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人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响
被引量：
10
1
作者
黄俊琼
孙万邦
+4 位作者
谢宇锋
盛伟华
缪竞诚
杜联峰
杨吉成
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期369-373,共5页
目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PC...
目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。
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关键词
人IL-31
表皮角化细胞
趋
化
因子
趋
化
作用
STAT3
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职称材料
大鼠表皮角化细胞Cx43表达和细胞增殖活性的关系
被引量：
1
2
作者
韩红梅
樊景禹
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期113-117,共5页
目的 :研究大鼠前肢表皮角化细胞Cx43的表达和细胞增殖活性的拓扑学分布特点及二者间的关系。方法 :常规石蜡切片 ,利用Cx43和增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)免疫组化法 ,分析单位面积表皮细胞中Cx43表达的长...
目的 :研究大鼠前肢表皮角化细胞Cx43的表达和细胞增殖活性的拓扑学分布特点及二者间的关系。方法 :常规石蜡切片 ,利用Cx43和增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)免疫组化法 ,分析单位面积表皮细胞中Cx43表达的长度 (LA)和PCNA阳性细胞核的百分率。结果 :在水平方向上 5mm范围内 ,表皮细胞Cx43的表达随部位而异 ,且在距离始端大约 3.0～ 4.5mm处Cx43表达丰富。同时 ,在水平方向上 10mm范围内 ,角化细胞的增殖活性随部位而异 ,且增殖活性类似的角化细胞各自聚集成群 ,其直径大小约为 10 -3 m数量级 ;并在距离始端约 3.0～ 4.0mm处是角化细胞增殖活性低的位置。结论
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关键词
增殖
细胞
核抗原
细胞
分裂期
表皮角化细胞
CX43
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职称材料
表皮角化细胞培养的研究进展
被引量：
1
3
作者
王海燕
周曾同
《国外医学（口腔医学分册）》
2004年第5期338-339,共2页
表皮角化细胞体外培养已有近30年的历史,随着研究手段和实验条件的进一步改善,表皮角化细胞培养方法在理论和技术上都有了不断的发展和完善。从滋养层细胞培养、无滋养层细胞培养到与生物支架材料的复合培养,有望通过少量表皮角化细胞...
表皮角化细胞体外培养已有近30年的历史,随着研究手段和实验条件的进一步改善,表皮角化细胞培养方法在理论和技术上都有了不断的发展和完善。从滋养层细胞培养、无滋养层细胞培养到与生物支架材料的复合培养,有望通过少量表皮角化细胞经体外扩增来构建具有生命力的皮片用于临床。本文就表皮细胞体外培养的最佳方法和条件作一简要综述。
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关键词
表皮角化细胞
细胞
培养
生物材料
成纤维
细胞
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职称材料
题名
人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响
被引量：
10
1
作者
黄俊琼
孙万邦
谢宇锋
盛伟华
缪竞诚
杜联峰
杨吉成
机构
苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室
遵义医学院珠海校区免疫学教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期369-373,共5页
文摘
目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。
关键词
人IL-31
表皮角化细胞
趋
化
因子
趋
化
作用
STAT3
Keywords
Human IL-31
Chemokines
Chemotaxis
STAT3
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
大鼠表皮角化细胞Cx43表达和细胞增殖活性的关系
被引量：
1
2
作者
韩红梅
樊景禹
机构
北京大学基础医学院生物物理学系
出处
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期113-117,共5页
基金
国家自然科学基金 (3 9770 895 )
文摘
目的 :研究大鼠前肢表皮角化细胞Cx43的表达和细胞增殖活性的拓扑学分布特点及二者间的关系。方法 :常规石蜡切片 ,利用Cx43和增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)免疫组化法 ,分析单位面积表皮细胞中Cx43表达的长度 (LA)和PCNA阳性细胞核的百分率。结果 :在水平方向上 5mm范围内 ,表皮细胞Cx43的表达随部位而异 ,且在距离始端大约 3.0～ 4.5mm处Cx43表达丰富。同时 ,在水平方向上 10mm范围内 ,角化细胞的增殖活性随部位而异 ,且增殖活性类似的角化细胞各自聚集成群 ,其直径大小约为 10 -3 m数量级 ;并在距离始端约 3.0～ 4.0mm处是角化细胞增殖活性低的位置。结论
关键词
增殖
细胞
核抗原
细胞
分裂期
表皮角化细胞
CX43
Keywords
Epidermis/metab
Cx43
Proliferating cell nuclear antigen
Cell division phases
分类号
R758.53 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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职称材料
题名
表皮角化细胞培养的研究进展
被引量：
1
3
作者
王海燕
周曾同
机构
上海第二医科大学附属第九人民医院
出处
《国外医学（口腔医学分册）》
2004年第5期338-339,共2页
文摘
表皮角化细胞体外培养已有近30年的历史,随着研究手段和实验条件的进一步改善,表皮角化细胞培养方法在理论和技术上都有了不断的发展和完善。从滋养层细胞培养、无滋养层细胞培养到与生物支架材料的复合培养,有望通过少量表皮角化细胞经体外扩增来构建具有生命力的皮片用于临床。本文就表皮细胞体外培养的最佳方法和条件作一简要综述。
关键词
表皮角化细胞
细胞
培养
生物材料
成纤维
细胞
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响
黄俊琼
孙万邦
谢宇锋
盛伟华
缪竞诚
杜联峰
杨吉成
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大鼠表皮角化细胞Cx43表达和细胞增殖活性的关系
韩红梅
樊景禹
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
表皮角化细胞培养的研究进展
王海燕
周曾同
《国外医学（口腔医学分册）》
2004
1
在线阅读
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职称材料
已选择
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