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用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原 被引量:7
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作者 古努尔·吐尔逊 米晓云 +8 位作者 张壮志 石保新 吐尔洪·依米提 张旭 巫剑 赵莉 阿曼古丽·马木提 金映红 张文宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期845-850,共6页
利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接... 利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接免疫组化方法对E g成虫表膜蛋白进行组织定位。利用双抗体夹心ELISA方法检测感染E g的犬粪抗原。ELISA结果表明E g成虫表膜抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体,抗体不与多头绦虫和泡状带绦虫抗原反应;Western blotting结果表明E g成虫表膜抗原与原头蚴、不成熟E g有共同蛋白成分。免疫组化结果证实虫体表膜蛋白分布在虫体表皮。该抗原抗体系统能检测到感染后13d的犬细粒棘球绦虫。结果表明该E g成虫表膜抗原抗体系统可用于诊断犬细粒棘球绦虫感染。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫成虫表膜抗原抗体 双抗体夹心ELISA 抗原
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细粒棘球绦虫成虫表膜抗原特异性基因的筛选及克隆 被引量:3
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作者 古努尔.吐尔逊 米晓云 +7 位作者 张壮志 雷震 石保新 巫剑 赵莉 易忠 吐尔洪.依米提 张文宝 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第4期47-51,共5页
为筛选细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)表膜抗原基因或具有诊断性的特异性基因,提取Eg成虫表膜抗原,经ELISA、Western blot对该抗原的免疫学特性进行初步研究。以Eg成虫表膜抗原高免鼠血清为探针,筛选Eg成虫cDNA文库,将阳... 为筛选细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)表膜抗原基因或具有诊断性的特异性基因,提取Eg成虫表膜抗原,经ELISA、Western blot对该抗原的免疫学特性进行初步研究。以Eg成虫表膜抗原高免鼠血清为探针,筛选Eg成虫cDNA文库,将阳性噬菌斑的PCR产物和pGEM-T载体连接,转染到DH5α,对得到的重组子进行测序,并进行同源性分析。ELISA检测显示,表膜抗原免疫鼠诱导产生了特异性抗体,Western blot鉴定该抗体能识别Eg成虫表膜抗原、原头蚴、Eg发育不成熟、Eg发育成熟抗原。筛选出6个阳性克隆,DNA片段大小在1~2kb之间。对阳性克隆进行同源性分析,结果与EgP-29mRNA同源性为99%,与Eg14-3-3蛋白mRNA同源性80%-99%。筛选Eg成虫cDNA文库所获得的基因,证明了Eg虫体表膜抗原的存在,有望成为犬细粒棘球绦虫的诊断抗原以及犬抗细粒棘球绦虫的候选基因。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 Eg成虫表膜抗原 Eg成虫cDNA文库 免疫筛选 序列分析
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华支睾吸虫表膜抗原制备方法的比较 被引量:3
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作者 刘慧如 王华 王力 《北京医科大学学报》 CSCD 1989年第2期132-132,131,共2页
国内对华支睾吸虫免疫诊断的报道较多,而表膜抗原在使用中效果更好。本文试用了几种方法制备华支睾吸虫表膜抗原,并就此进行检测比较,同时作扫描及透射电镜的观察。
关键词 华支睾吸虫 表膜抗原 电镜
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弓形虫速殖子表膜蛋白的组分和抗原性分析 被引量:1
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作者 王世海 熊美华 +2 位作者 唐丽娜 王秀珍 刘露露 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期923-925,共3页
目的试验分析弓形虫速殖子表膜蛋白的组分及其抗原性。方法用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析弓形虫速殖子表膜蛋白的组分和用弓形虫病人阳性血清及兔抗弓形虫表膜抗原血清识别硝酸纤维膜载体上的速殖子表膜抗原的免疫反应靶位。结果弓形虫速殖... 目的试验分析弓形虫速殖子表膜蛋白的组分及其抗原性。方法用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析弓形虫速殖子表膜蛋白的组分和用弓形虫病人阳性血清及兔抗弓形虫表膜抗原血清识别硝酸纤维膜载体上的速殖子表膜抗原的免疫反应靶位。结果弓形虫速殖子表膜抗原的独特蛋白区带分子为16和17kDa,弓形虫病人特异性抗血清识别的速殖子表膜抗原的免疫反应位点为16kDa,免抗血清识别出64,35,32,26,16kDa等8个位点。结论弓形虫速殖子表膜蛋白存在特异的抗原决定簇和可被特异性抗体识别的受体,证明速殖子表膜蛋白具有较好的抗原性,此对于弓形虫病的免疫学诊断具有重要的意义。 展开更多
