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荞麦主要过敏原分子特征与表位鉴定研究进展
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作者 秦宇飞 于宁 +4 位作者 康文瀚 李洋 胡风欣 张九凯 陈颖 《食品工业科技》 北大核心 2025年第5期397-404,共8页
荞麦是一种常见的食物过敏原,能够引发呼吸系统、消化系统、循环系统等方面的疾病,严重时可导致过敏性休克甚至死亡。明确荞麦中的主要过敏蛋白,确定其中的过敏原表位,对荞麦致敏机理解析及预防治疗相关的过敏疾病具有重要意义。本文综... 荞麦是一种常见的食物过敏原,能够引发呼吸系统、消化系统、循环系统等方面的疾病,严重时可导致过敏性休克甚至死亡。明确荞麦中的主要过敏蛋白,确定其中的过敏原表位,对荞麦致敏机理解析及预防治疗相关的过敏疾病具有重要意义。本文综述了荞麦中的主要过敏原(Fag e 1、Fag e 2、Fag e 3、Fag e 4、Fag e 5、Fag t 2、Fag t 3、Fag t 6)结构特征及其表位的研究进展,旨在为荞麦过敏深入研究与防治提供一定参考。 展开更多
关键词 荞麦过敏原 结构特征 表位鉴定 致敏性
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及初步应用
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作者 俞机敏 刘宏扬 +4 位作者 刘云飞 王尚辉 宋厚辉 张朝霞 翁长江 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第8期832-838,共7页
为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE糖蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究将PRV JM株gE蛋白主要抗原表位区域(aa52~aa238)的基因序列经密码子优化后由公司合成后克隆于pET-32a载体中构建重组表达质粒pET-32a-gE,经原核表达及纯化获得重组gE蛋白(rg... 为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE糖蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究将PRV JM株gE蛋白主要抗原表位区域(aa52~aa238)的基因序列经密码子优化后由公司合成后克隆于pET-32a载体中构建重组表达质粒pET-32a-gE,经原核表达及纯化获得重组gE蛋白(rgE),采用SDS-PAGE鉴定rgE的表达及纯化效果,并经BCA法测定rgE的浓度。将其免疫BALB/c小鼠。取3次免疫小鼠的脾脏制备脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合。通过ELISA筛选杂交瘤细胞株,经western blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定MAb的反应性,利用MAb亚类鉴定试剂盒检测其重链和轻链类型。以截短的gE合成多肽作为抗原,采用间接ELISA方法鉴定MAb识别的抗原表位,并利用MAb通过western blot和IFA鉴定PRV野毒株JM及gE基因缺失株PRV JMΔgE/TK中gE蛋白的表达水平。结果显示,经间接ELISA方法筛选到1株稳定分泌gE蛋白的单克隆细胞株,命名为4C6B。Western blot和IFA均表明本研究筛选的MAb能够特异性识别PRV感染PK-15细胞中表达的gE蛋白;亚类鉴定结果显示MAb重链为IgM型,轻链为κ链。间接ELISA结果显示MAb能够识别gE蛋白中的一个线性B细胞表位131ACHPDLVLGRACVPEAPEMG^(150)。利用制备的MAb腹水进行PRV野毒和gE基因缺失株的鉴定,结果显示该MAb能够有效鉴别PRV JM野毒株与gE缺失株。本研究制备的PRV gE蛋白的4C6B MAb可以用于特异性鉴别PRV JM野毒株和gE基因缺失株,同时也可以为PRV检测方法的建立、PRV基因缺失疫苗的构建以及gE蛋白的生物学功能研究提供生物材料。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 单克隆抗体 gE蛋白 表位鉴定
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癌-睾丸抗原NY-ESO-1的表位鉴定及其抗原肽疫苗研究 被引量:1
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作者 罗彬 林永达 +1 位作者 肖绍文 谢小薰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期474-477,共4页
关键词 癌-睾丸抗原 抗原肽疫苗 NY-ESO-1 表位鉴定 肿瘤免疫治疗 肿瘤组织 正常组织 表达特性
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CD8^+T细胞表位鉴定技术研究进展 被引量:1
