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玻璃体内注射色素上皮源性因子对大鼠早期糖尿病视网膜病变的保护作用 被引量：4
1
作者 江新利 苗慧鹏 +2 位作者 周忠友 赵平 刘岩 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第3期210-215,共6页
目的观察玻璃体内注射色素上皮源性因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）对SD糖尿病大鼠视网膜PEDF、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、炎性相关因子细胞间黏附分子-1（intercellular cell adh... 目的观察玻璃体内注射色素上皮源性因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）对SD糖尿病大鼠视网膜PEDF、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、炎性相关因子细胞间黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）和单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1,MCP-1）以及细胞通透性相关因子紧密连接蛋白-1（zonu-la occludens-1,ZO-1）和蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称Akt）表达的影响,探讨PEDF对早期糖尿病视网膜病变的保护作用。方法选取6~8周龄SD大鼠60只,随机分为4组：正常对照组（CON组）、糖尿病组（DM组）、糖尿病生理盐水注射组（DM＋NS组）和糖尿病PEDF注射组（DM＋PEDF组）。链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型后第1周、2周、3周时,DM＋PEDF组大鼠玻璃体内注射PEDF,而DM＋NS组注射同样体积的生理盐水。第4周时处死大鼠,摘出眼球,进行视网膜组织病理学及电镜观察。并采用免疫组织化学方法检测视网膜PEDF、VEGF、ICAM-1、MCP-1以及ZO-1、Akt的表达情况。结果糖尿病大鼠均造模成功。4周糖尿病病程尚不能导致明显的视网膜新生血管形成。在透射电镜下,DM组大鼠视网膜可见神经节细胞水肿,线粒体肿胀变大,基质肿胀明显,可见大部分或全部的嵴消失,部分双侧膜融合,粗面内质网扩张,而玻璃体内PEDF注射可以明显地改善这一病理改变。DM组大鼠PEDF主要表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层以及内丛状层、光感受器基质以及色素上皮层、脉络膜等部位;VEGF主要表达于神经节细胞层,ICAM-1主要表达在光感受器层,MCP-1主要表达在视网膜内层细胞,包括节细胞层和内核层,ZO-1蛋白主要表达于内核层的细胞以及神经节细胞,Akt主要表达于内丛状层以及脉络膜的细胞浆中。同CON组相比,DM组、DM＋NS组视网膜中PEDF、VEGF表达差异均无统计学意义（均为P〉0.05）,而ICAM-1、MCP-1表达增加,ZO-1、Akt表达减少,差异均有统计学意义（均为P0.05）,但ICAM-1、MCP-1表达减少,ZO-1、Akt表达增多,差异均有统计学意义（均为P〈0.05）。结论 PEDF可以明显地改善糖尿病视网膜病变早期视网膜神经节细胞的损害,通过减少炎性因子和增加细胞连接蛋白而减轻血-视网膜屏障的破坏,从而对早期糖尿病视网膜病变起一定的防治作用。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 色素上皮源性因子 血管内皮生长因子 细胞间黏附分子-1 单核细胞趋化蛋白-1 紧密连接蛋白-1 蛋白激酶B
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色素上皮源性因子基因转染对巨噬细胞诱导大鼠增生性玻璃体视网膜病变的抑制作用及其机制 被引量：1
2
作者 刘姝 王霁雪 +1 位作者 吴雅臻 王淑梅 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1181-1185,1313,共6页
目的：探讨玻璃体腔注射色素上皮源性因子（PEDF）基因真核表达载体在增生性玻璃体视网膜病变（PVR）模型眼内的表达及作用，阐明PEDF基因转染对巨噬细胞诱导的鼠增生性玻璃体视网膜病变的抑制作用。方法：采用阳离子脂质体包裹pcDNA3-P... 目的：探讨玻璃体腔注射色素上皮源性因子（PEDF）基因真核表达载体在增生性玻璃体视网膜病变（PVR）模型眼内的表达及作用，阐明PEDF基因转染对巨噬细胞诱导的鼠增生性玻璃体视网膜病变的抑制作用。方法：采用阳离子脂质体包裹pcDNA3-PEDF，注射到36只SD大鼠玻璃体腔内（每组大鼠的右眼为实验眼，左眼作为阴性对照眼），大鼠分为PVR对照组（仅在玻璃体腔内注射巨噬细胞诱发PVR形成）、盐水对照组（在玻璃体腔内注射生理盐水3d后注射巨噬细胞）和转染组（在玻璃体腔内注射脂质体、pcDNA3-PEDF混合物，3d后注射巨噬细胞），每组12只，应用检眼镜和全视网膜镜观察各组大鼠玻璃体和视网膜情况；HE染色光镜下观察各组大鼠玻璃体、视网膜各层结构和细胞增殖情况。结果：检眼镜和全视网膜镜观察各组大鼠PVR形成情况，玻璃体腔注射巨噬细胞后，与转染组比较，PVR对照组和盐水对照组大鼠可见玻璃体腔内增殖明显。于注射后1周见PVR对照组和盐水对照组开始出现条索样增殖，2～3周时增殖逐渐加重，并开始出现视网膜隆起，4周见全部模型眼均有明显增殖改变，有条索状增殖物牵引网膜，并出现牵拉网脱；转染组大鼠中仅1眼见玻璃体牵拉，视网膜浅脱离，余眼玻璃体无明显混浊，眼底清晰，视网膜平伏。HE染色，转染组大鼠绝大部分实验眼视网膜各层细胞结构清晰，仅发生了视网膜浅脱离的1眼可见视网膜前增殖膜，伴少量炎性细胞浸润；PVR对照组和盐水对照组大鼠玻璃体腔内可见随病程进展的炎症反应，炎症细胞聚集、成纤维细胞增殖、瘢痕形成最终导致眼球萎缩。结论：大鼠玻璃体腔注射转染PEDF可以明显抑制巨噬细胞诱导的PVR形成和发展。 展开更多
关键词 色素上皮源性因子 基因表达 巨噬细胞 增生性玻璃体视网膜病变
