靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的第三代嵌合抗原受体的构建与表达 被引量：5

1

作者 敖仕梅 伍玥 +2 位作者 王春荣 杨玉秀 韩双印 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期603-606,共4页

目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp... 目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp)、铰链区/穿膜区(213 bp)、共刺激分子(CD28和CD137的胞内信号区,123 bp和126 bp)和免疫受体酪氨酸活化基序(CD3ζ链,336 bp)连接成EGFRvⅢsc Fv-CD28-CD137-CD3ζ(EGFRvⅢ/3CAR),克隆入真核表达载体p CDHCMV-MCS-EF1-cop GFP的EcoRⅠ和Bam HⅠ位点,转染293T细胞48 h后提取蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting检测EGFRvⅢ/3CAR的表达。结果:EGFRvⅢsc Fv和基因合成的CD28-CD137-CD3ζ表达框通过重叠延伸PCR拼接成EGFRvⅢ/3CAR,限制性内切酶片段分析和DNA测序均验证了重组载体序列完全正确,Western blotting应用抗人-CD3ζ抗体检测到EGFRvⅢ/3CAR在293T细胞中的完整表达(相对分子质量约58 k D)。结论:成功构建嵌合抗原受体EGFRvⅢ/3CAR表达载体,为嵌合抗原受体修饰T细胞靶向治疗肿瘤提供研究基础。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体 过继免疫肿瘤治疗 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体

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表皮生长因子受体及Ⅲ型突变体在食管癌的表达及意义 被引量：7

2

作者 刘敏 郭晓娟 +3 位作者 张红霞 郭佑民 王鹏 段小艺 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期729-734,共6页

背景与目的:已有研究显示表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variant Ⅲ,EGFRv Ⅲ)在一系列恶性肿瘤的发生发展中起重要作用,但EGFR、EGFRvⅢ与食管癌的关系目前... 背景与目的:已有研究显示表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variant Ⅲ,EGFRv Ⅲ)在一系列恶性肿瘤的发生发展中起重要作用,但EGFR、EGFRvⅢ与食管癌的关系目前尚未明确。本研究探讨EGFR及EGFRvⅢ与食管癌组织发生发展的关系。方法:应用免疫组织化学及蛋白印迹实验(Western Blot)检测66例人食管癌组织及癌旁正常组织EGFR及EGFRvⅢ表达,评价EGFR及EGFRvⅢ在食管癌患者的性别、年龄、TNM分期及病理分级等临床参数组的表达分布。Pearson相关性检验分析EGFR及EGFRvⅢ表达相关性。结果:免疫组化显示EGFR、EGFRvⅢ在肿瘤组织表达的平均灰度净值分别为25.4±3.2、22.5±4.2,在癌旁正常食管组织平均灰度净值分别为5.0±3.5、5.5±3.0,肿瘤组织与正常组织相比差异均有显著性(P<0.000)。Western Blot显示EGFR、EGFRvⅢ在肿瘤组织表达的平均灰度净值分别为1.37±0.41、0.83±0.15,在瘤旁正常食管组织平均灰度净值分别为0.21±0.09、0.08±0.05,肿瘤组织与正常组织相比差异均有显著性(P<0.05)。在性别、年龄、肿瘤大小和生长方式方面EGFR、EGFRvⅢ的表达分布差异均无显著性(P>0.05),而在TNM分期、病理分级和淋巴结转移方面两者差异均有显著性(P<0.05)。免疫组化检测两蛋白表达净灰度值相关系数r为0.701(P<0.0001),Western Blot检测两种蛋白表达相关系数r为0.556(P=0.031)。两种研究方法均提示EGFR与EGFRvⅢ在食管癌中的表达成较好线性正相关性。结论:EGFRvⅢ在食管癌特异性表达,EGFR与EGFRvⅢ在食管癌中的表达呈线性正相关,提示EGFR与EGFRvⅢ与食管癌发生、发展密切相关。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 食管癌

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抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体噬菌体单链抗体库的构建与初步筛选 被引量：4

3

作者 韩东刚 段小艺 +3 位作者 郭佑民 周琦 王全颖 杨广笑 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-29,共5页

目的构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)特异性单链抗体库,从中筛选抗EGFRvⅢ特异性单链抗体。方法用pep-3偶联载体蛋白OVA,然后免疫BALB/c小鼠从脾淋巴细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增重链(VH)和轻链(VL)的可变区基因片段... 目的构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)特异性单链抗体库,从中筛选抗EGFRvⅢ特异性单链抗体。方法用pep-3偶联载体蛋白OVA,然后免疫BALB/c小鼠从脾淋巴细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增重链(VH)和轻链(VL)的可变区基因片段。将两基因片段由编码(Gly4Ser)3的linker连在一起,并克隆入噬菌体展示表达载体pCANTAB5E中,电转化至E.coliTG1,经辅助噬菌体超感染,构建噬菌体单链抗体库。以pep-3-BSA为抗原对所建抗体库进行4轮亲和筛选,用ELISA鉴定抗体与EGFRvⅢ结合的特异性。结果经琼脂糖凝胶电泳分析,RT-PCR方法扩增的抗体VH和VL基因片段大小约350和320bp,与预期理论值相符。经重组PCR得到大小约780bp的ScFv基因片段。ScFv基因片段经双酶切后成功定向克隆到噬菌粒载体,回收后构建成库容量为5.0×106的噬菌体抗体库,噬菌体滴度为3.0×104pfu/ml。通过亲和筛选使抗EGFRvⅢ噬菌体单链抗体得到富集,第4轮为第1轮的56倍。在E.coliHB2151中实现了单链抗体的可溶性表达。SDS-PAGE结果显示抗体相对分子质量为28000左右。ELISA测定结果显示该单链抗体具有结合EGFRvⅢ的特异性。结论成功构建了噬菌体单链抗体库,筛选得到了抗EGFRvⅢ特异性噬菌体单链抗体。 展开更多

