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题名响应面分析法优化重组原动蛋白2β诱导条件的研究
被引量:4
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作者
闻崇炜
刘瑞江
毛春友
胡萍萍
王亚丽
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机构
江苏大学药学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期173-178,共6页
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基金
江苏大学高级人才启动基金资助项目(1281370001)
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文摘
原动蛋白2β(PK2β)是近年新发现的一个选择性激活PKR1的蛋白质因子。采用响应面分析法(RSM)研究了利用重组BL21(DE3)表达PK2β的最优诱导条件。结果表明,诱导时机与诱导物浓度对PK2β的表达水平具有显著性影响,但诱导时间不具有显著性影响。试验数据拟合与极值分析表明最优诱导条件为工程菌OD600为0.50时,采用终浓度为0.11 mmol/L的IPTG在37℃诱导培养7.73 h,此时PK2β表达水平可达242.78 mg/L。验证试验结果表明,重组PK2β的表达水平比优化前提高了46%,而IPTG的用量减少了89%,有利于大量制备该蛋白质进行后续功能研究及应用研究。
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关键词
原动蛋白2β(PK2β)
响应面法
诱导时间
诱导物浓度
诱导时机
优化
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Keywords
Prokineticin 2β ( PK2β ) Response surface methodology ( RSM ) Post-induction time Inducer concentration Time-point of induction Optimization
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分类号
R341
[医药卫生—基础医学]
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题名提高重组原动蛋白2表达水平的优化策略
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作者
闻崇炜
王亚丽
胡萍萍
毛春友
盛琼
戴曙辉
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机构
江苏大学药学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期175-180,共6页
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基金
江苏大学高级人才启动基金资助项目(1281370001)
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文摘
原动蛋白2(PK2)是近年发现的一个具有多种生物学功能的蛋白质因子。采用Design-Expert 7.0.0软件对重组PK2表达的最优诱导条件进行响应面分析。结果表明,诱导起始时机与诱导物浓度是影响重组PK2表达水平的显著性因子。同时,诱导时间-诱导时机、诱导时机-诱导物浓度之间的相互作用对PK2的表达水平具有显著性影响。试验数据拟合与极值分析表明最优诱导条件为:工程菌OD600为0.60时,采用终浓度为0.62 mmol/L的IPTG在37℃诱导培养2.82 h,此时重组PK2的表达水平为170.73 mg/L。优化后的诱导条件导致重组PK2的表达水平提高了51.1%,而所需IPTG减少38.0%,诱导时间缩短53.0%,有利于大量制备重组PK2进行后续功能研究及应用研究。
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关键词
响应面法
原动蛋白2(PK2)
诱导时间
诱导物浓度
诱导时机
优化
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Keywords
Response surface methodology ( RSM )
Pmkineticin 2 ( PK2 )
Post-induction time
Inducer concentration
Time-pointof induction
Optimization
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分类号
TQ936.2
[化学工程]
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