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色素上皮源性因子局部注射对糖尿病大鼠视网膜内血管新生、炎症反应及细胞凋亡的影响 被引量：2
3
作者 杨红兰 姚东平 徐瑜玲 《海南医学院学报》 CAS 2018年第15期1391-1394,共4页
目的:研究色素上皮源性因子(PEDF)局部注射对糖尿病大鼠视网膜内血管新生、炎症反应及细胞凋亡的影响。方法:选择成年雄性SD大鼠作为实验动物,随机分为对照组、DM组、PEDF组,DM组、PEDF组通过链脲佐菌素腹腔注射的方式建立糖尿病模型,P... 目的:研究色素上皮源性因子(PEDF)局部注射对糖尿病大鼠视网膜内血管新生、炎症反应及细胞凋亡的影响。方法:选择成年雄性SD大鼠作为实验动物,随机分为对照组、DM组、PEDF组,DM组、PEDF组通过链脲佐菌素腹腔注射的方式建立糖尿病模型,PEDF组给予PEDF局部注射。干预后测定视网膜组织中血管新生分子、炎症反应分子的含量以及细胞凋亡基因的表达量。结果:DM组大鼠视网膜组织中mTOR、VEGF、VEGFR、Ang-2、Tie-2、NF-κB、COX2、iNOS、SDF-1、CXCR4的含量以及ASK1、JNK、p38MAPK、Caspase-3的mRNA表达量均显著高于对照组,Survivin、Bcl-2的mRNA表达量均显著低于对照组;PEDF组大鼠视网膜组织中mTOR、VEGF、VEGFR、Ang-2、Tie-2、NF-κB、COX2、iNOS、SDF-1、CXCR4的含量以及ASK1、JNK、p38MAPK、Caspase-3的mRNA表达量均显著低于DM组,Survivin、Bcl-2的mRNA表达量均显著高于对照组。结论:PEDF局部注射对糖尿病大鼠视网膜内血管新生、炎症反应及细胞凋亡均具有抑制作用。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 色素上皮源性因子 血管新生 炎症反应 细胞凋亡
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色素上皮源性因子与视网膜疾病关系的研究进展 被引量：2
4
作者 黄琬璐 杨庆华 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第8期794-797,共4页
色素上皮源性因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)是一种内源性非抑制性丝氨酸蛋白酶抑制剂,具有营养和保护神经、抗血管生成、抗炎、促进凋亡等多种生物活性,其在维持视网膜正常的生理功能等方面具有重要作用。促血管生成因... 色素上皮源性因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)是一种内源性非抑制性丝氨酸蛋白酶抑制剂,具有营养和保护神经、抗血管生成、抗炎、促进凋亡等多种生物活性,其在维持视网膜正常的生理功能等方面具有重要作用。促血管生成因子水平升高和/或抑制血管形成因子水平降低均有利于新生血管生成。PEDF作为一种血管生成抑制因子,在增生性玻璃体视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、糖尿病视网膜病变和早产儿视网膜病变等眼科疾病的发生发展中具有重要作用。本文就PEDF与视网膜疾病关系的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 色素上皮源性因子 糖尿病视网膜病变 早产儿视网膜病变 年龄相关性黄斑变性 增生性玻璃体视网膜病变
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色素上皮源性因子与糖尿病性视网膜病变 被引量：1
5
作者 李艳 李筱荣 袁佳琴 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2006年第6期669-671,672,共4页
研究表明眼内血管形成刺激因子与抑制因子的失衡是糖尿病性视网膜病变(DR)发生的主要原因,而色素上皮源性因子(PEDF)是新近发现的一种重要的新生血管抑制物,可对抗病理性血管形成,同时具有神经营养及神经保护等其他作用。有研究表明糖... 研究表明眼内血管形成刺激因子与抑制因子的失衡是糖尿病性视网膜病变(DR)发生的主要原因,而色素上皮源性因子(PEDF)是新近发现的一种重要的新生血管抑制物,可对抗病理性血管形成,同时具有神经营养及神经保护等其他作用。有研究表明糖尿病视网膜病变患者眼内PEDF表达发生改变,在DR的发生、发展过程中起一定的促进作用。就PEDF在DR中的表达及作用进行综述。 展开更多
关键词 色素上皮源性因子 糖尿病性视网膜病变 视网膜
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视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗息肉样脉络膜血管病变并发浆液性视网膜色素上皮脱离的疗效和安全性 被引量：1
6
作者 徐恩沛 孙先勇 +3 位作者 高荣玉 刘建东 李南 杨娟娟 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第3期208-212,共5页
目的探讨视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗息肉样脉络膜血管病变(PCV)并发浆液性视网膜色素上皮脱离(sPED)的疗效和安全性。方法选取2019年7月至2021年2月于潍坊眼科医院行视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体... 目的探讨视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗息肉样脉络膜血管病变(PCV)并发浆液性视网膜色素上皮脱离(sPED)的疗效和安全性。方法选取2019年7月至2021年2月于潍坊眼科医院行视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗的PCV并发sPED患者共13例(13眼),所有患眼术前接受过至少3次(每月1次)的玻璃体内抗血管内皮生长因子(VEGF)(雷珠单抗)注射治疗,且治疗无效。