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P物质受体在人表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中的表达调控 被引量:15
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作者 刘继勇 胡晋红 朱全刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期667-670,共4页
目的考察P物质受体(Neurokinin1R,NK1R)在正常人表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中的表达调控特征。方法培养人表皮角质形成细胞株HaCaT细胞和真皮成纤维细胞,应用免疫组织化学法检测NK1R在两种细胞中的表达;采用RTPCR方法检测NK1R在... 目的考察P物质受体(Neurokinin1R,NK1R)在正常人表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中的表达调控特征。方法培养人表皮角质形成细胞株HaCaT细胞和真皮成纤维细胞,应用免疫组织化学法检测NK1R在两种细胞中的表达;采用RTPCR方法检测NK1R在两种细胞mRNA水平的表达特征,并采用流式细胞术定量检测在不同刺激因素及药物作用下两种细胞中NK1R的表达调控情况。结果NK1R在HaCaT细胞及真皮成纤维细胞中均有表达,阳性部位位于细胞膜及细胞质。NK1RmRNA在HaCaT细胞上的表达水平要高于在真皮成纤维细胞上的表达。P物质和IFNγ可以上调NK1R在两种细胞上的表达,而LPS抑制了NK1R的表达;抗组胺药盐酸西替利嗪和P物质受体特异性拮抗剂SpantideI可以降低两种细胞上NK1R的表达。结论皮肤角质形成细胞和真皮成纤维细胞在细胞、蛋白及mRNA水平均有NK1R的表达,而且这种表达可被过敏炎症因子调控,提示角质形成细胞和真皮成纤维细胞参与了皮肤免疫调控,神经肽P物质可能在皮肤过敏性炎症中起重要作用。 展开更多
关键词 表皮角质形成细胞 HACAT细胞 真皮成纤维细胞 P物质受体 皮肤炎症
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诱导表皮角质形成细胞体外分层的途径及机制 被引量:5
2
作者 连小华 杨恬 +1 位作者 蔡绍皙 杨力 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1201-1203,共3页
目的 探讨诱导表皮角质形成细胞体外分层途径及机制。方法 在体外培养状态下,利用气液界面培养法及高浓度钙离子诱导胎鼠皮片、表皮角质形成细胞分层,借助冰冻切片、免疫荧光及激光共聚焦等技术检测其分层层数及分化程度。结果 胚胎... 目的 探讨诱导表皮角质形成细胞体外分层途径及机制。方法 在体外培养状态下,利用气液界面培养法及高浓度钙离子诱导胎鼠皮片、表皮角质形成细胞分层,借助冰冻切片、免疫荧光及激光共聚焦等技术检测其分层层数及分化程度。结果 胚胎龄16d的胎鼠皮片经气液界面培养3d后,其表皮基底上角质形成细胞由2层增加为5层;经气液界面培养7d后,胎鼠皮片表皮基底上角质形成细胞的局部区域分层已可达8层,细胞呈现更为分化的形态。在高浓度Ca2 + (1 5mmol L)条件下培养7d后,培养角质形成细胞发生了分层,分化标记物角蛋白K10在分层角质形成细胞中的表达明显增加。结论 气液界面培养法及高浓度钙离子能诱导表皮角质形成细胞的体外分层,同时促进其分化。 展开更多
关键词 表皮角质形成细胞 表皮分层 体外诱导
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人表皮角质形成细胞Toll样受体表达 被引量:4
3
作者 刘苏俊 张彩萍 +2 位作者 周武庆 陈敏 林麟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期296-300,共5页
目的研究人表皮角质形成细胞Toll样受体表达谱。方法培养人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞和正常人表皮角质形成细胞(NHEK),采用分散酶分离表皮。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测10种Toll样受体mRNA表达,流式细胞仪检测HaCaT细胞... 目的研究人表皮角质形成细胞Toll样受体表达谱。方法培养人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞和正常人表皮角质形成细胞(NHEK),采用分散酶分离表皮。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测10种Toll样受体mRNA表达,流式细胞仪检测HaCaT细胞和NHEK表面Toll样受体2和4蛋白的表达。结果HaCaT细胞、NHEK以及分离的表皮均有全部10种Toll样受体mRNA表达,其表达强弱各不相同。流式细胞仪检测显示HaCaT细胞和NHEK表面有Toll样受体4蛋白的表达,而Toll样受体2无明显表达。结论人表皮角质形成细胞中有Toll样受体1~10mRNA的组成性表达。 展开更多
