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人类非小细胞肺癌细胞对小鼠体外血脑屏障模型功能的影响被引量：2: 1; 作者王家雄徐显鑫 +4 位作者康志文邱金涛俞泽然许金明龙江《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期179-184,共6页; 目的:建立体外血脑屏障模型(blood-brain barrier model,BBBM),观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞对BBBM功能的影响。方法:早上将周细胞(pericytes,PC)接种到Transwell膜的外侧面,星形胶质细胞(astrocytes,AS... 展开更多; 关键词血脑屏障模型非小细胞肺癌脑转移小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

Epsin2基因沉默对小鼠内皮细胞体外血脑屏障模型的影响: 2; 作者於晓东柴文英 +2 位作者王永刚曹奕强龙江《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期657-662,共6页; 目的:研究使用小干扰RNA(siRNA)特异性沉默体外血脑屏障模型中小鼠脑微血管内皮细胞系b. End3细胞中Epsin2的表达后对血脑屏障模型的功能及VEGFR2、ZO1、occludin表达的影响。方法:使用化学合成的siRNA特异性干扰b. End3细胞Epsin2的表... 展开更多; 关键词 Epsin2 VEGFR2 SIRNA 血脑屏障模型 b.End3细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响: 3; 作者蒋雯邓琼花梅松《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期153-157,共5页; 目的:研究M1表型的小胶质细胞外泌体(M1 microglia-derived exosome,M1-exo)对体外血脑屏障(blood-brain bar⁃rier,BBB)功能及血管内皮细胞间紧密连接蛋白表达的影响。方法:用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠小胶质细胞来源的... 展开更多; 关键词 M1表型的小胶质细胞外泌体体外血脑屏障模型缺血性脑卒中; 在线阅读下载PDF 职称材料

铅诱导血脑屏障体外模型中紧密连接相关蛋白的信号调控被引量：4: 4; 作者徐焰车红磊 +4 位作者刘明朝柯涛马越云陈景元郝晓柯《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1141-1146,共6页; 目的研究铅损伤体外血脑屏障(BBB)模型的紧密连接过程中,MAPK、AKT通路的改变,并观察相关通路的抑制剂的调节作用。方法利用TranswellTM小室培养系统将ECV304人脐静脉内皮细胞系与C6大鼠胶质瘤细胞共培养建立体外BBB模型。共培养实验组... 展开更多; 关键词铅血脑屏障血脑屏障体外模型紧密连接信号转导通路; 在线阅读下载PDF 职称材料

β-毒素促进金黄色葡萄球菌破坏血脑屏障的实验研究: 5; 作者王哲芬尹靓 +2 位作者陈韬吴静琳郑颖《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期578-586,共9页; 目的探讨β-毒素(Hlb)在金黄色葡萄球菌通过血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)中的作用。方法通过血琼脂平板划线筛选金葡菌MW2的Hlb高产菌株,验证其对hCMEC/D3模拟BBB细胞模型通透性的影响。采用生物信息学分析筛选hlb基因完整的... 展开更多; 关键词金黄色葡萄球菌 β-毒素血脑屏障血源性脑膜炎/脑微脓肿模型血脑屏障细胞模型; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人类非小细胞肺癌细胞对小鼠体外血脑屏障模型功能的影响被引量：2: 1; 作者王家雄徐显鑫康志文邱金涛俞泽然许金明龙江; 机构昆明医科大学第一附属医院神经外科红河州第一人民医院; 出处《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期179-184,共6页; 基金云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项资金项目(2015FB033); 文摘目的:建立体外血脑屏障模型(blood-brain barrier model,BBBM),观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞对BBBM功能的影响。方法:早上将周细胞(pericytes,PC)接种到Transwell膜的外侧面,星形胶质细胞(astrocytes,AS)接种到12孔板内,8 h后将Transwell置入12孔板内,再将小鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMEC)接种到transwell膜的内侧面,建立血脑屏障模型。模型建立后每天进行试漏试验及跨内皮电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)测定,鉴定是否成模。成模后分为对照组与实验组,将A549细胞接种到实验组BBBM内室,共培养体系置于培养箱,于24 h、48 h、72 h后进行电阻测定及辣根过氧化物酶渗透试验,以评估BBBM的功能。分别于渗透试验进行至2 h、6 h时取样,根据样本中辣根过氧化物酶浓度计算表观渗透系数(apparent permeability coefcient,Papp)。结果:(1)部分血脑屏障模型在建立后3 d成模,4 d可全部成模。(2)A549细胞加入BBBM内室共培养。