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一氧化氮(NO)对角膜神经再生的影响作用
被引量：
2
1
作者
向征
石赟懿
谭钢
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2022年第10期769-774,共6页
目的探讨一氧化氮(NO)对角膜神经再生的影响作用。方法本研究以亚硝酸钠(NaNO_(2))作为外源性NO供体,在细胞实验中以小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)为研究对象。采用不同浓度的NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞并筛选出NO的最佳神经营养浓度...
目的探讨一氧化氮(NO)对角膜神经再生的影响作用。方法本研究以亚硝酸钠(NaNO_(2))作为外源性NO供体,在细胞实验中以小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)为研究对象。采用不同浓度的NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞并筛选出NO的最佳神经营养浓度。在动物实验中,将30只SD大鼠随机分组,10只作为NC组,其余20只大鼠建立角膜碱烧伤模型,再随机分为PBS组和NO组,每组10只。从碱烧伤当天开始,PBS组给予PBS治疗,NO组给予10.00μmol•L^(-1) NaNO_(2)与PBS混合治疗。用荧光素钠染色后观察并记录大鼠角膜上皮愈合情况,计算角膜上皮愈合率。用CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光法检测细胞神经元标记物的表达。于大鼠角膜碱烧伤处理后7 d取大鼠角膜上皮组织,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测每组角膜上皮中神经元标志物βⅢ-微管蛋白和神经生长因子(NGF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)的表达水平。结果10.00μmol•L^(-1) NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞24 h后可显著提高细胞活性;使用浓度为0.00μmol•L^(-1)、10.00μmol•L^(-1)、1000.00μmol•L^(-1)的NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞24 h后,测得细胞凋亡率分别为18.60%、13.00%、19.48%;与0.00μmol•L^(-1)组相比,10.00μmol•L^(-1)组细胞凋亡率降低(P<0.01)。与0.00μmol•L^(-1)组相比,10.00μmol•L^(-1)组Neuro-2a细胞βⅢ-微管蛋白、MAP2和SMI312三种神经元标志物相对表达量均增加(均为P<0.05)。碱烧伤后1 d、3 d、7 d,与PBS组相比,NO组大鼠角膜上皮愈合率均升高(均为P<0.05)。与NC组相比,PBS组和NO组大鼠角膜组织各神经营养因子mRNA的相对表达量均增高(均为P<0.05)。与PBS组相比,NO组大鼠角膜组织NGF、GDNF、CNTF mRNA的相对表达量均增高(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示:碱烧伤后7 d,与NC组相比,PBS组和NO组大鼠角膜组织βⅢ-微管蛋白、NGF、GDNF、CNTF的蛋白表达水平均增高(均为P<0.05);与PBS组相比,NO组大鼠角膜组织βⅢ-微管蛋白、NGF、GDNF、CNTF蛋白的表达水平均明显增高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论气体信号分子NO能促进神经细胞的生长以及相关神经元标志物的表达;在大鼠角膜碱烧伤模型中,局部应用外源性NO进行治疗,可对角膜上皮和角膜神经产生明显的营养作用。
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关键词
角膜
碱烧伤
一氧化氮
角膜神经再生
神经
生长因子
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职称材料
激光扫描共焦显微镜对飞秒激光小切口基质透镜取出术后角膜帽神经修复的动态观察
被引量：
5
2
作者
葛庆曼
崔传波
+1 位作者
孔德言
宋丽
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期151-155,共5页
背景飞秒激光小切口基质透镜取出术（SMILE）术后角膜中央部上皮基底膜下神经纤维丛存在再生的过程，但术后不同时间点角膜上皮基底膜下神经纤维的生长方式及角膜帽缘神经修复的动态变化鲜见报道。 目的探讨SMILE术后角膜帽神经损伤情...
