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胱天蛋白酶3介导BAG3蛋白剪切的研究
被引量：
8
1
作者
张海燕
都镇先
+2 位作者
孟欣
邓娓娓
王华芹
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第7期603-606,共4页
目的解析胱天蛋白酶(caspase)3介导BCL2结合抗凋亡基因3(BAG3)酶切的具体作用靶点,明确caspase 3裂解对BAG3抗凋亡作用的影响。方法采用生物信息学方法筛选BAG3蛋白序列中潜在caspase酶切位点;采用定点突变法构建潜在caspase酶切位点突...
目的解析胱天蛋白酶(caspase)3介导BCL2结合抗凋亡基因3(BAG3)酶切的具体作用靶点,明确caspase 3裂解对BAG3抗凋亡作用的影响。方法采用生物信息学方法筛选BAG3蛋白序列中潜在caspase酶切位点;采用定点突变法构建潜在caspase酶切位点突变体;体外翻译野生型和突变型BAG3蛋白;利用重组caspase对野生型或突变型重组BAG3蛋白进行体外剪切实验;构建BAG3裂解片段的真核表达载体,突变型或片段BAG3表达载体转染SW1990细胞;利用Western blot检测各组细胞中BAG3蛋白的裂解情况;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果在BAG3蛋白序列中存在K344EVD347和L515EAD518 2个潜在caspase酶切位点;caspase3可有效剪切D518A突变型BAG3,而不能剪切D347A突变型BAG3;D518A突变型和野生型BAG3同等程度抑制MG132诱导的细胞凋亡,D347A突变型BAG3对细胞凋亡的保护作用高于D518A突变型或野生型BAG3,而N末端和C末端剪切片段BAG3对MG132诱导的细胞凋亡无作用。结论 caspase3主要在D347位点裂解BAG3蛋白;BAG3在D347位点的剪切使其丧失了原有的抗凋亡作用。
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关键词
胱
天
蛋白酶
BAG
3
裂
解
凋亡
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职称材料
盐酸小檗碱通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻急性低氧暴露引起的肝损伤
被引量：
5
2
作者
张子昂
董倩
+3 位作者
官瑞丽
孙亚菲
刘新秦
邹远康
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期48-53,共6页
目的 研究盐酸小檗碱(BBR)对急性低氧暴露后肝脏的保护作用及相关机制。方法 C57BL/6小鼠分为常氧组、低氧暴露组、低氧暴露联合BBR组。实验第7天处死小鼠,取肝脏组织。称量小鼠及肝组织的质量,利用HE染色观察肝组织病变情况,利用实时定...
目的 研究盐酸小檗碱(BBR)对急性低氧暴露后肝脏的保护作用及相关机制。方法 C57BL/6小鼠分为常氧组、低氧暴露组、低氧暴露联合BBR组。实验第7天处死小鼠,取肝脏组织。称量小鼠及肝组织的质量,利用HE染色观察肝组织病变情况,利用实时定量PCR检测肝组织白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达水平,Western blot法检测肝脏组织TNF-α、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 caspase-8的蛋白表达水平,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测小鼠肝组织细胞凋亡情况。结果 低氧暴露7 d后,小鼠体质量及肝质量显著降低且肝组织损伤明显、肝组织细胞TNF-α和IL-1β的mRNA的水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白的表达显著增加、肝组织细胞凋亡增加;BBR给药处理可以显著提升低氧暴露7d小鼠体质量及肝质量、降低TNF-αmRNA表达水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白表达水平、减轻肝组织的细胞凋亡。结论 BBR可能通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3凋亡信号通路缓解低氧暴露导致的肝脏损伤。
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关键词
低氧
肝损伤
肿瘤坏死因子α(TNF-α)
盐酸小檗碱(BBR)
白细胞介素1β(IL-1β)
IL-6
裂
解
型
胱
天
蛋白酶
3(
c-caspase-
3)
胱
天
蛋白酶
8(caspase-8)
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职称材料
题名
胱天蛋白酶3介导BAG3蛋白剪切的研究
被引量：
8
1
作者
张海燕
都镇先
孟欣
邓娓娓
王华芹
机构
中国医科大学
中国医科大学
中国医科大学