关键词 噬菌体展示技术 单链抗体 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 筛选

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编码表皮生长因子受体Ⅲ型突变体PEP-3表位的cDNA的克隆 被引量：1

4

作者 段小艺 王健生 +4 位作者 郭佑民 刘敏 周斌 王全颖 杨广笑 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期140-142,共3页

目的克隆出针对表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)PEP-3表位的cDNA片段,为高表达EGFRvⅢ肿瘤的免疫治疗奠定基础。方法根据PEP-3的碱基序列设计出有12对互补碱基的正负引物,正负引物互为模板进行PCR扩增,制备出两端含酶切位点的PEP-3... 目的克隆出针对表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)PEP-3表位的cDNA片段,为高表达EGFRvⅢ肿瘤的免疫治疗奠定基础。方法根据PEP-3的碱基序列设计出有12对互补碱基的正负引物,正负引物互为模板进行PCR扩增,制备出两端含酶切位点的PEP-3 cDNA片段,再将扩增的PCR产物亚克隆于载体pGEM-T Easy构建重组质粒pGEM-T Easy/PEP-3。结果经限制性内切酶酶切鉴定和DNA测序证实,编码PEP-3的cDNA片段被成功扩增并亚克隆于载体pGEM-T Easy中。结论成功克隆了编码表皮生长因子受体Ⅲ型突变体PEP-3表位的cDNA片段。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 PEP-3表位 CDNA 基因克隆

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人表皮生长因子受体Ⅲ型突变体胞外区的克隆表达和鉴定 被引量：1

5

作者 张兴梅 石玉生 刘忠英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期151-153,共3页

目的构建含表皮生长因子(EGF)受体Ⅲ型突变体胞外区基因(vⅢECD)的重组质粒并进行表达和鉴定。方法应用PCR方法扩增EGFRvⅢ ECD片段,将其T-A克隆和测序,再将目的基因插入GST融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达。采用双酶切鉴定插入序列的... 目的构建含表皮生长因子(EGF)受体Ⅲ型突变体胞外区基因(vⅢECD)的重组质粒并进行表达和鉴定。方法应用PCR方法扩增EGFRvⅢ ECD片段,将其T-A克隆和测序,再将目的基因插入GST融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达。采用双酶切鉴定插入序列的正确性,用SDS-PAGE及Western blotting分析融合蛋白的表达。结果测序结果证实插入DNA序列与EGFR胞外区序列完全一致;双酶切鉴定表明,EGFRvⅢ ECD序列已经正确克隆到GST融合表达载体中。SDS-PAGE电泳显示融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中以包涵体形式表达,重组融合蛋白GST-vⅢECD的表达量占菌体总蛋白的15%以上。Western blotting分析证实重组融合蛋白可以被EGFR特异性抗体所识别。结论成功构建了融合表达载体(pGEX-4T-1/vⅢECD),并进行了融合蛋白的诱导表达和鉴定,可进一步用于EGFRvⅢ功能及免疫学研究。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 Ⅲ型突变体 胞外区 原核表达 融合蛋白

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人表皮生长因子受体显性负性突变体对胃癌细胞体外侵袭转移能力的抑制作用 被引量：5

6

作者 廖刚 王子卫 +1 位作者 张能 董浦江 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期574-578,共5页

目的:探讨人表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)显性负性突变体(Dominant negative epidermalgrowth factor receptor,DNEGFR)对胃癌细胞体外侵袭转移能力的影响及其分子机制。方法:构建pEGFPN1-DNEGFR,转染人胃... 目的:探讨人表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)显性负性突变体(Dominant negative epidermalgrowth factor receptor,DNEGFR)对胃癌细胞体外侵袭转移能力的影响及其分子机制。方法:构建pEGFPN1-DNEGFR,转染人胃癌细胞并筛选稳定转染株,采用Transwell侵袭小室模型检测人胃癌细胞体外侵袭转移能力,RT-PCR检测细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA水平,酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测培养液MMP-2和MMP-9蛋白水平。结果:成功构建pEGFPN1-DNEGFR,转染并筛选出稳定转染株,检测到人胃癌细胞体外侵袭转移能力降低,细胞MMP-2和MMP-9 mRNA水平降低,培养液MMP-2和MMP-9蛋白水平降低。结论:DNEGFR通过抑制人胃癌细胞分泌MMP-2和MMP-9,使其体外侵袭转移能力显著降低,将为DNEGFR在胃癌生物治疗中的深入研究打下基础。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 显性负性突变体 胃癌 基质金属蛋白酶

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人表皮生长因子受体显性负性突变体诱导胃癌细胞发生G0／G1期阻滞 被引量：2