检测术前和术后1周、1个月、3个月、6个月患者的最佳矫正视力(BCVA)、中央视网膜厚度(CRT)、黄斑中心凹PED高度及宽度变化,记录术中及术后并发症发生情况。结果术后1周患眼BCVA较术前好转,差异有统计学意义(Z=-3.237,P=0.001);术后1周、1个月、3个月、6个月患眼CRT均较术前变薄,差异均有统计学意义(Z=-3.180、-3.180、-3.110、-3.180,P=0.001、0.001、0.002、0.001);术后1周、1个月、3个月、6个月患眼PED高度和宽度均较术前下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。术前13眼平均接受过(4.15±1.40)次玻璃体内注药(雷珠单抗)治疗,治疗时间为(5.92±3.95)个月(相当于每6周注射1次)。术后随访6个月内13眼平均接受了(2.31±1.97)次玻璃体内重复注射(康柏西普)治疗(相当于每10周注射1次)。偏相关分析结果显示,术后6个月时患眼BCVA提高量与CRT的降低量呈弱正相关(r=0.416,P=0.203);术后6个月时患眼BCVA提高量与PED高度和宽度的变化量无明显相关性(r=0.218、0.209,P=0.520、0.538)。术后1个月时,9眼出现PED复发或不同程度的视网膜神经上皮下积液,后期配合玻璃体内重复注射康柏西普治疗,PED均改善。术后6个月时,3眼黄斑中心凹下PED完全消失,视网膜解剖完全复位,1眼黄斑区视网膜仍存在活动性渗出。13眼术后随访期间均未出现全身及严重眼部并发症。结论视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗PCV并发sPED能够安全有效地降低患者CRT和改善PED,减少PED长期存在对视网膜的损害,但对术后6个月时患者BCVA的提高无明显帮助。 展开更多
关键词 视网膜下抽液 息肉样脉络膜血管病变 浆液性视网膜色素上皮脱离 血管内皮生长因子
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热休克转录因子1对视网膜色素上皮细胞抗氧化和抗衰老的调控作用
7
作者 蒋明君 尚国辉 +4 位作者 张凤妍 殷凡响 薛梦姣 胡延忠 彭旭艳 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期417-427,共11页
目的探讨热休克转录因子1(HSF1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)抗氧化和抗衰老的作用。方法利用成簇规律间隔短回文重复序列及相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除人ARPE-19细胞系中HSF 1基因,构建并获得2种HSF1缺失ARPE细胞株(AR... 目的探讨热休克转录因子1(HSF1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)抗氧化和抗衰老的作用。方法利用成簇规律间隔短回文重复序列及相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除人ARPE-19细胞系中HSF 1基因,构建并获得2种HSF1缺失ARPE细胞株(ARPE/Hsf1-/-),分别命名为H8、H9细胞株。取野生型、H8和H9细胞株,应用DHE探针染色结合流式分析技术测定细胞内活性氧簇(ROS)含量,应用流式细胞分析方法测定细胞周期;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定不同培养时间点细胞活力值;采用结晶紫染色实验测定细胞相对存活率;采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色实验检测衰老细胞比率;采用Western blot法检测各细胞株中热休克蛋白(HSP)70、HSP27、聚集素(CLU)、p53、p21和白细胞介素(IL)-1β蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR法测定各细胞株中p53、p21、IL-6、IL-8、IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)mRNA表达水平。比较各细胞株在不同热休克处理条件下和HSP90抑制剂IPI504处理下热休克反应相关蛋白相对表达量,比较各细胞株不同浓度H_(2)O_(2)处理后相对存活率,比较各细胞株经或未经ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理后p21蛋白相对表达量。结果基因测序显示H8和H9细胞株成功携带突变基因,Western blot检测结果显示H8、H9细胞株不表达HSF1蛋白,HSF1在ARPE-19细胞中被成功敲除。与野生型细胞株相比,H8、H9细胞株中的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);各细胞株HSP90蛋白相对表达水平总体比较,差异无统计学意义(F=0.29,P>0.05)。在不同热休克刺激和IPI504诱导下野生型细胞株中HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与野生型细胞株相比,H8和H9细胞株的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著低于相应处理的野生型细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与野生型细胞株相比,H8和H9细胞株培养24、48、72和96 h的细胞活力均显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与野生型细胞株比较,H8和H9细胞株G1期细胞百分比显著升高,细胞周期抑制因子p53、p21的mRNA和蛋白相对表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),SA-β-gal染色阳性细胞比率显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.001);衰老相关炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、MCP1 mRNA相对表达量显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.001)。H8和H9细胞株ROS含量明显高于野生型细胞株,差异均有统计学意义(均P<0.001);H8和H9细胞株经NAC处理后p21蛋白相对表达量较未经NAC处理明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。H8和H9细胞株200、400、600、800μmol/L H 2O 2处理条件下细胞相对存活率明显低于野生型细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论敲除HSF1可下调HSP的表达,激活ROS/P53/P21通路,诱导RPE细胞衰老,并增加RPE对氧化应激刺激的敏感性。HSF1在RPE细胞中可能具有抗衰老和抗氧化调控作用。 展开更多
