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不同类型基质对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析寡糖和多糖的影响
1
作者 张子豪 王君巧 聂少平 《食品科学》 北大核心 2025年第14期225-237,共13页
本实验研究二元基质(氨基-4-羟基苯甲酸(amino-4-hydroxybenzoic acid,AHB)/2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、3-羟基香豆素(3-hydroxycoumarin,3-HC)/DHB)、离子液体基质(N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(对羟基苯偶氮)苯甲酸... 本实验研究二元基质(氨基-4-羟基苯甲酸(amino-4-hydroxybenzoic acid,AHB)/2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、3-羟基香豆素(3-hydroxycoumarin,3-HC)/DHB)、离子液体基质(N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(对羟基苯偶氮)苯甲酸/1,1,3,3-四甲基胍(1,1,3,3-tetramethylguanidine,TMG)、4-羟基香豆酸/TMG、2,4,6-三羟基苯乙酮(2,4,6-trihydroxyacetophenone,THAP)/TMG、N-甲基苯胺(N-methylaniline,NMA)/DHB)和反应性基质(3-肼基苯甲酸(3-hydrazylbenzoic acid,3-HBA)/DHB、6-肼烟酸(6-hydrazine niacin,HYNIC)/DHB、2-肼吡啶(2-hydrazopyridine,2-HPM))对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测麦芽八糖、半乳糖醛酸三糖和Dextran T6效果的影响,并与3种固体基质对比(DHB、THAP、α-氰基-4-羟基肉桂酸)。以麦芽八糖为例,研究各基质溶剂对检测寡糖效果的影响,针对反应性基质还研究了溶剂、反应时间、反应温度对衍生化率的影响。结果表明,对于麦芽八糖,3类基质均具有较理想的检测效果,谱图重现性好、质谱峰强度增加。对于反应性基质,其衍生化的反应温度至少为65℃,其中2-HPM在各条件下均具有高衍生效率((96.28±0.28)%),且能在较短时间(15 min)内完成衍生化反应,但是衍生化寡糖的信噪比(RSN)不高,而3-HBA/DHB和HYNIC/DHB衍生化寡糖的RSN高,但是衍生化效率较低,且反应时间至少需要60 min。此外,寡糖浓度对衍生化效率影响显著,当浓度低于108 fmol/L,衍生化寡糖信号很低或未被检测到。当THAP及3-HBA/DHB为基质时,其半乳糖醛酸三糖的质谱信号显著高于其余基质类型;对于Dextran T6,二元基质和离子液体基质的检测效果较优,其中AHB/DHB、3-HC/DHB、THAP/TMG、NMA/DHB为基质具有更广的分子质量测定范围,最高均可检测聚合度为36的多糖质谱峰。本实验系统研究不同类型基质对MALDI-TOF-MS检测3种不同类型碳水化合物效果的影响,研究结果可为碳水化合物的分析鉴定提供参考依据。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 基质 寡糖 多糖
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱结合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用
2
作者 张肖 蔡辉 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第2期168-173,共6页
目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用。方法 收集2023年1-12月苏州市第九人民医院检验科血培养仪报警时间<48 h、单一病原菌感染的无菌体液阳性标... 目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用。方法 收集2023年1-12月苏州市第九人民医院检验科血培养仪报警时间<48 h、单一病原菌感染的无菌体液阳性标本(血液、胸腹水、胆汁、脑脊液)共284份。所有标本均通过比浊仪进行菌液浓度检测,利用MALDI-TOF MS技术,根据病原菌浓度对应的分值快速评估鉴定结果的可靠性。结果 使用MALDI-TOF MS进行菌种鉴定时,各菌种可信结果的最低菌液浓度如下:大肠埃希菌3.0 mcf(1 mcf=3×10^(8) CFU/mL),肺炎克雷伯菌2.0 mcf,金黄色葡萄球菌3.0 mcf,粪肠球菌3.5 mcf,念珠菌3.5 mcf。VITEK 2 鉴定、常规MALDI-TOF MS 鉴定与MALDI-TOF MS直接鉴定进行对比:常规MALDI-TOF MS鉴定与VITEK 鉴定结果一致的有282份;MALDI-TOF MS直接鉴定>1.7的有272份,灵敏度为95.8% (272/284)。三种鉴定法得到的鉴定结果差异无统计学意义(χ^(2)=2.09,P=0.55)。结论 MALDI-TOF MS技术联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌,是病原菌鉴定的可靠创新技术,优点为快速准确,为临床尽快提供病原学的检出依据,具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 比浊法 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 快速鉴定 无菌体液 病原菌
