TXNIP/Trx-1通路在调控大鼠视网膜缺血-再灌注后小胶质细胞极化中的作用

1

作者 赵玉泽 王艺文 +5 位作者 张丽军 付忻澔 肖培伦 王晓莉 刘建亮 赵岩松 《眼科新进展》 北大核心 2025年第3期177-182,201,共7页

目的 探讨硫氧还原蛋白互作蛋白(TXNIP)/硫氧还原蛋白-1(Trx-1)通路在调控大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)后视网膜小胶质细胞极化的作用机制,为视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)的防治提供新思路。方法 健康雄性成年Sprague Dawley大鼠42只,随... 目的 探讨硫氧还原蛋白互作蛋白(TXNIP)/硫氧还原蛋白-1(Trx-1)通路在调控大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)后视网膜小胶质细胞极化的作用机制,为视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)的防治提供新思路。方法 健康雄性成年Sprague Dawley大鼠42只,随机分为假手术(Sham)组、模型(RIRI)组及TXNIP siRNA干预(siRNA)组,均以右眼为实验眼。RIRI组和siRNA组大鼠采用前房高眼压法建立RIRI模型,siRNA组大鼠于建模前3 d玻璃体内注射TXNIP siRNA。建模后24 h,HE染色观察各组大鼠视网膜组织病理变化,Brn-3a免疫组织化学染色计数视网膜神经节细胞(RGCs)数。建模后6 h、24 h、72 h及7 d,免疫组织化学染色动态观察RIRI组大鼠视网膜TXNIP^(+)细胞数;建模后24 h,免疫荧光双重染色结合Western blot检测各组大鼠视网膜小胶质细胞极化及TXNIP、Trx-1蛋白表达的变化。结果 HE染色结果显示,建模后24 h,RIRI组、siRNA组与Sham组相比视网膜细胞排列紊乱,视网膜内层水肿增厚。Brn-3a免疫组织化学染色结果显示,建模后24 h,RIRI组及siRNA组Brn-3a^(+)细胞数均显著少于Sham组,且siRNA组Brn-3a^(+)细胞数显著多于RIRI组,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。TXNIP免疫组织化学染色结果显示,RIRI后6 h TXNIP^(+)细胞数开始增多,RIRI后24 h达到较高水平,后逐渐降低。Western blot检测结果显示,建模后24 h,RIRI组与siRNA组TXNIP蛋白表达均显著高于Sham组,Trx-1蛋白表达均显著低于Sham组,且siRNA组TXNIP蛋白表达显著低于RIRI组,Trx-1蛋白表达显著高于RIRI组,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。免疫荧光双重染色结果显示,建模后24 h,siRNA组大鼠视网膜Iba1^(+)/CD206^(+)细胞数显著多于RIRI组,且Iba1^(+)/CD16^(+)细胞数显著少于RIRI组(均为P<0.05);RIRI组和siRNA组大鼠视网膜Iba1^(+)/TXNIP^(+)细胞数均显著多于Sham组,Iba1^(+)/Trx-1^(+)细胞数均显著少于Sham组,siRNA组Iba1^(+)/TXNIP^(+)细胞数显著少于RIRI组,Iba1^(+)/Trx-1^(+)细胞数显著多于RIRI组(均为P<0.05)。结论 大鼠RIR可通过激活TXNIP/Trx-1通路,诱导大鼠视网膜小胶质细胞活化,调控小胶质细胞极化,导致RIRI。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注损伤 小胶质细胞极化 TXNIP/Trx-1通路 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

葡萄籽原花青素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：8

2

作者 孙明 雷荣 黄偲璇 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第4期313-317,322,共6页

目的探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)的保护作用及其机制。方法将120只大鼠分为假手术组(Sham组,灌胃生理盐水)、模型组(RIRI组... 目的探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)的保护作用及其机制。方法将120只大鼠分为假手术组(Sham组,灌胃生理盐水)、模型组(RIRI组,眼内灌注加压法制备,灌胃生理盐水)及GSPE低、中、高剂量组(GSPE-L组、GSPE-M组、GSPE-H组,灌胃0.13 g·kg-1 GSPE、0.25 g·kg-1 GSPE、0.50 g·kg-1 GSPE)、阳性对照组(α-LA组,灌胃100 mg·kg-1α-硫酸锌)。采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠视网膜组织形态学变化情况;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、iNOS、白细胞介素-6(IL-6)水平,氮蓝四唑显色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性;双抗体夹心法检测血清丙二醛(MDA)水平,铁离子还原法检测活性氧(ROS)水平;TUNEL法检测各组大鼠视网膜组织神经细胞凋亡;免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜组织中核因子E2-相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、Caspase-3表达情况;Western blot法检测各组大鼠视网膜组织中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p-ERK1/2表达情况。结果GSPE-L组、GSPE-M组、GSPE-H组、α-LA组、RIRI组和Sham组视网膜厚度分别为(139.31±11.43)μm、(127.05±12.73)μm、(113.16±13.25)μm、(110.58±13.47)μm、(161.48±10.26)μm、(92.35±16.54)μm,Nrf2蛋白阳性表达率分别为(29.93±4.21)%、(34.06±5.17)%、(43.12±7.23)%、(45.35±7.46)%、(11.86±3.19)%、(52.27±8.36)%,ERK1/2蛋白磷酸化水平分别为0.41±0.05、0.62±0.07、0.89±0.09、0.92±0.05、0.23±0.04、1.16±0.25,RIRI组与Sham组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),GSPE-L组、GSPE-M组、GSPE-H组、α-LA组与RIRI组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且GSPE表现出剂量依赖性。与Sham组相比,RIRI组神经细胞凋亡率、Caspase-3阳性表达率、TNF-α、IL-6、iNOS、MDA、ROS水平显著升高,HO-1阳性表达率、SOD水平显著降低(均为P<0.05);与RIRI组相比,GSPE-L组、GSPE-M组、GSPE-H组、α-LA组神经细胞凋亡率、Caspase-3阳性表达率、TNF-α、IL-6、iNOS、MDA、ROS水平显著降低,HO-1阳性表达率、SOD水平显著升高,且GSPE表现出剂量依赖性剂量依赖性(均为P<0.05)。结论GSPE能够抑制视网膜组织神经细胞凋亡,保护视网膜组织,其作用机制可能与ERK/Nrf2/HO-1通路活化有关。 展开更多

