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缺氧和高糖对视网膜胶质细胞色素上皮衍生因子表达的影响 被引量:6
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作者 穆华 张晓梅 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期5-8,共4页
目的探讨缺氧和高糖对体外培养的大鼠视网膜胶质细胞色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法采用RT-PCR和Western blot法分别对缺氧和高糖条件下大鼠视网膜胶质细胞PEDF mRNA及蛋白表达水平进行测定。结果缺氧1h、3h,PEDF表达无明显变... 目的探讨缺氧和高糖对体外培养的大鼠视网膜胶质细胞色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法采用RT-PCR和Western blot法分别对缺氧和高糖条件下大鼠视网膜胶质细胞PEDF mRNA及蛋白表达水平进行测定。结果缺氧1h、3h,PEDF表达无明显变化。缺氧6h后PEDF mRNA及蛋白表达明显下降,缺氧24h下降最明显(P<0.01)。不同浓度葡萄糖(30、40、50mmol/L)培养48h后,PEDF的表达水平均明显下降(P<0.05)。结论体外培养的大鼠视网膜胶质细胞在缺氧和高糖环境下PEDF表达明显下降。PEDF表达水平的下调可能参与了糖尿病视网膜病变新生血管的形成过程。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 视网膜胶质细胞 缺氧 葡萄糖
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人视网膜胶质细胞的原代培养与鉴定方法 被引量:1
2
作者 林少芬 毛羽翔 +5 位作者 李斌 张平 郑健樑 罗燕 胡洁 唐仕波 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期17-19,共3页
背景人视网膜胶质细胞在视网膜增生性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功地培养了人视网膜胶质细胞,但方法学有待进一步改进以达到细胞收获量更大的目的。目的建立快速、收获量大且纯度高的视网膜胶质细胞的培养方法,对目标细... 背景人视网膜胶质细胞在视网膜增生性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功地培养了人视网膜胶质细胞,但方法学有待进一步改进以达到细胞收获量更大的目的。目的建立快速、收获量大且纯度高的视网膜胶质细胞的培养方法,对目标细胞的抗原表达特点进行分析。方法取正常人角膜移植供体眼球分离视网膜组织,采用质量分数2%胰蛋白酶和质量分数0.133%胶原酶Ⅵ用二步法消化获取人视网膜胶质细胞,用含质量分数10%胎牛血清的人内皮细胞培养液,其中添加内皮细胞生长因子(β-ECGF)和肝素钠,对分离的细胞进行体外培养,培养皿用纤维黏连蛋白(FN)包被以促进人视网膜胶质细胞贴壁。观察收获的目标细胞的形态特征,采用活体显微镜下形态学观察、常规组织学观察法观察目标细胞的生长,同时采用免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(Vimentin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100、CD34、Ⅷ因子在细胞中的表达以鉴定目标细胞。结果应用胰蛋白酶、胶原酶二步消化法可成功获取人视网膜胶质细胞,原代培养的细胞72h贴壁,第9~10天细胞达到融合状态呈花瓣状;常规组织学观察显示细胞核呈鲜亮蓝色,细胞质(盘膜)呈淡红色,培养细胞GFAP、Vimentin呈强阳性表达,NSE、S100、CD34、Ⅷ因子相关抗原表达呈阴性反应。结论应用胰蛋白酶、胶原蛋白酶消化法以及利用10%胎牛血清的人内皮细胞培养基,添加生长因子和肝素钠,并用FN包被培养皿进行体外培养可达到快速、大量分离和纯化人视网膜胶质细胞的目的,鉴定结果提示培养的目标细胞为人视网膜胶质细胞,其形态与以往报道的有所不同,具体特点尚需进一步研究。 展开更多
关键词 视网膜胶质细胞 细胞培养 鉴定
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慢性高眼压大鼠视网膜胶质细胞TNF-α及其受体的表达 被引量:2
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作者 凌志红 孙兴怀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1193-1198,共6页