关键词 弓形虫表膜抗原 抗原性分析
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细粒棘球绦虫表膜糖抗原HSP70基因的克隆、表达及免疫特性分析 被引量:1
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作者 古努尔.吐尔逊 米晓云 +6 位作者 赵莉 张旭 张壮志 石保新 吐尔洪.依米提 艾力麦麦提.麦麦提力 马合木提.塔力普 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期949-958,共10页
【目的】克隆细粒棘球绦虫(Eg)表膜糖抗原的热休克蛋白70(HSP70)基因,构建原核表达载体,鉴定EgHSP70蛋白的免疫学特性。【方法】以Eg表膜糖抗原高免鼠血清为探针,从Eg成虫cDNA文库中筛选得到阳性克隆EgHSP70。构建EgHSP70基因的原核表... 【目的】克隆细粒棘球绦虫(Eg)表膜糖抗原的热休克蛋白70(HSP70)基因,构建原核表达载体,鉴定EgHSP70蛋白的免疫学特性。【方法】以Eg表膜糖抗原高免鼠血清为探针,从Eg成虫cDNA文库中筛选得到阳性克隆EgHSP70。构建EgHSP70基因的原核表达载体pET28a-EgHSP70,诱导表达重组蛋白,纯化,免疫鼠,ELISA、Western-blot和IFA法分别检测血清抗体效价、特异性及抗原在虫体组织中的位置。【结果】从Eg成虫cDNA文库中筛选获得特异性EgHSP70基因,酶切和测序结果均表明该基因已克隆到pET28a。EgHSP70融合蛋白在A600=0.6,0.4 mmol IPTG,37℃表达5 h为最佳表达。经His亲和层析法纯化获得了HSP70融合蛋白相对分子质量约为33 kDa。免疫小鼠可产生高滴度(最高1:640 000)特异性抗体。Westernblot分析结果表明,制备的抗血清与EgHSP70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、Eg虫体蛋白和Eg虫体表面蛋白均能特异性结合,其他带科绦虫有此蛋白表达IFA检测结果证实EgHSP70在细粒棘球绦虫成虫体表膜及体表内有表达。【结论】实验得到的EgHSP7O融合蛋白具有较好的免疫原性和抗原性,可用于研制包虫病疫苗及相关诊断试剂为包虫病的防控提供技术支持。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫成虫cDNA文库 细粒棘球绦虫抗原 热休克蛋白HSP70 EgHSP70融合蛋白 免疫学特性
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伊氏锥虫表膜蛋白在体外对小鼠巨噬细胞生长影响的研究
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作者 田还成 赵建增 刘子 《中国动物传染病学报》 CAS 1995年第1期21-21,共1页
伊氏锥虫表膜蛋白在体外对小鼠巨噬细胞生长影响的研究田还成,赵建增,刘子(军事兽医研究所)锥虫的表膜蛋白在病理发生中的地位越来越明显,不过,对它的意义的有关结论或推测都是根据一些生化研究的结果推断出来的,因而也不直观。... 伊氏锥虫表膜蛋白在体外对小鼠巨噬细胞生长影响的研究田还成,赵建增,刘子(军事兽医研究所)锥虫的表膜蛋白在病理发生中的地位越来越明显,不过,对它的意义的有关结论或推测都是根据一些生化研究的结果推断出来的,因而也不直观。为进一步认识锥虫表胰蛋白的生物学作... 展开更多
关键词 巨噬细胞 蛋白 伊氏锥虫 生长影响 小鼠 淋巴细胞增殖 大学学报 抑制细胞生长 免疫抑制 表膜抗原
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SjAWMMcAb对吡喹酮杀虫效果的影响 被引量:3
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作者 张祖萍 曾庆仁 +4 位作者 吴翔 张顺科 沈杰 黄志辉 龚燕飞 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期455-458,共4页
目的 :制备日本血吸虫成虫表膜单克隆抗体 (SjAWMMcAb) ,探讨其与吡喹酮在宿主体内的联合杀虫作用。方法 :用SP2 / 0骨髓瘤细胞与日本血吸虫成虫表膜抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合 ,经筛选和克隆化后建立分泌日本血吸虫成虫表膜抗原... 目的 :制备日本血吸虫成虫表膜单克隆抗体 (SjAWMMcAb) ,探讨其与吡喹酮在宿主体内的联合杀虫作用。方法 :用SP2 / 0骨髓瘤细胞与日本血吸虫成虫表膜抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合 ,经筛选和克隆化后建立分泌日本血吸虫成虫表膜抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株 ,通过单层细胞培养法和小鼠体内接种法收集单克隆抗体 ;采用Westernblotting和免疫荧光测定 (IFA)对其进行鉴定 ;小鼠实验观察单抗与吡喹酮的联合杀虫作用。结果 :建立了 3个分泌SjAWMMcAb的细胞株 ,Westernblotting显示 3个McAb可识别 5种不同分子量的蛋白 ,IFA表明 3个McAb均能与血吸虫成虫表膜发生特异性反应 ,3B6和 1C2两株McAbs与吡喹酮联用杀虫率分别可提高 4 1.78%和 2 4 .12 %。结论 展开更多
关键词 单克隆抗体 表膜抗原 日本血吸虫 吡喹酮
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