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作者 樊淑华 王永立 《动物医学进展》 北大核心 2017年第8期85-89,共5页
CD8^+T细胞表位通过MHCⅠ分子呈递到细胞表面,激活CTL细胞从而介导并调节机体抗内源性抗原的免疫应答。MHC-peptide稳定性试验通过TAP缺陷的RMAS细胞转染克隆在细胞水平鉴定CD8^+T细胞表位与MHCⅠ分子的亲和力;酶联免疫斑点技术(ELISPOT... CD8^+T细胞表位通过MHCⅠ分子呈递到细胞表面,激活CTL细胞从而介导并调节机体抗内源性抗原的免疫应答。MHC-peptide稳定性试验通过TAP缺陷的RMAS细胞转染克隆在细胞水平鉴定CD8^+T细胞表位与MHCⅠ分子的亲和力;酶联免疫斑点技术(ELISPOT)通过检测IFN-γ的分泌水平评估抗原免疫后机体的细胞免疫应答能力,具有较高的敏感性和高效性。四聚体技术通过流式细胞仪分析抗原特异性CD8^+T细胞的表型和功能特征。论文介绍了CD8^+T细胞表位的特征和上述3种表位鉴定方法的基本原理和研究进展,为CD8^+T细胞表位的鉴定和表位疫苗的研制提供参考。 展开更多
关键词 T细胞表位 CD8+T细胞 表位预测 表位鉴定
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抗人心脏型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其应用
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作者 韩起 丛珊 +5 位作者 易维京 陈莎 梁文斌 陈安 胡川闽 李淑慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期620-624,共5页
目的制备抗人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)单克隆抗体(mAb),鉴定其基本特性并通过配对检测临床样本血清,对已配对的mAb进行表位鉴定。方法通过已制备的H-FABP抗原和合成肽免疫BALB/c小鼠,常规融合筛选后进行抗体亚型鉴定、效价和亲和... 目的制备抗人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)单克隆抗体(mAb),鉴定其基本特性并通过配对检测临床样本血清,对已配对的mAb进行表位鉴定。方法通过已制备的H-FABP抗原和合成肽免疫BALB/c小鼠,常规融合筛选后进行抗体亚型鉴定、效价和亲和力检测,纯化mAb后通过间接ELISA、Western blot法对mAb进行特异性检测;将获得的mAb分别作为捕获和检测抗体,经过配对建立检测重组H-FABP的ELISA体系,并初步用于临床血清检测;采用生物信息学分析设计2段H-FABP表位,通过原核表达获得其短肽并纯化,通过Western blot法对配对的mAb进行表位鉴定。结果成功获得4株抗H-FABP特异性mAb,亚类分别为IgG2a和IgG2b,抗体效价为1∶51 200~1∶1024 000,亲和力最高可达到9.02×109mol/L;经Western blot法和间接ELISA鉴定均能够特异检测重组H-FABP蛋白,经过配对发现mAb 3-H5和1-F10能够检测重组H-FABP,并在其临床血清样本检测中发现正常组和急性心梗组之间H-FABP水平具有显著性统计学差异;通过表位鉴定发现未知表位的mAb 1-F10能够特异识别位点为H-FABP的第86到第133位氨基酸。结论制备了4株高特异性和高亲和力的抗H-FABPmAb,成功建立了检测临床样本血清中的ELISA体系,并对其表位进行了分析鉴定。 展开更多
关键词 H-FABP 单克隆抗体 ELSIA体系检测 表位鉴定
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一株PRRSV N蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定 被引量:6
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作者 李敏华 王倩 +1 位作者 田志军 金涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期279-283,共5页
为了制备具有阻断能力的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的单克隆抗体(MAb),本研究以PRRSV SD53株感染Marc-145细胞后的上清作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得一株稳定分泌抗PRRSV MAb的杂交瘤细胞株(1H4)。鉴定结果显示,1H4 MAb是Ig... 为了制备具有阻断能力的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的单克隆抗体(MAb),本研究以PRRSV SD53株感染Marc-145细胞后的上清作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得一株稳定分泌抗PRRSV MAb的杂交瘤细胞株(1H4)。