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炎症诱导性表达载体的表达特性 被引量:1
1
作者 李泉 俞卫锋 +4 位作者 黄晶 吕欣 张中军 王红阳 吴孟超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期648-651,共4页
目的 :构建一种具有自控性的炎症诱导性表达载体 ,为探索符合临床实际的抗炎基因治疗新系统奠定基础。 方法 :(1)将对炎症敏感的 SAA3启动子调控片段与报告基因 CAT片段重组 ,构建炎症诱导性表达载体 p SAA3/CAT;(2 )用脂质体转染法将... 目的 :构建一种具有自控性的炎症诱导性表达载体 ,为探索符合临床实际的抗炎基因治疗新系统奠定基础。 方法 :(1)将对炎症敏感的 SAA3启动子调控片段与报告基因 CAT片段重组 ,构建炎症诱导性表达载体 p SAA3/CAT;(2 )用脂质体转染法将表达载体 p SAA3/CAT转入体外培养细胞或动物体内 ,观察不同时间、不同剂量的炎性刺激时报告基因的表达变化 ,分析 SAA3启动子体内外转录活性和炎症诱导性。 结果 :(1)阳离子脂质体包裹表达质粒可以有效地转染肝源性细胞SMMC- 772 1和单核细胞源性细胞 U937,经活化后的 U 937细胞可迅速表达 CAT,6 h启动 ,2 4 h达峰值 ,72 h渐降至基础水平。(2 )腹腔注射脂质体包裹 DNA可有效转染外源报告基因 CAT在体内表达 ;L PS活化的基因转染小鼠肝脏中的 CAT表达与一次典型的急性反应时间一致 ,鼠肝 CAT表达水平与 L PS有显著的剂量依赖关系。 结论 :初步建立了一种具有自控性的有效抗炎基因治疗新系统。 展开更多
关键词 炎症 诱导性表达载体 基因疗法 淀粉样蛋白 SAA 脓态症
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四环素诱导性人肝细胞生长因子真核表达载体的构建与鉴定 被引量:1
2
作者 任淑婷 于琳华 +1 位作者 徐长福 高广道 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1443-1445,共3页
目的构建四环素诱导性人肝细胞生长因子(HGF)真核表达载体。方法运用基因重组技术,将人HGFcDNA全长序列,定向克隆于四环素诱导性真核表达载体pBI-L多克隆位点MluI和SalI之间,限制性内切酶酶切和测序鉴定。结果重组pBI-L-HGF真核表达载... 目的构建四环素诱导性人肝细胞生长因子(HGF)真核表达载体。方法运用基因重组技术,将人HGFcDNA全长序列,定向克隆于四环素诱导性真核表达载体pBI-L多克隆位点MluI和SalI之间,限制性内切酶酶切和测序鉴定。结果重组pBI-L-HGF真核表达载体经限制性内切酶酶切,与理论值相符;测序结果与GenBank比对,序列正确。结论本实验成功构建人HGF四环素诱导性真核表达载体pBI-L-HGF,为今后临床开展HGF基因治疗提供了一种安全可调控的基因治疗策略。 展开更多
关键词 人肝细胞生长因子 四环素诱导性真核表达载体 基因治疗
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