关键词 热休克转录因子1 年龄相关性黄斑变性 细胞衰老 视网膜色素上皮 衰老治疗 氧化应激
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色素上皮衍生因子对大鼠慢性高眼压视网膜神经节细胞的保护作用 被引量：3
8
作者 吕炳健 高晓唯 +2 位作者 王瑞夫 严宏 王百忍 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第5期427-431,共5页
目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对慢性高眼压条件下大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的作用。方法雌性SD大鼠36只,随机分为高眼压+PEDF组(A组)、高眼压+去离子水组(B组)和假手术+PEDF组(C组),A组、B组模型的制作应用巩膜浅层静脉烧烙法建立... 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对慢性高眼压条件下大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的作用。方法雌性SD大鼠36只,随机分为高眼压+PEDF组(A组)、高眼压+去离子水组(B组)和假手术+PEDF组(C组),A组、B组模型的制作应用巩膜浅层静脉烧烙法建立慢性高眼压模型,C组仅剪开球结膜,不烧烙巩膜浅静脉。A组、C组在模型建立后即刻用10μL微量注射器于大鼠角膜缘后2mm处刺入玻璃体腔,抽出玻璃体2μL,再向玻璃体腔内注射0.05g/L重组大鼠PEDF2μL,B组同法注入等量的去离子水。在3d和14d后处死动物,摘除眼球,将视网膜组织行冰冻切片,用TUNEL法及Fluoro-Jade(FJ)荧光染色检测各组RGCs的凋亡和变性。结果术后3d、14d时A组和B组眼压均明显升高,与同时间点C组相比差异均有统计学意义(P<0.05);各组术后3d和14d间的眼压比较差异均无统计学意义(P>0.05)。TUNEL检测显示,A组、C组3d和14dRGCs的凋亡数目均明显少于同时间点B组(P<0.05),A组14d的凋亡细胞数明显少于3d(P<0.05)。FJ荧光染色结果显示,A组、C组3d和14d变性RGCs数均明显少于B组(P<0.05),A组14d的变性细胞数较3d时明显减少(P<0.05)。结论玻璃体腔注射PEDF可减少慢性高眼压大鼠RGCs的凋亡和变性。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 高眼压 视网膜神经节细胞 凋亡
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脑源性神经营养因子治疗视网膜色素变性的研究进展 被引量：2
9
作者 闫博婧 李根林 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期267-271,共5页
脑源性神经营养因子（BDNF）是一种由脑组织合成并广泛分布于中枢神经系统的小分子碱性蛋白。研究发现，BDNF对视网膜神经节细胞（RGCs）、视网膜感光细胞（RPCs）和视网膜色素上皮（RPE）细胞均有保护、营养及抗凋亡作用。视网膜色素... 脑源性神经营养因子（BDNF）是一种由脑组织合成并广泛分布于中枢神经系统的小分子碱性蛋白。研究发现，BDNF对视网膜神经节细胞（RGCs）、视网膜感光细胞（RPCs）和视网膜色素上皮（RPE）细胞均有保护、营养及抗凋亡作用。视网膜色素变性（RP）是由于RPCs及RPE细胞凋亡引起的视网膜退行性疾病。RP动物模型证实了BDNF的长期给药对于RP的治疗价值。然而BDNF在体内的半衰期较短，且无法跨越血－视网膜屏障由循环系统输送到视网膜，这给BDNF用于RP的治疗带来了挑战。为了使BDNF在眼内可以稳定持续地释放，多种新型给药方式已被尝试，包括基因工程技术、细胞移植技术、高分子材料缓释系统及滴眼液等。本文就BDNF对RP治疗的研究现状及BDNF的新型给药方式做一综述。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 视网膜色素变性 治疗
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孔源性视网膜脱离模型视网膜色素上皮细胞CD44的表达变化 被引量：2
10
作者 肖青 曾水清 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期89-92,共4页
目的研究兔孔源性视网膜脱离模型视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞CD44的表达,及其与孔源性视网膜脱离病理变化的关系。方法90只健康有色兔随机分为5组建立不同模型:Ⅰ组:孔源性视网膜脱离组,28只眼;Ⅱ组:孔源性视... 目的研究兔孔源性视网膜脱离模型视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞CD44的表达,及其与孔源性视网膜脱离病理变化的关系。方法90只健康有色兔随机分为5组建立不同模型:Ⅰ组:孔源性视网膜脱离组,28只眼;Ⅱ组:孔源性视网膜脱离伴玻璃体积血组,27只眼;Ⅲ组:单纯视网膜裂孔组,18只眼;Ⅳ组:玻璃体切除组,17只眼;Ⅴ组:空白对照组,90只眼。分别于手术后不同时间点(1、3、7、14、21、28d)摘取各组兔眼眼球,用酶消化和机械分离法分离RPE细胞,制成细胞悬液,荧光免疫法标记CD44,用流式细胞仪检测各组RPE细胞膜上CD44的表达水平。结果Ⅰ组和Ⅱ组模型眼均发生视网膜脱离,Ⅲ组和Ⅳ组模型眼未发生视网膜脱离。Ⅰ、Ⅱ组中RPE细胞CD44的表达明显高于Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,Ⅰ、Ⅱ组RPE细胞CD44表达水平在术后1d即增高,7d左右达到高峰,继而下降,Ⅰ、Ⅱ组与Ⅴ组RPE细胞CD44的表达差异有极显著性意义(均P<0.01),Ⅲ、Ⅳ组与Ⅴ组RPE细胞CD44表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论孔源性视网膜脱离中RPE细胞CD44表达增强,RPE细胞CD44的表达变化与孔源性视网膜脱离的病理发展关系密切。 展开更多