鉴定结果显示,1H4 MAb是Ig G1亚类,轻链为κ链。1H4细胞上清经间接免疫荧光(IFA)检测其效价是1∶40,腹水的IFA效价是1∶3 200。阻断ELISA试验显示1H4 MAb与病毒的结合能够被PRRSV阳性血清阻断。Western blot试验显示1H4 MAb可以特异性识别PRRSV的N蛋白,经截短表达N蛋白鉴定该MAb的抗原识别序列为N蛋白末端aa 107~aa 123。该抗原表位在美洲型PRRSV中高度保守,该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的PRRSV阻断ELISA检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 单克隆抗体 细胞融合 N蛋白 表位鉴定
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禽腺病毒血清4型Fiber2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定 被引量:8
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作者 郭瑞珍 苏冰倩 +6 位作者 王棋 王一 于朋伟 孟洁洁 齐艳丽 杨国宇 褚贝贝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期2000-2012,共13页
旨在制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白(Fiber2)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NusA-Fiber2作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白MAb的杂交瘤细胞株2G5、2G8、4C2,取细胞... 旨在制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白(Fiber2)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NusA-Fiber2作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白MAb的杂交瘤细胞株2G5、2G8、4C2,取细胞株2G5制备腹水并纯化,利用间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)和Western blot鉴定该单抗的特异性。用制备的单抗包被酶标板,通过一系列的优化,建立了FAdV-4 Fiber2双抗夹心ELISA检测方法。通过逐步截短分析鉴定出单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明:成功获取3株单克隆细胞株2G5、2G8、4C2。MAb 2G5可与原核表达纯化的Fiber2蛋白及FAdV-4特异性反应。建立的双抗夹心ELISA检测方法具有很好的特异性、灵敏性和重复性。该MAb识别的表位序列是N端aa1—33。本研究成功制备了具有良好Western blot和IFA反应原性的单克隆抗体,为Fiber2蛋白功能研究和FAdV-4新型表位疫苗商品化研发奠定了基础。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 Fiber2蛋白 单克隆抗体 双抗夹心ELISA 表位鉴定
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猪肺炎支原体P97蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其初步应用 被引量:4
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作者 王宁 谨瑾 +4 位作者 刘璐 刘欢欢 姜立波 辛九庆 刘恒贵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1110-1118,共9页
为了制备能够用于阻断ELISA检测的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的Mhp J株P97蛋白C末端包含R1区的肽段(P97CR1)作为免疫原免疫BALB/C雌鼠,筛选获得一株能稳定分泌抗Mhp P97蛋白MAb的杂... 为了制备能够用于阻断ELISA检测的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的Mhp J株P97蛋白C末端包含R1区的肽段(P97CR1)作为免疫原免疫BALB/C雌鼠,筛选获得一株能稳定分泌抗Mhp P97蛋白MAb的杂交瘤细胞株A3。鉴定结果显示,A3 MAb是IgG1亚类,轻链为κ链。Western blot结果显示A3 MAb能够和原核表达纯化的P97CR1蛋白特异性反应,并且在流式细胞仪分析中能够识别天然的Mhp。通过逐渐截短表达分析该MAb识别的表位序列为LDDNLQ,该抗原表位在Mhp菌株中高度保守。阻断ELISA初步试验结果显示,A3 MAb与蛋白抗原的结合能够被Mhp高免阳性血清阻断。该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的Mhp阻断ELISA检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 单克隆抗体 P97蛋白 表位鉴定