目的:通过研究大鼠慢性高眼压模型视网膜胶质细胞TNF-α及其受体的表达,探索胶质细胞在青光眼视网膜神经节细胞损伤中的作用机制。方法:用结扎上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-Fu的方法建立大鼠慢性高眼压模型。在模型建立后1月,做眼... 目的:通过研究大鼠慢性高眼压模型视网膜胶质细胞TNF-α及其受体的表达,探索胶质细胞在青光眼视网膜神经节细胞损伤中的作用机制。方法:用结扎上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-Fu的方法建立大鼠慢性高眼压模型。在模型建立后1月,做眼球冰冻切片,行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察视网膜TNF-α-GFAP、TNF-α-OX42、TNFR-1-GFAP以及TNFR-1-NeuN的双标染色情况。结果:结扎上巩膜静脉联合术后结膜下注射5-Fu可诱导较长时间稳定高眼压,4周内6只高眼压眼眼压均大于22mmHg;正常大鼠视网膜未见明显TNF-α以及TNF-R1阳性染色,1个月高眼压大鼠TNF-α在视网膜的表达高于正常对照组,并且有TNF-α-GFAP、TNF-α-OX42的共表达;在慢性高眼压情况下,TNF-R1在视网膜内层的表达也高于正常对照组,并且在视网膜内层有TNF-R1与GFAP的共表达,但TNF-R1与神经节细胞层NeuN(神经元特异性核蛋白)没有共表达。结论:在慢性高眼压情况中,活化的视网膜胶质细胞来源的TNF-α可能在神经节细胞损伤中发挥重要作用。 展开更多
关键词 高眼压 大鼠 视网膜胶质细胞 肿瘤坏死因子 受体 肿瘤坏死因子
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人视网膜胶质细胞切线方向收缩的测定 被引量:1
4
作者 陆融 管怀进 《眼科新进展》 CAS 2001年第1期18-20,共3页
目的 测定细胞离体培养中的人视网膜胶质细胞切线方向收缩。方法 人视网膜胶质细胞提取并用 GFAP和 Vimentin确定细胞属性 ,培养到第二代时 ,将细胞置于胶原凝胶上 ,培养 0~ 2 4h后测定胶原凝胶厚度。结果 人视网膜胶质细胞培养至 ... 目的 测定细胞离体培养中的人视网膜胶质细胞切线方向收缩。方法 人视网膜胶质细胞提取并用 GFAP和 Vimentin确定细胞属性 ,培养到第二代时 ,将细胞置于胶原凝胶上 ,培养 0~ 2 4h后测定胶原凝胶厚度。结果 人视网膜胶质细胞培养至 6 h后可使胶原凝胶厚度明显减小 ,12 0 0 0细胞培养 2 4h可使凝胶厚度减小 15 % ,而对照组 (无细胞组 )凝胶厚度则无明显改变。结论 本结果提示第二代人视网膜胶质细胞有产生切线方向收缩的能力 ,为 展开更多
关键词 视网膜胶质细胞 切线方向收缩 特发性黄斑裂孔
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长期酒精暴露诱导胰岛素抵抗对视网膜胶质细胞的影响
5
作者 王志新 闫志勇 +3 位作者 杨峰 常成 马钊 高晓群 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期95-102,共8页
目的:本文旨在探讨长期酒精暴露诱导胰岛素抵抗对小鼠视网膜胶质细胞的损伤以及IGF-1可能的作用。方法:选取野生型(wild type,WT)小鼠48只,酒精暴露建立动物模型,用血糖仪测定血糖浓度,用ELISA测定血胰岛素和IGF-1浓度,并计算胰岛素抵... 目的:本文旨在探讨长期酒精暴露诱导胰岛素抵抗对小鼠视网膜胶质细胞的损伤以及IGF-1可能的作用。方法:选取野生型(wild type,WT)小鼠48只,酒精暴露建立动物模型,用血糖仪测定血糖浓度,用ELISA测定血胰岛素和IGF-1浓度,并计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMAIR),利用免疫荧光染色观察视网膜胶质细胞的变化。结果:长期酒精暴露引起小鼠胰岛素抵抗(P<0.05),酒精暴露后出现视网膜胶质细胞的损伤如星形胶质细胞数量减少,Müller细胞GS染色减弱,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:长期酒精暴露可以诱导小鼠胰岛素抵抗和视网膜胶质细胞损伤,IGF-1浓度和胰岛素抵抗指数呈负相关,提示IGF-1可以作为胰岛素抵抗综合征的标志物。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 酒精 视网膜胶质细胞 免疫荧光技术 小鼠