关键词 表皮角质形成细胞 TOLL样受体 表达
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基于太极阴阳鱼图探讨表皮角质形成细胞的阴阳变化 被引量:2
4
作者 李东海 李勇 +2 位作者 齐庆 肖红丽 陈罗娣 《辽宁中医杂志》 CAS 2012年第9期1736-1737,共2页
基于太极阴阳鱼图的特点,即圆运动的连续性、阴阳消长的动态平衡及阴阳互藏性,探讨表皮角质形成细胞演变过程中的阴阳变化,认为基底层、棘层表现出阳的属性,颗粒层、角质层表现出阴的属性,棘层与颗粒层是由阳转阴,重阳必阴关键。
关键词 太极 圆运动阴阳 表皮角质形成细胞
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小鼠表皮角质形成细胞中Ca^(2+)对组织型纤溶酶原激活剂表达的调节 被引量:1
5
作者 连小华 杨恬 曾益军 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期262-265,I005,共5页
目的 探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中Ca^(2+)对组织型纤溶酶原激活剂(tPA)表达的调节作用及其与分化的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术定性、定量检测低Ca^(2+)( 0.05 mmol/L)及高Ca^(2+)(1.5 mmol/L)浓度对tPA、tPA mRNA... 目的 探讨小鼠表皮角质形成细胞(KC)中Ca^(2+)对组织型纤溶酶原激活剂(tPA)表达的调节作用及其与分化的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术定性、定量检测低Ca^(2+)( 0.05 mmol/L)及高Ca^(2+)(1.5 mmol/L)浓度对tPA、tPA mRNA的表达及表皮KC分化的影响。结果与未经Ca^(2+)处理的对照相比,低Ca^(2+)浓度下培养的表皮KC中,tPA mRNA及tPA量均增加(P< 0.05),KC分化标记物K10抗原表达为弱阳性,KC胞体较小,细胞形态趋于圆形;而高Ca^(2+)浓度下的培养表皮KC中,tPA mRNA及tPA量显著增加(P< 0.001),K10抗原呈强阳性表达,KC胞体增大,形态为典型的多角形。结论Ca^(2+)浓度的增高促进了tPA mRNA及tPA的表达,并与KC分化有关。 展开更多
关键词 组织型纤溶酶原激活剂 CA^2+ 表皮角质形成细胞 表达 调节 皮肤疾病
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小鼠表皮角质形成细胞中TNF-α对PAI-2表达的调节 被引量:1
6
作者 连小华 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1069-1072,共4页
目的 探讨表皮角质形成细胞中TNF α对PAI 2表达的调节及其生物学意义。方法 利用免疫细胞化学、TUNEL反应及免疫细胞化学 TUNEL双标等方法 ,观察TNF α作用下 ,培养的表皮角质形成细胞及其脱落细胞中PAI 2表达的变化及凋亡发生的情... 目的 探讨表皮角质形成细胞中TNF α对PAI 2表达的调节及其生物学意义。方法 利用免疫细胞化学、TUNEL反应及免疫细胞化学 TUNEL双标等方法 ,观察TNF α作用下 ,培养的表皮角质形成细胞及其脱落细胞中PAI 2表达的变化及凋亡发生的情况。结果 在TNF α作用下 ,脱落细胞中PAI 2的表达明显增加 ,凋亡细胞的数量增多 ,PAI 2在凋亡细胞中的表达也增强 ,而在一些胞体较大、形态呈多角形的凋亡细胞中PAI 2表达的增加更为明显。结论 在高度分化的表皮角质形成细胞中 ,TNF α可促进PAI 2的表达并可诱导凋亡的产生 ,就与KC凋亡的关系而言 ,TNF α所诱导的PAI 2可分为两种 ,一种与KC凋亡有关 ,另一种与KC凋亡无关。 展开更多
关键词 PAI-2 TNF-α表皮角质形成细胞 表达调节
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表皮角质形成细胞分化中tPA分泌的研究
7
作者 连小华 杨恬 蔡绍皙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期1357-1359,共3页
