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弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列SRS47D基因的原核表达及蛋白定位研究被引量：1: 1; 作者刘辉米荣升 +7 位作者贾海燕王旭黄燕张烨华张晓丽杨衡韩先干陈兆国《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第4期17-23,共7页; 为表达弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列(surface antigen glycoprotein 1-related sequences,SRS47D)并确定其在弓形虫中的定位,本研究将SRS47D基因序列插入原核表达载体pColdⅠ,构建原核表达质粒pColdⅠ-SRS47D,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,... 展开更多; 关键词刚地弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列原核表达定位; 在线阅读下载PDF 职称材料

堆型艾美耳球虫子孢子表面抗原基因cSZ1的克隆及序列分析被引量：1: 2; 作者覃宗华蔡建平 +4 位作者谢明权艾哈迈德彭新宇魏文康吴惠贤《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期550-554,共5页; 根据已报道的堆型艾美耳球虫(Eimeriaacervulina)子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计特异性引物,以孢子化12h的E.acervulina广东株卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法成功克隆了其子孢子表面抗原基因cSZ1(cSZ1(Gd))的cDNA。所克隆cSZ1(... 展开更多; 关键词堆型艾美耳球虫子孢子表面抗原 cSZ1基因基因克隆序列分析鸡球虫病; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡传染性支气管炎病毒分离株与疫苗株抗原相关性和S1基因序列分析被引量：1: 3; 作者任海松张秀美 +4 位作者崔言顺许传田杨少华李建亮胡北侠《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第1期74-78,共5页; 本实验挑选8株近年来山东省IBV分离株与疫苗株H120和491,利用SPF鸡分别制备了高免阳性血清,进行鸡胚交叉中和试验,计算其抗原相关系数,鉴定其血清型,并结合S1基因序列分析,研究其血清型和基因型之间的关系。结果显示:SDWF0608、SDLY0612... 展开更多; 关键词鸡传染性支气管炎 S1基因序列分析血清中和实验抗原相关系数(R); 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形虫srs19d基因敲除株的构建及其在宿主细胞中的生物学功能分析: 4; 作者牛水珠潘明 +1 位作者葛层层黄思扬《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期10-17,共8页; 为探究弓形虫表面抗原1相关序列(SRS)蛋白家族新成员SRS19D的功能,本试验以弓形虫Ⅱ型Pru虫株为亲本,运用成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9)技术构建了PruΔsrs 19 d敲除虫株,并进行了噬斑试验、细胞内增殖试验、体... 展开更多; 关键词弓形虫表面抗原1相关序列(srs) srs19d 成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9) 生物学功能; 在线阅读下载PDF 职称材料

恶性疟原虫海南、云南、安徽株裂殖子表面抗原MSA1第二区基因的克隆和序列分析被引量：1: 5; 作者李明谢毅 +2 位作者李英杰任大明毕惠祥《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第2期90-93,共4页; 本文应用ＰＣＲ技术扩增并克隆了恶性疟原虫海南、云南、安徽三个地理株ＭＳＡ１第二区基因，测定并分析了基因序列。结果表明，海南、云南、安徽株扩增片段长度为４２３ｂｐ，基因序列完全相同，我国虫株ＭＳＡ１与ＷＥＬＬＣＯＭＥ株... 展开更多; 关键词疟原虫裂殖子表面抗原基因序列分析 MSA1; 在线阅读下载PDF 职称材料

含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究被引量：1: 6; 作者胡贵方吴小兵 +3 位作者俞守义董小岩陈清候云德《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期553-556,共4页; 目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂... 展开更多; 关键词乙型肝炎表面抗原基因表达重组腺相关病毒 PCR法 PTHBV-1质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