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视网膜胶质细胞与增生性玻璃体视网膜病变形成的关联 被引量:1
6
作者 李雪(综述) 李晓华(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1197-1201,共5页
增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是视网膜脱离手术的常见并发症,也是致盲的重要原因。除了视网膜色素上皮细胞之外,视网膜胶质细胞也是参与PVR形成及发展的主要细胞。视网膜胶质细胞包括Müller细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞。视网... 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是视网膜脱离手术的常见并发症,也是致盲的重要原因。除了视网膜色素上皮细胞之外,视网膜胶质细胞也是参与PVR形成及发展的主要细胞。视网膜胶质细胞包括Müller细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞。视网膜胶质细胞不仅能发生活化,改变细胞形态,还能分泌生长因子和细胞因子,合成细胞外基质,参与PVR的形成;并且视网膜胶质细胞分泌的因子及合成的细胞外基质又促进了视网膜胶质细胞的增生,从而加速了PVR病变的发展。此外,非编码RNA可通过视网膜胶质细胞参与PVR的调控。本文就视网膜胶质细胞活化、星形胶质细胞分泌的生长因子、胶质细胞分泌的生长因子及细胞因子、胶质细胞合成的细胞外基质与PVR形成的相互作用及非编码RNA对胶质细胞和PVR的作用进行阐述。 展开更多
关键词 视网膜胶质细胞 增生性玻璃体视网膜病变 上皮-间质转化
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激活的小胶质细胞在大鼠视网膜缺血再灌损伤模型中的作用 被引量:8
7
作者 李娟娟 李燕 汤志伟 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第1期9-14,共6页
目的探讨活化的小胶质细胞在视网膜缺血再灌注损伤过程中的作用。方法前房灌注法建立视网膜缺血再灌注动物模型,在损伤发生后2 h、12 h、24 h、48 h、72 h,采用免疫组织化学染色方法检测特异性抗原标志物CD68的表达,观察活化小胶质细胞... 目的探讨活化的小胶质细胞在视网膜缺血再灌注损伤过程中的作用。方法前房灌注法建立视网膜缺血再灌注动物模型,在损伤发生后2 h、12 h、24 h、48 h、72 h,采用免疫组织化学染色方法检测特异性抗原标志物CD68的表达,观察活化小胶质细胞的分布、活化程度等,同时观察相应时间点的视网膜超微结构变化。结果对照组中视网膜小胶质细胞主要位于神经节细胞层。缺血再灌注损伤后2 h组视网膜小胶质细胞的分布部位、表达量等基本与对照组相同;缺血再灌注损伤后12 h组视网膜中CD68+细胞表达增多,内丛状层可见阳性细胞。缺血再灌注损伤后24 h组CD68+细胞表达明显增多,部分向视网膜外层迁移。缺血再灌注损伤后48 h组进入视网膜外层的CD68+细胞多数出现于视网膜内丛状层、内核层、外丛状层。缺血再灌注损伤后72 h组活化小胶质细胞数量达到最高水平。视网膜超微结构显示:缺血再灌注损伤后12 h组开始出现损伤表现,视网膜神经节细胞间隙扩大、光感受器细胞外节膜盘疏松变形、可见散在小胶质细胞;缺血再灌注损伤后24 h组病变继续加重,小胶质细胞数量明显增多;缺血再灌注损伤后72 h组病变继续加重,视网膜神经节细胞数量明显减少,细胞核膜肿胀溶解,细胞器溶解,大鼠视网膜神经节细胞层内可见凋亡小体、小胶质细胞,证明了小胶质细胞对光感受器的损伤作用。结论视网膜缺血再灌注损伤出现明显小胶质细胞活化,活化的小胶质细胞在视网膜超微结构的损伤中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 视网膜胶质细胞 缺血再灌注损伤 CD68 电镜 免疫组织化学
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视网膜色素上皮细胞条件培养液促进视网膜神经胶质细胞增生 被引量:4
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作者 富名水 张皙 +2 位作者 张喜梅 王方 顾青 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第6期486-488,共3页