目的 探讨表皮角质形成细胞中 ,tPA分泌的变化及其对细胞分化的影响。方法 利用免疫细胞化学、酶联免疫吸附测定等方法 ,检测高浓度Ca2 + 作用下 ,培养的小鼠分化表皮角质形成细胞表面及培养上清中tPA表达的变化。结果 高Ca2 + 浓度... 目的 探讨表皮角质形成细胞中 ,tPA分泌的变化及其对细胞分化的影响。方法 利用免疫细胞化学、酶联免疫吸附测定等方法 ,检测高浓度Ca2 + 作用下 ,培养的小鼠分化表皮角质形成细胞表面及培养上清中tPA表达的变化。结果 高Ca2 + 浓度下 ,KC分化标记物K10在培养 2 4h即有较强的表达 ,与此同时 ,在培养上清中检测到大量分泌tPA ;培养 2 4h以后 ,随着培养时间的延长 ,KC培养上清中分泌tPA的含量呈现出降低趋势 ,KC表面tPA量则呈现出增加趋势 ,当有L 精氨酸存在时 ,上述两种趋势均明显减弱。结论 小鼠表皮KC分化过程中存在tPA的分泌 ,分泌tPA能通过其赖氨酸位点进一步吸附于KC表面 。 展开更多
关键词 表皮角质形成细胞 分化 TPA 分泌
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EGF对小鼠角质形成细胞中组织型纤溶酶原激活剂表达的调节
8
作者 连小华 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1094-1097,共4页
目的 探讨小鼠表皮角质形成细胞 (KC)中 ,EGF对组织型纤溶酶原激活剂 (tPA)表达的影响。方法 应用免疫组化及原位杂交技术 ,结合图像分析 ,定性及定量检测在EGF作用下的小鼠表皮角质形成细胞中 ,tPAmRNA/蛋白质的表达。结果 小鼠表... 目的 探讨小鼠表皮角质形成细胞 (KC)中 ,EGF对组织型纤溶酶原激活剂 (tPA)表达的影响。方法 应用免疫组化及原位杂交技术 ,结合图像分析 ,定性及定量检测在EGF作用下的小鼠表皮角质形成细胞中 ,tPAmRNA/蛋白质的表达。结果 小鼠表皮KC经EGF处理 12、2 4、48、72h后 ,tPAmRNA/蛋白质的量均增加 (P <0 .0 1) ,tPAmRNA表达的高峰出现于EGF作用 2 4h时 ,tPA蛋白质表达的高峰则出现于EGF作用 48h时。EGF联合 0 .5、1.0、1.5mmol/LCa2 + 作用小鼠表皮KC 48h ,与EGF单独作用小鼠表皮KC 48h时 ,tPAmRNA/蛋白质的表达 ,均显著降低 (P <0 .0 0 1)。结论 小鼠表皮KC中 ,EGF可以时间依赖方式促进tPAmR NA/蛋白质的表达 ,但受Ca2 + 浓度的影响。 展开更多
关键词 TPA EGF 基因表达 调节 表皮角质形成细胞 组织型纤溶酶原激活剂
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绿茶水粗提物抗中波紫外线致人表皮细胞衰老作用 被引量:4
9
作者 王振 刘仲华 +2 位作者 蔡淑贤 刘安 文祎 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2017年第12期129-134,共6页
以人表皮角质形成细胞(HaCaT)为模型,采用中波紫外线诱导细胞衰老,研究绿茶水粗提物对细胞的抗衰老效果。在细胞培养基(DMEM)中分别添加0~20μg/mL绿茶水粗提物,培养细胞接受60mJ/cm^2 UVB照射诱导,考察绿茶水粗提物对细胞形态、凋亡水... 以人表皮角质形成细胞(HaCaT)为模型,采用中波紫外线诱导细胞衰老,研究绿茶水粗提物对细胞的抗衰老效果。在细胞培养基(DMEM)中分别添加0~20μg/mL绿茶水粗提物,培养细胞接受60mJ/cm^2 UVB照射诱导,考察绿茶水粗提物对细胞形态、凋亡水平、细胞存活率、细胞内抗氧化酶活力、细胞内活性氧簇(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、细胞线粒体膜电位、Na^+,K^+-ATP酶活力的影响。结果表明:绿茶水粗提物对受诱导细胞在细胞体积、形状、核体积上明显改善,能抑制细胞凋亡;细胞存活率提高(30.52±8.69)%;细胞内抗氧化酶活力明显提高;ROS含量下降17.16%;MDA含量降低(50.69±6.81)%;JC-1染色红绿荧光平均光密度比提高13.75%;Na^+,K^+-APT酶活力提高(103.95±3.64)%。试验结果表明绿茶水粗提物具有抗中波紫外线致人表皮细胞衰老作用。 展开更多
关键词 绿茶 水粗提物 中波紫外线 表皮角质形成细胞 抗衰老
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蚯蚓小分子多肽提取物对人皮肤细胞活性及胶原分泌的影响 被引量:3
10
作者 刘廷强 严泽民 +2 位作者 侯冬梅 周华峰 段明星 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期168-172,共5页
通过体外细胞模型,考察蚯蚓小分子多肽提取物(LMWPEE)对正常成人皮肤成纤维细胞(HSF)和正常成人表皮角质形成细胞(HEK)的细胞活性以及对HSF分泌I型前胶原蛋白的影响。结果表明,与空白组相比,质量浓度为25—400 mg/L的LMWPEE对... 通过体外细胞模型,考察蚯蚓小分子多肽提取物(LMWPEE)对正常成人皮肤成纤维细胞(HSF)和正常成人表皮角质形成细胞(HEK)的细胞活性以及对HSF分泌I型前胶原蛋白的影响。结果表明,与空白组相比,质量浓度为25—400 mg/L的LMWPEE对2种细胞的细胞活性都具有显著促进作用,但对2种细胞的细胞周期并没有明显的影响。LMWPEE对HSF细胞活性的促进作用存在一定的剂量一效应关系,而促进HEK细胞活性的较佳质量浓度为50 mg/L。此外,LMWPEE在质量浓度为200和400 mg/L时,可显著促进HSF分泌I型前胶原蛋白,较空白组分别提高了31%(P〈0.05)和51%(P〈0.01)。 展开更多