背景飞秒激光小切口基质透镜取出术（SMILE）术后角膜中央部上皮基底膜下神经纤维丛存在再生的过程，但术后不同时间点角膜上皮基底膜下神经纤维的生长方式及角膜帽缘神经修复的动态变化鲜见报道。 目的探讨SMILE术后角膜帽神经损伤情况及其修复规律。 方法对2014年4月至2015年4月于山东医学高等专科学校附属眼科医院接受SMILE手术且按时完成随访的近视患者16例32眼进行回顾性分析。术眼于术前及术后1周、1个月、3个月、6个月进行随访检查，采用激光扫描共焦显微镜对术眼角膜中央部及帽缘切口部位进行0.4 mm×0.4 mm区域的扫描，采用Image-Pro Plus图像分析软件对上皮基底膜下神经纤维丛成像最为清晰的图片进行分析，测定术眼角膜中央每平方毫米范围内图像中神经纤维的总长度，即角膜中央神经纤维密度，并观察帽缘神经纤维分支的修复。 结果术眼术前及术后1周、1个月、3个月、6个月角膜中央神经纤维密度分别为（19 687.45±1 147.59）、（10 500.46±1 056.22）、（12 833.40±1 047.98）、（13 564.04±1 173.01）、（14 661.35±941.92）μm/mm2，手术前后不同时间点总体比较差异有统计学意义（F＝319.440，P＝0.000）。术眼术后角膜神经纤维密度均明显低于术前，手术1个月后随时间推移角膜中央神经纤维密度逐渐增加，各时间点间两两比较差异均有统计学意义（均P〈0.01）。术眼术后角膜上皮基底膜下均发现有较丰富的神经纤维丛，形态与术前接近，术后1周角膜帽缘小切口处可见神经纤维的断端及崩解，角膜帽缘非切口处神经纤维越过角膜帽缘伸入角膜帽；术后1个月角膜帽缘切口处可见新生神经芽穿过角膜切口；术后3～6个月角膜帽缘切口处可见明显的神经纤维连续延伸。 结论SMILE术后部分浅层神经纤维未受到损伤，神经纤维的修复呈从角膜帽外向角膜帽内水平放射状再生的模式；术后角膜帽中央神经纤维密度随时间的延长逐渐增加。
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关键词
角膜神经再生
角膜
激光手术
准分子激光/治疗用途
共焦显微镜检查
神经再生
/生
理
眼
神经
/生理
手术瓣
小切口基质透镜取出术
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职称材料
题名
一氧化氮(NO)对角膜神经再生的影响作用
被引量：
2
1
作者
向征
石赟懿
谭钢
机构
南华大学附属第一医院眼科
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2022年第10期769-774,共6页
基金
国家自然科学基金项目(编号:81100648,82171031)
湖南省自然科学基金资助项目(编号:2021JJ30620)
湖南省卫生健康委员会科技计划资助项目(编号:20201966)。
文摘
目的探讨一氧化氮(NO)对角膜神经再生的影响作用。方法本研究以亚硝酸钠(NaNO_(2))作为外源性NO供体,在细胞实验中以小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)为研究对象。采用不同浓度的NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞并筛选出NO的最佳神经营养浓度。在动物实验中,将30只SD大鼠随机分组,10只作为NC组,其余20只大鼠建立角膜碱烧伤模型,再随机分为PBS组和NO组,每组10只。从碱烧伤当天开始,PBS组给予PBS治疗,NO组给予10.00μmol•L^(-1) NaNO_(2)与PBS混合治疗。用荧光素钠染色后观察并记录大鼠角膜上皮愈合情况,计算角膜上皮愈合率。用CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光法检测细胞神经元标记物的表达。于大鼠角膜碱烧伤处理后7 d取大鼠角膜上皮组织,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测每组角膜上皮中神经元标志物βⅢ-微管蛋白和神经生长因子(NGF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)的表达水平。结果10.00μmol•L^(-1) NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞24 h后可显著提高细胞活性;使用浓度为0.00μmol•L^(-1)、10.00μmol•L^(-1)、1000.00μmol•L^(-1)的NaNO_(2)处理Neuro-2a细胞24 h后,测得细胞凋亡率分别为18.60%、13.00%、19.48%;与0.00μmol•L^(-1)组相比,10.00μmol•L^(-1)组细胞凋亡率降低(P<0.01)。与0.00μmol•L^(-1)组相比,10.00μmol•L^(-1)组Neuro-2a细胞βⅢ-微管蛋白、MAP2和SMI312三种神经元标志物相对表达量均增加(均为P<0.05)。碱烧伤后1 d、3 d、7 d,与PBS组相比,NO组大鼠角膜上皮愈合率均升高(均为P<0.05)。与NC组相比,PBS组和NO组大鼠角膜组织各神经营养因子mRNA的相对表达量均增高(均为P<0.05)。