7

作者 廖刚 王子卫 +2 位作者 张能 董浦江 汤为学 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期430-435,共6页

目的:探讨人表皮生长因子受体显性负性突变体(dominant negative epidermal growth factor recep-tor,DNEGFR)对胃癌细胞细胞周期的影响及其分子机制。方法:选用2株人胃癌细胞,分为如下6组:SGC-7901细胞未转染组(US组)、SGC-7901细胞pEG... 目的:探讨人表皮生长因子受体显性负性突变体(dominant negative epidermal growth factor recep-tor,DNEGFR)对胃癌细胞细胞周期的影响及其分子机制。方法:选用2株人胃癌细胞,分为如下6组:SGC-7901细胞未转染组(US组)、SGC-7901细胞pEGFP-N1质粒转染组(ES组)、SGC-7901细胞pEGFPN1-DNEGFR质粒转染组(DS组)、NCI-N87细胞未转染组(UN组)、NCI-N87细胞pEGFP-N1质粒转染组(EN组)和NCI-N87细胞pEGF-PN1-DNEGFR质粒转染组(DN组)。采用流式细胞术检测细胞周期,Western blotting检测细胞周期素依赖性蛋白激酶2(CDK2)、cyclin D1、Ser9位点磷酸化糖原合成酶激酶3β[p-GSK-3β(Ser9)]、p21和p27蛋白水平。结果:转染pEGFPN1-DNEGFR质粒的人胃癌细胞株出现G0/G1期阻滞,CDK2、cyclin D1和p-GSK-3β(Ser9)蛋白水平降低,p21和p27蛋白水平则升高。结论:DNEGFR通过激活GSK-3β使cyclin D1蛋白水平降低,并降低CDK2蛋白水平,上调p21和p27蛋白水平,最终导致胃癌细胞发生G0/G1期阻滞。这一结果将为胃癌生物治疗研究提供新思路。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 显性负性突变体 胃肿瘤 细胞周期

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含表皮生长因子受体(EGFR)启动子萤光素酶报告基因的三阴性乳腺癌细胞模型的建立 被引量：2

8

作者 梁丹丹 王春苗 +3 位作者 李俊莹 覃良淑 粟正英 侯华新 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期918-923,共6页

目的建立稳定表达人表皮生长因子受体(EGFR)启动子及萤光素酶(Luc)报告基因的三阴性乳腺癌细胞系,并对其应用进行初步验证。方法采用基因重组技术,构建含有EGFR启动子以及Luc报告基因的慢病毒载体,并感染MDA-MB231细胞,经过嘌呤霉素筛... 目的建立稳定表达人表皮生长因子受体(EGFR)启动子及萤光素酶(Luc)报告基因的三阴性乳腺癌细胞系,并对其应用进行初步验证。方法采用基因重组技术,构建含有EGFR启动子以及Luc报告基因的慢病毒载体,并感染MDA-MB231细胞,经过嘌呤霉素筛选获得能稳定表达Luc活性的MDA-MB231-EGFR-Luc2细胞系;分别采用EGFR激活剂EGF以及抑制剂吉非替尼处理细胞后检测Luc活性变化。结果通过基因测序和质粒双酶切鉴定,EGFR基因启动子Luc报告基因-慢病毒表达载体构建成功,经过嘌呤霉素筛选获得稳定表达Luc的MDA-MB231-EGFR-Luc2细胞;EGF可剂量依赖性的增加细胞中Luc的活性,而吉非替尼则相反。结论建立了MDA-MB231-EGFR-Luc2稳定表达EGFR启动子及Luc报告基因细胞系,为高通量筛选靶向EGFR的抗肿瘤药物提供一类新的细胞模型。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 启动子 萤光素酶报告基因 三阴性乳腺癌 MDA-MB231细胞

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三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌临床病理特征差异及与雌激素受体β和表皮生长因子受体表达的关系 被引量：14

9

作者 袁礼 吴焕文 +1 位作者 任新瑜 梁智勇 《协和医学杂志》 2015年第1期1-8,共8页

目的比较三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌在临床病理特征及部分免疫组织化学指标表达上的差异,并探讨这些免疫组织化学指标的表达与三阴乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法 2010年1月至2013年12月北京协和医院收治的经组织病理确诊的乳腺... 目的比较三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌在临床病理特征及部分免疫组织化学指标表达上的差异,并探讨这些免疫组织化学指标的表达与三阴乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法 2010年1月至2013年12月北京协和医院收治的经组织病理确诊的乳腺癌患者共863例,其中三阴乳腺癌患者135例,非三阴乳腺癌患者728例。分析三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌患者在发病年龄、病理类型、肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期、是否有淋巴结转移、是否累及乳头以及手术方式等临床病理特征方面的差异。通过免疫组织化学法检测135例三阴乳腺癌患者与经单纯抽样法选取的135例非三阴乳腺癌患者中雌激素受体β(estrogen receptor β,ERβ)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、P53、Ki67的表达,分析上述指标在两类乳腺癌中的表达差异。进一步通过单因素生存分析探讨三阴乳腺癌患者的预后相关因素。结果三阴乳腺癌中浸润性导管癌的比例高于非三阴乳腺癌(86.7%比65.2%,P<0.001),发病年龄低于非三阴乳腺癌[(46.0±10.6)岁比(51.0±13.3)岁,P<0.05];三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌在淋巴结转移、临床分期、肿瘤大小、分化程度、手术方式方面差异亦有统计学意义(P<0.05);三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌在肿瘤累及乳头的比例差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学结果显示,三阴乳腺癌中ERβ阳性表达率较非三阴乳腺癌显著降低(63.7%比75.6%,P<0.05),而EGFR阳性表达率显著升高(62.2%比33.3%,P<0.05);P53、Ki67在三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。与非三阴乳腺癌相比,三阴乳腺癌的总体生存率(overall survival,OS)和无复发生存率(relapse-free survival,RFS)更低(P<0.05)。三阴乳腺癌单因素生存分析结果显示,ERβ阴性表达与EGFR阳性表达均与三阴乳腺癌的不良预后相关(P<0.05)。结论相较于非三阴乳腺癌,三阴乳腺癌有明显不同的临床病理特征:发病年龄较低、原发肿瘤体积较大、分化程度低、易发生淋巴结转移、ERβ阳性表达率较低、EGFR阳性表达率较高、OS及RFS较低。ERβ和EGFR可能成为重要的三阴乳腺癌预后判断指标。 展开更多