关键词 葡萄籽原花青素 视网膜缺血-再灌注损伤 细胞外调节蛋白激酶 核因子E2-相关因子2 血红素加氧酶-1

在线阅读 下载PDF 职称材料

微小RNA-181a与视网膜节细胞在视网膜缺血-再灌注中的关系及其作用机制探讨 被引量：3

3

作者 刘巾男 何宇 +1 位作者 张军军 范玮 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期985-990,共6页

背景视网膜缺血-再灌注（RIR）损伤是眼科常见病理改变之一，但其发病机制尚未明确。目的探讨大鼠RIR模型中微小RNA-181a（miR-181a）与视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡之间的关系及可能的靶向机制。方法构建68只SD大鼠RIR模型，按随机数... 背景视网膜缺血-再灌注（RIR）损伤是眼科常见病理改变之一，但其发病机制尚未明确。目的探讨大鼠RIR模型中微小RNA-181a（miR-181a）与视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡之间的关系及可能的靶向机制。方法构建68只SD大鼠RIR模型，按随机数字表法随机分为对照组和造模后即刻组、造模后24h组及造模后72h组，每组17只，根据MiRanda、Targetscan和miRBase3个靶基因数据库的共同预测结果，选取肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作为miR-181a的下游靶基因研究对象，通过免疫荧光标记法Westernblot及实时荧光定量PCR法观察miR-181a、TNF·仅在各组的表达情况及其与RGCs凋亡的关系。结果RGCs计数在造模后24h和72h显著减少，与对照组比较差异有统计学意义（P〈O．001）。各造模组miR-181a表达量随造模时间明显下降，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。此外，随RIR时间的延长，miR-181a的表达量及RGCs的数量均逐渐减少，两者呈正相关（r=0．995，P=0．005）。TNF-α主要在内层视网膜表达，与miR-181a分布重叠；RIR即刻至24h之间TNF-α表达明显升高，与RGCs计数及miR-181a表达的变化趋势相反，但总体相关性分析无统计学意义。结论在RIR模型中，miR-181a可能参与RGCs凋亡的调控，TNF-α是其可能的下游靶基因之一，RIR24h前是重要的干预时机。深入研究miR-181a及其靶向基因有助于探寻新的神经保护治疗靶点。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注 视网膜神经节细胞 肿瘤坏死因子-Α 微小RNA-181a

在线阅读 下载PDF 职称材料

Edaravone对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠Bcl-2和Bax表达的影响 被引量：3

4

作者 梁冰 曹永亮 +3 位作者 郭爱华 李娜娜 韩延燕 曲群 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第4期316-318,共3页

目的研究Edaravone对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischem ia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜神经节细胞Bc-l2和Bax表达的影响。方法健康Wistar大鼠36只随机分为3组:空白对照组、模型组和Edaravone治疗组。空白对照组不做任何处... 目的研究Edaravone对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischem ia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜神经节细胞Bc-l2和Bax表达的影响。方法健康Wistar大鼠36只随机分为3组:空白对照组、模型组和Edaravone治疗组。空白对照组不做任何处理,模型组和Edaravone治疗组均采用前房加压法建立大鼠RIRI模型,Edaravone治疗组于缺血前30min行腹腔注射Edaravone(3mg.kg-1),恢复灌注30min后再行腹腔注射Edaravone(3mg.kg-1)。免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜缺血-再灌注后24h视网膜神经节细胞Bc-l2和Bax的表达情况。结果空白对照组未见Bc-l2和Bax表达。再灌注后24h,模型组Bc-l2表达为0.406±0.022,Bax表达为0.661±0.034,Bc-l2/Bax为0.609±0.015;Edaravone治疗组Bc-l2表达为0.581±0.031,Bax表达为0.491±0.017,Bc-l2/Bax为1.104±0.094。与模型组比较,Edaravone治疗组Bc-l2表达明显增强(P<0.05),Bax表达明显减弱(P<0.05),Bc-l2/Bax比值升高(P<0.05)。结论 Edaravone对RIRI大鼠视网膜神经节细胞有明显的保护作用。 展开更多

关键词 EDARAVONE 视网膜缺血-再灌注损伤 Bc-l2 BAX

在线阅读 下载PDF 职称材料

BMSC移植对视网膜缺血-再灌注损伤凋亡相关基因c-fos/c-jun表达的影响 被引量：4

5

作者 韩延燕 曹永亮 +2 位作者 梁冰 曲群 李娜娜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第3期209-212,共4页

目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)移植对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)凋亡相关基因c-fos/c-jun表达的影响。方法将52只健康成熟SD大鼠随机分为正常组(4只)、模... 目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)移植对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)凋亡相关基因c-fos/c-jun表达的影响。方法将52只健康成熟SD大鼠随机分为正常组(4只)、模型组(24只)、BMSC组(24只),将后两组按再灌注后时间1 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h分为6个时间点,前房加压建立RIRI模型,干细胞贴壁法培养BMSC,RIRI模型建立1 h后模型组与BMSC组分别行玻璃体腔注射等量PBS缓冲液、BMSC细胞悬液。在再灌注后6个时间点过度麻醉处死大鼠,立即摘取术眼,通过免疫组织化学检测各组视网膜中c-fos/c-jun的阳性表达。结果正常组未见c-fos/c-jun阳性表达,再灌注后1 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h后,模型组c-fos阳性细胞数分别为(6.2±1.8)mm-2、(59.8±19.7)mm-2、(428.5±45.8)mm-2、(680.5±38.1)mm-2、(230.0±30.1)mm-2、(5.8±1.2)mm-2,BMSC组c-fos阳性细胞数分别为(3.9±1.9)mm-2、(30.5±23.3)mm-2、(230.5±36.3)mm-2、(546.5±40.8)mm-2、(110.5±24.4)mm-2、(3.3±0.8)mm-2;模型组c-fos阳性细胞数分别为(9.2±2.0)mm-2、(255.7±30.1)mm-2、(435.3±40.4)mm-2、(665.2±55.7)mm-2、(91.7±16.5)mm-2、(4.3±1.5)mm-2,BMSC组c-fos阳性细胞数分别为(5.2±1.4)mm-2、(134.6±29.4)mm-2、(251.9±34.5)mm-2、(558.3±25.9)mm-2、(50.5±23.4)mm-2、(2.5±0.9)mm-2。与模型组比较,BMSC组各时间点c-fos、c-jun的阳性细胞数明显减少,其中再灌注后1 h、6 h、12 h、24 h、48 h 2组差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论RIRI后行BMSC玻璃体腔注射可抑制c-fos/c-jun阳性表达,减少神经节细胞层细胞的凋亡,对RIRI有一定的保护作用。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注损伤 骨髓间充质干细胞移植 c—fos C-JUN