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牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白表位鉴定 被引量:1
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作者 周跃辉 朱远茂 +5 位作者 任建乐 严昊 王雪枝 马磊 史鸿飞 薛飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期871-874,898,共5页
为鉴定牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)g D蛋白抗原表位,本研究利用p ET-30a原核表达系统表达、纯化了重组g D蛋白,采用超速离心纯化的IBRV免疫BALB/c小鼠,取脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,以重组g D蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA筛选出... 为鉴定牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)g D蛋白抗原表位,本研究利用p ET-30a原核表达系统表达、纯化了重组g D蛋白,采用超速离心纯化的IBRV免疫BALB/c小鼠,取脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,以重组g D蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA筛选出一株稳定分泌抗g D蛋白的MAb杂交瘤细胞株(1G3)。间接免疫荧光结果表明:MAb与IBRV呈阳性反应,中和试验测定其腹水中和效价为1∶32。利用肽扫描技术原核表达GST融合短肽对MAb 1G3识别的抗原表位进行筛选鉴定,结果表明:该MAb识别的抗原表位为259EESKGYE265。蛋白序列分析表明该抗原表位在IBRV各分离株及牛疱疹病毒5型(Bo HV-5)中均保守。本研究为IBRV的糖蛋白g D的结构和免疫学特性及IBRV致病性的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 gD蛋白 单克隆抗体 表位鉴定
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猪急性腹泻综合征冠状病毒核衣壳蛋白新型线性B细胞表位的鉴定
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作者 曹丽艳 孔祥雨 +10 位作者 袁聪 段月月 马国祥 施磊 张宇 万颖 李想通 王娅婷 杜煜 郑海学 王琦 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1854-1864,共11页
猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)是一种蝙蝠来源的新型猪肠道冠状病毒,可引起新生仔猪腹泻、呕吐、脱水而死亡。SADS-CoV核衣壳蛋白(N)是病毒复制中最保守的结构蛋白,具有良好的抗原性... 猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)是一种蝙蝠来源的新型猪肠道冠状病毒,可引起新生仔猪腹泻、呕吐、脱水而死亡。SADS-CoV核衣壳蛋白(N)是病毒复制中最保守的结构蛋白,具有良好的抗原性。前期研究获得的5株抗SADS-CoV N蛋白的单克隆抗体(1C10、4B10、6G1、6F3和6E8),其中6E8与SADS-CoV的反应性最强。在本研究中,利用pET32a作为表达载体构建N蛋白的截短及缺失突变体质粒,经诱导表达后,用6E8进行抗原抗体反应。Western blot结果表明,6E8识别的抗原表位为69-QKGQRK-74。同源性分析结果显示,该表位在不同SADS-CoV毒株和蝙蝠冠状病毒HKU2中完全一致;在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猫感染性腹膜炎病毒(FIPV)中发现相似的表位(VKGQRK),仅有一个氨基酸的差异;而在其他冠状病毒中同源性较低。特异性试验中,6E8不能与猪流行性腹泻冠状病毒(PEDV)和TGEV发生发应,尽管6E8识别表位与TGEV仅有一个氨基酸的差异,这说明69-Q是6E8识别表位的关键氨基酸。进一步试验发现,当6E8与SADS-CoV孵育后再感染Huh7细胞,能增强SADS-CoV的感染,出现抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement, ADE)现象。总之,SADS-CoV N蛋白新型B细胞表位的鉴定,将为设计SADS-CoV新型疫苗和开发表位相关的诊断试剂提供新的见解。 展开更多