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表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱在甲状腺癌诊断及临床分期中的应用 被引量：1
3
作者 张静 卢秀波 +2 位作者 刘洋 徐桂安 李振宇 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第1期123-125,共3页
目的:用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析正常人和甲状腺癌患者血清蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别正常人和甲状腺癌及Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型。方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测72例血清标... 目的:用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析正常人和甲状腺癌患者血清蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别正常人和甲状腺癌及Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型。方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测72例血清标本的蛋白质质谱,其中甲状腺癌40例(Ⅰ-Ⅱ期26例,Ⅲ-Ⅳ期14例),正常人32例。应用支持向量机和判别分析的方法分析质谱数据,建立甲状腺癌诊断模型并留一法交叉验证。结果:区分甲状腺癌和正常人的诊断模型交叉检验敏感性为100%,特异性为86%,总的符合率为93%;区分Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型对Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌检出的敏感性为77%,特异性为86%,对Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌检出的敏感性为86%,特异性为77%,总的符合率为80%。结论:应用SELDI-TOF-MS技术平台和生物信息技术建立的诊断模型为甲状腺癌的早期诊断及临床分期提供了新的手段。 展开更多
关键词 甲状腺癌 表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱 蛋白芯片 肿瘤标志物
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表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术在白血病诊断中的应用 被引量：1
4
作者 黄华 陈林兴 +1 位作者 林美册 黄靖宇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1273-1277,共5页
本研究对白血病患者及健康对照者的血清样本进行检测分析,筛选新的生物标记物并建立白血病的蛋白质指纹图谱诊断模型。应用SELDI-TOF-MS技术检测40例白血病标本及37例健康对照标本,用Biomarker Wizard软件分析筛选新的生物标记物,使用Bi... 本研究对白血病患者及健康对照者的血清样本进行检测分析,筛选新的生物标记物并建立白血病的蛋白质指纹图谱诊断模型。应用SELDI-TOF-MS技术检测40例白血病标本及37例健康对照标本,用Biomarker Wizard软件分析筛选新的生物标记物,使用Biomarker Patterns 5.0软件进行标记物的比较判别,建立白血病决策树诊断模型。结果表明,蛋白质指纹图谱分析发现有22个差异显著的蛋白峰(P<0.05);由m/z为4650,8609及11660建立的决策树诊断模型对白血病的诊断灵敏度为97.5%(39/40),特异性为91.9%(34/37)。结论:由3个蛋白标记物构成的白血病蛋白质指纹图谱诊断模型为白血病的诊断提供了新的借鉴和参考。 展开更多
关键词 表面增强激光解吸电离飞行时间质谱 白血病 蛋白质指纹图谱
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表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术及其在器官移植领域中的应用 被引量：1
5
作者 陈雅斌 赵猛 兰小鹏 《医学研究生学报》 CAS 2010年第5期547-550,共4页
表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术是较有效的蛋白质组学研究手段,虽然目前尚未应用于临床常规实验室诊断,但已广泛应用于肿瘤、传... 表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术是较有效的蛋白质组学研究手段,虽然目前尚未应用于临床常规实验室诊断,但已广泛应用于肿瘤、传染病、心血管病和神经系统疾病的研究。近年来,SELDI-TOF-MS技术试用于器官移植领域,如急性移植排斥反应的早期诊断、移植相关疾病的诊断、疾病相关蛋白的鉴定,探讨疾病的发生机制,展现了该技术在器官移植中的广阔应用前景。 展开更多