在线阅读 下载PDF 职称材料

实验性视网膜缺血-再灌注损伤中坏死性凋亡相关因子的表达变化 被引量：6

6

作者 孔蕾 胡敏 +1 位作者 华启云 张红 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第12期1109-1112,共4页

目的建立视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)模型,观察坏死性凋亡是否参与其病理过程。方法野生型C57小鼠随机分为对照组及实验组。对照组不做任何处理,实验组采用前房灌注法建立RIRI模型,并于RIRI后1 d... 目的建立视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)模型,观察坏死性凋亡是否参与其病理过程。方法野生型C57小鼠随机分为对照组及实验组。对照组不做任何处理,实验组采用前房灌注法建立RIRI模型,并于RIRI后1 d、2d、4 d、7 d分别收集视网膜或眼球,行荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光染色检测受体相互作用蛋白(receptor interacting protein,RIP)3及RIP1、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、Caspase8的表达变化。结果荧光定量PCR检测RIP3、RIP1、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、Caspase8的mRNA表达,与对照组比较,实验组在不同时间点均有显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。RIP3及RIP1表达以早期升高为主,后期逐渐下降。Western blotting检测发现RIP3在RIRI后1 d及2 d显著升高,随后呈下降趋势。组织切片免疫荧光染色也发现RIP3在RIRI后1 d及2 d显著升高,随后呈下降趋势。结论实验性RIRI模型中,坏死性凋亡参与了其病理过程。坏死性凋亡特异性蛋白RIP3表达以早期升高为主,后期逐渐下降。 展开更多

关键词 坏死性凋亡 视网膜缺血-再灌注损伤 受体相互作用蛋白:鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

木犀草素对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠TLR4/Syk/NF-κB信号通路及视网膜的影响 被引量：6

7

作者 李茜 王红星 +1 位作者 傅强 任泽钦 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第4期311-316,共6页

目的探讨木犀草素对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠Toll样受体4(TLR4)/脾脏酪氨酸激酶(Syk)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及视网膜的影响。方法40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、木犀草素低剂量组(5 mg·kg^(-1))、木犀草素高剂... 目的探讨木犀草素对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠Toll样受体4(TLR4)/脾脏酪氨酸激酶(Syk)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及视网膜的影响。方法40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、木犀草素低剂量组(5 mg·kg^(-1))、木犀草素高剂量组(10 mg·kg^(-1)),每组10只,除对照组外,其余各组大鼠制备RIRI模型,造模成功后分别进行腹腔注射不同试剂处理,每天1次,持续7 d。各组大鼠给药结束后24 h行光学相干断层扫描(OCT)检查,测量视盘周围视网膜厚度;取各组大鼠视网膜行HE染色观察视网膜组织病理形态、行TUNEL染色观察视网膜组织细胞凋亡情况;行酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组大鼠视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,并检测大鼠视网膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;利用Western blot检测各组大鼠视网膜TLR4/Syk/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠视网膜出现水肿、空泡变性及凋亡等损伤,视网膜厚度(156.31±18.76)μm、视网膜神经节细胞数(66.25±15.18)个·mm-1、SOD活性(50.33±1.98)U·mg^(-1)均显著降低(均为P<0.05),视网膜细胞凋亡率(21.36±2.04)%、视网膜中MDA(1.82±0.14)μmol·g^(-1)、TNF-α(98.42±11.25)g·L^(-1)、IL-6(87.34±7.62)g·L^(-1)含量及TLR4、p-Syk/Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白相对表达水平均显著升高(均为P<0.05)。与模型组相比,木犀草素低剂量组、木犀草素高剂量组大鼠视网膜水肿等损伤程度逐渐减轻,视网膜厚度(170.62±12.46)μm、(183.54±13.75)μm、视网膜神经节细胞数(86.74±16.21)个·mm-1、(105.44±14.23)个·mm-1、SOD活性(65.26±2.64)U·mg^(-1)、(73.48±3.13)U·mg^(-1)均依次增加(均为P<0.05),视网膜细胞凋亡率(16.75±1.55)%、(9.65±1.23)%、视网膜中MDA(1.23±0.12)μmol·g^(-1)、(0.86±0.09)μmol·g^(-1)、TNF-α(61.48±8.37)g·L^(-1)、(36.83±8.49)g·L^(-1)、IL-6(55.47±6.12)g·L^(-1)、(38.71±3.85)g·L^(-1)含量及TLR4、p-Syk/Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白相对表达水平均依次降低(均为P<0.05)。结论木犀草素可抑制RIRI大鼠TLR4/Syk/NF-κB信号激活,减轻视网膜组织氧化应激及炎症损伤,进一步减轻视网膜损伤。 展开更多

关键词 木犀草素 视网膜缺血-再灌注损伤 Toll样受体4/脾脏酪氨酸激酶/核因子-κB信号通路 视网膜损伤 氧化应激

在线阅读 下载PDF 职称材料

色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：3

8

作者 常鲁 许丽 +2 位作者 韩新红 王慧凤 李艳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第4期324-328,共5页

目的观察色素上皮衍生因子色素上皮衍生因子(pigment epithelial-derived factor,PEDF)基因修饰的人脐带间充质干细胞(pigment epithelial-derived factor gene-odified human umbilical cord mesenchimal stem cells,PEDF-MSCs)对大鼠... 目的观察色素上皮衍生因子色素上皮衍生因子(pigment epithelial-derived factor,PEDF)基因修饰的人脐带间充质干细胞(pigment epithelial-derived factor gene-odified human umbilical cord mesenchimal stem cells,PEDF-MSCs)对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)模型中PEDF、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响及对视网膜神经节细胞的保护作用。方法绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的慢病毒(lentivirus,LV)为载体,将PEDF基因以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1、10、20、50体外转染至人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)中,应用RT-PCR及ELISA法分别检测以最佳MOI值转染细胞中PEDF的表达情况。选取健康SD雄性大鼠,采用高眼压的方法制成RIRI模型,随机分为正常对照组(N组)、磷酸盐缓冲液(phosphate bufferedsaline,PBS)治疗组(PBS组)、hUCMSCs治疗组(M组)及PEDF基因转染的hUCMSLs治疗组(P组);N组不予特殊处理,其余三组大鼠造模成功后立即进行干预治疗,PBS组给予PBS治疗,P组与M组分别给予PEDF-MSCs、hUCMSCs治疗。5 d后处死大鼠,尼氏染色计数视网膜神经节细胞数目,计算视网膜内层厚度,RTMPCR检测大鼠视网膜PEDF和VECGF的mRNA表达情况。结果荧光显微镜下观察到转染率高达75.8%。RT-PCR结果显示,转染后PEDF-MSCs的上清液中PEDF mRNA相对表达量(4.34±0.29)明显高于hUCMSCs(1.08±0.15),差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,转染后PEDFMSCs上清液中PEDF蛋白表达量[(83.09±7.58)μg·L^(-1)]明显高于hUCMSCs[(12.30±1.24)μg·L^(-1)],差异有统计学意义(P<0.05)。尼氏染色结果显示造模后PBS组大鼠神经节细胞数量变少,治疗5 d后,P组、M组大鼠神经节细胞数量均高于PBS组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);P组高于M组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗5 d后,P组、M组大鼠视网膜厚度均厚于PBS组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);P组厚于M组。RT-PCR检测结果显示,P组PEDF mRNA表达水平显著升高,VEGF mRNA表达水平下降,与PBS组、M组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论玻璃体内注射PEDF-MSCs能上调RIRI模型大鼠视网膜PEDF表达,并下调VEGF表达,对RIRI大鼠视网膜神经节细胞有保护作用。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 血管内皮生长因子 基因转染 视网膜缺血-再灌注损伤