(a)实验组TEER值与对照组比较:1 d后无显著变化(P>0.05);2 d后降低出现统计学差异(P<0.05);3 d后降低具有统计学差异(P<0.01);(b)渗透试验与对照组比较:1 d后2 h及6 h渗透试验实验组Papp均降低,但无统计学差异(P>0.05);2 d后实验组Papp升高,2 h渗透试验差异具有统计学意义(P<0.05),6 h渗透试验差异无统计学意义(P>0.05);3 d后实验组Papp升高,2 h及6 h渗透试验均具有显著统计学差异(P<0.01)。结论:小鼠体外血脑屏障模型的功能可被人类非小细胞肺癌细胞影响。体外共培养体系可用于研究肺癌脑转移过程中肿瘤细胞与脑微血管内皮细胞间相互作用的分子机制。; 关键词血脑屏障模型非小细胞肺癌脑转移小鼠; Keywords blood-brain barrier model NSCLC brain metastasis mouse; 分类号 R734.2 [医药卫生—肿瘤] R-332 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Epsin2基因沉默对小鼠内皮细胞体外血脑屏障模型的影响: 2; 作者於晓东柴文英王永刚曹奕强龙江; 机构昆明医科大学第一附属医院神经外科十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院); 出处《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期657-662,共6页; 基金云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项资金项目(2015FB033); 文摘目的:研究使用小干扰RNA(siRNA)特异性沉默体外血脑屏障模型中小鼠脑微血管内皮细胞系b. End3细胞中Epsin2的表达后对血脑屏障模型的功能及VEGFR2、ZO1、occludin表达的影响。方法:使用化学合成的siRNA特异性干扰b. End3细胞Epsin2的表达,免疫荧光、Western Blot检测转染后细胞Epsin2、VEGFR2、ZO1、occludin的表达。体外血脑屏障模型分为对照组(control)和Epsin2-siRNA干扰组(Epsin2-siRNA),Control组使用正常b. End3细胞建立体外血脑屏障模型,Epsin2-siRNA组使用Epsin2-siRNA转染后b. End3细胞建立体外血脑屏障模型,分别于建模24、48、72 h后进行跨内皮电阻测定,48 h辣根过氧化物酶(HRP)渗透试验测定血脑屏障模型功能。结果:转染后b. End3细胞Epsin2免疫荧光和Western Bolt结果均提示表达下降(P <0. 05)。随着Epsin2的表达下降,VEGFR2表达随之下降,ZO1、occludin表达上升(P <0. 05)。Epsin2-siRNA组TEER值与Control组比,48 h后Control组与Epsin2-siRNA组TEER均升高,但Epsin2-siRNA组升高幅度高于Control组,差异有统计学意义(P <0. 05);72 h后Epsin2-siRNA干扰组TEER进一步升高且与Control组相比差异有统计学意义(P <0. 05);共培养48 h后Epsin2-siRNA干扰组通透性明显低于Control组,且有统计学差异(P <0. 05)。结论:Epsin2的表达能够影响血脑屏障相关分子的表达,从而影响血脑屏障功能。; 关键词 Epsin2 VEGFR2 SIRNA 血脑屏障模型 b.End3细胞; Keywords Epsin2 VEGFR2 siRNA blood-brain barrier model b.End3 cell; 分类号 R73 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响: 3; 作者蒋雯邓琼花梅松; 机构昆明医科大学第一附属医院神经内科昆明医科大学第一附属医院心脏大血管外科; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期153-157,共5页; 基金云南省教育厅科学研究基金资助项目(编号:2022J0199) 云南省科技厅-昆明医科大学联合基金资助项目(编号:202201AY070001-049)。; 文摘目的:研究M1表型的小胶质细胞外泌体(M1 microglia-derived exosome,M1-exo)对体外血脑屏障(blood-brain bar⁃rier,BBB)功能及血管内皮细胞间紧密连接蛋白表达的影响。方法:用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠小胶质细胞来源的细胞系BV2细胞,流式技术检测其向M1型极化情况,分离提取外泌体。用小鼠脑微血管内皮细胞系b.End3细胞与原代培养的小鼠星形胶质细胞构建体外BBB模型,随机分为3组:b.End3细胞正常培养组(b.End3组)、b.End3细胞+25µg/mL正常BV2细胞来源外泌体(BV2-derived exosome,BV2-exo)组(b.End3+BV2-exo组)、b.End3细胞+25µg/mL M1表型的小胶质细胞来源外泌体组(b.End3+M1-exo组)。按实验分组将不同来源外泌体与BBB模型共培养,检测各组的跨膜电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)、荧光黄通过率,免疫印迹法(Western blot,WB)检测紧密连接复合物蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1及JAM蛋白的表达。结果:①小胶质细胞向M1型极化成功,其细胞标志物CD16/32阳性率较对照组明显升高(P=0.023);②与M1-exo共培养后,体外BBB模型的TEER明显下降(P=0.000),对荧光黄的透过率明显增加(P=0.000);③与b.End3组和b.End3+BV2-exo组相比,b.End3+M1-exo组的Claudin-1、Occludin及ZO-1蛋白的表达水平明显下降。结论:M1-exo可以破坏BBB的完整性,影响其功能。