关键词 表面增强激光解吸电离飞行时间质谱 诊断 器官移植
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应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱联合磁珠技术寻找肺癌血清蛋白标志物 被引量：1
6
作者 谢静 朱乾坤 +5 位作者 朱莉思 肖刻 朱威 诸葛斯亮 朱朝晖 吴志宏 《协和医学杂志》 2016年第6期416-420,共5页
目的 建立肺癌蛋白质指纹图谱诊断模型,探讨用于肺癌早期诊断及手术疗效评估的血清蛋白标志物。方法 收集38例肺癌患者、12例肺部良性肿瘤患者及32名正常对照者的血清标本,应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface-enhanced lase... 目的 建立肺癌蛋白质指纹图谱诊断模型,探讨用于肺癌早期诊断及手术疗效评估的血清蛋白标志物。方法 收集38例肺癌患者、12例肺部良性肿瘤患者及32名正常对照者的血清标本,应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）联合磁珠技术,获得蛋白质指纹图谱,采用BPS分析软件对数据分组及相关性进行分析,初步建立肺癌的血清蛋白质指纹图谱诊断模型,并验证其诊断效率;同时对比肺癌患者手术前后的差异蛋白质谱,结合肺癌的诊断模型,选取合适的蛋白作为肺癌手术疗效的观察指标。结果 在质荷比为1000-50 000范围内,肺癌患者、肺部良性肿瘤患者和正常对照者之间共检测到215个蛋白质峰。其中,质荷比为1115.37、1929.70、3217.57、3246.34、3318.57、11 508.90的6个蛋白质峰表达差异具有统计学意义（P〈0.05）。决策树模型对肺癌的原始判别敏感性为92.11%（35/38）,特异性为90.91%（40/44）;交叉验证敏感性为86.67%（13/15）,特异性为86.67%（13/15）。其中质荷比为1115.37、1929.70、3246.34和11 508.90的蛋白质峰在肺癌患者中明显升高（P〈0.05）,当肺癌患者手术治疗后表达量较术前明显降低（P〈0.01）,表明这4个蛋白质峰对肺癌的诊断及疗效判定具有潜在应用价值。结论 应用SELDI-TOF-MS技术建立的肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型具有较高的敏感性和特异性,为发现肺癌早期生物标志物并判断疗效奠定基础。 展开更多
关键词 肺癌 肿瘤标志物 诊断 蛋白质组学 表面增强激光解吸电离飞行时间质谱
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应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱筛选大肠癌血清特异标志物
7
作者 马明 宋鉴清 欧阳金鸣 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期209-211,共3页
目的采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测大肠癌患者与健康对照者血清中蛋白的差异,为大肠癌的早期诊断提供理论依据。方法应用SELDI-TOF-MS技术及弱阳离子蛋白质芯片(WCX2)检测36例健康成人(对照组)和36例大... 目的采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测大肠癌患者与健康对照者血清中蛋白的差异,为大肠癌的早期诊断提供理论依据。方法应用SELDI-TOF-MS技术及弱阳离子蛋白质芯片(WCX2)检测36例健康成人(对照组)和36例大肠癌患者(大肠组)血清中蛋白含量。结果在质荷比为2000Da～30000Da的范围内,两组样本检测到了对照组82个蛋白峰。其中3604.240Da蛋白峰大肠癌组明显高于对照组(P<0.05),而12861.368Da的蛋白峰对照组明显高于大肠癌组(P<0.05)。利用这两个蛋白筛查大肠癌的特异度为86.11%(31/36),敏感度为77.78%(28/36),阳性预测值为87.5%。结论质荷比为3604.240Da与12861.368Da的两个蛋白峰可以作为大肠癌早期诊断的备选标志物。 展开更多
关键词 大肠癌 表面增强激光解吸电离 飞行时间 质谱技术 弱阳离子蛋白质芯片 标志物
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半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析 被引量：1
8
作者 黄益曼 李春晖 +5 位作者 柏家辉 陆颖洁 李添 董志颖 苏越 郭寅龙 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期226-236,共11页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备的时长和比例,以麦胚凝集素(TVL)为内标,直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明,CNC辅助MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间的延长,姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降,浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中,由于pH值的改变,法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外,将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中,均未检出PTL。该方法操作简便,可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化,为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。 展开更多