采用RACE技术获得全长人新基因MAGE-D1 被引量：27: 7; 作者邢桂春张成岗 +1 位作者魏汉东贺福初《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期203-208,共6页; c DNA末端快速扩增 (RACE)技术是快速获得新基因 5′和 3′端未知序列的有效手段 .鉴于新报导的人肿瘤基因 MAGE家族成员之一 MAGE- D1的 c DNA序列不完全 ,从而拟用 RACE技术获得 MAGE- D1的全长 c DNA序列 .结果显示 ,MAGE- D1的 c DN... 展开更多; 关键词 CDNA末端快速扩增技术人黑色素瘤抗原相关基因D1 全长CDNA序列; 在线阅读下载PDF 职称材料

MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化: 8; 作者穆杨张彦明 +4 位作者童德文王玉东李崴李玉清郑增忍《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第12期1-5,共5页; 将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1... 展开更多; 关键词 MSB1 马立克病肿瘤相关表面抗原 MATSA的分离与纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列SRS47D基因的原核表达及蛋白定位研究被引量：1: 1; 作者刘辉米荣升贾海燕王旭黄燕张烨华张晓丽杨衡韩先干陈兆国; 机构中国农业科学院上海兽医研究所农业农村部动物产品质量安全生物性危害因子风险评估实验室(上海)农业农村部动物寄生虫学重点实验室; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第4期17-23,共7页; 基金国家重点研发计划(2018YFD0502305) 国家农产品质量安全风险评估计划项目(GJFP201900022) +2 种基金中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2019JB13)。; 文摘为表达弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列(surface antigen glycoprotein 1-related sequences,SRS47D)并确定其在弓形虫中的定位,本研究将SRS47D基因序列插入原核表达载体pColdⅠ,构建原核表达质粒pColdⅠ-SRS47D,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析重组蛋白表达情况,Western blot分析重组蛋白的反应原性;利用His柱纯化重组蛋白,免疫新西兰兔,制备抗血清,通过间接ELISA检测血清效价;利用免疫荧光法检测蛋白在弓形虫速殖子中的定位。结果显示:成功构建了原核表达质粒pColdⅠ-SRS47D,在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,表达产物约为55 kDa;重组蛋白能与感染弓形虫的小鼠血清发生特异性反应,免疫兔血清效价达到1∶51 200;免疫荧光检测结果显示,SRS47D蛋白分布在弓形虫速殖子表面,尤其前部和后部表膜。上述结果为进一步深入研究弓形虫SRS47D的特性和功能奠定了基础。; 关键词刚地弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列原核表达定位; Keywords Toxoplasma gondii surface antigen glycoprotein 1-related sequence prokaryotic expression location; 分类号 S852.723 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名堆型艾美耳球虫子孢子表面抗原基因cSZ1的克隆及序列分析被引量：1: 2; 作者覃宗华蔡建平谢明权艾哈迈德彭新宇魏文康吴惠贤; 机构广东省农业科学院兽医研究所华南农业大学兽医学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期550-554,共5页; 基金广东省自然科学基金(000145) 国家"863"计划(2002AA241331)资助。; 文摘根据已报道的堆型艾美耳球虫(Eimeriaacervulina)子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计特异性引物,以孢子化12h的E.acervulina广东株卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法成功克隆了其子孢子表面抗原基因cSZ1(cSZ1(Gd))的cDNA。所克隆cSZ1(Gd)的cDNA全长940bp,其中第3～512位是其阅读框架,共编码170个氨基酸,两端为非编码区。与已报道的cSZ1基因的cDNA序列相比,cSZ1(Gd)有4个位置的核苷酸发生了变异,即原序列中第294、443、569、586位的G、G、G、A在cSZ1(Gd)分别为A、A、A、G,二者核苷酸序列的同源性为99.57%(936/940),其中阅读框架的核苷酸同源性为99.61%(508/510)。比较根据核苷酸序列推导的氨基酸序列,第294位的变异导致了所编码氨基酸由缬氨酸(V)变为异亮氨酸(I),而第443位的变异则为无义突变,氨基酸序列的同源性为99.41%(169/170)。