目的 观察体外培养的视网膜色素上皮细胞条件培养液对视网膜神经胶质细胞生长的影响。 方法 用不同稀释度的视网膜条件培养液培养视网膜神经胶质细胞,细胞计数法观察细胞数量的变化;MTT法测定对细胞增生活性(吸光度A值)的影响;流式细胞... 目的 观察体外培养的视网膜色素上皮细胞条件培养液对视网膜神经胶质细胞生长的影响。 方法 用不同稀释度的视网膜条件培养液培养视网膜神经胶质细胞,细胞计数法观察细胞数量的变化;MTT法测定对细胞增生活性(吸光度A值)的影响;流式细胞仪观察细胞周期的变化。结果 随着视网膜条件培养液稀释度的增加,视网膜胶质细胞的数量明显增加:稀释度为1:32时,细胞数为(40 854±427)/ml,稀释度为1:2时,细胞数为(59 360±491)/ml;吸光度A值升高(稀释度为1:16、1:8、1:2时,细胞增殖率分别为13.8%、32.9%、41.4%);进入S期的细胞明显增加(稀释度为1:32时,S期细胞数为30.72%,稀释度为1:32时,S期细胞数为56.50%),显示体外培养视网膜色素上皮细胞条件培养液促进视网膜神经胶质细胞增生。结论视网膜色素上皮细胞条件培养液促进视网膜神经胶质细胞增生,细胞间的相互作用对于PVR等的产生和发展是非常重要的。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 RPE RG 视网膜神经胶质细胞 条件培养液 细胞增生 流式细胞仪 细胞周期 MTT法 增生性玻璃体视网膜病变 PVR
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视网膜神经胶质细胞及其分泌的细胞因子与视网膜病变 被引量:8
9
作者 周媛 曹霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期996-998,共3页
视网膜内常见的神经胶质细胞包括星形胶质细胞、Müller细胞(放射状胶质细胞)和小胶质细胞。最近研究表明,这些神经胶质细胞能释放多种细胞因子,包括VEGF、bFGF、TGF、IGF、TNF及IL等,这些细胞因子不仅在调节视网膜神经细胞生长发... 视网膜内常见的神经胶质细胞包括星形胶质细胞、Müller细胞(放射状胶质细胞)和小胶质细胞。最近研究表明,这些神经胶质细胞能释放多种细胞因子,包括VEGF、bFGF、TGF、IGF、TNF及IL等,这些细胞因子不仅在调节视网膜神经细胞生长发育中起着重要作用,而且是参与视网膜病变的重要因素。 展开更多
关键词 视网膜神经胶质细胞 细胞因子 视网膜病变
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EGFR反义寡核苷酸对人视网膜神经胶质细胞增生的影响 被引量:3
10
作者 富名水 张皙 +1 位作者 邱庆华 顾青 《眼科新进展》 CAS 2002年第4期239-241,共3页
目的 观察表皮生长因子受体 (epiderm al growth factor receptor,EGFR)反义寡核苷酸 (antisense oligonucleotide,ASODN)对人视网膜神经胶质 (retinal glial,RG)细胞增生的影响。方法 人视网膜神经胶质细胞的原代培养 ,用脂质体 (L i... 目的 观察表皮生长因子受体 (epiderm al growth factor receptor,EGFR)反义寡核苷酸 (antisense oligonucleotide,ASODN)对人视网膜神经胶质 (retinal glial,RG)细胞增生的影响。方法 人视网膜神经胶质细胞的原代培养 ,用脂质体 (L ipofectin)作为载体将修饰型 EGFR ASODN转染 RG细胞后 ,MTT法测细胞增生活性 (吸光度 A值 )的变化 ,流式细胞仪观察细胞周期的变化。结果  EGFR ASODN转染 RG细胞后 ,细胞的增生活性降低 ,对 RG细胞生长增生的抑制率约为 46 .5 % ,进入 S期的细胞减少。结论  EGFR A-SODN能够抑制人 展开更多
关键词 视网膜神经胶质细胞 表皮生长因子受体 反义寡核苷酸 脂质体 细胞增生
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LPS刺激对大鼠视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40表达的影响 被引量:1
11
作者 陈燕 程瑜 +2 位作者 焦秦 闵颖君 钟一声 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期527-529,共3页