关键词 半夏 炮制方法 半夏凝集素(PTL) 纤维素纳米晶体(CNC) 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法快速测定米饭和乳制品中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide 被引量：1
9
作者 曾羲 王宇 +3 位作者 徐巨才 黄穗东 王涓 徐振林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期232-238,共7页
建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考... 建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考察基质种类、点靶方式、基质溶剂和用量、激光强度等对Cereulide的质谱信号强度的影响,并进行方法学验证和实际样品检测。结果表明,选择以α-氰基-4-羟基肉桂酸为基质,均匀分散在50%乙腈-水(含0.1%三氟乙酸)中,采用先点基质再点样品的点样方式,反射线性正离子模式下选择激光强度70%进行食品中MALDI-TOF MS筛查时,可检测到Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰,此质谱信号稳定、强度高、响应重复性好。方法学验证结果表明,Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰在5~100 ng/mL范围内线性好,相关系数(r)>0.99;方法的检出限分别为3.0 ng/g和5.0 ng/g;对米饭和牛乳样品的加标回收率为73.3%~118.2%,相对标准偏差为0.3%~10.9%(n=6)。本方法分析速度快、准确性高、灵敏度好、抗干扰能力强、无需内标即可实现对米饭和乳制品中Cereulide的批量筛查和检测。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱 蜡样芽孢杆菌 呕吐毒素 α-氰基-4-羟基肉桂酸
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法测定α/β-二羰基类化合物与标准瓜氨酸化肽段之间的衍生化反应活性
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作者 李雁凤 周丹丹 +7 位作者 陈旭飞 赵娟娟 高春丽 邱兴泰 唐紫超 邓楠 赵伟宁 边阳阳 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期711-720,共10页
蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,... 蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,因此对蛋白质的瓜氨酸化修饰进行质谱分析面临着巨大挑战。通过对瓜氨酸侧链脲基进行化学衍生反应,可以提高瓜氨酸化肽段的m/z差值,引入亲和富集标签,可有效提高瓜氨酸化分析的灵敏度和精准度。本研究以标准瓜氨酸化肽段为研究对象,以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)为检测手段,对一系列二羰基类化合物与瓜氨酸化肽段之间的化学反应活性进行测定。在对α-二羰基类化合物的考察中发现,苯乙二醛、丙酮醛、1,2-环己二酮和1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮对瓜氨酸化肽段的衍生化效率很高,并且能够生成单一的衍生化产物;2,3-丁二酮、乙二醛与瓜氨酸化肽段之间的反应效率也很高,但会生成一系列副反应产物。在对β-二羰基类化合物的考察中发现,1,3-环己二酮、2,4-戊二酮在与瓜氨酸化肽段进行反应后,均可以产生单一的衍生化产物,但反应效率很低,不适用于瓜氨酸化肽段的化学衍生反应。实验结果表明,α-二羰基结构是实现高效、特异性瓜氨酸化肽段化学衍生反应的基础,α-二羰基类化合物中不同的侧链结构又决定了衍生化产物的结构、衍生化效率及副产物的生成。通过进一步合成含有亲和标签的α-二羰基类化合物,可以实现瓜氨酸化肽段的特异性富集和精准鉴定,有助于瓜氨酸化蛋白质及其位点鉴定的新方法开发。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 二羰基结构 瓜氨酸化肽段 化学衍生
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表面增强激光解析电离飞行时间质谱的质量控制 被引量：1
11
作者 陈蓉艳 兰小鹏 《医学研究生学报》 CAS 2009年第7期770-773,共4页
表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)是快速、高通量的蛋白质组学分析技术;应用于临床的关键是必须具有可重复性,使其结果具有可信度。文中综述SELDI-TOF MS质量控制的相关问题。