; 关键词堆型艾美耳球虫子孢子表面抗原 cSZ1基因基因克隆序列分析鸡球虫病; Keywords Eimeria acervulina cSZ1 cloning sequence; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡传染性支气管炎病毒分离株与疫苗株抗原相关性和S1基因序列分析被引量：1: 3; 作者任海松张秀美崔言顺许传田杨少华李建亮胡北侠; 机构山东农业大学动物科技学院山东农科院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室; 出处《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第1期74-78,共5页; 基金山东省自然基金(ZR2009DQ015) 现代农业产业技术体系建设专项资金联合资助; 文摘本实验挑选8株近年来山东省IBV分离株与疫苗株H120和491,利用SPF鸡分别制备了高免阳性血清,进行鸡胚交叉中和试验,计算其抗原相关系数,鉴定其血清型,并结合S1基因序列分析,研究其血清型和基因型之间的关系。结果显示:SDWF0608、SDLY0612、SDLY0701与疫苗株H120同属Mass血清型的不同亚型,其它5个分离株与H120和491不属于同一个血清型。结合S1基因序列分析发现,S1基因序列分析与血清中和结果二者不具有明显的相关性,8个分离株分属三个基因群,其中SDTA06111与H120等同属一个基因群,但血清中和实验显示它们不属于一个血清型;CK/CH/SD09/005与一个参考株独自构成一个基因群,其S1基因变异程度较大,并且能够与两个疫苗株发生交叉中和实验,但不属于一个血清型,它可能是一个基因重组后病毒。; 关键词鸡传染性支气管炎 S1基因序列分析血清中和实验抗原相关系数(R); Keywords Infectious bronchitis virus S1 gene analysis neutralization test antigen relatedness value（R）; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫srs19d基因敲除株的构建及其在宿主细胞中的生物学功能分析: 4; 作者牛水珠潘明葛层层黄思扬; 机构扬州大学兽医学院教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期10-17,共8页; 基金江苏省杰出青年基金项目(BK20190046) 江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)。; 文摘为探究弓形虫表面抗原1相关序列(SRS)蛋白家族新成员SRS19D的功能,本试验以弓形虫Ⅱ型Pru虫株为亲本,运用成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9)技术构建了PruΔsrs 19 d敲除虫株,并进行了噬斑试验、细胞内增殖试验、体外缓殖子转化试验、小鼠毒力试验和小鼠脑包囊检测试验。噬斑试验和细胞内增殖试验结果显示,与Pru虫株相比,PruΔsrs 19 d敲除虫株在人包皮成纤维(HFF)细胞上形成的噬斑显著变小(P<0.05),纳虫泡内形成的速殖子个数显著减少(P<0.05)。体外缓殖子转化试验发现,与Pru虫株相比,PruΔsrs 19 d敲除虫株的体外缓殖子转化率极显著降低(P<0.01)。小鼠毒力试验结果显示,与Pru虫株相比,弓形虫PruΔsrs 19 d敲除虫株不会引起ICR小鼠的死亡(P<0.05)。小鼠脑包囊检测试验结果显示,与Pru虫株相比,PruΔsrs 19 d敲除虫株感染小鼠后形成的脑包囊数量极显著减少(P<0.01)。本试验成功构建了弓形虫PruΔsrs 19 d敲除虫株,发现srs 19 d基因在弓形虫的体外生长、复制、毒力和慢性感染中发挥重要作用,为进一步探究SRS19D的功能和作用机制提供参考。; 关键词弓形虫表面抗原1相关序列(srs) srs19d 成簇规律间隔短回文重复-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9) 生物学功能; Keywords Toxoplasma gondii surface antigen 1-related sequences(srs) srs 19 d CRISPR/Cas9 biological function; 分类号 S852 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名恶性疟原虫海南、云南、安徽株裂殖子表面抗原MSA1第二区基因的克隆和序列分析被引量：1: 5; 作者李明谢毅李英杰任大明毕惠祥; 机构第一军医大学热带医院研究所; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第2期90-93,共4页; 文摘本文应用ＰＣＲ技术扩增并克隆了恶性疟原虫海南、云南、安徽三个地理株ＭＳＡ１第二区基因，测定并分析了基因序列。结果表明，海南、云南、安徽株扩增片段长度为４２３ｂｐ，基因序列完全相同，我国虫株ＭＳＡ１与ＷＥＬＬＣＯＭＥ株最为相似，存在ＭＡＤ和Ｋ１两种等位基因型的基因内重组现象。; 关键词疟原虫裂殖子表面抗原基因序列分析 MSA1; 分类号 R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究被引量：1: 6; 作者胡贵方吴小兵俞守义董小岩陈清候云德; 机构第一军医大学流行病教研室中国预防医学科学院病毒学研究所; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期553-556,共4页; 基金国家863课题(863-BH03-05-02)~~; 文摘目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中,G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-HBsAg;用具有rAAV包装功能的HSV-1- HSV1-rc/△UL2感染BHK-HBsAg,纯化后得到rAAV-HBsAg;ELISA检测重组病毒表面抗原基因在BHK-21细胞和293细胞中的表达;用rAAV-HBsAg免疫BalB/C小鼠,RIA法检测血清中表面抗体的滴度。