关键词 三阴乳腺癌 雌激素受体Β 表皮生长因子受体 临床病理特征 预后

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联合检测CK5/6、CK14和表皮生长因子受体对基底样三阴乳腺癌的诊断价值 被引量：10

10

作者 任新瑜 袁礼 +3 位作者 沈松杰 吴焕文 陆俊良 梁智勇 《协和医学杂志》 2017年第2期154-160,共7页

目的探讨联合检测CK5/6、CK14和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)对基底样三阴乳腺癌的诊断价值。方法北京协和医院2000年1月至2011年12月经组织病理学证实的115例三阴乳腺癌患者,收集其临床及病理资料。应用... 目的探讨联合检测CK5/6、CK14和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)对基底样三阴乳腺癌的诊断价值。方法北京协和医院2000年1月至2011年12月经组织病理学证实的115例三阴乳腺癌患者,收集其临床及病理资料。应用免疫组织化学法检测所有石蜡标本中CK5/6,CK14和EGFR的表达,以此判定是否为基底样三阴乳腺癌。以三者联合检测结果作为金标准,计算CK5/6,CK14和EGFR单独检测、两两联合检测的敏感性和特异性。进一步分析基底样三阴乳腺癌和非基底样三阴乳腺癌在年龄、肿瘤大小、组织学类型等临床及病理特征方面的差异。结果115例三阴乳腺癌患者平均患病年龄为(50.7±13.6)岁。免疫组织化学结果显示,单独检测CK5/6,基底样三阴乳腺癌阳性率为29.6%(34/115),CK14为21.7%(18/83),EGFR为60.9%(70/115)。CK14,CK5/6和EGFR三者联合检测阳性率为67.8%(78/115)。将三者联合检测的阳性例数作为金标准,则EGFR与CK5/6联合检测敏感性及特异性分别可达98.7%及100%。基底样三阴乳腺癌与非基底样三阴乳腺癌在组织学类型、分级,淋巴结转移情况,死亡率方面差异有统计学意义(P均<0.05),基底样三阴乳腺癌总生存期显著缩短(HR=0.363,95%CI:0.139~0.947)。结论 CK14、CK5/6和EGFR联合检测能够标识出最多数量的基底样三阴乳腺癌。基底样三阴乳腺癌预后比非基底样三阴乳腺癌预后更差,病理识别很重要。 展开更多

关键词 三阴乳腺癌 基底样亚型 CK5/6 CK14 受体 表皮生长因子

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肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域及神经表皮生长因子样蛋白-1 检测在M型磷脂酶A2受体阴性膜性肾病中的临床意义 被引量：6

11

作者 汤绚丽 杜园园 +4 位作者 余瑾 叶田 朱虹 陈银凤 李晓虹 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期235-244,共10页

目的探讨肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域(THSD7A)及神经表皮生长因子样蛋白-1(NELL1)检测在M型磷脂酶A2受体(PLA2R)阴性膜性肾病中的诊断及治疗指导意义。方法选取浙江中医药大学附属杭州市中医院2014至2021年肾穿刺活检确诊为PLA2R... 目的探讨肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域(THSD7A)及神经表皮生长因子样蛋白-1(NELL1)检测在M型磷脂酶A2受体(PLA2R)阴性膜性肾病中的诊断及治疗指导意义。方法选取浙江中医药大学附属杭州市中医院2014至2021年肾穿刺活检确诊为PLA2R阴性膜性肾病共116例,通过免疫组织化学方法检测肾组织THSD7A及NELL1的阳性表达情况,比较各组间临床病理特征及治疗与预后。结果116例PLA2R阴性膜性肾病中THSD7A阳性23例,NELL1阳性9例,其中两者双阳性1例。THSD7A阳性较阴性者IgG4阳性率更高(P=0.010);膜性肾病Ⅰ期占比更少,Ⅱ期占比更多(P=0.002);基底膜增厚更明显(P=0.034)。NELL1阳性较阴性者C1q及IgG2的阳性率更低(P=0.029,P=0.001);炎细胞浸润更多(P=0.033);多部位沉积物更少(P=0.001);基底膜增厚更不明显(P<0.001);不典型膜性肾病比例更低(P=0.010)。继发因素分析显示THSD7A阳性者有1例确诊为乙状结肠癌,NELL1阳性者均未发现恶性肿瘤。生存分析提示THSD7A阳性组肾病复合缓解率(完全缓解或部分缓解)显著低于阴性组(P=0.016),而NELL1阳性组肾病复合缓解率显著优于阴性组(P=0.015),两指标单一阳性组间比较显示NELL1单一阳性组肾病复合缓解率显著优于THSD7A单一阳性组(P<0.001)。结论THSD7A及NELL1阳性膜性肾病更倾向于原发性膜性肾病,且无恶性肿瘤提示价值,但对膜性肾病患者的预后具有一定的预测价值。 展开更多