目的研究脂多糖(LPS)刺激对CD80、CD86、CD40在大鼠视网膜小胶质细胞上表达的影响,探讨视网膜小胶质细胞在视网膜和视神经病变中与T细胞活化的关系。方法分离培养大鼠视网膜小胶质细胞并进行OX42染色鉴定,当细胞培养达80%融合状态时分... 目的研究脂多糖(LPS)刺激对CD80、CD86、CD40在大鼠视网膜小胶质细胞上表达的影响,探讨视网膜小胶质细胞在视网膜和视神经病变中与T细胞活化的关系。方法分离培养大鼠视网膜小胶质细胞并进行OX42染色鉴定,当细胞培养达80%融合状态时分为正常培养组和LPS刺激组。采用RT-PCR法检测两组细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达,硝酸还原法和ELISA法检测两组细胞一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNFα-)的分泌量。结果RT-PCR检测显示,LPS刺激组的视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达较正常培养组显著增加,两组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。正常培养组的视网膜小胶质细胞有少量NO和TNFα-分泌,LPS刺激组的小胶质细胞培养上清液中NO和TNFα-的分泌量较正常组显著增加[(18.10±1.57)μmol/Lvs(1.55±0.15)μmol/L,(51.07±4.30)pg/mLvs(2.37±0.31)pg/mL],两组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论培养的大鼠视网膜小胶质细胞有共刺激分子表达,LPS刺激后表达上调,提示视网膜小胶质细胞可能与T细胞活化有关。 展开更多
关键词 CD80 CD86 CD40 视网膜胶质细胞 脂多糖
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视网膜下液体对人视网膜神经胶质细胞生长的刺激作用与PVR关系 被引量:2
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作者 罗贤民 姜德咏 聂爱光 《眼科研究》 CSCD 1996年第3期174-176,共3页
研究了28例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液(SubretinalFluidSRF)对人视网膜神经胶质细胞(RetinalGlialRG)生长的刺激作用。结果表明:所有标本通常具有刺激RG细胞增殖能力,但存在较大范围的... 研究了28例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液(SubretinalFluidSRF)对人视网膜神经胶质细胞(RetinalGlialRG)生长的刺激作用。结果表明:所有标本通常具有刺激RG细胞增殖能力,但存在较大范围的活动性,增殖率范围在基线上36.4~181.8%,SRF促RG细胞增殖能力与PVR程度呈平行关系,PVR在C级以上,促RG细胞增殖活力显著性加强(P<0.01)。 展开更多
关键词 视网膜下液体 视网膜神经胶质细胞 PVR
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黄芩素对缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中脯氨酸羟化酶2表达的抑制作用 被引量:5
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作者 杨宁 路强 +2 位作者 袁梦克 张晗 崔巍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期990-996,共7页
背景 脯氨酸羟化酶2(PHD2)是缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)降解酶,能够调控缺氧诱导的新生血管形成过程中血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)等多种促血管生成因子的表达。黄芩素对PHD2有抑制作用,了解其对缺氧诱导... 背景 脯氨酸羟化酶2(PHD2)是缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)降解酶,能够调控缺氧诱导的新生血管形成过程中血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)等多种促血管生成因子的表达。黄芩素对PHD2有抑制作用,了解其对缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中PHD2表达的抑制作用有助于了解相关新生血管性眼病的机制及其防治。 