在线阅读 下载PDF 职称材料

视网膜缺血-再灌注损伤中小胶质细胞对微循环的破坏作用 被引量：3

9

作者 李娟娟 陈晨 +1 位作者 张利伟 李妍 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第7期625-630,共6页

目的探讨视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)中小胶质细胞活化与视网膜微循环损伤的关系及作用机制。方法 160只雄性C57BL/6小鼠右眼均采用前房灌注建立RIRI模型为RIRI组,左眼不作处理为正常对照组。在... 目的探讨视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)中小胶质细胞活化与视网膜微循环损伤的关系及作用机制。方法 160只雄性C57BL/6小鼠右眼均采用前房灌注建立RIRI模型为RIRI组,左眼不作处理为正常对照组。在损伤后24 h、48 h、72 h分别进行视网膜冰冻切片、视网膜铺片免疫荧光染色检测小胶质细胞的活化情况,检测相关缺氧因子及炎症因子的表达,与正常对照组比较,研究小胶质细胞的激活状态与微循环损伤的关系,并初步分析其作用机制。结果视网膜微循环结构损伤观察结果显示,与正常对照组相比,RIRI后24 h组大部分血管仍呈正常形态;RIRI后48 h组,闭塞的血管数量增多;RIRI后72 h组,血管损伤明显加重。浅层毛细血管密度正常对照组,RIRI后24 h、48 h、72 h组间两两比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。而深层血管网毛细血管密度RIRI后72 h组与其余3组相比明显减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05),其余3组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。视网膜冰冻切片检测显示,RIRI后24 h组与正常对照组各层视网膜中抗离子钙接头蛋白(ionized calcium bindingadaptor molecule-1,Iba-1)阳性细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。RIRI后48 h组各层中Iba-1阳性细胞数与正常对照组及24 h组差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RIRI后72 h组各层中Iba-1阳性细胞数与正常对照组、24 h组、48 h组差异均有统计学意义(均为P<0.05)。视网膜铺片结果显示,RIRI后48 h组和72 h组活化的小胶质细胞数明显增加,与正常对照组和RIRI后24 h组在两个层次毛细血管中差异均有统计学意义(均为P<0.05),而72 h组小胶质细胞的活化达到高峰值,与其余组差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RT-PCR检测结果显示:血管内皮生长因子和缺氧诱导因子-1α的缺血缺氧因子,肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β的炎症因子在正常对照组与RIRI后24 h组、48 h组、72 h组,组间比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论激活的小胶质细胞在RIRI中发挥了对微循环的破坏作用,损伤早期抑制小胶质细胞的活化可能成为此类疾病治疗的新思路。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注损伤 视网膜 微循环

在线阅读 下载PDF 职称材料

雷帕霉素对视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：2

10

作者 赵昆 黄敏丽 +1 位作者 王淼 刘欣 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第5期409-413,共5页

目的探讨雷帕霉素对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion iniury,RIRI)的保护作用和机制。方法75只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为3组:空白对照组、实验对照组、实验组,每组25只。实验对照组和实验组行前房灌注建立R... 目的探讨雷帕霉素对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion iniury,RIRI)的保护作用和机制。方法75只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为3组:空白对照组、实验对照组、实验组,每组25只。实验对照组和实验组行前房灌注建立RIRI模型。实验组在前房灌注前2 h按2 mg·kg-1剂量腹腔注射雷帕霉素,实验对照组大鼠腹腔注射等量的生理盐水和DMSO。分别在再灌注后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h取3组视网膜标本,HE染色法观察视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)形态及测量视网膜内层厚度;TUNEL法检测视网膜组织中凋亡细胞的表达;Real-time PCR检测缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)mRNA在视网膜组织的表达水平。结果再灌注后0 h,实验组视网膜内层厚度为(137.55±7.76)μm,视网膜水肿较实验对照组轻,实验对照组视网膜内层厚度为(162.26±6.41)μm,且实验组RGC空泡化现象较少;再灌注6 h以后实验组视网膜内层厚度均较实验对照组厚(均为P<0.05)。实验组再灌注后12 h、24 h、48 h的细胞凋亡情况明显低于实验对照组(均为P<0.05)。再灌注后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h实验组视网膜组织中HIF-1αmRNA表达水平较实验对照组降低(均为P<0.05)。结论雷帕霉素对RIRI具有保护作用,HIF-1α表达水平的下调可能与该作用有关。 展开更多

关键词 雷帕霉素 WISTAR大鼠 缺氧诱导因子1Α 视网膜缺血-再灌注损伤 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同N-乙酰-5-羟色胺(NAS)给药途径对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响

11

作者 徐宁 殷慧文 +3 位作者 张宁 刘建晓 王晓莉 赵岩松 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第5期415-419,共5页

