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从噬菌体随机肽库中筛选IL-6抗体的识别表位
被引量：
5
1
作者
陈兴
王鑫
+4 位作者
杨子义
董家新
王建安
姚志建
沈倍奋
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第3期125-126,共2页
目的 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选IL 6抗体的识别表位。方法 :利用具有IL 6中和活性的单抗C2 2 0筛选呈现于丝状噬菌体表面P3蛋白的随机 6肽文库。结果 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选出 36株可与单抗特异结合的噬菌体克隆 ,其中多数克...
目的 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选IL 6抗体的识别表位。方法 :利用具有IL 6中和活性的单抗C2 2 0筛选呈现于丝状噬菌体表面P3蛋白的随机 6肽文库。结果 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选出 36株可与单抗特异结合的噬菌体克隆 ,其中多数克隆呈现核心序列SWLR ,该序列与IL 6的序列具有一定同源性。竞争结合实验和Western印迹分析 ,带有SWFNLR和HSWLRY小肽的 2株噬菌体克隆可与IL 6竞争结合单抗C2 2 0。结论 :SWFNLR和HSWLRY是IL 6单抗C2 2 0特异识别的表位。
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关键词
随机肽库
IL-6
单克隆抗体
识别表位
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职称材料
抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体抑制肉瘤生长的初步研究
被引量：
2
2
作者
赵文忠
刘艳君
+3 位作者
朱平
刘洁
韩强涛
富宁
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第8期873-876,共4页
目的观察抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体对小鼠肉瘤S180生长的影响。方法在对小鼠Toll样受体2(mTLR-2)B细胞优势表位预测的基础上,合成B细胞识别表位20mer短肽,将其与载体蛋白偶联,制备免疫原。所得兔抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位...
目的观察抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体对小鼠肉瘤S180生长的影响。方法在对小鼠Toll样受体2(mTLR-2)B细胞优势表位预测的基础上,合成B细胞识别表位20mer短肽,将其与载体蛋白偶联,制备免疫原。所得兔抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位多克隆抗体TSP-1纯化后,采用Westernblotting、免疫组织化学和流式细胞仪进行初步鉴定。小鼠肉瘤株S180细胞注射小鼠左后肢,其中实验组混合100μg纯化抗体TSP-1,无关免疫球蛋白对照组混合100μg正常兔IgG,空白对照组仅接种S180。小鼠经麻醉分别于10、14、18d处死,称量瘤质量并计算抑瘤率。结果Westernblotting显示在相对分子质量约95000处可见清晰的反应条带;免疫组织化学和流式细胞术检测显示抗体可与表达天然mTLR-2的J774A.1细胞反应;实验组小鼠肉瘤生长明显受到抑制,其瘤质量在10、14、18d与对照组相比差异显著(P<0.05);抑瘤率分别为77%、51%和53%。结论局部应用抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位抗体可抑制小鼠肉瘤S180生长,且表现在肿瘤生长的早期。
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关键词
小鼠TLR-2
B细胞
识别表位
抗体
肿瘤
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职称材料
猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析
被引量：
4
3
作者
魏莹
盖新娜
+2 位作者
贾红
郭鑫
杨汉春
《中国动物传染病学报》
CAS
2009年第1期33-37,共5页
为获得针对猪源EMCV结构蛋白VP2的特异性单克隆抗体,本试验以EMCV结构蛋白VP2为对象,将EMCV BJC3株VP2基因定向插入穿梭质粒中,构建重组腺病毒AdV-VP2,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,利用Pepscan技术对单抗识别的抗原位点进行分析。结...