关键词 膜性肾病 血小板反应蛋白1型结构7A域 神经表皮生长因子样蛋白-1 M型磷脂酶A2受体

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肾上腺嗜酸细胞型皮质癌的临床病理特征及表皮生长因子受体基因状态 被引量：3

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作者 张静 高洁 +2 位作者 武莎斐 鲁涛 梁智勇 《协和医学杂志》 2015年第3期191-196,共6页

目的探讨肾上腺嗜酸细胞型皮质癌临床病理特征及其表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）蛋白表达、基因突变和基因拷贝数改变情况。方法回顾性分析2000年1月至2009年12月在北京协和医院手术切除的9例肾上腺嗜酸... 目的探讨肾上腺嗜酸细胞型皮质癌临床病理特征及其表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）蛋白表达、基因突变和基因拷贝数改变情况。方法回顾性分析2000年1月至2009年12月在北京协和医院手术切除的9例肾上腺嗜酸细胞型皮质癌的临床特点、组织形态学特征,并以9例肾上腺嗜酸细胞型皮质腺瘤为对照,应用免疫组织化学、Scorpion ARMS突变系统及荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）的方法分析EGFR在二者中的蛋白表达、基因突变和基因拷贝数改变的情况。结果 9例肾上腺嗜酸细胞型皮质癌中,Cushing综合征2例,无功能性皮质癌7例。病例随访时间6~56个月,皮质癌患者失访2例,死亡6例。肾上腺嗜酸细胞型皮质癌中EGFR蛋白过表达率为77.8%（7/9）,EGFR FISH阳性率为55.6%（5/9）;仅有22.2%（2/9）皮质腺瘤存在EGFR蛋白的表达,且EGFR FISH均为阴性。肾上腺嗜酸细胞型皮质腺瘤及皮质癌中均未检测出EGFR基因扩增及基因突变。结论肾上腺嗜酸细胞型皮质癌非常罕见,其诊断依据病理学及免疫表型,EGFR蛋白过表达和7号染色体的高多体性较腺瘤更常见,可能有助于与后者的鉴别诊断,也有可能成为今后临床分子靶向治疗的潜在方向。 展开更多

关键词 肾上腺嗜酸细胞型皮质癌 表皮生长因子受体 免疫组化 荧光原位杂交 基因突变

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人上颌窦鳞癌及粘膜不典型增生组织中表皮生长因子受体的表达

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作者 陈东 贺建业 +3 位作者 魏永昆 高冬玲 许平 张红 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第3期259-261,共3页

目的 :探讨表皮生长因子受体 (EGFR)在上颌窦鳞癌发生不同阶段中的表达情况。方法 :应用免疫组织化学LSAB法 ,分别观测EGFR在上颌窦正常粘膜、慢性炎症及鳞癌组织中的表达情况 ,以及其与上颌窦鳞癌临床病理学特征间的关系。结果 :EGFR... 目的 :探讨表皮生长因子受体 (EGFR)在上颌窦鳞癌发生不同阶段中的表达情况。方法 :应用免疫组织化学LSAB法 ,分别观测EGFR在上颌窦正常粘膜、慢性炎症及鳞癌组织中的表达情况 ,以及其与上颌窦鳞癌临床病理学特征间的关系。结果 :EGFR在上颌窦不典型增生粘膜和鳞癌中的阳性表达率明显高于正常、单纯增生的粘膜 ,鳞癌组织中的表达又明显高于不典型增生组织 (P <0 0 5 ) ;EGFR的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤组织的分化程度无关 (P >0 0 5 ) ,而与患者的淋巴结转移与否及 3a生存期有关 (P <0 0 5 )。结论 :EGFR在上颌窦鳞癌发生发展中起重要作用 ,可作为判断上颌窦鳞癌生物学行为和预后的一个参考指标。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 尿抑胃素 鳞状细胞癌 上颌窦肿瘤 碘型增生组织

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胶原蛋白三螺旋重复序列1调控表皮生长因子受体信号通路促进高血压心肌重构形成及其机制 被引量：4

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作者 欧阳慎予 邵利辉 +2 位作者 秦佩 卓晓军 牛培 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期423-429,共7页

