人衰变加速因子的二级结构与B细胞表位预测 被引量：3

1

作者 邹强 谢佩蓉 +2 位作者 李华 郭波 郑萍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期388-392,共5页

目的 :分析预测人衰变加速因子的二级结构特征及B细胞表位。方法 :比较Chou&Fasman经典方案和基于多重序列比较的PHDsec二级结构预测方案的预测准确率 ,应用较优方案对DAF的二级结构进行预测分析 ;运用Hopp&Woods的亲水性方案及... 目的 :分析预测人衰变加速因子的二级结构特征及B细胞表位。方法 :比较Chou&Fasman经典方案和基于多重序列比较的PHDsec二级结构预测方案的预测准确率 ,应用较优方案对DAF的二级结构进行预测分析 ;运用Hopp&Woods的亲水性方案及PHDacc可及性方案预测DAF的亲水性和可及性 ,结合DAF的二级结构特征 ,分析预测DAF的B细胞表位。结果 :PHDsec方案对SCR的预测准确率明显高于Chou&Fasman方案 ,DAF的SCR1 4中无α螺旋 ,仅包含 β折叠及袢 ;推测最可能的抗原表位位于Pro73 Val79、Arg130 Leu139及Glu15 6 Cys16 3;SCR1、SCR2与SCR3、SCR4在亲水性及二级结构分布方面具有较大差异。结论 展开更多

关键词 衰变加速因子 二级结构 表位 预测 B细胞

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心肺转流不同氧分压对红细胞衰变加速因子的影响 被引量：4

2

作者 王晓军 张红 +1 位作者 蔡回钧 丁君 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期388-390,共3页

目的 探讨心肺转流（CPB）中不同动脉氧分压（PaO2）对红细胞衰变加速因子（DAF或CD55）的影响.方法 40例心脏病患者随机均分为四组：紫绀型先天性心脏病高氧分压组（A组）及正常氧分压组（B组）,非紫绀型心脏病高氧分压组（C组）及正... 目的 探讨心肺转流（CPB）中不同动脉氧分压（PaO2）对红细胞衰变加速因子（DAF或CD55）的影响.方法 40例心脏病患者随机均分为四组：紫绀型先天性心脏病高氧分压组（A组）及正常氧分压组（B组）,非紫绀型心脏病高氧分压组（C组）及正常氧分压组（D组）.CPB中,A、C组PaO2控制在300～500 mm Hg,B、D组PaO2控制在100～250 mm Hg.于CPB前（T1）、CPB15 min（T2）、主动脉开放15 min（T3）、术后24 h（T4）采集动脉血,用小鼠抗人CD55 FITC荧光单克隆抗体直接标记,流式细胞仪检测红细胞CD55活性及数量.结果 A组T2、T3时的红细胞CD55活性明显高于T1时（P〈0.05）.但红细胞CD55数量差异无统计学意义.B、C、D三组各时点红细胞CD55活性及数量差异无统计学意义.结论 CPB中高氧分压可使紫绀型心脏病患者的红细胞CD55活性明显增强,缺氧红细胞可能存在再氧合损伤;控制氧分压对红细胞免疫功能有一定的保护作用. 展开更多

关键词 心肺转流 动脉血氧分压 衰变加速因子

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构建人补体衰变加速因子真核载体并转染NIH/3T3成纤维细胞 被引量：2

3

作者 乔庆 陈勇 +2 位作者 窦科峰 张静 李剑平 《医学研究生学报》 CAS 2006年第4期302-305,i0012,共5页

目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecT... 目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,构建pSecTag2/HygroBDAF真核表达质粒,并进行酶切鉴定及序列测定;利用壳聚糖包裹质粒,转染小鼠NIH/3T3细胞,并对转染细胞用抗DAF进行免疫组化染色。结果:DAF基因大小为1049bp,与基因序列数据库中记载的人DAFcDNA序列结果完全一致;利用壳聚糖DAF纳米微粒转染NIH/3T3细胞24h后,免疫组化染色显示细胞质弥漫染色阳性。结论:成功构建了人DAF真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH/3T3细胞。 展开更多