目的探讨腹腔与尾静脉注射N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)两种给药途径对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)组织病理学、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达及细胞凋亡的影... 目的探讨腹腔与尾静脉注射N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)两种给药途径对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)组织病理学、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法健康无眼疾成年Sprague-Dawley雄性大鼠54只,采用随机数字表法分为正常对照组(n=6)、RIRI腹腔组(n=12)、RIRI静脉组(n=12)、NAS腹腔组(n=12)和NAS静脉组(n=12),后四组采用升高眼压法建立大鼠RIRI模型。NAS腹腔组、NAS静脉组于建模前30 min分别经腹腔、尾静脉注射NAS(10 mg·kg^-1),RIRI腹腔组、RIRI静脉组于造模前30 min分别经腹腔、尾静脉注射同等剂量的生理盐水。RIRI后24 h,采用免疫组织化学染色检测各组大鼠视网膜中活性Caspase-3的表达,TUNEL染色检测各组视网膜细胞凋亡情况;RIRI后7 d,HE染色观察各组视网膜组织病理学变化。结果HE染色结果示,正常对照组大鼠视网膜各层细胞排列整齐、规则;RIRI后7 d,RIRI腹腔组与RIRI静脉组大鼠视网膜细胞排列稀疏、紊乱,形态不规则,视网膜内层厚度变薄;NAS腹腔组视网膜细胞形态较规则,排列较规整;NAS静脉组视网膜各层形态及细胞排列均趋于正常。NAS静脉组视网膜内层厚度(91.67±1.43)μm显著高于NAS腹腔组(87.80±1.33)μm、RIRI腹腔组(82.37±1.09)μm和RIRI静脉组(82.81±0.90)μm,差异均具有统计学意义(均为P<0.05);且NAS静脉组视网膜神经节细胞数(616.90±79.51)个·mm^-2显著高于NAS腹腔组(529.25±92.05)个·mm^-2、RIRI静脉组(434.42±87.17)个·mm^-2、RIRI腹腔组(390.72±72.12)个·mm^-2,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。免疫组织化学染色结果发现,RIRI后24 h,NAS静脉组活性Caspase-3阳性细胞数(145.01±22.54)个·mm^-2少于NAS腹腔组(221.34±30.84)个·mm^-2,差异具有统计学意义(P<0.05),二者活性Caspase-3阳性细胞数均显著少于RIRI静脉组(380.54±41.25)个·mm^-2和RIRI腹腔组(387.79±26.72)个·mm^-2,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。TUNEL染色结果示,RIRI后24 h,NAS静脉组TUNEL染色阳性细胞数(1468.03±128.40)个·mm^-2少于NAS腹腔组(1968.96±254.98)个·mm^-2,差异具有统计学意义(P<0.05),二者TUNEL染色阳性细胞数均显著少于RIRI静脉组(2122.77±165.76)个·mm^-2和RIRI腹腔组(2140.53±177.96)个·mm^-2,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。结论腹腔及静脉注射NAS治疗均可减少视网膜细胞凋亡,从而减轻RIRI大鼠视网膜损伤,且静脉注射给药的疗效优于腹腔给药。 展开更多

关键词 N-乙酰-5-羟色胺 视网膜缺血-再灌注损伤 活性Caspase-3 细胞凋亡 视网膜内层厚度

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同剂量N-乙酰-5-羟色胺(NAS)对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜细胞凋亡的影响 被引量：3

12

作者 刘建晓 殷慧文 +4 位作者 陈伟 徐宁 杨明 王晓莉 赵岩松 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第8期728-731,736,共5页

目的探讨不同剂量N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜细胞凋亡的影响。方法成年SD大鼠随机分为正常对照组、RIRI组和NAS组。采用高眼压法建立RIRI大... 目的探讨不同剂量N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜细胞凋亡的影响。方法成年SD大鼠随机分为正常对照组、RIRI组和NAS组。采用高眼压法建立RIRI大鼠模型。NAS组按照给药剂量的不同分为NAS低剂量组(5 mg·kg-1)、NAS中剂量组(10 mg·kg-1)和NAS高剂量组(20 mg·kg-1),造模前后30 min腹腔注射NAS。HE染色法观察各组大鼠视网膜形态学的改变,免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜中活性Caspase-3的表达,TUNEL法检测各组视网膜细胞凋亡的变化。结果 HE染色结果显示,NAS中剂量组大鼠视网膜各层细胞排列最整齐,视网膜内层厚度[(53.24±1.68)μm]显著薄于RIRI组[(60.54±2.52)μm]及NAS低剂量组[(56.78±1.78)μm](均为P<0.01),NAS中剂量组视网膜神经节细胞数[(1113.65±74.40)个·mm^-2]显著多于RIRI组[(719.89±83.67)个·mm^-2]及NAS低剂量组[(882.09±55.62)个·mm^-2](均为P<0.01)。免疫组织化学结果示,视网膜中活性Caspase-3阳性细胞数RIRI组[(246.08±19.23)个·mm^-2]及NAS低、中、高剂量组[(196.95±19.83)个·mm^-2、(142.77±18.25)个·mm^-2、(133.10±15.19)个·mm^-2]均显著多于正常对照组[(95.37±10.93)个·mm^-2](均为P<0.01);NAS中剂量组视网膜中活性Caspase-3阳性细胞数量显著少于RIRI组及NAS低剂量组(均为P<0.01)。TUNEL检测结果显示,TUNEL阳性细胞数RIRI组[(225.45±18.93)个·mm^-2]及NAS低、中、高剂量组[(175.06±17.69)个·mm^-2、(108.85±13.41)个·mm^-2、(100.37±13.53)个·mm^-2]均多于正常对照组[(81.98±11.29)个·mm^-2](均为P<0.01);NAS中剂量组视网膜TUNEL阳性细胞数显著少于RIRI组及NAS低剂量组(均为P<0.01)。结论腹腔注射NAS治疗可减轻RIRI大鼠视网膜细胞凋亡,具有神经保护作用,中剂量NAS治疗方案最佳。 展开更多

关键词 N-乙酰-5-羟色胺 视网膜缺血-再灌注损伤 活性Caspase-3 视网膜细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于JAK2/STAT3通路分析姜黄素对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜小胶质细胞极化的影响 被引量：3

13

作者 尹伊 徐莹 +5 位作者 赵玉泽 王晨旭 肖培伦 李晓双 王晓莉 赵岩松 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第6期439-443,共5页