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第7期603-606,共4页
基金
辽宁省教育厅高校科研计划(L2010616
2009A765)
文摘
目的解析胱天蛋白酶(caspase)3介导BCL2结合抗凋亡基因3(BAG3)酶切的具体作用靶点,明确caspase 3裂解对BAG3抗凋亡作用的影响。方法采用生物信息学方法筛选BAG3蛋白序列中潜在caspase酶切位点;采用定点突变法构建潜在caspase酶切位点突变体;体外翻译野生型和突变型BAG3蛋白;利用重组caspase对野生型或突变型重组BAG3蛋白进行体外剪切实验;构建BAG3裂解片段的真核表达载体,突变型或片段BAG3表达载体转染SW1990细胞;利用Western blot检测各组细胞中BAG3蛋白的裂解情况;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果在BAG3蛋白序列中存在K344EVD347和L515EAD518 2个潜在caspase酶切位点;caspase3可有效剪切D518A突变型BAG3,而不能剪切D347A突变型BAG3;D518A突变型和野生型BAG3同等程度抑制MG132诱导的细胞凋亡,D347A突变型BAG3对细胞凋亡的保护作用高于D518A突变型或野生型BAG3,而N末端和C末端剪切片段BAG3对MG132诱导的细胞凋亡无作用。结论 caspase3主要在D347位点裂解BAG3蛋白;BAG3在D347位点的剪切使其丧失了原有的抗凋亡作用。
关键词
胱
天
蛋白酶
BAG
3
裂
解
凋亡
Keywords
caspase
BAG
3
cleavage
apoptosis
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
盐酸小檗碱通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻急性低氧暴露引起的肝损伤
被引量：
5
2
作者
张子昂
董倩
官瑞丽
孙亚菲
刘新秦
邹远康
机构
空军军医大学军队预防医学院劳动与环境卫生教研室
空军军医大学学员队
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期48-53,共6页
文摘
目的 研究盐酸小檗碱(BBR)对急性低氧暴露后肝脏的保护作用及相关机制。方法 C57BL/6小鼠分为常氧组、低氧暴露组、低氧暴露联合BBR组。实验第7天处死小鼠,取肝脏组织。称量小鼠及肝组织的质量,利用HE染色观察肝组织病变情况,利用实时定量PCR检测肝组织白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达水平,Western blot法检测肝脏组织TNF-α、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 caspase-8的蛋白表达水平,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测小鼠肝组织细胞凋亡情况。结果 低氧暴露7 d后,小鼠体质量及肝质量显著降低且肝组织损伤明显、肝组织细胞TNF-α和IL-1β的mRNA的水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白的表达显著增加、肝组织细胞凋亡增加;BBR给药处理可以显著提升低氧暴露7d小鼠体质量及肝质量、降低TNF-αmRNA表达水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白表达水平、减轻肝组织的细胞凋亡。结论 BBR可能通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3凋亡信号通路缓解低氧暴露导致的肝脏损伤。
关键词
低氧
肝损伤
肿瘤坏死因子α(TNF-α)
盐酸小檗碱(BBR)
白细胞介素1β(IL-1β)
IL-6
裂
解
型
胱
天
蛋白酶
3(
c-caspase-
3)
胱
天
蛋白酶
8(caspase-8)
Keywords
hypoxia
liver injury
TNF-α
berberine hydrochloride(BBR)
IL-1β
IL-6
cleaved-caspase-
3
caspase-8
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
R364.4 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胱天蛋白酶3介导BAG3蛋白剪切的研究
张海燕
都镇先
孟欣
邓娓娓
王华芹
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
盐酸小檗碱通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻急性低氧暴露引起的肝损伤
张子昂
董倩
官瑞丽
孙亚菲
刘新秦
邹远康
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
5
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0
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