目的 探讨胶原蛋白三螺旋重复序列1(CTHRC1)调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路在高血压心肌重构形成中的作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为以下3组:野生型对照(WTC)组、AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组,每组10只。AngⅡ+Stuffer组... 目的 探讨胶原蛋白三螺旋重复序列1(CTHRC1)调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路在高血压心肌重构形成中的作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为以下3组:野生型对照(WTC)组、AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组,每组10只。AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组大鼠分别以1×10^(11)v.g.的剂量通过尾静脉注射Stuffer或CTHRC1进行预处理;注射4周后,大鼠接受渗透微型泵给药AngⅡ[1.5 mg/(kg·d)]持续4周以发展高血压,通过经胸超声心动图无创测量心脏功能,并采用Masson三色染相比,AngⅡ+stuffer组高血压大鼠心脏组织纤维化显著增加(P <0.05)。CTHRC1给药进一步加剧了高血压大鼠这些病理变化(P <0.05)。心脏超声显示,AngⅡ+CTHRC1组大鼠左心室射血分数降低和分数缩短程度较AngⅡ+stuffer组更大(P <0.05)。与对照组相比,AngⅡ色评估心脏纤维化。从2至3日龄SD大鼠的心脏中分离出心脏成纤维细胞(CF),分为:Con组、AngⅡ组、AngⅡ+sh-NC组、AngⅡ+shCTHRC1组和AngⅡ+sh-CTHRC1+Colivelin TFA组。通过CCK8试验、伤口愈合试验评估细胞增殖、迁移,二氢乙锭荧光染色检测活性氧(ROS)水平,蛋白质印迹分析CTHRC1蛋白和EGFR/Stat3信号通路表达。结果 与WTC组比较,AngⅡ组CF的增殖,EGFR、Stat3蛋白表达显著增加(P <0.05),sh-CTHRC1预处理显著逆转了AngⅡ诱导的CF增殖和EGFR、Stat3蛋白表达增加(P <0.05)。AngⅡ组中CF迁移、ROS水平和纤维化相关信号(COL1A1、COL3A1、TGF-β)基因表达较对照组均显著增加(P <0.05);sh-CTHRC1预处理显著逆转了AngⅡ诱导的这些变化(P <0.05)。此外,Colivelin TFA加入很大程度降低了sh-CTHRC1预处理对AngⅡ诱导的有益作用(P <0.05)。结论 CTHRC1过表达导致高血压大鼠心脏纤维化、结构损伤和功能障碍的增加,其作用机制与激活EGFR/Stat3信号通路介导的氧化应激有关。 展开更多

关键词 胶原蛋白三螺旋重复序列1 高血压 心肌重构 表皮生长因子受体信号通路

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靶向表皮生长因子受体的肿瘤生物治疗方法研究进展 被引量：17

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作者 廖刚 王子卫 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期97-100,共4页

肿瘤生物治疗(cancer biotherapy)已经成为继手术、放疗和化疗三大经典肿瘤治疗模式后的第四模式。在肿瘤生物治疗中,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)靶点扮演着重要角色。EGFR为一种相对分子质量为170 000的... 肿瘤生物治疗(cancer biotherapy)已经成为继手术、放疗和化疗三大经典肿瘤治疗模式后的第四模式。在肿瘤生物治疗中,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)靶点扮演着重要角色。EGFR为一种相对分子质量为170 000的酪氨酸蛋白激酶型受体,在多种恶性肿瘤存在过表达,在肿瘤发生、发展中起着重要作用。靶向EGFR的肿瘤生物治疗方法主要包括:基因沉默治疗、显性负性治疗、单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)治疗、生物"导弹"治疗、EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR tyrosine kinase inhibitor,EGFR TKI)治疗、双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)治疗方法等。目前靶向EGFR的肿瘤生物治疗研究已经取得较大进展,随着研究的进一步深入,肿瘤的治疗必将跨入一个全新的时代。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 肿瘤生物治疗 显性负性突变体 酪氨酸激酶抑制剂 单克隆抗体

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白藜芦醇对过表达EGFR的Ⅲ型突变体的胶质瘤细胞的生长抑制作用 被引量：1

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作者 石玉生 林水苗 +2 位作者 邓晓刚 陈龙华 张兴梅 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期351-354,共4页

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对过表达EGFR的Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87人脑胶质瘤细胞(U87-EGFRvⅢ)的生长抑制作用。方法:将不同浓度的Res作用于U87-EGFRvⅢ或U87细胞,用MTT法检测Res对细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞... 目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对过表达EGFR的Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87人脑胶质瘤细胞(U87-EGFRvⅢ)的生长抑制作用。方法:将不同浓度的Res作用于U87-EGFRvⅢ或U87细胞,用MTT法检测Res对细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡作用,免疫印迹法检测Res作用后细胞内EGFRvⅢ的表达情况。结果:经不同浓度Res处理后的U87-EGFRvⅢ细胞和U87细胞均显示抑制细胞生长的作用(P<0.05);流式细胞仪显示不同浓度Res对U87-EGFRvⅢ有促凋亡作用,显著高于对照组(P<0.05),100μmol/L和200μmol/L Res的48 h的细胞凋亡率分别为20.1%±0.8%、46.9%±1.2%;免疫印迹法显示Res作用后U87-EGFRvⅢ细胞内的EGFRvⅢ的表达量显著下降。结论:Res可诱导U87-EGFRvⅢ细胞凋亡、抑制其细胞增殖,并可使细胞内的EGFRvⅢ表达下降。 展开更多

关键词 白藜芦醇 胶质瘤 表皮生长因子受体的Ⅲ型突变体 凋亡

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基于多参数MRI影像组学联合MRI特征无创预测NME型乳腺癌HER-2过表达和低表达