关键词 表面增强激光解析电离飞行时间质谱 质量控制 蛋白质组学
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表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术筛选蕈样肉芽肿血清生物标志物
12
作者 刘洁 郑燕华 +1 位作者 张建中 王宝玺 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期13-16,共4页
目的应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛选蕈样肉芽肿患者血清中的生物标志物。方法采用CM10蛋白质芯片捕获14例蕈样肉芽肿患者(研究组)和17例对照者(对照组)血清中的蛋白质,结合Biomarker Wizard软件进行分... 目的应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛选蕈样肉芽肿患者血清中的生物标志物。方法采用CM10蛋白质芯片捕获14例蕈样肉芽肿患者(研究组)和17例对照者(对照组)血清中的蛋白质,结合Biomarker Wizard软件进行分析。结果所有标本在相对分子质量0~50 000范围内均能检测出131个左右的蛋白峰。两组血清样本的蛋白质指纹图谱存在14个差异表达蛋白质峰,其中相对分子质量为7 670的蛋白质峰与C-C基序趋化因子22相符。结论SELDI-TOF-MS可用于蕈样肉芽肿患者血清生物标志物的筛选。 展开更多
关键词 表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱 蕈样肉芽肿 血清 生物标志物
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在李斯特菌检测和鉴定中的应用 被引量：17
13
作者 龚艳清 陈信忠 +3 位作者 杨俊萍 郭书林 马群飞 石椿丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第6期209-214,共6页
为建立食品中各种李斯特菌的快速检测和鉴定方法,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对单增李斯特菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌和格氏李斯特菌5种李斯特菌进行检测,并与传统的生化鉴定方法(VITEK... 为建立食品中各种李斯特菌的快速检测和鉴定方法,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对单增李斯特菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌和格氏李斯特菌5种李斯特菌进行检测,并与传统的生化鉴定方法(VITEK 2)和聚合酶链式反应(PCR)方法检测结果进行比较;用不同培养基和不同培养时间培养的单增李斯特菌对该方法进行检测,还对60份人工感染5种李斯特菌的食品样品分别进行MALDI-TOF-MS、PCR以及传统生化方法的检测和鉴定。结果表明:MALDI-TOF-MS能够快速、可靠地区分上述5种李斯特菌,而且具有很好的稳定性和重复性,在检测时间、重复性和准确性方面的总体表现优于传统生化鉴定方法。MALDI-TOF-MS技术适用于对李斯特菌等食源性病原菌进行高通量、低成本的快速鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 李斯特菌 检测 鉴定
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沙门菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法研究 被引量：14
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作者 赵剑虹 高艳 +6 位作者 李书明 张士尧 王恒伟 顾琳 韩庆华 焦洋 陈倩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期705-709,共5页
目的优化基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对沙门菌鉴定的条件,研究不同前处理方法对MALDI靶板污染情况,建立安全高效的检测沙门菌的方法。方法应用MALDI-TOF-MS法对4株沙门菌标准菌株进行不同培养条件、样品前处理方... 目的优化基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对沙门菌鉴定的条件,研究不同前处理方法对MALDI靶板污染情况,建立安全高效的检测沙门菌的方法。方法应用MALDI-TOF-MS法对4株沙门菌标准菌株进行不同培养条件、样品前处理方式检验,确立优化的鉴定程序,对不同处理方式下MALDI靶板进行检测,采用优化的前处理方法对33株腹泻病人粪便标本中分离的沙门菌进行数据采集和图谱比对,所得鉴定结果与常规血清学分型结果比较。结果不同前处理方法、不同的培养基上沙门菌标准菌株均准确鉴定为沙门菌。33株沙门菌用MALDI-TOF-MS方法全部准确鉴定为沙门菌属,19株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果完全一致,14株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果不一致。不同前处理方法的MALDI靶板上均未发现细菌生长。结论 MALDI-TOF-MS方法能快速、简便、安全、准确鉴定属水平沙门菌,是一种有效的沙门菌检测鉴定的手段。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 沙门菌 鉴定