关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒 N蛋白 6E8单克隆抗体 表位鉴定
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肿瘤抗原MAGE-12的B细胞表位4分支多重抗原肽的合成及鉴定 被引量:10
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作者 李艳秋 吴玉章 +1 位作者 倪兵 贾正才 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1143-1145,共3页
目的 设计合成肿瘤抗原MAGE 12的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法 在预测MAGE 12的B细胞表位序列为QSDEGSSNEEQE(82 -93 )的基础上 ,采用 4分支多重抗原肽结构合成抗原肽 ,免疫C 5 7BL 6小鼠 ,产生多克隆抗体 ,应用ELISA实验及... 目的 设计合成肿瘤抗原MAGE 12的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法 在预测MAGE 12的B细胞表位序列为QSDEGSSNEEQE(82 -93 )的基础上 ,采用 4分支多重抗原肽结构合成抗原肽 ,免疫C 5 7BL 6小鼠 ,产生多克隆抗体 ,应用ELISA实验及免疫组化实验检测多克隆抗体是否为人的抗原肽的特异性抗体。结果 免疫C 5 7BL 6小鼠后可产生MAGE 12的抗原特异性的多克隆抗体 ,抗体滴度可达 1∶64。结论 证明所预测的表位为MAGE 12的B细胞表位。 展开更多
关键词 肿瘤抗原 B细胞表位 MAGE-12 表位鉴定 酶联免疫吸附法 肿瘤免疫治疗
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空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位分析及功能鉴定 被引量:6
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作者 楼宏强 胡野 +3 位作者 王岚 单小云 盛秀胜 高素华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期739-742,共4页
目的从生物信息学角度了解空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的跨膜结构、B细胞抗原表位及其抗原性、基因序列保守性等特征,并鉴定空肠弯曲菌主要外膜蛋白优势B细胞抗原表位,为后续抗体检测和疫苗研究提供实验依据。方法使用NCBI/Blast,TMHMM... 目的从生物信息学角度了解空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的跨膜结构、B细胞抗原表位及其抗原性、基因序列保守性等特征,并鉴定空肠弯曲菌主要外膜蛋白优势B细胞抗原表位,为后续抗体检测和疫苗研究提供实验依据。方法使用NCBI/Blast,TMHMM Server V2.0,DNA Star等生物信息学分析软件对空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18进行蛋白跨膜结构预测、线性B细胞抗原表位及其抗原性分析、并对不同空肠弯曲菌OMP18蛋白的氨基酸序列同源性进行比较。采用空肠弯曲菌全菌抗体IgG为一抗,基于ELISA技术对优势线性B细胞抗原表位进行筛选鉴定。结果生物信息学预测结果表明外膜蛋白OMP18定位于空肠弯曲菌外膜且不存在跨膜结构。蛋白序列保守存在于各空肠弯曲菌株中,序列同源性达95%以上。同时,我们发现该外膜蛋白中存在3个明显的B细胞线性表位,且具有很强的抗原性。ELISA检测鉴定结果表明3个B细胞抗原表位都能有效识别空肠弯曲菌全菌抗体。结论空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18保守存在于细菌表面,存在3个重要的B细胞线性抗原表位,可用于后续的抗体检测和疫苗开发研究。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 外膜蛋白OMP18 序列分析 表位鉴定 OMP18
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肿瘤抗原MAGE-2 HLA-A2限制性新CTL表位的鉴定 被引量:3
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作者 耿淼 吴玉章 +1 位作者 贾正才 周伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1156-1158,共3页