目的探讨姜黄素(CUR)对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜小胶质细胞极化的影响,并通过JAK2/STAT3通路探讨其机制,以期为CUR的临床应用提供理论依据。方法健康雄性成年Sprague Dawley大鼠36只,随机分为假手术(Sham)组、RIRI组与CUR... 目的探讨姜黄素(CUR)对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜小胶质细胞极化的影响,并通过JAK2/STAT3通路探讨其机制,以期为CUR的临床应用提供理论依据。方法健康雄性成年Sprague Dawley大鼠36只,随机分为假手术(Sham)组、RIRI组与CUR组,每组各12只。RIRI组和CUR组大鼠右眼采用高眼压法建立RIRI模型,Sham组仅将针头刺入大鼠右眼前房,不升高眼压。CUR组大鼠于建模前30 min腹腔注射CUR(100 mg·kg^(-1)),RIRI组和Sham组大鼠腹腔注射等剂量生理盐水。造模后24 h,采用HE染色及免疫组织化学染色法观察各组大鼠视网膜形态及视网膜神经节细胞(RGC)数变化,Iba-1/CD16、Iba-1/Arg1免疫荧光双标法检测CUR对RIRI大鼠视网膜小胶质细胞极化的影响,免疫组织化学结合Western blot检测观察CUR对RIRI大鼠RGC及JAK2/STAT3通路信号分子表达的影响。结果HE染色及免疫组织化学染色结果显示,Sham组大鼠视网膜细胞排列整齐,神经节细胞层见大量Brn-3a^(+)细胞(即RGC);与Sham组相比,造模后24 h,RIRI组大鼠内层视网膜厚度显著增加、RGC数显著减少,而CUR组大鼠内层视网膜厚度较RIRI组显著变薄,RGC数显著多于RIRI组(均为P<0.05)。免疫荧光双标染色结果显示,RIRI组大鼠视网膜Iba-1^(+)CD16^(+)细胞(M1型小胶质细胞)数较Sham组显著增加,而CUR组大鼠视网膜Iba-1^(+)CD16^(+)细胞数显著少于RIRI组,但仍多于Sham组(均为P<0.05);RIRI组大鼠视网膜Iba-1^(+)Arg1^(+)细胞(M2型胶质细胞)数较Sham组增加,而CUR组大鼠视网膜Iba-1^(+)Arg1^(+)细胞数显著高于RIRI组(均为P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,与Sham组相比,RIRI组大鼠视网膜p-JAK2^(+)、p-STAT3^(+)细胞数均较Sham组增多,而CUR组大鼠视网膜p-JAK2^(+)、p-STAT3^(+)细胞数均显著少于RIRI组(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,Sham组大鼠视网膜p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平较低;造模后24 h,RIRI组大鼠视网膜p-JAK2和p-STAT3蛋白表达显著升高,而CUR组大鼠视网膜p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量均较RIRI组显著下降,但仍高于Sham组(均为P<0.05)。结论CUR可调控小胶质细胞由M1型向M2型极化,从而减轻大鼠RIRI,具有神经保护作用,其机制可能与JAK2/STAT3信号通路激活有关。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注损伤 小胶质细胞极化 姜黄素 JAK2/STAT3通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

KLF7对TLR4/NLRP3炎症小体激活的抑制作用及其对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响 被引量：4

14

作者 夏江南 沈蕾 李晶晶 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第9期699-703,共5页

目的探讨Krüppel样因子7(KLF7)通过抑制Toll样受体4/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(TLR4/NLRP3)炎症小体的激活对视网膜缺血-再灌注(RIR)损伤大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组、RIR组和KLF7组... 目的探讨Krüppel样因子7(KLF7)通过抑制Toll样受体4/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(TLR4/NLRP3)炎症小体的激活对视网膜缺血-再灌注(RIR)损伤大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组、RIR组和KLF7组,每组20只。RIR组和KLF7组建立RIR模型,KLF7组大鼠腹腔注射2μL AAV2-KLF7腺病毒,对照组和RIR组大鼠注射100μL PBS。HE染色观察大鼠视网膜形态变化,显微镜下测量神经节细胞层(GCL)厚度和GCL中RGC数量,Western blot检测大鼠视网膜组织中KLF7、TLR4、髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)、NLRP3、肿瘤坏死因子受体相关分子6(TRAF6)蛋白表达水平,TUNEL检测RGC凋亡,ELISA法检测大鼠视网膜组织中白细胞介素(IL)-18和IL-1β表达水平。结果对照组大鼠的视网膜内界膜平滑完整。RIR组大鼠内核层、外核层细胞排列明显疏松、紊乱,RGC数量减少。KLF7组大鼠RGC数量较RIR组减少,视网膜较前变薄,但视网膜损伤程度较RIR组明显减轻。与对照组相比,RIR组和KLF7组大鼠GCL厚度及GCL中RGC数量均降低,TUNEL阳性RGC占比升高,KLF7、TLR4、MYD88、NLRP3、TRAF6蛋白相对表达水平以及IL-18、IL-1β表达水平均升高(均为P<0.05);与RIR组相比,KLF7组大鼠GCL厚度及GCL中RGC数量均升高,TUNEL阳性RGC占比降低,KLF7、TLR4、MYD88、NLRP3、TRAF6蛋白相对表达水平以及IL-18、IL-1β表达水平均降低(均为P<0.05)。结论KLF7具有减轻RIR损伤的作用,KLF7可能通过抑制TLR4/NLRP3炎症小体的激活来减轻RIR的损伤。 展开更多

关键词 Krüppel样因子7 TLR4/NLRP3 视网膜缺血-再灌注损伤 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

牡荆苷对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型中神经节细胞的保护作用 被引量：3

15

作者 李漫丽 范珂 崔红培 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期191-197,共7页

目的探讨牡荆苷对大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)引起的视网膜神经节细胞(RGCs)氧化应激损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法将60只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组、模型组和牡荆苷组,均以右眼为实验眼。模型组和... 目的探讨牡荆苷对大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)引起的视网膜神经节细胞(RGCs)氧化应激损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法将60只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组、模型组和牡荆苷组,均以右眼为实验眼。模型组和牡荆苷组大鼠采用前房灌注方法建立RIR模型,牡荆苷组大鼠建模后每日按照25 mg/kg剂量腹腔内注射牡荆苷生理盐水溶液,模型组大鼠腹腔内注射相同剂量的生理盐水,连续给药7 d。正常对照组大鼠右眼仅行前房穿刺而不升高眼压,同时腹腔内注射相同剂量的生理盐水。造模后7 d过量麻醉法处死大鼠,采用组织病理学染色法检测大鼠视网膜厚度和RGCs数量,采用逆行荧光金染色标记法检测RGCs密度,采用TUNEL染色法检测RGCs凋亡情况,采用比色法检测视网膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)浓度,采用Western blot法检测大鼠视网膜组织细胞质Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、NQO1、细胞核Nrf2蛋白表达。结果模型组大鼠视网膜厚度为(90.21±3.55)μm,明显低于正常对照组的(128.20±5.31)μm和牡荆苷组的(119.65±6.14)μm,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组单位面积RGCs数量为(1300.85±14.00)个/mm^(2),明显低于正常对照组的(2330.12±15.05)个/mm^(2)和牡荆苷组的(1921.64±11.78)个/mm^(2),差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组TUNEL阳性RGCs比率为(68.34±5.04)%,明显高于正常对照组的(3.01±0.18)%和牡荆苷组的(35.51±2.04)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组大鼠视网膜组织中SOD活性明显低于正常对照组和牡荆苷组,MDA、NO摩尔浓度明显高于正常对照组和牡荆苷组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组大鼠视网膜组织中细胞质Nrf2蛋白相对表达量明显低于正常对照组,HO-1、NQO1和细胞核Nrf2蛋白相对表达量明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);牡荆苷组大鼠视网膜组织中细胞质Nrf2蛋白相对表达量明显低于模型组和正常对照组,HO-1、NQO1和细胞核Nrf2蛋白相对表达量明显高于模型组和正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论牡荆苷能减少RGCs凋亡,缓解RIR引起的大鼠视网膜氧化应激损伤,这一作用可能是通过活化Nrf2相关信号通路而实现的。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注 牡荆苷 氧化应激 Nrf2信号通路 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