关键词 孔源性视网膜脱离 视网膜色素上皮细胞 CD44 流式细胞术
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碱性成纤维细胞生长因子对体外培养新生牛视网膜色素上皮细胞生长周期的影响 被引量：3
11
作者 张鲲 何守志 《中国康复理论与实践》 CSCD 2006年第1期39-40,共2页
目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养新生牛视网膜色素上皮(RPE)细胞生长周期的影响。方法采用流式细胞仪测定bFGF4ng/ml作用下,不同时间RPE细胞的细胞周期情况。结果bFGF组与对照组比较,两组细胞各周期比例随时间变化趋势... 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养新生牛视网膜色素上皮(RPE)细胞生长周期的影响。方法采用流式细胞仪测定bFGF4ng/ml作用下,不同时间RPE细胞的细胞周期情况。结果bFGF组与对照组比较,两组细胞各周期比例随时间变化趋势相同且同步,但bFGF组的变化幅度均大于对照组。结论bFGF可以促进新生牛RPE细胞自G1期进入S期,从而促进细胞增殖。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 视网膜色素上皮细胞 细胞周期 增殖
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人酸性成纤维细胞生长因子对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮细胞坏死的保护作用 被引量：1
12
作者 海广范 詹合琴 +2 位作者 牛秉轩 崔建敏 刘巨源 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第2期128-131,共4页
目的研究人酸性成纤维细胞生长因子(human acidic fibroblast growth factor,haFGF)对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞的保护作用。方法用0.2mmol.L-1过氧化氢培养hRPE细胞36h制作hRPE细胞坏死模型为模型... 目的研究人酸性成纤维细胞生长因子(human acidic fibroblast growth factor,haFGF)对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞的保护作用。方法用0.2mmol.L-1过氧化氢培养hRPE细胞36h制作hRPE细胞坏死模型为模型组,用1mg.L-1haFGF预培养hRPE细胞12h、24h、48h,并设置空白对照组,用台盼蓝染色在倒置显微镜下观察细胞坏死情况,用MTT法检测haFGF预作用hRPE细胞不同时间细胞的死亡率,并用8g.L-1琼脂糖凝胶电泳检测haFGF不同时间对hRPE细胞完整性的影响。结果模型组细胞死亡率为(36.97±2.81)%,空白对照组细胞死亡率为(1.05±0.04)%,haFGF预作用细胞12h、24h、48h细胞死亡率分别为(32.50±4.06)%、(19.77±3.68)%、(26.45±3.19)%。其中,模型组与空白对照组细胞死亡率相比、haFGF预作用24h与模型组相比差异均有显著统计学意义(均为P<0.01),而haFGF预作用12h、48h细胞死亡率与模型组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。台盼蓝染色结果显示haFGF预作用细胞24h,hRPE蓝染细胞核数明显减少,而预作用12h染色细胞核数减少不显著,预作用48h蓝染细胞核数显著增加。琼脂糖凝胶电泳显示:模型组细胞DNA呈现"涂布"状,说明细胞坏死明显,haFGF预作用细胞24h"涂布"状基体消失,提示hRPE细胞DNA完整性尚好,而预作用12h和48hDNA"涂布"状仍明显存在。结论1mg.L-1的haFGF可以显著拮抗过氧化氢对hRPE细胞的损伤,预作用24h时haFGF对hRPE细胞的保护作用最佳。 展开更多
关键词 人视网膜色素上皮细胞 酸性成纤维细胞生长因子 过氧化氢
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表皮生长因子治疗碘酸钠诱导视网膜色素上皮变性扫描电镜观察
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作者 陈勤 鲍玉洲 +2 位作者 高保真 周全 韩秀娴 《眼科研究》 CSCD 1996年第4期243-246,共4页
通过扫描电镜观察碘酸钠对家兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的破坏及表皮生长因子(EGF)对其影响。参照 Cohen 法从胎儿组织中提取人表皮生长因子(hEGF);给家兔静脉注入碘酸钠,分别间隔48小时和72小时再注射一次;第7天取出部分眼球,扫描电镜... 通过扫描电镜观察碘酸钠对家兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的破坏及表皮生长因子(EGF)对其影响。参照 Cohen 法从胎儿组织中提取人表皮生长因子(hEGF);给家兔静脉注入碘酸钠,分别间隔48小时和72小时再注射一次;第7天取出部分眼球,扫描电镜观察 RPE 细胞外形及数量,余右眼玻璃体内注入hEGF 提取液,左眼注等量生理盐水;7天后,取出眼球观察。结果间隔48小时组,RPE 细胞损伤较重,hEGF对其影响不大;间隔72小时组,RPE 细胞损伤较轻,hEGF 治疗组残余 RPE 细胞较多。表明 hEGF 对损伤程度较轻的 RPE 细胞可能有促修复作用。 展开更多