关键词 化妆品添加剂 蚯蚓 小分子多肽 人皮肤成纤维细胞 表皮角质形成细胞 I型前胶原蛋白
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中药白疕合剂对体外培养HaCaT细胞增殖与凋亡的影响 被引量:1
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作者 陈兴 卢益萍 李忻红 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第12期2961-2963,共3页
目的:观察中药白疕合剂对体外培养人永生化表皮角质形式细胞(HaCaT细胞)增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:SD大鼠50只随机分为空白血清组,白疕合剂低、中、高剂量组和阿维A组,用药后制备血清,干预体外培养HaCaT细胞模型,采用MT... 目的:观察中药白疕合剂对体外培养人永生化表皮角质形式细胞(HaCaT细胞)增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:SD大鼠50只随机分为空白血清组,白疕合剂低、中、高剂量组和阿维A组,用药后制备血清,干预体外培养HaCaT细胞模型,采用MTT法检测白疕合剂对HaCaT细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测白疕合剂对HaCaT细胞凋亡的影响。结果:用白疕合剂低、中、高剂量组干预HaCaT细胞,分别培养24 h、48h、72 h后,对HaCaT细胞增殖均有明显抑制作用且呈现浓度依赖性,白疕合剂对HaCaT细胞增殖的抑制作用72h时最强;流式细胞术结果示白疕合剂低、中、高剂量组细胞凋亡率明显增高,凋亡率随药物浓度增高而上升。结论:白疕合剂发挥治疗银屑病的作用,可能与通过抑制HaCaT细胞增殖并诱导其凋亡相关。 展开更多
关键词 白疕合剂 人永生化表皮角质形成细胞 增殖 细胞凋亡
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中药白秓合剂对HaCaT细胞CXCR2蛋白表达及TNF-α诱导的HaCaT细胞IL-6表达的影响 被引量:1
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作者 陈兴 卢益萍 李忻红 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第11期2710-2712,共3页
目的:观察中药白疕合剂对人永生化角质形成细胞(Ha Ca T细胞)CXC趋化因子受体2(CXCR2)蛋白表达及肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的Ha Ca T细胞分泌白细胞介素(IL)-6和IL-6 mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法:用白疕合剂干预Ha Ca T细胞,... 目的:观察中药白疕合剂对人永生化角质形成细胞(Ha Ca T细胞)CXC趋化因子受体2(CXCR2)蛋白表达及肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的Ha Ca T细胞分泌白细胞介素(IL)-6和IL-6 mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法:用白疕合剂干预Ha Ca T细胞,Western-blot检测CXCR2蛋白表达;用白疕合剂干预TNF-α诱导的Ha Ca T细胞,ELISA检测IL-6分泌量,RT-PCR检测IL-6 mRNA表达。结果:白疕合剂中、高剂量组对CXCR2蛋白的表达有明显的抑制作用;白疕合剂低、中、高剂量组对IL-6分泌量和IL-6 mRNA表达均有明显的抑制作用且呈浓度依赖性。结论:白疕合剂可能通过抑制IL-6分泌,降低IL-6 mRNA、CXCR2蛋白表达发挥对银屑病的治疗作用。 展开更多
关键词 白疕合剂 人永生化表皮角质形成细胞 肿瘤坏死因子-α 细胞介素-6 CXC趋化因子受体2
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PM2.5联合中波紫外线处理对HaCaT细胞的影响 被引量:2
13
作者 牛梦鸽 谢雄雄 +1 位作者 王超鹏 周美娟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第12期1929-1933,共5页