目的 寻求新的HLA A2限制性肿瘤抗原MAGE 2CTL表位。方法 经超基序与量化基序相结合预测的肿瘤抗原MA GE 2的 4个表位作为研究对象 ,标准的51 Cr实验与肽结合实验相结合进行验证。结果 预测表位肽MAGE 2 2 2 0 2 2 8,MAGE 2 2 71 2... 目的 寻求新的HLA A2限制性肿瘤抗原MAGE 2CTL表位。方法 经超基序与量化基序相结合预测的肿瘤抗原MA GE 2的 4个表位作为研究对象 ,标准的51 Cr实验与肽结合实验相结合进行验证。结果 预测表位肽MAGE 2 2 2 0 2 2 8,MAGE 2 2 71 2 79经体外刺激PBMC后可有效的诱导CTL效应产生 ,当效 靶为 10 0∶1时溶破靶细胞效率分别为 74 4% ,68 2 %。HLA A2分子亲和力分析 ,荧光系数分别为 0 61、0 2 4阳性肽荧光系数为 0 79。结论 多肽MAGE 2 2 2 0 2 2 8、MAGE 2 2 71 2 79可作为新的HLA A2限制性CTL表位。 展开更多
关键词 CTL表位 肿瘤抗原 MAGE-2 表位鉴定 肿瘤免疫治疗
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猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体结合抗原表位的鉴定
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作者 李亮 林跃智 +4 位作者 那雷 汤艳东 吕晓玲 周建华 曲娟娟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期738-741,共4页
为鉴定抗猴免疫缺陷病毒(SIV)衣壳蛋白p27单克隆抗体(MAb)p27-A5、p27-C7和p27-D2所识别的抗原表位,本研究通过间接ELISA法相加试验对这3株MAbs结合抗原表位进行初步分析,并利用部分重叠的短肽对MAbs的结合抗原表位进行鉴定。结果表明p2... 为鉴定抗猴免疫缺陷病毒(SIV)衣壳蛋白p27单克隆抗体(MAb)p27-A5、p27-C7和p27-D2所识别的抗原表位,本研究通过间接ELISA法相加试验对这3株MAbs结合抗原表位进行初步分析,并利用部分重叠的短肽对MAbs的结合抗原表位进行鉴定。结果表明p27-C7和p27-A5的结合抗原表位位于p27蛋白的aa61~aa76(氨基酸序列为61SEGCTPYDINQMLNCV76);p27-D2的结合抗原表位则位于aa191~aa206(氨基酸序列为191EQTDAAVKNWMTQTLL206)。该结果为进一步深入了解p27的抗原特性和建立该蛋白的检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 猴免疫缺陷病毒 P27蛋白 单克隆抗体 表位鉴定
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猪丹毒丝菌GAPDH线性B细胞表位预测与鉴定 被引量:1
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作者 朱伟峰 陈露 +2 位作者 谭凯 王高杰 蔡承志 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第22期171-174,共4页
为预测并鉴定猪丹毒丝菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)分子线性B细胞表位,首先通过多序列比分析已经全基因组测序的10株菌株的GAPDH一级结构保守性;然后使用在线软件Bepipred-2.0预测猪丹毒丝菌GAPDH线性B细胞表位,接下来通过人工化学合... 为预测并鉴定猪丹毒丝菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)分子线性B细胞表位,首先通过多序列比分析已经全基因组测序的10株菌株的GAPDH一级结构保守性;然后使用在线软件Bepipred-2.0预测猪丹毒丝菌GAPDH线性B细胞表位,接下来通过人工化学合方式合成GAPDH表位对应的多肽;最后使用间接ELISA法检测这些多肽与猪丹毒丝菌GAPDH高免血清之间的反应。研究发现已经完成全基因组测序的10株菌株的GAPDH一级结构高度保守。通过软件预测,找到了猪丹毒丝菌GAPDH的3个潜在的表位。ELISA检测结果表明74VLSERDPKNLPWKELGV90和178HAYTNDQNTLDGPHAKGDLRRGRAAAQSIIPNSTGA213与GAPDH高免血清反应明显,是猪丹毒丝菌GAPDH的表位。成功预测并鉴定到2个猪丹毒丝菌的抗原表位,这些表位将为以后基于猪丹毒丝菌GAPDH表位的诊断、疫苗设计及致病机制研究提供技术基础。 展开更多
关键词 猪丹毒丝菌 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 保护性抗原 表位预测 表位鉴定
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巴氏杆菌GAPDH线性B细胞表位预测与鉴定
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作者 朱伟峰 陈露 +2 位作者 谭凯 王高杰 蔡承志 《养殖与饲料》 2021年第11期16-19,共4页