关键词 表皮生长因子 视网膜 色素上皮变性 碘酸钠
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肺炎克雷伯菌的毒力特性及其对视网膜色素上皮细胞炎症相关因子表达的影响 被引量：6
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作者 惠靖雯 倪焰 +1 位作者 栾洁 高大庆 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第9期829-831,共3页
目的比较高毒力肺炎克雷伯菌与经典肺炎克雷伯菌的毒力特性,探讨不同毒力的肺炎克雷伯菌对视网膜色素上皮细胞炎症相关因子表达的影响。方法收集8株高毒力肺炎克雷伯菌及8株经典肺炎克雷伯菌,分为高毒力肺炎克雷伯菌组和经典肺炎克雷伯... 目的比较高毒力肺炎克雷伯菌与经典肺炎克雷伯菌的毒力特性,探讨不同毒力的肺炎克雷伯菌对视网膜色素上皮细胞炎症相关因子表达的影响。方法收集8株高毒力肺炎克雷伯菌及8株经典肺炎克雷伯菌,分为高毒力肺炎克雷伯菌组和经典肺炎克雷伯菌组,通过黏液丝实验、PCR扩增rmp A基因检测、细菌抗血清杀伤实验及细菌抗吞噬实验比较两组肺炎克雷伯菌的毒力特性;两组细菌分别感染视网膜色素上皮细胞,通过ELISA检测视网膜色素上皮细胞内单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达水平。结果高毒力肺炎克雷伯菌组细菌的高黏液表型、rmp A基因表达水平、抗血清杀伤能力及抗巨噬细胞吞噬能力均显著高于经典肺炎克雷伯菌组;两组细菌分别感染视网膜色素上皮细胞后,高毒力肺炎克雷伯菌组MCP-1和IL-6含量分别为(1177.38±227.17)ng·L^(-1)、(118.63±40.39)ng·L^(-1),经典肺炎克雷伯菌组分别为(669.50±62.01)ng·L^(-1)、(53.75±14.04)ng·L^(-1);视网膜色素上皮细胞MCP-1和IL-6表达水平高毒力肺炎克雷伯菌组分别是经典肺炎克雷伯菌组的1.76倍和2.20倍,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论相对于经典肺炎克雷伯菌,高毒力肺炎克雷伯菌具有高黏液表型、抗血清杀伤能力及抗巨噬细胞吞噬能力强的特性,且感染视网膜色素上皮细胞后,可引起更严重的炎症反应。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 高毒力 视网膜色素上皮细胞 炎症因子
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视网膜色素变性组织内脑源性神经营养因子动态变化的实验研究 被引量：2
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作者 张姗姗 李根林 刘月月 《眼科新进展》 CAS 2008年第4期252-255,共4页
目的观察视网膜变性组织内脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）的mRNA和蛋白的表达情况，研究视网膜早期的生长发育规律。进而探讨BDNF在视网膜生长发育以及变性过程中的可能作用。方法出生后0～4周龄的rd... 目的观察视网膜变性组织内脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）的mRNA和蛋白的表达情况，研究视网膜早期的生长发育规律。进而探讨BDNF在视网膜生长发育以及变性过程中的可能作用。方法出生后0～4周龄的rd小鼠（病变组）和C57BL小鼠（正常对照组）在每个时间点各取10只处死后，即刻摘除眼球，显微手术操作取出视网膜组织。提取mRNA及蛋白。采取RT-PCR和Western blotting方法分别对不同时间点、不同组别的视网膜组织内BDNF mRNA和蛋白质的表达水平进行测定。结果BDNF mRNA表达在病变组呈现明显高于正常组的趋势（PN0周、2周、3周、4周时，2组相比P=0．000），但蛋白质表达低于正常组（PN0周、1周、2周、3周、4周时，2组相比P=0．000）。结论BDNF在视网膜变性过程中有保护视网膜感光细胞的作用。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 视网膜色素变性 RT-PCR WESTERN BLOTTING
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LED光源对人视网膜色素上皮细胞分泌单核细胞趋化因子-1和白细胞介素-8的影响 被引量：2
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作者 彭素芬 韩泉洪 +1 位作者 李丽华 南莉 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第3期201-205,共5页
目的观察LED光源对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial cells,RPE)细胞增生及分泌单核细胞趋化因子-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的影响。方法传代培养的ARPE细胞分别置于500 ... 目的观察LED光源对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial cells,RPE)细胞增生及分泌单核细胞趋化因子-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的影响。方法传代培养的ARPE细胞分别置于500 lux、1000 lux的LED白光、蓝光、绿光中分别照射6 h、12 h、24 h,并分别设置对照组避光培养。采用MTT法检测RPE细胞的增生值(A_(460)),分别使用Real-time PCR和ELISA法检测各组RPE细胞MCP-1和IL-8的表达水平。