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构建人补体衰变加速因子真核载体并转染NIH/3T3成纤维细胞
被引量：
2
1
作者
乔庆
陈勇
+2 位作者
窦科峰
张静
李剑平
《医学研究生学报》
CAS
2006年第4期302-305,i0012,共5页
目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecT...
目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,构建pSecTag2/HygroBDAF真核表达质粒,并进行酶切鉴定及序列测定;利用壳聚糖包裹质粒,转染小鼠NIH/3T3细胞,并对转染细胞用抗DAF进行免疫组化染色。结果:DAF基因大小为1049bp,与基因序列数据库中记载的人DAFcDNA序列结果完全一致;利用壳聚糖DAF纳米微粒转染NIH/3T3细胞24h后,免疫组化染色显示细胞质弥漫染色阳性。结论:成功构建了人DAF真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH/3T3细胞。
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关键词
补体衰变加速因子
壳聚糖
纳米微粒
基因克隆
基因转染
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职称材料
题名
构建人补体衰变加速因子真核载体并转染NIH/3T3成纤维细胞
被引量：
2
1
作者
乔庆
陈勇
窦科峰
张静
李剑平
机构
第四军医大学唐都医院普通外科
第四军医大学西京医院肝胆外科
第四军医大学西京医院病理科
出处
《医学研究生学报》
CAS
2006年第4期302-305,i0012,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:30070210)
文摘
目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,构建pSecTag2/HygroBDAF真核表达质粒,并进行酶切鉴定及序列测定;利用壳聚糖包裹质粒,转染小鼠NIH/3T3细胞,并对转染细胞用抗DAF进行免疫组化染色。结果:DAF基因大小为1049bp,与基因序列数据库中记载的人DAFcDNA序列结果完全一致;利用壳聚糖DAF纳米微粒转染NIH/3T3细胞24h后,免疫组化染色显示细胞质弥漫染色阳性。结论:成功构建了人DAF真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH/3T3细胞。
关键词
补体衰变加速因子
壳聚糖
纳米微粒
基因克隆
基因转染
Keywords
Decay accelerating factor
Chitosan
Nanoparticle
Gene clone
Gene transfection
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
构建人补体衰变加速因子真核载体并转染NIH/3T3成纤维细胞
乔庆
陈勇
窦科峰
张静
李剑平
《医学研究生学报》
CAS
2006
2
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