目的研究PM2.5联合中波紫外线(UVB)处理对人皮肤角质形成细胞Ha Ca T的影响。方法收集环境中PM2.5并进行其金属成分分析;MTT法测定PM2.5对Ha Ca T细胞的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为空白对照组(NC组)、单纯IC50浓度的PM2.5处理组(PM2.... 目的研究PM2.5联合中波紫外线(UVB)处理对人皮肤角质形成细胞Ha Ca T的影响。方法收集环境中PM2.5并进行其金属成分分析;MTT法测定PM2.5对Ha Ca T细胞的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为空白对照组(NC组)、单纯IC50浓度的PM2.5处理组(PM2.5组)、单纯30 m J/cm2的UVB照射组(UVB组)和PM2.5联合UVB处理组(联合处理组),MTT法检测不同处理组对细胞活力的抑制;流式细胞术检测不同处理对细胞凋亡的影响;Western blot检测不同处理后PARP、LC3的蛋白表达变化。结果 PM2.5样品中金属成分有Ca、Ba、Al、Cu、Pb等;PM2.5对Ha Ca T细胞的IC50约为300μg/m L;不同处理组之间,在处理后24 h,对细胞活力的抑制差异显著(P<0.001),其中联合处理组细胞对比NC组活力最低(P<0.001);流式分析结果显示,与NC组比,PM2.5组、UVB组以及联合处理组细胞凋亡率增加(P<0.01),联合处理组凋亡率较PM2.5组增加(P<0.05),但低于UVB照射组(P<0.01);Western blot显示PM2.5组、UVB组以及联合处理组LC3-Ⅱ、PARP蛋白较NC组均有增加,联合处理组PARP较UVB组减少,LC3-Ⅱ较PM2.5组、UVB组增加。结论 PM2.5能增加UVB对Ha Ca T细胞的损伤,其主要可能通过增加细胞自噬,而非凋亡方式。 展开更多
关键词 中波紫外线 PM2.5 表皮角质形成细胞 凋亡 自噬
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红树莓对UVB诱导HaCaT光损伤的抑制作用 被引量:5
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作者 林勇 刘硕 +1 位作者 朱华伟 刘仲华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期474-479,共6页
为研究红树莓对中波紫外线(UVB)诱导的人表皮角质形成细胞(HaCaT)光损伤的抑制作用,用20、40、80mg/mL3个不同剂量的红树莓果汁预处理人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT细胞)6h,再采用60mJ/cm2强度UVB照射细胞;用MTT法检测细胞的生存率,... 为研究红树莓对中波紫外线(UVB)诱导的人表皮角质形成细胞(HaCaT)光损伤的抑制作用,用20、40、80mg/mL3个不同剂量的红树莓果汁预处理人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT细胞)6h,再采用60mJ/cm2强度UVB照射细胞;用MTT法检测细胞的生存率,采用比色法检测细胞中丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH–Px)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,用荧光法检测细胞内活性氧自由基(ROS)的含量,用倒置显微镜和流式细胞仪观察、检测细胞的凋亡状况。结果表明:UVB辐射对HaCaT细胞造成比较严重的损伤;相比于空白对照组,UVB辐射模型组HaCaT细胞活性下降了29.54%,SOD和GSH–Px活性极显著降低(P<0.01);相比于模型组,红树莓各剂量组可显著提高UVB照射后HaCaT细胞的活性(P<0.05或P<0.01),提高SOD和GSH–Px活性(P<0.01),减少MDA和ROS含量(P<0.05或P<0.01),降低LDH活性和增加Hyp含量(P<0.01),呈剂量依赖关系,减轻UVB所导致的细胞损伤,凋亡率降低。红树莓可以明显减少UVB诱导HaCaT细胞的氧化损伤和凋亡,具有显著的光保护功效,其作用机理与增强细胞抗氧化能力、加速清除氧自由基以及促进胶原蛋白合成有关。 展开更多
关键词 红树莓 人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT细胞) 中波紫外线(UVB) 光损伤 氧化 细胞凋亡
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阿维A治疗银屑病引起不良反应的护理 被引量:2
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作者 许波 桑巍 鞠宏 《护理研究(上旬版)》 2009年第9期2329-2330,共2页
关键词 中重度银屑病 阿维A酯 不良反应 护理对策 治疗期 表皮角质形成细胞 免疫调节作用 维A酸类药物
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