应用
被引量：
3
1
作者
吴少春
刘林
高艳春
顾玉超
机构
中国海洋大学医药学院糖生物学实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期651-656,共6页
基金
国家自然科学基金(81871868)
中央高校基本科研业务费(202042011)。
文摘
目的 制备特异性识别人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)的兔多克隆抗体。方法 通过比对GFPT1及其高度同源的同工酶GFPT2的蛋白质序列,针对GFPT1的特异性序列设计并合成2个多肽,多肽与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联作为抗原免疫新西兰大白兔,3次加强免疫后得到抗血清,采用ELISA检测抗血清效价。构建GFPT1和GFPT2的大肠杆菌表达载体,诱导表达获得GFPT1和GFPT2重组蛋白,通过Western blot法检测GFPT1和GFPT2重组蛋白以验证抗血清的特异性、免疫荧光细胞化学染色检测786-O细胞GFPT1的表达验证获得的抗血清能否识别内源性表达的GFPT1。结果 获得了特异性识别GFPT1的多克隆抗体,效价高达1∶1 458 000,该抗体可用于Western blot法以及免疫荧光细胞化学染色。结论 成功制备了特异性识别GFPT1的兔多克隆抗体。
关键词
谷氨酰胺
果糖
6
磷酸
氨基
转移
酶
1(
gfpt
1)
重组蛋白
多克隆抗体
Keywords
glutamine fructose-
6
-phosphate amidotransferase 1(
gfpt
1)
recombinant protein
polyclonal antibody
分类号
Q5127 [生物学—生物化学]
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
兔抗人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)多克隆抗体的制备及应用
吴少春
刘林
高艳春
顾玉超
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
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