与PBS组相比,NO组大鼠角膜组织NGF、GDNF、CNTF mRNA的相对表达量均增高(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示:碱烧伤后7 d,与NC组相比,PBS组和NO组大鼠角膜组织βⅢ-微管蛋白、NGF、GDNF、CNTF的蛋白表达水平均增高(均为P<0.05);与PBS组相比,NO组大鼠角膜组织βⅢ-微管蛋白、NGF、GDNF、CNTF蛋白的表达水平均明显增高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论气体信号分子NO能促进神经细胞的生长以及相关神经元标志物的表达;在大鼠角膜碱烧伤模型中,局部应用外源性NO进行治疗,可对角膜上皮和角膜神经产生明显的营养作用。
关键词
角膜
碱烧伤
一氧化氮
角膜神经再生
神经
生长因子
Keywords
corneal alkali burn
nitric oxide
corneal nerve regeneration
nerve growth factor
分类号
R772.2 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
激光扫描共焦显微镜对飞秒激光小切口基质透镜取出术后角膜帽神经修复的动态观察
被引量：
5
2
作者
葛庆曼
崔传波
孔德言
宋丽
机构
山东医学高等专科学校附属眼科医院屈光手术科
山东医学高等专科学校眼科教研室
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期151-155,共5页
文摘
背景飞秒激光小切口基质透镜取出术（SMILE）术后角膜中央部上皮基底膜下神经纤维丛存在再生的过程，但术后不同时间点角膜上皮基底膜下神经纤维的生长方式及角膜帽缘神经修复的动态变化鲜见报道。 目的探讨SMILE术后角膜帽神经损伤情况及其修复规律。 方法对2014年4月至2015年4月于山东医学高等专科学校附属眼科医院接受SMILE手术且按时完成随访的近视患者16例32眼进行回顾性分析。术眼于术前及术后1周、1个月、3个月、6个月进行随访检查，采用激光扫描共焦显微镜对术眼角膜中央部及帽缘切口部位进行0.4 mm×0.4 mm区域的扫描，采用Image-Pro Plus图像分析软件对上皮基底膜下神经纤维丛成像最为清晰的图片进行分析，测定术眼角膜中央每平方毫米范围内图像中神经纤维的总长度，即角膜中央神经纤维密度，并观察帽缘神经纤维分支的修复。 结果术眼术前及术后1周、1个月、3个月、6个月角膜中央神经纤维密度分别为（19 687.45±1 147.59）、（10 500.46±1 056.22）、（12 833.40±1 047.98）、（13 564.04±1 173.01）、（14 661.35±941.92）μm/mm2，手术前后不同时间点总体比较差异有统计学意义（F＝319.440，P＝0.000）。术眼术后角膜神经纤维密度均明显低于术前，手术1个月后随时间推移角膜中央神经纤维密度逐渐增加，各时间点间两两比较差异均有统计学意义（均P〈0.01）。术眼术后角膜上皮基底膜下均发现有较丰富的神经纤维丛，形态与术前接近，术后1周角膜帽缘小切口处可见神经纤维的断端及崩解，角膜帽缘非切口处神经纤维越过角膜帽缘伸入角膜帽；术后1个月角膜帽缘切口处可见新生神经芽穿过角膜切口；术后3～6个月角膜帽缘切口处可见明显的神经纤维连续延伸。 结论SMILE术后部分浅层神经纤维未受到损伤，神经纤维的修复呈从角膜帽外向角膜帽内水平放射状再生的模式；术后角膜帽中央神经纤维密度随时间的延长逐渐增加。
关键词
角膜神经再生
角膜
激光手术
准分子激光/治疗用途
共焦显微镜检查
神经再生
/生
理
眼
神经
/生理
手术瓣
小切口基质透镜取出术
Keywords
Corneal reinnervation
Cornea surgery, laser
Lasers, excimer/therapeuticconfocal
Nerve regeneration/physiology
Ophthalmic nerve/physiology
Surgical flaps
Smallextractionuse
Microscopy,incision lenticule
分类号
R779.63 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
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被引量
操作
1
一氧化氮(NO)对角膜神经再生的影响作用
向征
石赟懿
谭钢
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2022
2
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职称材料
2
激光扫描共焦显微镜对飞秒激光小切口基质透镜取出术后角膜帽神经修复的动态观察
葛庆曼
崔传波
孔德言
宋丽
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
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