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作者 赵盈 蒋鑫垚 +2 位作者 赵楠 许永生 雷军强 《磁共振成像》 北大核心 2025年第10期41-47,97,共8页

目的探讨多参数MRI影像组学联合MRI特征无创预测非肿块强化(non-mass enhancement,NME)型乳腺癌人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)过表达和低表达的应用价值。材料与方法收集本院156例在动态对比增... 目的探讨多参数MRI影像组学联合MRI特征无创预测非肿块强化(non-mass enhancement,NME)型乳腺癌人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)过表达和低表达的应用价值。材料与方法收集本院156例在动态对比增强磁共振成像(dynamic contrast-enhanced magnetic resonance imaging,DCE-MRI)上表现为NME且经病理证实的乳腺癌,将其分为HER-2过表达组(66例)和HER-2低表达组(90例),按照8∶2将其随机划分为训练集(124例)和测试集(32例)。在第2期(DCE-2)、第8期(DCE-8)及扩散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)图像上勾画VOI并提取影像组学特征。采用弹性网络(elastic net,Enet)算法构建DCE-2、DCE-8、DWI以及三者联合模型。采用logistic回归分析筛选HER-2表达的独立影响因素。最终,基于联合模型rad-score结合独立影响因素构建融合模型。结果基于DCE-2、DCE-8、DWI及三者联合的影像组学模型在训练集和测试集的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.746和0.714、0.768和0.714、0.721和0.635、0.823和0.734。logistic回归分析显示,肿瘤最大径是区分HER-2表达的独立影响因素(P<0.05)。最终,融合模型预测效能最佳,其在训练集和测试集的AUC分别为0.844和0.808。DeLong检验显示联合模型和融合模型差异无统计学意义(P=0.316)。SHAP结果分析rad-score对融合模型的贡献度最大。结论多参数MRI影像组学联合MRI特征可有效预测NME型乳腺癌HER-2过表达和低表达,结合SHAP算法进一步提高模型的可解释性。 展开更多

关键词 非肿块强化型乳腺癌 对比增强磁共振成像 影像组学 磁共振成像 人表皮生长因子受体2 过表达和低表达

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DCE-MRI影像特征对乳腺癌激素受体、HER-2及三阴性乳腺癌的预测价值 被引量：13

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作者 代婷 苏桐 +4 位作者 王锐 杨鸿羽 赵青 吕发金 欧阳祖彬 《磁共振成像》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期57-67,共11页

目的 探讨动态对比增强MRI(dynamic contrast-enhanced MRI, DCE-MRI)图像特征联合定量参数对乳腺癌激素受体、人表皮生长因子受体2 (human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)及三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, ... 目的 探讨动态对比增强MRI(dynamic contrast-enhanced MRI, DCE-MRI)图像特征联合定量参数对乳腺癌激素受体、人表皮生长因子受体2 (human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)及三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)的预测价值。材料与方法 回顾性分析316例行乳腺MRI检查的乳腺癌患者的临床资料、DCE-MRI图像及定量参数,其中242例为训练组,74例为验证组。根据激素受体表达情况分为激素受体阳性组和阴性组;按照HER-2表达情况分为HER-2阳性组和HER-2阴性组;根据激素受体及HER-2表达状态分为TNBC和非三阴性乳腺癌组(non-triple-negative breast cancer, NTNBC)。比较训练组中不同类型乳腺癌MRI图像特征及定量参数的差异,运用logistic回归联合部分影像征象及定量参数预测激素受体阳性、HER-2阳性与TNBC,构建出相应的列线图,利用验证组进行验证,采用受试者工作特征(receiver operator characteristic, ROC)曲线、校正曲线、决策曲线分析(decision curve analysis, DCA)评估预测模型效能。结果 训练组中病灶大小、形状、毛刺、内部强化特征(internal enhancement characteristics, IEC)、非肿块样强化(non-mass enhancement, NME)、子灶、周围血管增多、腋窝淋巴结肿大、乳头改变等乳腺DCE-MRI图像特征在乳腺癌不同免疫组化结果及分子亚型组间存在显著差异(P均<0.05),定量参数中血管外细胞外间隙容积比(volume fraction of extravascular extra vascular space, Ve)则是激素受体阳性组大于阴性组(P<0.001),而TNBC的Ve小于NTNBC (P<0.001)。毛刺(P<0.001)、IEC(P=0.041)、NME(P=0.006)以及腋窝淋巴结肿大(P=0.029)可以鉴别激素受体阳性和阴性乳腺癌。训练组的曲线下面积(area under the curve, AUC)为0.746(95%CI:0.681~0.811),敏感度、特异度及准确度分别为82.8%、52.9%及72.3%。验证组的AUC为0.829(95%CI:0.730~0.926),敏感度、特异度及准确度分别为78.7%、74.1%及77.0%。肿块形状(P=0.050)、毛刺(P=0.016)、NME(P=0.013)及腋窝淋巴结肿大(P<0.001)与HER-2阳性乳腺癌显著相关,结合上述特征构建HER-2阳性乳腺癌预测模型的AUC为0.733(95%CI:0.665~0.800),敏感度、特异度及准确度分别为55.6%、82.0%及73.1%。验证组的AUC为0.649(95%CI:0.507~0.791),敏感度、特异度及准确度分别为63.6%、65.4%及64.9%。联合病灶大小(P=0.010)、乳头改变(P=0.016)及Ve(P=0.007)构建的TNBC预测模型,训练组的AUC为0.689(95%CI:0.600~0.779),敏感性、特异度及准确度分别为80.0%、52.5%及57.0%,验证组的预测模型AUC为0.794(95%CI:0.662~0.927),敏感度、特异度及准确度分别为86.7%、67.8%及71.6%。训练组及验证组中激素受体阳性、HER-2阳性及TNBC预测模型的校正曲线均表明模型的一致性较高。DCA曲线显示,在较大阈值范围内,使用该模型具有的净收益更高。结论 乳腺癌DCE-MRI的影像特征及定量参数与激素受体及HER-2表达状态相关,具备无创预测激素受体阳性、HER-2阳性及TNBC的潜力。 展开更多