为获得针对猪源EMCV结构蛋白VP2的特异性单克隆抗体,本试验以EMCV结构蛋白VP2为对象,将EMCV BJC3株VP2基因定向插入穿梭质粒中,构建重组腺病毒AdV-VP2,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,利用Pepscan技术对单抗识别的抗原位点进行分析。结果显示,间接ELISA及间接免疫荧光法筛选获得了2个阳性细胞克隆株,命名为C11和G8。经检测杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1:1 600,腹水效价分别为1:2.56×106和1:1.28×106,中和试验鉴定均无中和活性。Western-blot鉴定表明获得的2株单抗均能识别原核表达的重组VP2蛋白。亚类鉴定结果显示2株单抗均为IgG2b亚类,轻链均为κ型。Pepscan分析结果显示,这2株单抗可分别识别EMCV VP2蛋白上的2个B细胞线性表位。本研究获得的蛋白十分接近于其天然构象,很大程度上保证了病毒表面抗原位点的结构和功能。
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关键词
脑心肌炎病毒
VP2蛋白
单克隆抗体
表
位
识别
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职称材料
题名
从噬菌体随机肽库中筛选IL-6抗体的识别表位
被引量：
5
1
作者
陈兴
王鑫
杨子义
董家新
王建安
姚志建
沈倍奋
机构
军事医学科学院基础医学研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第3期125-126,共2页
基金
国家"8 63"高技术发展基金!资助 ( 162 0 9 0 3 0 4)
文摘
目的 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选IL 6抗体的识别表位。方法 :利用具有IL 6中和活性的单抗C2 2 0筛选呈现于丝状噬菌体表面P3蛋白的随机 6肽文库。结果 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选出 36株可与单抗特异结合的噬菌体克隆 ,其中多数克隆呈现核心序列SWLR ,该序列与IL 6的序列具有一定同源性。竞争结合实验和Western印迹分析 ,带有SWFNLR和HSWLRY小肽的 2株噬菌体克隆可与IL 6竞争结合单抗C2 2 0。结论 :SWFNLR和HSWLRY是IL 6单抗C2 2 0特异识别的表位。
关键词
随机肽库
IL-6
单克隆抗体
识别表位
Keywords
Random peptides library IL 6 McAb Recognition epitope
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体抑制肉瘤生长的初步研究
被引量：
2
2
作者
赵文忠
刘艳君
朱平
刘洁
韩强涛
富宁
机构
第一军医大学免疫学教研室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第8期873-876,共4页
基金
国家自然科学基金(30070719)~~
文摘
目的观察抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体对小鼠肉瘤S180生长的影响。方法在对小鼠Toll样受体2(mTLR-2)B细胞优势表位预测的基础上,合成B细胞识别表位20mer短肽,将其与载体蛋白偶联,制备免疫原。所得兔抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位多克隆抗体TSP-1纯化后,采用Westernblotting、免疫组织化学和流式细胞仪进行初步鉴定。小鼠肉瘤株S180细胞注射小鼠左后肢,其中实验组混合100μg纯化抗体TSP-1,无关免疫球蛋白对照组混合100μg正常兔IgG,空白对照组仅接种S180。小鼠经麻醉分别于10、14、18d处死,称量瘤质量并计算抑瘤率。结果Westernblotting显示在相对分子质量约95000处可见清晰的反应条带;免疫组织化学和流式细胞术检测显示抗体可与表达天然mTLR-2的J774A.1细胞反应;实验组小鼠肉瘤生长明显受到抑制,其瘤质量在10、14、18d与对照组相比差异显著(P<0.05);抑瘤率分别为77%、51%和53%。结论局部应用抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位抗体可抑制小鼠肉瘤S180生长,且表现在肿瘤生长的早期。
关键词
小鼠TLR-2
B细胞
识别表位
抗体
肿瘤
Keywords
murine Toll-like receptor 2
B cell epitope
antibody
tumor
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析
被引量：
4
3
作者
魏莹
盖新娜
贾红
郭鑫
杨汉春
机构
中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
2009年第1期33-37,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30700589
30530550)
中国农业大学科研启动基金资助项目(2007001)
文摘
为获得针对猪源EMCV结构蛋白VP2的特异性单克隆抗体,本试验以EMCV结构蛋白VP2为对象,将EMCV BJC3株VP2基因定向插入穿梭质粒中,构建重组腺病毒AdV-VP2,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,利用Pepscan技术对单抗识别的抗原位点进行分析。结果显示,间接ELISA及间接免疫荧光法筛选获得了2个阳性细胞克隆株,命名为C11和G8。经检测杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1:1 600,腹水效价分别为1:2.56×106和1:1.28×106,中和试验鉴定均无中和活性。Western-blot鉴定表明获得的2株单抗均能识别原核表达的重组VP2蛋白。亚类鉴定结果显示2株单抗均为IgG2b亚类,轻链均为κ型。Pepscan分析结果显示,这2株单抗可分别识别EMCV VP2蛋白上的2个B细胞线性表位。本研究获得的蛋白十分接近于其天然构象,很大程度上保证了病毒表面抗原位点的结构和功能。
关键词
脑心肌炎病毒
VP2蛋白
单克隆抗体
表
位
识别
Keywords
Eneephalomyocarditis virus （ EMCV ）
VP2 protein
monoclonal antibodies （ MAbs ）
epitope identification
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
从噬菌体随机肽库中筛选IL-6抗体的识别表位
陈兴
王鑫
杨子义
董家新
王建安
姚志建
沈倍奋
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体抑制肉瘤生长的初步研究
赵文忠
刘艳君
朱平
刘洁
韩强涛
富宁
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析
魏莹
盖新娜
贾红
郭鑫
杨汉春
《中国动物传染病学报》
CAS
2009
4
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