结果ELISA法检测到混合细胞系BHK-HBsAg中HBsAg的表达量为(28.6±6.7)ng/5×106细胞;rAAV-HBsAg感染BHK-21细胞和293细胞后均能检测到HBsAg的表达,表达量随感染复数的增加而升高;rAAV-HBsAg免疫的BalB/C小鼠能产生表面抗体(抗-HBs抗体)。结论rAAV-HBsAg在体外能表达,免疫动物能诱导体液免疫反应的产生。rAAV-HBsAg有希望成为乙型肝炎候选疫苗,也可以进一步用于探索慢性乙型肝炎的免疫治疗。; 关键词乙型肝炎表面抗原基因表达重组腺相关病毒 PCR法 PTHBV-1质粒; Keywords hepatitis B surface antigens gene expression recombinant adeno-associated virus; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名采用RACE技术获得全长人新基因MAGE-D1 被引量：27: 7; 作者邢桂春张成岗魏汉东贺福初; 机构军事医学科学院放射医学研究所; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期203-208,共6页; 基金国家"8 6 3"项目! (No.10 2 -10 -0 4-0 4) 国家自然科学基金!重点项目(No.39730 310 +1 种基金 39970 2 47) 国家自然科学基金!项目 (No.; 文摘 c DNA末端快速扩增 (RACE)技术是快速获得新基因 5′和 3′端未知序列的有效手段 .鉴于新报导的人肿瘤基因 MAGE家族成员之一 MAGE- D1的 c DNA序列不完全 ,从而拟用 RACE技术获得 MAGE- D1的全长 c DNA序列 .结果显示 ,MAGE- D1的 c DNA全长为 2 80 0个碱基 ,编码778个氨基酸 .同时对 RACE技术应用时的一些关键问题进行了讨论 .; 关键词 CDNA末端快速扩增技术人黑色素瘤抗原相关基因D1 全长CDNA序列; Keywords rapid amplification of cDNA ends,human melanoma antigen encoding gene D1,full lenth cDNA sequence; 分类号 Q75 [生物学—分子生物学] Q987 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化: 8; 作者穆杨张彦明童德文王玉东李崴李玉清郑增忍; 机构西北农林科技大学动物科技学院农业部动物检疫所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第12期1-5,共5页; 基金国家自然科学基金项目(30371067) 霍英东教育基金项目(91033); 文摘将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1细胞进行间接荧光抗体染色以检测M ATSA的分离情况。获得的M ATSA粗提物经超滤浓缩和Sephadex G-75凝胶纯化后,用SDS-PAGE检测纯化的结果。试验结果表明,从M SB 1细胞表面分离到M ATSA,经电泳获得了纯化的M ATSA,其相对分子质量约为35 ku。结果为M ATSA单克隆抗体的制备及其相关的研究奠定了基础。; 关键词 MSB1 马立克病肿瘤相关表面抗原 MATSA的分离与纯化; Keywords MSB1 marek＇s disease tumor-associated surface antigen separation and purification of MATSA; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列SRS47D基因的原核表达及蛋白定位研究	刘辉米荣升贾海燕王旭黄燕张烨华张晓丽杨衡韩先干陈兆国	《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	堆型艾美耳球虫子孢子表面抗原基因cSZ1的克隆及序列分析	覃宗华蔡建平谢明权艾哈迈德彭新宇魏文康吴惠贤	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鸡传染性支气管炎病毒分离株与疫苗株抗原相关性和S1基因序列分析	任海松张秀美崔言顺许传田杨少华李建亮胡北侠	《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	弓形虫srs19d基因敲除株的构建及其在宿主细胞中的生物学功能分析	牛水珠潘明葛层层黄思扬	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	恶性疟原虫海南、云南、安徽株裂殖子表面抗原MSA1第二区基因的克隆和序列分析	李明谢毅李英杰任大明毕惠祥	《第一军医大学学报》 CSCD	1995	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究	胡贵方吴小兵俞守义董小岩陈清候云德	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	采用RACE技术获得全长人新基因MAGE-D1	邢桂春张成岗魏汉东贺福初	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	27	在线阅读下载PDF 职称材料
8	MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化	穆杨张彦明童德文王玉东李崴李玉清郑增忍	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料