首先通过多序列比对分析不同血清型菌株GAPDH的一级结构保守性,然后使用在线软件Bepipred-2.0预测巴氏杆菌GAPDH线性B细胞表位,并通过人工化学合方式合成GAPDH表位对应的多肽。最后使用间接ELISA法检测这些多肽与巴氏杆菌GAPDH高免血清... 首先通过多序列比对分析不同血清型菌株GAPDH的一级结构保守性,然后使用在线软件Bepipred-2.0预测巴氏杆菌GAPDH线性B细胞表位,并通过人工化学合方式合成GAPDH表位对应的多肽。最后使用间接ELISA法检测这些多肽与巴氏杆菌GAPDH高免血清之间的反应,确认预测结果。研究发现,不同血清型菌株的GAPDH一级结构高度保守,只有D型菌株HN06发生A288T突变。本次试验预测到巴氏杆菌GAPDH的3个表位,ELISA检测结果表明_(177)HATTATQKTVDGPSAKDWRGGRGAAQNIIPSSTGA_(211)与GAPDH高免血清反应明显,是巴氏杆菌GAPDH的表位。本研究鉴定到了巴氏杆菌GAPDH的1个线性B细胞表位,这些表位将为以后基于巴氏杆菌GAPDH表位的诊断、疫苗设计及感染与免疫机制研究提供技术基础。 展开更多
关键词 巴氏杆菌 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 保护性抗原 表位预测 表位鉴定
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禽戊型肝炎病毒人兽共感染的可能性研究 被引量:2
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作者 周恩民 荆胜涛 +3 位作者 彭军 孙培明 张璐 董施伟 《中国家禽》 北大核心 2009年第1期5-9,共5页
戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E Virus,HEV)引起的急性病毒性肝炎,主要经肠道传播,临床表现与甲型肝炎类似,主要流行于亚洲、非洲和中美洲的发展中国家。急性肝损坏和散发急性肝炎病例中50%以上由戊型肝炎引起。这使戊型肝炎成... 戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E Virus,HEV)引起的急性病毒性肝炎,主要经肠道传播,临床表现与甲型肝炎类似,主要流行于亚洲、非洲和中美洲的发展中国家。急性肝损坏和散发急性肝炎病例中50%以上由戊型肝炎引起。这使戊型肝炎成为一个重要的公共卫生问题。随着猪HEV的发现,禽HEV于2001年由美国的Meng博士领导的研究室发现和鉴定。在过去的几年里,我们与Meng博士研究室合作对禽HEV结构蛋白(ORF2)的B细胞抗原表位做了较系统的研究,鉴定出两个中和抗原表位,证明了禽HEV ORF2基因重组抗原免疫后能够产生中和抗体并可以防止禽HEV的感染。我们同时阐明了在禽HEV ORF2抗原内至少有一个禽HEV特异的抗原表位,一个人、猪和禽HEV三种病毒共有的抗原表位,至少有一个禽、人HEV共有的抗原表位。这些研究结果表明禽HEV ORF2蛋白的抗原表位可以作为有效的免疫诊断抗原,用来鉴别人和禽HEV感染。我们最近对健康人群HEV血清抗体检测结果表明抗禽HEV ORF2抗体阳性率约为1%,其中约4.5%的人群血清中含抗人HEV抗体。在对鸭群的血清学检测证明健康鸭群的抗禽HEV ORF2抗体阳性率约为20%。这些研究结果提示人可能被禽HEV感染。 展开更多
关键词 戊型肝炎 人戊型肝炎 禽戊型肝炎 人兽共感染 抗原表位鉴定
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尘螨主要变应原蛋白的IgE结合表位序列分析 被引量:8
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作者 钟志美 郑传东 王方 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1183-1186,共4页
目的对屋尘螨主要变应原(Derp1)蛋白分子中与过敏病人血清特异性IgE相结合的表位序列的鉴定。进而获得基于串联表位的小分子低毒过敏原以作为新的免疫治疗剂。方法采用全蛋白序列重叠扫描法对Derp1蛋白进行全表位筛选,即合成了覆盖Derp... 目的对屋尘螨主要变应原(Derp1)蛋白分子中与过敏病人血清特异性IgE相结合的表位序列的鉴定。进而获得基于串联表位的小分子低毒过敏原以作为新的免疫治疗剂。方法采用全蛋白序列重叠扫描法对Derp1蛋白进行全表位筛选,即合成了覆盖Derp1全蛋白222个氨基酸的31段各含15个氨基酸的多肽,且相邻肽段间有8个氨基酸的重叠。并将这些肽段按点状固相多肽合成法依顺序合成于纤维膜上。再将该膜与由数份过敏血清组成的血清池孵育,经抗人IgE-HRP二抗结合及X光片显影后对阳性点进行灰度比对及分析。结果经对X光片阳性点的比对及分析,我们确定出了Derp1过敏原蛋白中的3个强阳性表位序列。它们是位于第85~99位的氨基酸序列(表位1,Ep1),第106~120位的氨基酸序列(表位2,Ep2)及第190~204位的氨基酸序列(表位3,Ep3)。结论我们获得了Derp1中3个15肽的线性IgE结合表位(B细胞表位)序列。证实了Derp1分子中存在IgE结合的线性表位。为进一步构建T/B细胞串联表位的小分子低毒过敏原提供了物质基础。 展开更多
关键词 变应原 表位鉴定 低毒过敏原 屋尘螨
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