结果 MTT法检测细胞增生值显示:蓝光、白光各组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05),白光500 lux 24 h和1000 lux 12 h、24 h,蓝光各照度6h、12 h、24 h,RPE细胞增生值均较对照组低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),细胞增生值随着白光和蓝光光照强度及光照时间的增加逐渐下降。RT-PCR结果显示,各组RPE细胞中MCP-1和IL-8的mRNA比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。其中白光500 lux 24 h和1000 lux 24 h,蓝光500 lux 12 h、24 h和1000 lux 12 h、24 h,绿光500 lux 24 h和1000 lux 24 h,各组RPE细胞中MCP-1和IL-8的mRNA表达水平较对照组高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA结果显示,白光500 lux 24 h和1000 lux 12 h、24 h,蓝光500 lux 12 h、24 h和1000 lux 12 h、24 h,绿光500 lux 24 h、1000 lux 24 h,与对照组相比,RPE细胞MCP-1、IL-8分泌量增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);蓝光在500 lux 24 h和1000 lux 12 h、24 h,MCP-1和IL-8分泌量较白光、绿光增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 LED白光、蓝光和绿光能以照度和时间依赖性影响ARPE细胞增生及分泌MCP-1和IL-8,以蓝光更为显著。 展开更多
关键词 人视网膜色素上皮细胞 单核细胞趋化因子-1 白细胞介素-8 光损伤
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无动物源性成分培养体系快速诱导人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞的分化 被引量：1
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作者 刘秋慧 王菁 +4 位作者 田蓉 王肖 曹迪 卢晶 罗燕 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期484-488,共5页
背景 随着视网膜色素上皮（RPE）细胞视网膜下腔移植治疗年龄相关性黄斑变性（AMD）研究的开展,需要优化无动物源性成分（xeno-free）培养体系快速定向诱导人胚胎干细胞（hESCs）向RPE细胞分化以满足日渐增长的科研及临床需要. 目的 建... 背景 随着视网膜色素上皮（RPE）细胞视网膜下腔移植治疗年龄相关性黄斑变性（AMD）研究的开展,需要优化无动物源性成分（xeno-free）培养体系快速定向诱导人胚胎干细胞（hESCs）向RPE细胞分化以满足日渐增长的科研及临床需要. 目的 建立xeno-free培养体系,优化快速诱导hESCs向RPE细胞分化的方法. 方法 将hESCs克隆团接种至Vitronectin XFTM,在培养液中加入50 ng/ml noggin、10 ng/ml DKK-1以及10 ng/ml胰岛素样生长因子-1（IGF-1）培养2d,第2～4天将培养液中noggin质量浓度减至10 ng/ml,并加入5 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）,第4～6天移除培养液中的noggin和bFGF,第8～14天培养液中加入1 μmol/L CHIR99021.倒置显微镜下观察ESCs在分化为RPE细胞过程中的形态变化,免疫荧光染色检测细胞内特异性抗原的表达以对分化细胞进行鉴定,实时荧光定量PCR （qRT-PCR）法检测细胞分化过程中RPE细胞特异性蛋白mRNA的相对表达变化量.结果 分化培养第14天,部分细胞呈多角形并呈现铺路石样排列,且细胞内可见色素颗粒;培养第35天,诱导分化的细胞内表达RPE细胞特异性抗原Mitf及RPE65;培养至第60天,细胞内富含黑色素颗粒且呈规则六边形.与诱导分化前比较,诱导分化第7天和第14天hES-RPE细胞中Mitf mRNA的表达量分别增加了（3.43±2.77）倍和（8.91±2.83）倍,而RPE65 mRNA的表达量分别增加了（14.60±3.94）倍和（87.16±9.32）倍,分化第7天和第14天细胞中的Mitf mRNA和RPE65mRNA的相对表达量均明显高于分化前,差异均有统计学意义（均P＜0.05）. 结论 hESCs可在含尼克酰胺、DKK-1、noggin、IGF-1和CHIR99021的xeno-free优化培养体系中快速分化为RPE细胞. 展开更多
关键词 胚胎干细胞/药物作用 细胞培养技术/方法 细胞分化 视网膜色素上皮 培养液/药物作用 细胞株 人 无动物源性
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色素上皮细胞衍生因子基因治疗视网膜及脉络膜新生血管性疾病研究进展 被引量：4
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作者 刘彦 李筱荣 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2006年第3期330-333,共4页
色素上皮细胞衍生因子(p igm ent ep ithelium-derived factor,PEDF)是一种相对分子质量为50 000的分泌蛋白,属于丝氨酸超家族的一员。近年来研究发现PEDF具有多种生物学功效,包括抗新生血管,神经营养及神经保护功能。PEDF是最有效的内... 色素上皮细胞衍生因子(p igm ent ep ithelium-derived factor,PEDF)是一种相对分子质量为50 000的分泌蛋白,属于丝氨酸超家族的一员。近年来研究发现PEDF具有多种生物学功效,包括抗新生血管,神经营养及神经保护功能。PEDF是最有效的内源性眼部新生血管抑制物。PEDF对于治疗血管增生性疾病及视网膜变性性疾病具有广阔的前景,基因转移为眼内组织治疗药物的持续传递提供了有效途径。就近年来关于PEDF基因治疗视网膜及脉络膜疾病的研究进展给以综述。 展开更多