关键词 补体衰变加速因子 壳聚糖 纳米微粒 基因克隆 基因转染

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人衰变加速因子在CHO细胞的表达及其衰变加速活性研究

4

作者 郭波 郑萍 +5 位作者 马正伟 许桂莲 李华 谢佩蓉 吴玉章 邹强 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期576-579,共4页

目的　获得稳定表达人衰变加速因子 (humandecay acceleratingactivity ,hDAF)的中国仓鼠卵巢 (Chineseham sterovary ,CHO)细胞系 ,观察在补体活化情况下 ,hDAF对异种细胞的保护作用。方法　构建真核表达载体DAF pcDNA3 .1,用脂质体转... 目的　获得稳定表达人衰变加速因子 (humandecay acceleratingactivity ,hDAF)的中国仓鼠卵巢 (Chineseham sterovary ,CHO)细胞系 ,观察在补体活化情况下 ,hDAF对异种细胞的保护作用。方法　构建真核表达载体DAF pcDNA3 .1,用脂质体转染法将其导入CHO细胞 ,有限稀释法筛选稳定表达hDAF的单细胞克隆 ,流式细胞仪检测hDAF的表达 ,C3沉积实验和51 Cr释放法测定其促补体衰变活性。结果　成功构建了真核表达载体DAF pcDNA3 .1,并获得了表达hDAF的单细胞克隆 ,表达hDAF的CHO能减少补体C3的沉积 ,减弱补体的杀伤作用。结论　获得在细胞膜上稳定表达具功能活性的hDAF的CHO克隆 ,为进一步研究其结构与功能的关系准备了条件。 展开更多

关键词 补体 衰变加速因子 CHO细胞 ^51Cr释放法

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人衰变加速因子DAF基因真核表达系统的构建

5

作者 徐莉 赵舟宙 +1 位作者 刘辉 李文鑫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1116-1120,共5页

目的:构建含人补体调节蛋白衰变加速因子DAF分子的cDNA编码区的真核重组表达载体pcDNA3-DAF,转染NIH3T3细胞,建立稳定表达人DAF的NIH3T3细胞模型。方法:将人DAF分子的cDNA编码区克隆到真核表达载体pcDNA3,经酶切和测序鉴定后用磷酸钙沉... 目的:构建含人补体调节蛋白衰变加速因子DAF分子的cDNA编码区的真核重组表达载体pcDNA3-DAF,转染NIH3T3细胞,建立稳定表达人DAF的NIH3T3细胞模型。方法:将人DAF分子的cDNA编码区克隆到真核表达载体pcDNA3,经酶切和测序鉴定后用磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的NIH3T3细胞株。用PCR检测人DAF基因在NIH3T3细胞基因组中的整合;用RT-PCR、Westernblot实验和间接免疫荧光技术分别从RNA水平和蛋白质水平检测人补体调节蛋白分子DAF在细胞株中的表达。结果:成功构建了pcDNA3-DAF重组真核表达载体,并建立了稳定转染的NIH3T3细胞株,成功地表达了目的基因。PCR检测连续传代30次的NIH3T3pcDNA3-DAF细胞,结果显示人DAF基因仍稳定整合在异源细胞的染色体上,并未随着传代而丢失,为稳定的转染细胞株。结论:真核表达载体构建和稳定转染NIH3T3细胞株的建立为进一步研究人DAF功能和多种补体调节蛋白的协同作用奠定基础。 展开更多

关键词 衰变加速因子 NIH3T3细胞 稳定转染 真核表达

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人衰变加速因子与异种器官移植

6

作者 王威巍 王济明 《实用医学杂志》 CAS 2007年第9期1434-1436,共3页

目前全世界每年有数十万的患者因行器官移植手术而得以存活，然而移植技术的日趋成熟使得器官移植形成了供不应求的局面。供体器官的短缺使人们把目光投向了异种移植，而异种移植带来的第一个问题即是排斥反应特别是超急性排斥反应（hyp... 目前全世界每年有数十万的患者因行器官移植手术而得以存活，然而移植技术的日趋成熟使得器官移植形成了供不应求的局面。供体器官的短缺使人们把目光投向了异种移植，而异种移植带来的第一个问题即是排斥反应特别是超急性排斥反应（hyperactue rejection，HAR）。近来人们利用抗体去除、补体去除或抑制补体激活在一定程度上阻止了HAR的发生， 展开更多