目的 观察PHD2在缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中的表达变化,探讨黄芩素对PHD2过表达的抑制作用及其意义。 方法 将出生48 h以内SPF级SD乳鼠用体积分数10%水合氯醛麻醉后以颈椎脱臼法处死,分离双侧视网膜后采用组织块培养法分离培养鼠视网膜神经胶质细胞,采用兔抗羊胶质纤维酸性蛋白(GFAP)对神经胶质细胞进行鉴定。将培养的细胞分为正常对照组、CoCl2组和CoCl2+黄芩素组,其中正常对照组细胞进行常规培养,CoCl2组细胞培养液中添加200 μmol/L CoCl2以制备缺氧细胞模型,CoCl2+黄芩素组细胞培养液中添加200 μmol/L CoCl2和50 μmol/L黄芩素溶液。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞增生情况;采用免疫荧光染色法检测各组鼠视网膜神经胶质细胞中PHD2和VEGF的表达及其定位;采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中PHD2和VEGF mRNA的相对表达量;采用Western blot法定量检测各组细胞中PHD2和VEGF蛋白的表达量。 结果 各组鼠视网膜神经胶质细胞增生值(吸光度,A值)总体比较差异有统计学意义(F=132.05,P=0.00),其中CoCl2组鼠视网膜神经胶质细胞增生值明显高于正常对照组和CoCl2+黄芩素组,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。免疫荧光检测显示,正常对照组细胞中PHD2和VEGF均呈弱表达,CoCl2组细胞中PHD2和VEGF均呈强阳性表达,CoCl2+黄芩素组细胞中PHD2和VEGF表达较CoCl2组减弱。正常对照组、CoCl2组和CoCl2+黄芩素组细胞中PHD2 mRNA相对表达量分别为0.366±0.034、0.894±0.015和0.445±0.017,PHD2蛋白相对表达量分别为131.27±2.61、140.12±4.29和133.14±2.11,VEGF mRNA相对表达量分别为1.346±0.008、3.465±0.048和2.264±0.073,VEGF蛋白相对表达量分别为532.25±19.92、601.13±10.21和537.34±5.96,组间总体比较差异均有统计学意义(PHD2:F=905.89、43.18,均P〈0.01;VEGF:F=27.13、185.79,均P〈0.01),其中CoCl2组PHD2和VEGF mRNA及蛋白相对表达量均明显高于正常对照组和CoCl2+黄芩素组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。 结论 体外低氧环境促进鼠视网膜神经胶质细胞增生,同时诱导视网膜神经胶质细胞中PHD2和VEGF的表达上调。黄芩素可有效抑制低氧环境下PHD2过表达引起的神经胶质细胞的增生和相关促血管生成因子的表达,PHD2有望成为缺氧性视网膜血管新生疾病的防治靶点。 展开更多
关键词 脯氨酸羟化酶2 缺氧 视网膜神经胶质细胞 血管内皮生长因子 增生 黄芩素
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抗增生药物对人视网膜神经胶质细胞的抑制作用 被引量:1
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作者 蔡季平 周韵秋 魏锐利 《眼科研究》 CSCD 2000年第4期316-318,共3页
目的寻找抑制视网膜、玻璃体内细胞增生的有效药物;明确抗增生药物秋水仙碱、道诺霉素和5-氟尿嘧啶(5-Fu)对体外培养的人视网膜胶质(retinal glia,RG)细胞的作用。方法用 MTT法测定秋水仙碱(0.5~16... 目的寻找抑制视网膜、玻璃体内细胞增生的有效药物;明确抗增生药物秋水仙碱、道诺霉素和5-氟尿嘧啶(5-Fu)对体外培养的人视网膜胶质(retinal glia,RG)细胞的作用。方法用 MTT法测定秋水仙碱(0.5~16.0μg/ml)、道诺霉素(0.1~3.2μg/ml)和5-Fu(0.5~16.0μg/ml)对体外培养人RG细胞的作用。结果秋水仙碱(1.0~16.0μg/ml)、道诺霉素(0.2~3.20μg/ml)和 5-Fu(1.0~16.0μg/ml)3组药物对培养细胞均有抑制作用,与对照组均差别显著(P<0.01),ID_(50)分别为3.11μg/ml,0.79μg/ml和5.23μg/ml。结论秋水仙碱、道诺霉素和5-Fu对RG细胞有明显抑制作用。 展开更多
关键词 视网膜神经胶质细胞 增生性视网膜病变 药物疗法