姜黄素对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜IL-1β表达的影响

16

作者 张宁 尹伊 +4 位作者 徐莹 肖培伦 李晓双 王晓莉 赵岩松 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第3期178-184,共7页

目的 观察姜黄素(CUR)对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响,从Toll样受体4/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(TLR4/Caspase-8)通路探讨其机制,为CUR治疗RIRI的临床应用提供科学的理论依据。方法 SPF级健... 目的 观察姜黄素(CUR)对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响,从Toll样受体4/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(TLR4/Caspase-8)通路探讨其机制,为CUR治疗RIRI的临床应用提供科学的理论依据。方法 SPF级健康无眼疾雄性SD大鼠102只,随机分为Sham组(n=10)、RIRI组(n=35)、RIRI+TLR4抑制剂(TAK-242)组(n=11)、RIRI+CUR组(n=35)及RIRI+CUR+TAK-242组(n=11),其中,Sham组、RIRI组及RIRI+CUR组根据建模后时间不同分为建模后6 h、12 h、24 h、72 h及7 d组。采用前房高眼压灌注法建立RIRI模型为RIRI组,Sham组不做特殊处理,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组分别于建模前腹腔注射相应药物。免疫组织化学染色检测建模后各时间点各组大鼠视网膜中IL-1β^(+)、TLR4^(+)Caspase-8^(+)细胞数;建模后12 h, Western blot检测各组大鼠视网膜TLR4、Caspase-8及IL-1β蛋白的表达,HE染色观察各组大鼠视网膜形态学变化。结果 免疫组织化学染色结果显示,建模后6 h、12 h、24 h、72 h及7 d,与Sham组相比,RIRI+CUR组IL-1β^(+)、TLR4^(+)细胞数均显著增加;与RIRI组相比,RIRI+CUR组各时间点IL-1β^(+)、TLR4^(+)细胞数均显著降低;与Sham组相比,RIRI组各时间点IL-1β^(+)、TLR4^(+)细胞数均显著增加;以上差异均统计学意义(均为P<0.05)。建模后12 h:与Sham组相比,RIRI组、RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4及Caspase-8蛋白均显著增加;与RIRI组相比,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4、Caspase-8蛋白均显著降低;与RIRI+CUR+TAK-242组相比,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4、Caspase-8蛋白均显著增加;以上差异均有统计学意义(均为P<0.05)。建模后12 h, RIRI+TAK-242组与RIRI+CUR组IL-1β^(+)、TLR4^(+)、Caspase-8^(+)细胞数以及IL-1β、TLR4、Caspase-8蛋白比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。建模后12 h:与Sham组相比,RIRI组、RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组大鼠视网膜内层细胞水肿,视网膜内层厚度增加,视网膜神经节细胞(RGCs)数显著减少;与RIRI组相比,RIRI+TAK-242组、RIRI+CUR组、RIRI+CUR+TAK-242组大鼠视网膜细胞形态排列较整齐,视网膜内层厚度变薄,RGCs数减少;与RIRI+CUR及RIRI+TAK-242组相比,RIRI+CUR+TAK-242组大鼠视网膜水肿减轻,视网膜内层厚度显著变薄,RGCs数量减少;以上差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RIRI+TAK-242组与RIRI+CUR组大鼠视网膜内层厚度及RGCs数比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 CUR可下调RIRI大鼠视网膜IL-1β的表达,进而减轻大鼠RIRI,发挥神经保护作用,其机制可能与CUR调控TLR4/Caspase-8信号通路有关。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注 姜黄素 白细胞介素-1Β TLR4/Caspase-8通路 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

藏红花素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：3

17

作者 常花蕾 朱娟 +1 位作者 于敬妮 田蕴霖 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第7期630-634,共5页

目的观察大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)时藏红花素对视网膜细胞凋亡数目、凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响,探讨缺血再灌注时藏红花素对视网膜的保护作用机制。方法选取体质量200~250 g的健康... 目的观察大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)时藏红花素对视网膜细胞凋亡数目、凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响,探讨缺血再灌注时藏红花素对视网膜的保护作用机制。方法选取体质量200~250 g的健康雄性SD大鼠24只,随机分为4组:对照组、模型组、藏红花素低剂量组和藏红花素高剂量组,每组6只。藏红花素低剂量组、高剂量组分别于造模前3 d、30 min定时腹腔注射5 g·L-1藏红花素5 mg·kg-1、50 mg·kg-1。造模成功后24 h处死大鼠并摘取眼球。使用电镜观察各组大鼠视网膜细胞结构,TUNEL染色检测视网膜凋亡细胞数量,免疫组织化学染色法观察凋亡相关蛋白Caspase-3在视网膜中的表达。结果视网膜TUNEL染色发现,对照组视网膜组织中几乎未发现凋亡细胞的阳性表达,模型组视网膜神经节细胞层和内核层中发现大量棕黄色着色的细胞,其凋亡细胞数为(27.40±0.96)个,藏红花素低剂量组可见神经节细胞层、内核层凋亡细胞数较模型组减少,凋亡细胞数为(8.40±0.41)个,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01);藏红花素高剂量组凋亡细胞数较模型组和低剂量组明显减少,凋亡细胞数为(4.30±0.47)个,和藏红花素低剂量组相比差异有统计学意义(P<0.01)。对照组大鼠视网膜组织Caspase-3染色阴性,模型组视网膜神经节细胞层可见棕黄色颗粒位于细胞浆内,藏红花素低剂量组Caspase-3蛋白表达量与模型组类似,藏红花素高剂量组Caspase-3蛋白表达量与对照组类似。结论藏红花素能通过降低Caspase-3蛋白含量及凋亡细胞数,从而有效保护视网膜免受RIRI。 展开更多