; 关键词 M1表型的小胶质细胞外泌体体外血脑屏障模型缺血性脑卒中; Keywords M1 microglia exosome in-vitro blood-brain barrier model ischemic stroke; 分类号 R743.32 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名铅诱导血脑屏障体外模型中紧密连接相关蛋白的信号调控被引量：4: 4; 作者徐焰车红磊刘明朝柯涛马越云陈景元郝晓柯; 机构第四军医大学西京医院检验科第四军医大学预防医学院军队劳动与环境卫生学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1141-1146,共6页; 基金国家自然科学基金重点项目(30830087); 文摘目的研究铅损伤体外血脑屏障(BBB)模型的紧密连接过程中,MAPK、AKT通路的改变,并观察相关通路的抑制剂的调节作用。方法利用TranswellTM小室培养系统将ECV304人脐静脉内皮细胞系与C6大鼠胶质瘤细胞共培养建立体外BBB模型。共培养实验组按照加入醋酸铅(PbC4H6O4)浓度的不同分组。测量跨内皮阻抗(TEER)和FITC-葡聚糖通过量,以动态TEER峰值和FITC-葡聚糖通过量作为判断ECV304细胞紧密连接形成的标准。Western blot法检测铅暴露对细胞紧密连接相关蛋白表达的影响;利用免疫荧光细胞化学染色检测紧密连接相关蛋白的细胞定位;染铅细胞MAPK、PI3K/AKT通路抑制作用。结果铅对ECV304细胞的生长具有抑制作用,且具有时间依赖性和剂量依赖性(P<0.05);随着培养时间延长,TEER的测定值不断下降,而FITC-葡聚糖通过量显著上升(P<0.05);Western blot法检测发现,在2.5μmol/L铅作用条件下,ECV304细胞和C6细胞共培养体系中ECV304细胞中的紧密连接相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-5的表达水平逐渐下降;p38、ERK、AKT的磷酸化水平逐渐增强;采用免疫荧光细胞化学染色发现ECV304细胞紧密连接相关蛋白表达减弱,信号通路抑制剂抑制铅诱导的信号通路活化,ERK1/2抑制剂PD98059和PI3K抑制剂LY2940021可抑制铅诱导的紧密连接相关蛋白表达降低。结论铅可诱导BBB通透性增强,MAPK、AKT通路抑制剂可抑制BBB通透性。; 关键词铅血脑屏障血脑屏障体外模型紧密连接信号转导通路; Keywords lead blood-brain barrier in vitro model of lead-induced BBB injury tight junction signal transduction pathway; 分类号 R392.33 [医药卫生—免疫学] R654.3 [医药卫生—外科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名β-毒素促进金黄色葡萄球菌破坏血脑屏障的实验研究: 5; 作者王哲芬尹靓陈韬吴静琳郑颖; 机构昆明医科大学第一附属医院神经内科云南省神经系统疾病临床医学研究中心; 出处《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期578-586,共9页; 基金国家自然科学基金青年科学基金(82002196) 云南省科技厅基础研究计划昆医联合专项-面上项目(202101AY070001-105) +1 种基金云南省重大科技专项计划(202102AA100061)。; 文摘目的探讨β-毒素(Hlb)在金黄色葡萄球菌通过血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)中的作用。方法通过血琼脂平板划线筛选金葡菌MW2的Hlb高产菌株,验证其对hCMEC/D3模拟BBB细胞模型通透性的影响。采用生物信息学分析筛选hlb基因完整的金葡菌菌株,利用同源重组的方法构建hlb敲除株,血琼脂平板法检测溶血活性改变。利用BBB细胞模型比较不同菌株对其通透性的影响,再将野生株与hlb敲除株经尾静脉注射构建小鼠血源性脑膜炎/脑微脓肿模型并比较感染72 h脑组织中菌载量。结果金葡菌MW2的Hlb高产菌株对BBB细胞模型破坏导致BBB细胞模型通透性增加的能力较野生株明显增强。NCTC8325-4、COL和RN4220菌株hlb基因无噬菌体插入。成功构建NCTC8325-4Δhlb株,血平板证实敲除株的β-溶血缺失。NCTC8325-4Δhlb株对BBB模型细胞破坏导致BBB细胞模型通透性增加的作用较野生株下降,在小鼠血源性脑膜炎/脑微脓肿模型脑组织中菌载量也较野生株明显降低。结论 β-毒素具有促进金葡菌破坏BBB的作用。; 关键词金黄色葡萄球菌 β-毒素血脑屏障血源性脑膜炎/脑微脓肿模型血脑屏障细胞模型; Keywords Staphylococcus aureus β-toxin blood-brain barrier hematogenous meningitis/brain microabscess model blood-brain barrier cell model; 分类号 R322.81 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R363.21 [医药卫生—病理学] R378.11 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人类非小细胞肺癌细胞对小鼠体外血脑屏障模型功能的影响	王家雄徐显鑫康志文邱金涛俞泽然许金明龙江	《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Epsin2基因沉默对小鼠内皮细胞体外血脑屏障模型的影响	於晓东柴文英王永刚曹奕强龙江	《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响	蒋雯邓琼花梅松	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	铅诱导血脑屏障体外模型中紧密连接相关蛋白的信号调控	徐焰车红磊刘明朝柯涛马越云陈景元郝晓柯	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	β-毒素促进金黄色葡萄球菌破坏血脑屏障的实验研究	王哲芬尹靓陈韬吴静琳郑颖	《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料