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SD大鼠视网膜小胶质细胞原代培养方法的改良
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作者 陈雪 张培 曹安民 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2009年第4期303-305,F0003,共4页
目的对经典的原代视网膜小胶质细胞体外纯化培养方法进行简单的改良以提高细胞产量。方法在视网膜小胶质细胞原代培养过程中以McCarthy等的经典方法为基础,寻找适当的初始种植密度,并在初次振荡分离后继续培养以获得多次产出,使用免疫... 目的对经典的原代视网膜小胶质细胞体外纯化培养方法进行简单的改良以提高细胞产量。方法在视网膜小胶质细胞原代培养过程中以McCarthy等的经典方法为基础,寻找适当的初始种植密度,并在初次振荡分离后继续培养以获得多次产出,使用免疫细胞化学染色方法进行小胶质细胞纯度鉴定。结果视网膜小胶质细胞原代培养最宜初始种植密度为1×106/mL,多次分离纯化获得的视网膜小胶质细胞均达到97%以上的纯度。结论视网膜小胶质细胞原代培养过程中,以适当的初始种植密度和多次振荡分离方法可在保证有效纯度的基础上提高细胞产量。 展开更多
关键词 视网膜胶质细胞 原代培养 种植密度 多次分离 纯化
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在人羊膜上培养牛视网膜神经胶质细胞的初步探讨
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作者 李雯霖 姜德咏 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第4期390-392,共3页
目的 研究在具有完整基底膜的人羊膜上培养牛视网膜神经胶质 (RG)细胞的可能性。方法 用常规培养液进行原代及传代牛RG细胞的培养 ,并以GFAP及S 10 0染色进行免疫组化鉴定。取第 3代或第 4代牛RG细胞 ,以 1 0× 10 5/mL密度接种... 目的 研究在具有完整基底膜的人羊膜上培养牛视网膜神经胶质 (RG)细胞的可能性。方法 用常规培养液进行原代及传代牛RG细胞的培养 ,并以GFAP及S 10 0染色进行免疫组化鉴定。取第 3代或第 4代牛RG细胞 ,以 1 0× 10 5/mL密度接种于羊膜基底膜面进行培养 ,并进行上述同样的鉴定。结果  ( 1)原代RG细胞GFAP及S 10 0染色阳性细胞分别为 86 2 %和 83 5 % ,传代RG至第 3代时GFAP及S 10 0染色阳性细胞百分数明显增加 ,分别为 92 8% ,90 3 %。 ( 2 )培养的牛RG细胞的羊膜基底膜面大部分细胞阳性着色 ,其GFAP和S 10 0染色阳性细胞分别为 91 4%和90 1%。结论 牛RG细胞可以在人羊膜基底膜面生长。 展开更多
关键词 羊膜 视网膜神经胶质细胞 组织培养
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视网膜小胶质细胞参与糖尿病视网膜神经变性的分子机制研究进展 被引量:1
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作者 陈蓬 邹文军 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第9期749-752,共4页
糖尿病视网膜神经变性(DRN)是由高血糖引起的视网膜神经血管单位破坏和血视网膜屏障功能障碍的一类疾病,神经元凋亡是该疾病的主要特征,可造成患者与视觉相关的生活质量下降。视网膜小胶质细胞(RMC)是视网膜胶质细胞的主要种群之一,主... 糖尿病视网膜神经变性(DRN)是由高血糖引起的视网膜神经血管单位破坏和血视网膜屏障功能障碍的一类疾病,神经元凋亡是该疾病的主要特征,可造成患者与视觉相关的生活质量下降。视网膜小胶质细胞(RMC)是视网膜胶质细胞的主要种群之一,主要参与视网膜神经元的发育,并维持视网膜神经元的功能。已有研究表明RMC的功能改变与DRN密切相关,靶向RMC可减少视网膜神经元损伤并减缓DRN的发生发展。本文就RMC参与DRN及其调控靶点和治疗药物展开综述,以期提供更多有效的防治策略。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜神经变性 视网膜胶质细胞 神经元凋亡
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羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞表皮生长因子受体表达的影响