关键词 藏红花素 凋亡 视网膜缺血-再灌注损伤 CASPASE-3

在线阅读 下载PDF 职称材料

外源性硫化氢调节视神经萎缩相关蛋白1(OPA1)表达对视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：3

18

作者 白雪 罗艳 +1 位作者 刘太祥 罗鑫 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第9期811-816,共6页

目的探讨外源性硫化氢(H 2S)对急性高眼压模型诱导视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠模型的作用和机制。方法建立SD雄性大鼠急性高眼压模型(前房加压法):通过自制的升眼压装置维持120 mmHg(1 kPa=7.... 目的探讨外源性硫化氢(H 2S)对急性高眼压模型诱导视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠模型的作用和机制。方法建立SD雄性大鼠急性高眼压模型(前房加压法):通过自制的升眼压装置维持120 mmHg(1 kPa=7.5 mmHg)眼压,1 h后解除压力造成RIRI。硫氢化钠(NaHS)作为提供外源性H 2S的供体,随机把52只健康无眼疾的SD雄性大鼠分为对照组(4只)、RIRI组(24只)及NaHS干预组(24只;连续5 d大鼠腹腔内注射NaHS液,造模前15 min再次给药)。后两组再分为造模后1 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h 6个时间点(n=4)。TUNEL法检测各组大鼠视网膜细胞凋亡指数,qPCR检测视网膜中视神经萎缩相关蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)mRNA表达,Western blot检测各组大鼠视网膜细胞胞质以及线粒体中OPA1、CytC蛋白的表达,透射电镜观察各组线粒体形态。结果与对照组比较:细胞凋亡指数除NaHS干预组造模后1 h(0.226±0.01)差异无统计学意义外(P>0.05),RIRI组和NaHS干预组均增加(均为P<0.05),两组视网膜中OPA1 mRNA表达均下降(均为P<0.05),线粒体内OPA1和CytC的蛋白表达均下降(均为P<0.05),细胞质内均增加(均为P<0.05)。透射电镜下RIRI组和NaHS干预组线粒体肿胀,可见细胞质空泡及自噬小体。与RIRI组比较:NaHS干预组细胞凋亡减少(P<0.05);视网膜OPA1 mRNA表达从造模后6 h开始均高于RIRI组(均为P<0.05),线粒体内OPA1和CytC表达从造模后24 h开始均高于RIRI组(均为P<0.05);在细胞质内OPA1和CytC表达均低于RIRI组(均为P<0.05);NaHS干预组各时间点线粒体损伤减轻。结论H 2S可能通过调节OPA1的表达与分布来减轻RIRI,且开始作用时间为造模后24 h。 展开更多

关键词 硫化氢 OPA1 视网膜缺血-再灌注损伤 急性高眼压

在线阅读 下载PDF 职称材料

Caspase-7与视网膜缺血-再灌注损伤

19

作者 黄逸慧 黄敏丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第12期1188-1191,1195,共5页

视网膜缺血-再灌注损伤是细胞凋亡、炎症反应等多种机制参与的病理生理过程。半胱氨酸蛋白酶7(Caspase-7)是Caspase家族中的凋亡效应分子,近期研究表明,它在调控炎症细胞因子方面也起着重要作用。本文就Caspase-7生物学特性及其与细胞... 视网膜缺血-再灌注损伤是细胞凋亡、炎症反应等多种机制参与的病理生理过程。半胱氨酸蛋白酶7(Caspase-7)是Caspase家族中的凋亡效应分子,近期研究表明,它在调控炎症细胞因子方面也起着重要作用。本文就Caspase-7生物学特性及其与细胞凋亡、炎症反应在视网膜缺血-再灌注损伤的分子机制进行综述。 展开更多

关键词 CASPASE-7 视网膜缺血-再灌注损伤 细胞凋亡 炎症反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

MSC移植对视网膜缺血—再灌注损伤后神经节细胞中HIF-1α及Caspase-3表达的影响 被引量：4

20

作者 范姗姗 曹永亮 +3 位作者 王晓莉 赵岩松 李娜娜 梁冰 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第7期613-616,共4页

目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)移植对视网膜缺血-再灌注损伤低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及Caspase-3表达及神经节细胞凋亡的影响,为MSC移植治疗视网膜缺血-再灌注损伤提供实验依据。... 目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)移植对视网膜缺血-再灌注损伤低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及Caspase-3表达及神经节细胞凋亡的影响,为MSC移植治疗视网膜缺血-再灌注损伤提供实验依据。方法将65只健康SD大鼠随机分为3组:正常组5只、模型组30只、MSC移植组30只,各组均将左眼作为实验眼制作视网膜缺血-再灌注损伤模型。贴壁筛选法体外培养SD大鼠MSC,模型组于缺血-再灌注1h予以玻璃体内注射PBS缓冲液,MSC移植组于缺血-再灌注后1h予以玻璃体腔注射MSC。各组SD大鼠分别于缺血-再灌注损伤后1h、6h、12h、24h、48h及72h处死,并立即摘除左眼眼球,固定包埋并切片,免疫组织化学法检测各组SD大鼠视网膜缺血-再灌注后HIF-1α及Caspase-3的表达情况。结果正常组未检测到HIF-1α及Caspase-3有表达,在视网膜缺血-再灌注后1h、6h、12h、24h、48h及72h模型组HIF-1α的表达分别为0.620±0.025、1.889±0.099、7.591±0.359、4.756±0.156、2.564±0.164、1.023±0.144;MSC移植组分别为0.222±0.058、0.774±0.162、1.831±0.124、1.567±0.059、0.930±0.010、0.583±0.065。模型组Caspase-3表达分别为0.106±0.093、0.593±0.083、1.760±0.087、3.855±0.142、2.429±0.070、1.329±0.080;MSC移植组分别为0.028±0.004、0.180±0.032、0.887±0.0075、1.857±0.050、1.554±0.079、0.957±0.087。与模型组相比,MSC移植组HIF-1α及Caspase-3的表达明显减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论视网膜缺血-再灌注损伤后行MSC玻璃体内注射可抑制神经节细胞HIF-1α及Caspase-3的表达,减少神经节细胞的凋亡,对视网膜缺血-再灌注损伤有一定的保护作用。 展开更多

关键词 视网膜缺血-再灌注损伤 间充质干细胞移植 低氧诱导因子-1Α Caspase-3

在线阅读 下载PDF 职称材料