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MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术直接鉴定阳性血培养病原菌的应用评估 被引量：11
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作者 秦娟秀 黄芊 +3 位作者 高倩倩 谢乙慧 李敏 张灏旻 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期546-551,共6页
目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病... 目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病原菌的有效性。方法收集上海交通大学医学院附属仁济医院2016年4-6月血培养仪报警的非重复血培养瓶138个,以传统培养鉴定的方法为金标准,同时采用以上两种前处理方法处理阳性标本,再进行MALDI-TOF MS鉴定。结果本次共收集非重复的血培养阳性标本138份,排除6个假阳性血瓶,鉴定出的病原菌包括革兰阴性菌70株(53.03%)、革兰阳性菌57株(43.18%)、真菌3株和2例复数菌。MALDI Sepsityper^(TM)Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法的血培养快速鉴定病原菌准确率分别为91.67%和84.09%,种鉴定准确率分别为83.33%和61.36%。两种前处理方法处理后,革兰阴性菌的准确率分别为98.57%和95.71%,革兰阳性菌的准确率分别为87.72%和78.59%,两者鉴定所需时间为40 min/样本和25 min/样本。结论虽然MALDI Sepsityper^(TM)Kit比血清分离胶促凝管法鉴定准确率稍高但两者差异无统计学意义(91.67%对84.09%,P>0.05),与MALDI Sepsityper^(TM) Kit相比,血清分离胶促凝管法是一种快速、易获得、低廉的MALDI-TOF MS直接鉴定血培养病原菌的前处理方法。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI Sepsityper^TM KIT 血清分离胶促凝管法 血培养 病原菌
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测蛋白质分子量的优化研究(英文) 被引量：4
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作者 胡炜 付强 +4 位作者 周洁 朱平川 蒙冰 张明 李杨瑞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期14-17,共4页
【目的】研究采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测蛋白质分子量的优化条件。【方法】选择3种不同的基质检测牛血清白蛋白(BSA)的分子量,在选定最佳基质化合物的基础上,通过改变样品蛋白质的浓度,以获得高质量... 【目的】研究采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测蛋白质分子量的优化条件。【方法】选择3种不同的基质检测牛血清白蛋白(BSA)的分子量,在选定最佳基质化合物的基础上,通过改变样品蛋白质的浓度,以获得高质量的质谱峰图,确定蛋白质样品的最小和最优检测量。【结果】1μg蛋白质样品与10mg/mL含0.1%乙酸(TFA)和50%乙腈(ACN)的芥子酸(SA)基质水溶液混合检测分子量,可产生最高质量的MALDI-TOF-MS峰图,同时蛋白质样品最小检测量应不少于500ng。【结论】MALDI-TOF-MS技术操作简单、分析快速、灵敏度高,是一种检测蛋白质分子量的可靠方法;研究结果确定了获得最优化质谱峰的最佳组合,这是从高度复杂的蛋白质样品测定准确分子量的必备条件。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 蛋白质 分子量 优化
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蒙药嘎日迪五味丸中二萜生物碱的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析 被引量：6
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作者 王勇 夏博 +1 位作者 邓晓春 刘淑莹 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2009年第2期78-82,共5页
采用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)对蒙药嘎日迪五味丸中的生物碱进行分析和鉴定。通过准确的相对分子质量测定,在嘎日迪五味丸中检测到了双酯型生物碱、单酯生物碱型和脂类生物碱共21种乌头生物碱,为复方中药中乌头生... 采用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)对蒙药嘎日迪五味丸中的生物碱进行分析和鉴定。通过准确的相对分子质量测定,在嘎日迪五味丸中检测到了双酯型生物碱、单酯生物碱型和脂类生物碱共21种乌头生物碱,为复方中药中乌头生物碱成分的分析提供了一种新的思路。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 嘎日迪五味丸 二萜生物碱
