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基于西门利克森林病毒复制子的“自杀性”DNA疫苗载体的构建及其体外表达特性
被引量:
3
1
作者
方六荣
肖少波
+3 位作者
谢京国
潘永飞
姚林
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期217-221,共5页
对西门利克森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pSFV1进行改造,即在SFV非结构蛋白(nSPs) 上游插入依赖于RNA聚合酶Ⅱ的人巨细胞病毒立即早期启动子/增强子序列(hCMV IE Pro/Enh),同时在pS- FV1的多克隆位点下游插入SV40 poly(A)终止信号...
对西门利克森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pSFV1进行改造,即在SFV非结构蛋白(nSPs) 上游插入依赖于RNA聚合酶Ⅱ的人巨细胞病毒立即早期启动子/增强子序列(hCMV IE Pro/Enh),同时在pS- FV1的多克隆位点下游插入SV40 poly(A)终止信号序列,获得可以完全在DNA水平上操作并具有自主复制功能的表达载体pSFV-DNA。为了进一步探讨改造载体的转染效率、表达能力以及是否能诱导细胞凋亡等特性, 将报告基因EGFP插入pSFV-DNA中亚基因组启动子下游,构建的重组表达质粒pSFV-EGFP转染BHK-21 细胞,转染后12 h即可观察到荧光,但转染效率明显低于直接由hCMV IE Pro/Enh驱动的EGFP真核表达质粒pEGFP-C1;提取转染后48 h的细胞基因组DNA,电泳发现pSFV-EGFP转染细胞均呈典型的DNA断裂(ladder),而pEGFP-C1转染细胞未观察到这种现象。上述结果表明:改造的载体不仅可完全在DNA水平上操作,而且能正确表达外源基因和诱导细胞凋亡,为开展各种病原微生物的“自杀性”DNA疫苗研究提供了良好的工具。
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关键词
西门利克森林病毒复制子
“自杀性”DNA疫苗
表达载体
表达特性
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职称材料
五种虫媒病毒生物学性状的研究
被引量:
8
2
作者
彭文明
李晓萸
黄如统
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2002年第6期76-80,共5页
目的 对引进的 5种虫媒病毒 :马雅罗病毒 (MAY) ,西门利克病毒 (SFV) ,墨累谷脑炎病毒 (MVE) ,伊利乌斯病毒 (ILH)和布尼安姆韦拉病毒 (BUN)进行生物学性状的研究。方法 乳鼠脑内接种传代及致病性观察 ;制作电镜标本进行病毒的形态学...
目的 对引进的 5种虫媒病毒 :马雅罗病毒 (MAY) ,西门利克病毒 (SFV) ,墨累谷脑炎病毒 (MVE) ,伊利乌斯病毒 (ILH)和布尼安姆韦拉病毒 (BUN)进行生物学性状的研究。方法 乳鼠脑内接种传代及致病性观察 ;制作电镜标本进行病毒的形态学观察 ;病毒的理化试验 (核酸型、耐乙醚、耐酸试验 ) ;进行病毒的空斑试验和血凝试验 ;采用 5种虫媒病毒 (MAY ,SFV ,MVE ,ILH ,BUN)及CHIK ,WN ,JBE病毒抗血清与 5种虫媒病毒血凝素进行交叉血凝抑制试验 ;结果与结论 发现 5种病毒具有典型虫媒病毒的生物学特征。脑内接种后 ,乳鼠死亡时间及症状不同。病毒均为有包膜的球形RNA病毒 ,在细胞浆内增殖 ,对酸和乙醚敏感。 5种病毒形成不同大小的空斑和具有不同的血凝特性 ,同组内的病毒可以发生交叉血凝抑制反应。
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关键词
虫媒
病毒
生物学性状
马雅罗
病毒
西门
利
克
病毒
墨累谷脑炎
病毒
伊
利
乌斯
病毒
布尼安姆韦拉
病毒
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职称材料
题名
基于西门利克森林病毒复制子的“自杀性”DNA疫苗载体的构建及其体外表达特性
被引量:
3
1
作者
方六荣
肖少波
谢京国
潘永飞
姚林
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期217-221,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30300257)
武汉市青年科技晨光计划项目(20025001041)资助
文摘
对西门利克森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pSFV1进行改造,即在SFV非结构蛋白(nSPs) 上游插入依赖于RNA聚合酶Ⅱ的人巨细胞病毒立即早期启动子/增强子序列(hCMV IE Pro/Enh),同时在pS- FV1的多克隆位点下游插入SV40 poly(A)终止信号序列,获得可以完全在DNA水平上操作并具有自主复制功能的表达载体pSFV-DNA。为了进一步探讨改造载体的转染效率、表达能力以及是否能诱导细胞凋亡等特性, 将报告基因EGFP插入pSFV-DNA中亚基因组启动子下游,构建的重组表达质粒pSFV-EGFP转染BHK-21 细胞,转染后12 h即可观察到荧光,但转染效率明显低于直接由hCMV IE Pro/Enh驱动的EGFP真核表达质粒pEGFP-C1;提取转染后48 h的细胞基因组DNA,电泳发现pSFV-EGFP转染细胞均呈典型的DNA断裂(ladder),而pEGFP-C1转染细胞未观察到这种现象。上述结果表明:改造的载体不仅可完全在DNA水平上操作,而且能正确表达外源基因和诱导细胞凋亡,为开展各种病原微生物的“自杀性”DNA疫苗研究提供了良好的工具。
关键词
西门利克森林病毒复制子
“自杀性”DNA疫苗
表达载体
表达特性
Keywords
replicon of SFV
suicidal DNA vaccine
expression vector
expression characteristic
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
五种虫媒病毒生物学性状的研究
被引量:
8
2
作者
彭文明
李晓萸
黄如统
机构
军事医学科学院微生物流行病研究所
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2002年第6期76-80,共5页
文摘
目的 对引进的 5种虫媒病毒 :马雅罗病毒 (MAY) ,西门利克病毒 (SFV) ,墨累谷脑炎病毒 (MVE) ,伊利乌斯病毒 (ILH)和布尼安姆韦拉病毒 (BUN)进行生物学性状的研究。方法 乳鼠脑内接种传代及致病性观察 ;制作电镜标本进行病毒的形态学观察 ;病毒的理化试验 (核酸型、耐乙醚、耐酸试验 ) ;进行病毒的空斑试验和血凝试验 ;采用 5种虫媒病毒 (MAY ,SFV ,MVE ,ILH ,BUN)及CHIK ,WN ,JBE病毒抗血清与 5种虫媒病毒血凝素进行交叉血凝抑制试验 ;结果与结论 发现 5种病毒具有典型虫媒病毒的生物学特征。脑内接种后 ,乳鼠死亡时间及症状不同。病毒均为有包膜的球形RNA病毒 ,在细胞浆内增殖 ,对酸和乙醚敏感。 5种病毒形成不同大小的空斑和具有不同的血凝特性 ,同组内的病毒可以发生交叉血凝抑制反应。
关键词
虫媒
病毒
生物学性状
马雅罗
病毒
西门
利
克
病毒
墨累谷脑炎
病毒
伊
利
乌斯
病毒
布尼安姆韦拉
病毒
Keywords
Arbovirus
Biological character
分类号
R373.3 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于西门利克森林病毒复制子的“自杀性”DNA疫苗载体的构建及其体外表达特性
方六荣
肖少波
谢京国
潘永飞
姚林
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
五种虫媒病毒生物学性状的研究
彭文明
李晓萸
黄如统
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2002
8
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