关键词 乳腺癌 三阴性乳腺癌 动态对比增强 磁共振成像 定量参数 激素受体 人类表皮生长因子受体2 预测模型

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ErbB3和ErbB4特异性配体筛选系统的建立及neuregulin-1突变体的筛选

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作者 戚英 魏东芝 +1 位作者 刘喜富 周明东 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1247-1255,共9页

Neuregulin-1(NRG1,纽兰格林)通过活化ErbB2/ErbB4二聚体具有治疗心衰的作用,目前已完成临床二期。为避免作为心衰治疗药物时同时激活ErbB3并产生副作用,因此用NRG1变异体的方法寻找能对ErbB4专一性激活的配体。文章构建了带有不同筛选... Neuregulin-1(NRG1,纽兰格林)通过活化ErbB2/ErbB4二聚体具有治疗心衰的作用,目前已完成临床二期。为避免作为心衰治疗药物时同时激活ErbB3并产生副作用,因此用NRG1变异体的方法寻找能对ErbB4专一性激活的配体。文章构建了带有不同筛选标记的ErbB2、ErbB3、ErbB4细胞表达质粒,将ErbB2/ErbB3、ErbB2/ErbB4质粒共转染至CHO细胞,建立了ErbB2/ErbB3特异性表达和ErbB2/ErbB4特异性表达的细胞株。通过与新生大鼠原代心肌细胞比较,证明ErbB2/ErbB4细胞株信号传导功能与心肌细胞相似,NRG1可以激活下游的AKT信号途径、PI3K信号途径,并表现出良好的剂量效应。因此可以通过检测与心肌功能密切相关的下游信号AKT磷酸化水平快速筛选抗心衰药物,并通过与ErbB2/ErbB3信号激活水平比较鉴定其对心肌细胞的特异性。文章还构建了31个不同的NRG1突变体并在大肠杆菌中成功的表达和纯化。将这些突变体用于刺激两个细胞株,通过检测AKT磷酸化水平,发现这些突变体对ErbB2/ErbB3与ErbB2/ErbB4受体的激活能力不同。进一步检测其中5个ErbB2/ErbB4激活特异性发生改变的突变体与两对受体的亲和力,发现这些突变体和ErbB2/ErbB4与ErbB2/ErbB3受体亲和力的变化有一致性。最终筛选到了4个可以更特异性激活ErbB2/ErbB4受体的突变体作为更有效治疗心衰的候选药物。 展开更多

关键词 纽兰格林(NRG1)突变体 心衰 表皮生长因子受体家族 稳定细胞株 磷酸化AKT

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三阴性乳腺癌的临床病理特征和预后影响因素分析 被引量：18

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作者 须捷平 徐曙光 +4 位作者 张云 俞羚 吴连明 殷志强 曹晖 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期637-641,共5页

目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)的临床病理特征和预后影响因素。方法收集547例女性乳腺癌患者的病历及随访资料,患者分为TNBC组和非三阴性乳腺癌(non-TNBC)组,分析TNBC的临床病理特征和预后影响因素。结果 TNBC组和non-TNBC组的患者数分别... 目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)的临床病理特征和预后影响因素。方法收集547例女性乳腺癌患者的病历及随访资料,患者分为TNBC组和非三阴性乳腺癌(non-TNBC)组,分析TNBC的临床病理特征和预后影响因素。结果 TNBC组和non-TNBC组的患者数分别为71(13.0%)和476(87.0%)。TNBC组与non-TNBC组患者年龄<35岁(14.1%vs1.1%)、有乳腺癌家族史(29.6%vs9.2%)、肿瘤直径>50 mm(22.5%vs8.0%)、肿瘤分期Ⅲ期(23.9%vs16.4%)、肿瘤分级Ⅲ级(40.8%vs28.8%)、有转移或复发(28.2%vs10.9%)等指标的差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05),绝经状态、转移淋巴结数、病理类型、手术方式等指标差异均无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,TNBC组患者5年无病生存率(DFS)和5年总生存率(OS)均显著低于non-TNBC组患者(65.8%vs85.3%,P<0.01;77.7%vs88.7%,P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析显示,乳腺癌家族史、肿瘤分级和转移淋巴结数是影响TNBC组患者DFS的独立预后危险因素。结论与non-TNBC患者相比,TNBC患者发病年龄轻、有明显乳腺癌家族史、肿瘤体积大、肿瘤分期晚、肿瘤分级高、易复发转移、DFS和OS低、预后差。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 三阴性 雌激素受体 孕激素受体 人表皮生长因子受体2 临床特征 预后

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