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补肾法调控小鼠卵母细胞自噬促进其成熟的分子机制研究
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作者 吴忠玉 刘雪平 +5 位作者 唐思玲 张新苗 郗红燕 何文娟 吴莉园 段彦苍 《世界中医药》 北大核心 2025年第11期1898-1905,共8页
目的:研究补肾法对体外培养小鼠卵母细胞成熟的促进作用及其对丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬的影响。方法:150只雌性美国癌症研究所(ICR)小鼠随机分为5组,空白对照组和自噬抑制剂组小鼠蒸馏水灌... 目的:研究补肾法对体外培养小鼠卵母细胞成熟的促进作用及其对丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬的影响。方法:150只雌性美国癌症研究所(ICR)小鼠随机分为5组,空白对照组和自噬抑制剂组小鼠蒸馏水灌胃,补肾组、补肾加自噬抑制剂组、补肾加MEK抑制剂组小鼠补肾调经Ⅱ、Ⅲ号方灌胃。剥离卵母细胞复合体(COCs)进行体外培养。定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测卵母细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、MEK1/2、ERK1/2 mRNA表达情况;免疫荧光法检测卵母细胞LC3、p62、MEK1/2、ERK1/2、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,补肾组卵母细胞第一极体排出率升高,胞质中皮质颗粒密度降低,卵母细胞中LC3、MEK1/2、ERK1/2 mRNA表达升高,p62 mRNA和蛋白表达降低,LC3、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);自噬抑制剂组卵母细胞第一极体排出率降低,胞质中皮质颗粒密度升高,卵母细胞中LC3 mRNA和蛋白表达降低,p62 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。与自噬抑制剂组比较,补肾加自噬抑制剂组卵母细胞第一极体排出率升高,胞质中皮质颗粒密度降低,LC3 mRNA和蛋白表达升高,p62 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与补肾组比较,补肾加MEK抑制剂组卵母细胞第一极体排出率降低,胞质中皮质颗粒密度升高,卵母细胞中LC3、MEK、ERK mRNA表达降低,p62 mRNA和蛋白表达升高,LC3、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾调经系列方可通过激活MEK/ERK信号通路提高卵母细胞自噬水平从而促进小鼠卵母细胞成熟。 展开更多
关键词 补肾调经系列方 小鼠 卵母细胞 自噬 丝裂原细胞外信号调节激酶 细胞外信号调节激酶 信号通路 分子生物学
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