关键词 色素上皮细胞衍生因子 基因治疗 新生血管 视网膜和脉络膜疾病
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血管内皮生长因子与色素上皮衍生因子在糖尿病猕猴视网膜病变早变早期的表达 被引量：17
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作者 陈镜妃 罗启慧 +6 位作者 黄超 刘文涛 曾文 高琪 陈苹 陈兵 陈正礼 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1217-1221,共5页
目的检测糖尿病视网膜病变早期猕猴视网膜中血管内皮生长因子(VEGF)及色素上皮衍生因子(PEDF)的表达,探讨其意义。方法通过空腹血糖值糖化血红蛋白水平、眼底彩照情况及糖尿病病程,确定入选3只利用高脂饲料诱导成功且处于糖尿病视网膜... 目的检测糖尿病视网膜病变早期猕猴视网膜中血管内皮生长因子(VEGF)及色素上皮衍生因子(PEDF)的表达,探讨其意义。方法通过空腹血糖值糖化血红蛋白水平、眼底彩照情况及糖尿病病程,确定入选3只利用高脂饲料诱导成功且处于糖尿病视网膜病变早期的猕猴及3只年龄相当的健康猕猴。行实时荧光定量PCR及免疫组织化学检测,观察猕猴视网膜内VEGF和PEDF表达情况。结果处于糖尿病视网膜病变早期的猕猴视网膜内VEGF在mRNA表达水平(P<0.05)及蛋白表达水平(P<0.05)均明显高于对照组猕猴,糖尿病组猕猴视网膜内PEDF mRNA表达量相比对照组显著减少(P<0.01),PEDF蛋白表达与其mRNA表达趋势一致(P<0.05)。结论猕猴糖尿病视网膜早期,出现VEGF的上调和PEDF的下调,对糖尿病视网膜病变的发生具有一定的提示意义,可为早期糖尿病视网膜病变提供辅助诊断。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变早期 猕猴 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子
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高度近视对糖尿病豚鼠视网膜血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子表达的影响 被引量：10
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作者 王爽 梁申芝 +1 位作者 万光明 徐亚娟 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期398-402,共5页
背景 研究发现糖尿病合并高度近视患者较少发生糖尿病视网膜病变（DR）,高度近视对DR的发生和发展可能具有保护作用.DR的主要病理基础是新生血管的形成,而血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）在DR的发生和发展过程中具... 背景 研究发现糖尿病合并高度近视患者较少发生糖尿病视网膜病变（DR）,高度近视对DR的发生和发展可能具有保护作用.DR的主要病理基础是新生血管的形成,而血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）在DR的发生和发展过程中具有重要作用. 目的 观察高度近视合并糖尿病豚鼠视网膜中VEGF和PEDF表达的变化,探讨高度近视对DR的影响.方法 将出生3d的豚鼠48只采用随机数字表法随机分为正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组,每组12只.高度近视组豚鼠用半透明眼罩行右眼遮盖,构建高度近视动物模型;采用60 mg/kg的链脲佐菌素（STZ）腹腔内注射4次,每3天1次,制作糖尿病豚鼠模型;糖尿病合并高度近视组豚鼠采用半透明眼罩联合STZ制作糖尿病合并高度近视模型.造模成功后行常规苏木精-伊红染色观察视网膜结构,免疫组织化学染色检测视网膜中VEGF和PEDF的表达情况,应用Biosens数字成像分析系统分析阳性反应部位的平均吸光度（A）值. 结果 正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组的屈光度分别为（＋0.25±177;0.07）、（-7.50±177;0.04）、（＋0.25±177;0.03）和（-7.50±177;0.02）D;空腹血糖分别为（5.3±177;0.1）、（5.1±177;0.2）、（19.7±177;0.4）和（18.5±177;0.3）mmol/L.各组豚鼠均造模成功.与正常对照组相比,高度近视组视网膜组织变薄,神经节细胞数目减少;糖尿病组视网膜组织结构疏松、肿胀;糖尿病合并高度近视组视网膜组织变薄,结构肿胀.正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组VEGF阳性反应部位平均A值分别为128.61 ±177;5.57、118.24±177;2.59、155.60±177;9.70和135.15±177;5.22,各组间总体比较差异有统计学意义（F=17.365,P=0.032）,其中糖尿病合并高度近视组豚鼠视网膜中VEGF表达水平（A值）明显低于糖尿病组,差异有统计学意义（t=5.210,P＜0.05）;PEDF阳性反应部位平均A值分别为145.57±177;8.35、149.54±177;6.20、127.71 ±177;2.45和1 37.53±177;7.38,各组间总体比较差异有统计学意义（F=19.210,P=0.019）,其中糖尿病合并高度近视组豚鼠视网膜中PEDF水平明显高于糖尿病组,差异有统计学意义（t=4.521,P＜0.05）.结论 高度近视合并糖尿病的豚鼠视网膜中VEGF表达量下调,而PEDF表达上调,这可能是高度近视眼不易发生DR的主要机制. 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 高度近视 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子
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