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小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法 被引量:11
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作者 孙黔云 叶巧玲 闫银萍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1619-1622,共4页
目的针对现有补体溶血活性测定方法不适宜测定小鼠血清补体的缺点,构建一种血清用量少、灵敏度高的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法。方法选用具有代表性的3个小鼠品系KM、BALB/c和C57BL/6小鼠的血清补体作为测定材料,以兔红... 目的针对现有补体溶血活性测定方法不适宜测定小鼠血清补体的缺点,构建一种血清用量少、灵敏度高的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法。方法选用具有代表性的3个小鼠品系KM、BALB/c和C57BL/6小鼠的血清补体作为测定材料,以兔红细胞为溶血靶细胞,利用眼镜蛇毒因子(CVF)特异激活补体替代途径的特点,构建和优化小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的方法,并采用该方法测定两种抗补体蛋白对小鼠体内血清补体活性的影响。结果以CVF作为激活剂成功构建了测定小鼠血清补体替代途径溶血活性的微量新方法。3个品系小鼠的血清在5~20μl的范围内即可分别达到合适的溶血度。该方法明显减少了血清用量,并能有效提高溶血度。结论基于CVF特异激活补体替代途径的特点而构建的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定新方法,血清用量少、灵敏度高、稳定性好,适用于测定小鼠血清补体的溶血活性。 展开更多
关键词 小鼠血清 补体溶血活性 补体替代途径 补体激活 眼镜蛇毒因子 补体蛋白
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补体旁路过度激活影响体内凝血功能 被引量:10
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作者 李敏 孙黔云 +3 位作者 赵琼 蒿雨露 季仁升 沈良贤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期39-44,共6页
目的研究补体旁路的过度激活对体内纤溶、凝血及血小板的影响。方法采用尾静脉注射眼镜蛇毒因子(CVF)造成大鼠体内补体旁路的过度激活。检测大鼠给药前和给药后多个时间点血样的补体活性、t-PA、PAI-1、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血... 目的研究补体旁路的过度激活对体内纤溶、凝血及血小板的影响。方法采用尾静脉注射眼镜蛇毒因子(CVF)造成大鼠体内补体旁路的过度激活。检测大鼠给药前和给药后多个时间点血样的补体活性、t-PA、PAI-1、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、P-selectin、PF-4、β-TG、血小板数量及聚集活性的变化,并检测小鼠静脉给予CVF后其尾部出血时间的变化。结果大鼠注射CVF后,血清补体活性在1h内基本消失。t-PA和PAI-1含量在1h内有明显增加,在48 h时间点t-PA/PAI-1比值有明显下降(P<0.01);PT、APTT、TT均略有变化,而血浆FIB含量明显下降;补体旁路的过度激活导致血中P-selectin、PF-4、β-TG明显上调,血小板数量明显减少,凝血酶和花生四烯酸诱导的血小板聚集被明显抑制,而ADP诱导的血小板聚集只受到轻微影响。小鼠尾部出血时间在1 h时明显缩短。结论补体旁路的过度激活能明显影响体内凝血功能,导致血液的高凝状态。 展开更多
关键词 补体替代途径 补体激活 内皮细胞活化 血小板聚 凝血功能 黏附分子 眼镜蛇毒因子
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补体旁路激活导致内皮细胞活化和损伤 被引量:14
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作者 孙黔云 李敏 +1 位作者 叶巧玲 李红玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期925-929,共5页
目的研究补体替代途径的激活对血管内皮细胞活化和损伤的作用。方法采用眼镜蛇毒因子(CVF)与人血清孵育,特异激活补体替代途径。将孵育物作用于人微血管内皮细胞,采用ELISA检测内皮细胞P-selectin、E-selectin、ICAM-1、MCP-1和IL-8的表... 目的研究补体替代途径的激活对血管内皮细胞活化和损伤的作用。方法采用眼镜蛇毒因子(CVF)与人血清孵育,特异激活补体替代途径。将孵育物作用于人微血管内皮细胞,采用ELISA检测内皮细胞P-selectin、E-selectin、ICAM-1、MCP-1和IL-8的表达,采用酶活性测定法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,化学发光法检测内皮细胞caspase-8活化信号,MTT法检测内皮细胞增殖活性,并检测内皮细胞释放NO的变化。结果补体旁路激活导致内皮细胞瞬时表达P-selectin,并进而使内皮细胞上调表达E-selectin、ICAM-1、MCP-1和IL-8。内皮细胞经补体激活物刺激后,LDH释放增加、凋亡信号caspase-8活化上调以及NO释放下调,同时,细胞增殖也受到抑制。结论补体旁路激活能诱导内皮细胞活化和损伤,介导血管内皮的生理结构与功能发生变化,从而可能导致相应的炎症和组织损伤。 展开更多
关键词 补体激活 内皮细胞活化 炎症 补体替代途径 黏附分子 趋化因子 眼镜蛇毒因子
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补体旁路激活对内皮细胞纤溶功能的影响 被引量:3
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作者 蒿雨露 孙黔云 李敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1772-1773,共2页
补体对机体防御和免疫功能有重要的作用,然而其过度激活会造成炎症和损伤[1]。旁路激活是补体激活的一条重要途径,很多疾病的发生与补体的旁路激活密切相关[2]。激活的补体会对内皮细胞产生作用和影响。内皮细胞具有多种重要的分泌调节... 补体对机体防御和免疫功能有重要的作用,然而其过度激活会造成炎症和损伤[1]。旁路激活是补体激活的一条重要途径,很多疾病的发生与补体的旁路激活密切相关[2]。激活的补体会对内皮细胞产生作用和影响。内皮细胞具有多种重要的分泌调节功能,而补体旁路激活对内皮细胞纤溶功能影响的研究极少见报道。为进一步探讨炎症相关病征中补体激活与凝血功能异常的相关性,本文开展了补体旁路激活对内皮细胞纤溶功能影响的研究。 展开更多
关键词 补体 补体激活 补体替代途径 内皮细胞 纤溶活性 眼镜蛇毒因子
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