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转基因表达HBV抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞受体
被引量：
2
1
作者
吴静
王琳
+4 位作者
刘妍
叶海燕
丁宁
刘永明
徐东平
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期453-457,共5页
目的通过逆转录病毒介导HBV抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的T细胞受体(TCR)转基因表达,初步观察其结合活性。方法从HLA-A2阳性急性乙肝患者外周血中诱导、分选、克隆和扩增HBV抗原特异性CTL;提取细胞RNA,用RT-PCR、5'-RACE和OVER-LA...
目的通过逆转录病毒介导HBV抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的T细胞受体(TCR)转基因表达,初步观察其结合活性。方法从HLA-A2阳性急性乙肝患者外周血中诱导、分选、克隆和扩增HBV抗原特异性CTL;提取细胞RNA,用RT-PCR、5'-RACE和OVER-LAP PCR等方法获取TCR的α和β链编码基因;构建TCR重组逆转录病毒,介导特异性TCR分别在人Jurkat T细胞和HLA-A2阳性健康人CD8 T淋巴细胞上表达。结果从1例HLA-A2阳性急性乙肝患者样本中分别获得了2组TCR Vα、Vβ配对,分别命名为α21β13、α15β13,包装的重组逆转录病毒滴度为(1.5～5.0)×105IU/mL,用针对目标TCR的特异性Vβ链抗体(抗Vβ13 TCR-PE)和HLA-A2限制性表位特异性五聚体(pentamer)进行免疫荧光染色,重组TCR在T细胞表面获得表达:其中在Jurkat细胞上转入的Vβ13链表达细胞占1.06%～2.25%,在HLA-A2阳性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer阳性细胞分别占到1.03%～2.06%和1.05%～1.12%,在HLA-A2阴性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer阳性细胞均低于0.05%。结论通过逆转录病毒介导可以使HBV特异性CTL TCR获得转基因表达,具有结合HLA-A2限制性表位的活性。
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关键词
乙型肝炎病毒
细胞毒性T淋巴细胞
T细胞受体
表位特异性
表
达
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职称材料
重组人α2a型干扰素单克隆抗体的研制、特性鉴定及初步应用
被引量：
4
2
作者
朱勇
金伯泉
+3 位作者
安献禄
智刚
刘雪松
赵宁
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1992年第4期219-222,共4页
应用常规方法建立了5株稳定分泌抗重组人α2a 型干扰素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系1B8、2B6、3F1、4G5和5G10,并对其免疫学特性进行了较系统的鉴定.5株单抗均为 IgG1,特异性强,与重组人α1 型、γ型干扰素以及受体菌菌体蛋白成分无交...
应用常规方法建立了5株稳定分泌抗重组人α2a 型干扰素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系1B8、2B6、3F1、4G5和5G10,并对其免疫学特性进行了较系统的鉴定.5株单抗均为 IgG1,特异性强,与重组人α1 型、γ型干扰素以及受体菌菌体蛋白成分无交叉反应.间接 ELISA 测定小鼠腹水单抗效价1:320,000～1:10,240,000,其中3F1和5G10单抗对重组人α2a 型干扰素具中和活性(中和效价均为1:10,000)。竞争结合 ELISA 证实5株单抗针对3种不同表位。用3F1和5G10单抗建立的夹心 ELISA 能检测到60pg/ml的重组人α2a 和α2b 型干扰素。3F1单抗用于制备亲和层析柱纯化重组人α2a 型干扰素结果与进口单抗NK2相当。
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关键词
干扰素
单克隆抗体
表位特异性
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职称材料
题名
转基因表达HBV抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞受体
被引量：
2
1
作者
吴静
王琳
刘妍
叶海燕
丁宁
刘永明
徐东平
机构
桂林医学院
解放军
桂林市第三人民医院肝病科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期453-457,共5页
基金
国家自然科学基金(30771898)
军队"十一五"医药卫生科研杰出人才项目(06J024)
文摘
目的通过逆转录病毒介导HBV抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的T细胞受体(TCR)转基因表达,初步观察其结合活性。方法从HLA-A2阳性急性乙肝患者外周血中诱导、分选、克隆和扩增HBV抗原特异性CTL;提取细胞RNA,用RT-PCR、5'-RACE和OVER-LAP PCR等方法获取TCR的α和β链编码基因;构建TCR重组逆转录病毒,介导特异性TCR分别在人Jurkat T细胞和HLA-A2阳性健康人CD8 T淋巴细胞上表达。结果从1例HLA-A2阳性急性乙肝患者样本中分别获得了2组TCR Vα、Vβ配对,分别命名为α21β13、α15β13,包装的重组逆转录病毒滴度为(1.5～5.0)×105IU/mL,用针对目标TCR的特异性Vβ链抗体(抗Vβ13 TCR-PE)和HLA-A2限制性表位特异性五聚体(pentamer)进行免疫荧光染色,重组TCR在T细胞表面获得表达:其中在Jurkat细胞上转入的Vβ13链表达细胞占1.06%～2.25%,在HLA-A2阳性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer阳性细胞分别占到1.03%～2.06%和1.05%～1.12%,在HLA-A2阴性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer阳性细胞均低于0.05%。结论通过逆转录病毒介导可以使HBV特异性CTL TCR获得转基因表达,具有结合HLA-A2限制性表位的活性。
关键词
乙型肝炎病毒
细胞毒性T淋巴细胞
T细胞受体
表位特异性
表
达
Keywords
hepatitis B virus
cytotoxicity T lymphocytes
T cell receptor
epitope-specific
expression
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
重组人α2a型干扰素单克隆抗体的研制、特性鉴定及初步应用
被引量：
4
2
作者
朱勇
金伯泉
安献禄
智刚
刘雪松
赵宁
机构
第四军医大学免疫学教研室
第四军医大学药物研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1992年第4期219-222,共4页
文摘
应用常规方法建立了5株稳定分泌抗重组人α2a 型干扰素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系1B8、2B6、3F1、4G5和5G10,并对其免疫学特性进行了较系统的鉴定.5株单抗均为 IgG1,特异性强,与重组人α1 型、γ型干扰素以及受体菌菌体蛋白成分无交叉反应.间接 ELISA 测定小鼠腹水单抗效价1:320,000～1:10,240,000,其中3F1和5G10单抗对重组人α2a 型干扰素具中和活性(中和效价均为1:10,000)。竞争结合 ELISA 证实5株单抗针对3种不同表位。用3F1和5G10单抗建立的夹心 ELISA 能检测到60pg/ml的重组人α2a 和α2b 型干扰素。3F1单抗用于制备亲和层析柱纯化重组人α2a 型干扰素结果与进口单抗NK2相当。
关键词
干扰素
单克隆抗体
表位特异性
Keywords
Recombinant human interferon—α2a
Monoclonal antibody
Epitope specificity
Neutralization
Affinity purification
Sandwich ELISA
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转基因表达HBV抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞受体
吴静
王琳
刘妍
叶海燕
丁宁
刘永明
徐东平
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
2
重组人α2a型干扰素单克隆抗体的研制、特性鉴定及初步应用
朱勇
金伯泉
安献禄
智刚
刘雪松
赵宁
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1992
4
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