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作者 郝玉华 马景学 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第12期1086-1088,共3页
目的研究羊膜对兔视网膜Mller细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响及其机制。方法取出生15d新西兰白兔视网膜Mller细胞进行原代培养及传代,采用神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S-100进行细胞鉴定。0.25%胰蛋白酶、0.05%EDTA酶消化取... 目的研究羊膜对兔视网膜Mller细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响及其机制。方法取出生15d新西兰白兔视网膜Mller细胞进行原代培养及传代,采用神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S-100进行细胞鉴定。0.25%胰蛋白酶、0.05%EDTA酶消化取第3代Mller细胞,实验组加0.5mL羊膜匀浆上清液继续培养12h,采用免疫组织化学法检测羊膜诱导和非诱导条件下兔视网膜Mller细胞EGFR表达的变化并进行分析。结果培养的兔视网膜Mller细胞GFAP和S-100表达阳性,透射电镜检查细胞质内可见8~10nm的中间丝。未经羊膜诱导的视网膜Mller细胞EGFR有少量表达,经羊膜诱导12h后,EGFR表达明显增多,2组灰度值分别为571588.80±67862.68和1000352.00±98386.22,差异有统计学意义(t=4.035,P<0.01)。结论经羊膜诱导后可促进培养的兔视网膜Mller细胞EGFR的表达。 展开更多
关键词 羊膜 视网膜胶质细胞 表皮生长因子受体
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兔视网膜Mller细胞的原代培养 被引量:1
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作者 郝玉华 马景学 +1 位作者 修贺明 徐铮 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第4期269-272,共4页
目的探索体外培养兔视网膜Mller细胞的有效方法。方法采用酶消化法从乳兔视网膜获取Mller细胞,通过振荡和反复洗涤使之纯化。采用免疫组织化学技术和透射电镜对传代Mller细胞进行鉴定。结果培养24h后即有部分细胞贴壁生长,72h后... 目的探索体外培养兔视网膜Mller细胞的有效方法。方法采用酶消化法从乳兔视网膜获取Mller细胞,通过振荡和反复洗涤使之纯化。采用免疫组织化学技术和透射电镜对传代Mller细胞进行鉴定。结果培养24h后即有部分细胞贴壁生长,72h后贴壁细胞进一步增多。通过振荡吹打可使附着于Mller细胞上的神经元脱落。20~25d后细胞接近融合,呈三角形或不规则形。传代后细胞经1周达到融合。培养细胞GFAP阳性率在95%以上。电镜观察显示:细胞内含有线粒体、粗面内质网、核糖体及8~10nm的中间丝。结论利用酶消化法可成功分离兔视网膜Mller细胞,通过振荡和吹打洗涤,可使之纯化。 展开更多
关键词 细胞培养 视网膜神经胶质细胞 Mūeller细胞
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米诺环素对视网膜神经保护作用的研究进展 被引量:3
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作者 熊海波 刘苏 《眼科新进展》 CAS 2007年第5期390-392,共3页
米诺环素(minocycline)是一种第2代人工半合成的四环素类药,口服吸收好,脂溶性高,可穿透血-脑屏障,对人安全,已在中枢神经系统和视网膜疾病中表现出显著的神经保护作用。已知视网膜小胶质细胞在多种视网膜疾病中均有激活并参与病变发展... 米诺环素(minocycline)是一种第2代人工半合成的四环素类药,口服吸收好,脂溶性高,可穿透血-脑屏障,对人安全,已在中枢神经系统和视网膜疾病中表现出显著的神经保护作用。已知视网膜小胶质细胞在多种视网膜疾病中均有激活并参与病变发展,而米诺环素神经保护作用机制主要为抑制小胶质细胞和caspase-3激活。本文对米诺环素神经保护作用机制及在视网膜疾病中的保护作用做一综述。 展开更多
关键词 米诺环素 凋亡 视网膜胶质细胞 视网膜疾病
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