关键词 异种器官移植 人衰变加速因子 超急性排斥反应 器官移植手术 异种移植 补体激活 供不应求 移植技术

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补体过度激活与自身免疫型复发性流产的关系 被引量：8

7

作者 肖世金 赵爱民 鲍世民 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1125-1128,共4页

目的建立自身免疫型复发性流产(RSA)小鼠模型,探讨补体在自身免疫型RSA发病机制中的作用。方法采用子宫注射人β2GP-1免疫Balb/c小鼠(子宫β2GP-1注射组,n=15);分别以子宫无关蛋白注射组(n=6)、子宫佐剂注射组(n=13)、子宫生理盐水(NS)... 目的建立自身免疫型复发性流产(RSA)小鼠模型,探讨补体在自身免疫型RSA发病机制中的作用。方法采用子宫注射人β2GP-1免疫Balb/c小鼠(子宫β2GP-1注射组,n=15);分别以子宫无关蛋白注射组(n=6)、子宫佐剂注射组(n=13)、子宫生理盐水(NS)注射组(n=10)及正常未孕组(n=10)、正常妊娠组(n=15)作为对照。比较各组小鼠胚胎丢失率、胎盘平均质量、外周血补体C3浓度及胎盘组织衰变加速因子(DAF)的质量浓度。结果子宫β2GP-1注射组小鼠胚胎丢失率显著高于正常妊娠组和各子宫注射对照组(P<0.05),胎盘平均质量显著低于正常妊娠组和各子宫注射对照组(P<0.05),外周血补体C3水平和胎盘组织DAF的质量浓度显著低于正常妊娠组和各子宫注射对照组(P<0.05)。结论通过子宫注射人β2GP-1的方法可诱导建立符合自身免疫型RSA临床特征的小鼠模型,补体系统过度激活可能是自身免疫型RSA的发病机制之一。 展开更多

关键词 复发性流产 自身免疫 动物模型 β2GP-1 补体C3 衰变加速因子 小鼠

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酵母细胞表面展示的hDAF对补体在酵母细胞表面沉积的抑制作用 被引量：2

8

作者 郭波 郑萍 +2 位作者 谢佩蓉 吴玉章 邹强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期269-271,共3页

目的 :研究酿酒酵母细胞表面展示的人衰变加速因子 (hDAF) ,是否具有天然衰变加速因子的补体抑制活性。方法 :先用正常人血清处理酵母细胞EBY10 0 ,然后用流式细胞仪检测酵母细胞表面C5b 9复合物的沉积和hDAF在酵母细胞表面的表达。结... 目的 :研究酿酒酵母细胞表面展示的人衰变加速因子 (hDAF) ,是否具有天然衰变加速因子的补体抑制活性。方法 :先用正常人血清处理酵母细胞EBY10 0 ,然后用流式细胞仪检测酵母细胞表面C5b 9复合物的沉积和hDAF在酵母细胞表面的表达。结果 :酵母细胞EBY10 0可直接活化人血清中的补体成分 ,导致酵母细胞表面C5b 9的沉积 ;而表达DAF的酵母细胞表面C5b 9的沉积明显减少。结论 :酵母细胞表面展示的DAF可正确折叠 。 展开更多

关键词 补体 衰变加速因子 酵母细胞 表面展示

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转人DAF基因猪体内外源基因的整合鉴定 被引量：2

9

作者 华文君 陈付学 +1 位作者 魏庆信 樊俊华 《湖北农业科学》 1998年第2期56-58,共3页

衰变加速因子（ＤＡＦ）是补体激活途径中的一个重要膜调节蛋白，转人ＤＡＦ基因的猪可以作为人器官移植的供体。采用聚合酶链反应的方法，对８７头经显微注射导入ｈＤＡＦＳＣ质粒片段或ｈＤＡＦＢ质粒片段的产仔猪进行整合鉴定，获得... 衰变加速因子（ＤＡＦ）是补体激活途径中的一个重要膜调节蛋白，转人ＤＡＦ基因的猪可以作为人器官移植的供体。采用聚合酶链反应的方法，对８７头经显微注射导入ｈＤＡＦＳＣ质粒片段或ｈＤＡＦＢ质粒片段的产仔猪进行整合鉴定，获得转ｈＤＡＦ基因阳性猪１８头。 展开更多