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应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测载脂蛋白E基因多态性 被引量：4
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作者 欧雪玲 赵方 +2 位作者 许传超 伍新尧 区敬华 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期564-567,共4页
【目的】应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测人类载脂蛋白E(apoE)基因的多态性。【方法】用PCR扩增出含apoE两个单核苷酸多态性(SNPs)位点(334T/C和472C/T)的DNA片段作为模板,经延伸反应,产物纯化后利用MALDI-TOFMS进行检测... 【目的】应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测人类载脂蛋白E(apoE)基因的多态性。【方法】用PCR扩增出含apoE两个单核苷酸多态性(SNPs)位点(334T/C和472C/T)的DNA片段作为模板,经延伸反应,产物纯化后利用MALDI-TOFMS进行检测。从而确定样本apoE基因型。【结果】应用本技术对50例广东地区无关个体进行apoE基因多态性检测,共检出3种常见的apoE基因型,其中以apoEΣ3/3型最多,占总数的74.00%;等位基因频率分布以ε3(87.00%)最高。【结论】本实验建立的基于MALDI-TOFMS与引物延伸技术检测apoE基因多态性的方法,具有快速、准确和可靠的特点。 展开更多
关键词 APOE基因 载脂蛋白E基因多态性 MS 常见 检出 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 单核苷酸多态性 MALDI-TOF DNA片段 SNP
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基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统的血流感染致病菌早期检测 被引量：3
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作者 张可昕 胡翀 +3 位作者 陈琛 何赏 杨明 王成彬 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期17-22,共6页
目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)建立早期血流感染致病菌检测体系。方法选取大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、肺... 目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)建立早期血流感染致病菌检测体系。方法选取大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、肺炎链球菌等10种临床最常见的病原菌作为检测对象,结合多重PCR技术和Mass ARRAY iPLEX单碱基延伸技术、MALDI-TOF MS技术,模拟细菌感染血液样本建立MALDI-TOF MS细菌核酸检测体系,测定其灵敏度;选取2017年3-5月在解放军总医院急诊科收集的疑似脓毒症患者血液样本33例对该体系进行验证,并将检测结果与微生物科血培养结果进行比较。结果本研究所建立的MALDI-TOF质谱血液致病菌检测系统可同时检测分属两组的10种细菌,所有细菌样本均可见延伸峰;灵敏度为100CFU/ml;与33例临床血培养鉴定结果的阴性符合率为100%(27/27),6例血培养阳性样品中有2例为摩氏摩根菌和人葡萄球菌感染,因这两种细菌不包含在10种检测对象之内而未能通过质谱检出,其余4例血培养阳性样品与质谱检测结果的符合率为100%。结论本研究建立的MALDI-TOF质谱检测体系可从全血样本中直接检测10种临床常见血流感染致病菌,无需进行培养,与传统血培养及生化鉴定相比具有耗时短、灵敏度高、准确度高等优势,可在一定程度上满足临床早期、快速诊断血流感染致病菌的需求。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 细菌性血流感染 早期诊断
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在蛇毒组分分析中的应用 被引量：3
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作者 彭嘉柔 孙徐林 +1 位作者 于亭 彭师奇 《质谱学报》 EI CAS CSCD 1997年第1期28-32,共5页
本文用MALDI－TOFMS对江浙蝮蛇毒混合物及其几个分离样品的组分进行了分析和比较，表明MALDI－TOFMS灵敏度高，且可以直接分析混合物的组分，同时还比较了不同基质对混合物分析结果的影响．
关键词 基质 激光解吸电离 飞行时间质谱 蛇毒 组分分析
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