关键词 衰变加速因子 聚合酶链反应 整合 猪

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外源hDAF基因在转基因猪中的表达研究 被引量：5

10

作者 陈付学 曹军平 +4 位作者 魏庆信 樊俊华 熊忠良 郭晖 陈实 《湖北畜牧兽医》 1999年第2期3-5,共3页

衰变加速因子(DAF)是补体激活途径中的一个重要调节蛋白,转人DAF(hDAF)基因猪可以作为异种器官移植的供体.采用直接免疫荧光法对转hDAF基因猪耳组织冰冻切片进行了观察,并应多媒体图文分析系统测定荧光照片的平均灰度.结果表明,14头转... 衰变加速因子(DAF)是补体激活途径中的一个重要调节蛋白,转人DAF(hDAF)基因猪可以作为异种器官移植的供体.采用直接免疫荧光法对转hDAF基因猪耳组织冰冻切片进行了观察,并应多媒体图文分析系统测定荧光照片的平均灰度.结果表明,14头转基因猪中,有7头动脉肌肉展表达了外源hDAF基因,它可以作为外源基因在供体中表达的主要指标,用于转基因猪的检测. 展开更多

关键词 衰变加速因子 免疫荧光 基因表达 猪 器官移植

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病毒受体陷阱与病毒性心肌炎 被引量：2

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作者 李奋 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期801-804,866,共5页

柯萨奇B组病毒(CVB)是引起人类病毒性心肌炎(VM)的最常见病原体,CVB感染心肌细胞主要是通过与柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)及衰变加速因子(DAF/CD55)这2种受体蛋白的相互作用完成。近年来,病毒受体陷阱(virus receptor trap)已被用于治... 柯萨奇B组病毒(CVB)是引起人类病毒性心肌炎(VM)的最常见病原体,CVB感染心肌细胞主要是通过与柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)及衰变加速因子(DAF/CD55)这2种受体蛋白的相互作用完成。近年来,病毒受体陷阱(virus receptor trap)已被用于治疗实验性小鼠CVB3心肌炎,并已显示出良好的抗病毒效果。所谓"病毒受体陷阱疗法"是指利用人工合成的可溶性病毒受体来结合病毒,从而阻断病毒与靶细胞膜上的受体结合及随后的病毒内吞。病毒受体陷阱疗法加深了对VM发病机制的理解,拓展了VM的治疗策略,有望成为急性VM一个新的有效治疗手段。 展开更多

关键词 病毒受体陷阱 心肌炎 柯萨奇B组病毒 柯萨奇病毒和腺病毒受体 衰变加速因子

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利用转基因猪的心脏

12

作者 陶冶 《生物技术通报》 CAS CSCD 1995年第6期16-16,共1页

在法国尼斯召开的第七届欧洲生物技术研讨会上,Imutran Ltd宣布他们已成功地对其转基因猪的心脏进行了离体测试。开发这种心脏是为了向异种移植物移植术提供一种安全的移植物,利用猪的心脏工程可以避免人的免疫防御系统对移植物的过急... 在法国尼斯召开的第七届欧洲生物技术研讨会上,Imutran Ltd宣布他们已成功地对其转基因猪的心脏进行了离体测试。开发这种心脏是为了向异种移植物移植术提供一种安全的移植物,利用猪的心脏工程可以避免人的免疫防御系统对移植物的过急性排斥。 补体级联系统的引发物,一种被称作C3b的转换酶可以通过存在于每个细胞表面的调控因子阻止自身组织被攻击。将这些调控因子中的一种,被称为衰变加速因子或DAF的编码DNA微注射并脂转染2443个猪卵细胞。其中有2%成功再生,产生60头携带(在每个细胞上)人DAF的转基因猪。 展开更多

关键词 转基因猪 调控因子 衰变加速因子 异种移植物 急性排斥 猪卵细胞 级联系统 心脏功能 移植术 生物技术

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