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HEBP1基因敲除对牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞中增殖的影响
1
作者
付强
陈俊贞
+7 位作者
郭妍婷
贺渊秀
董文丽
李泽宇
王万顺
姚刚
冉多良
史慧君
《动物医学进展》
北大核心
2021年第10期14-18,共5页
为研究血红素结合蛋白1(HEBP1)对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)复制的影响,应用CRISPR/Cas9技术建立HEBP1基因敲除的MDBK细胞系;用BVDV TC株感染HEBP1基因敲除的MDBK细胞,用免疫荧光染色检测BVDV双链RNA(dsRNA)水平,观察BVDV致细胞病变效应(C...
为研究血红素结合蛋白1(HEBP1)对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)复制的影响,应用CRISPR/Cas9技术建立HEBP1基因敲除的MDBK细胞系;用BVDV TC株感染HEBP1基因敲除的MDBK细胞,用免疫荧光染色检测BVDV双链RNA(dsRNA)水平,观察BVDV致细胞病变效应(CPE)情况,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测BVDV 5′UTR mRNA水平,Reed-Muench测定病毒滴度变化。结果表明,成功构建HEBP1基因敲除的MDBK稳定细胞系,敲除效率为72.41%;敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV 5′UTR mRNA和dsRNA积累,减弱BVDV感染靶细胞的CPE,降低BVDV滴度。说明敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV的复制,为抗BVDV研究提供新的思路和药物靶点。
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关键词
血红素结合蛋白1
牛病毒性腹泻病毒
CRISPR/Cas9基因编辑
病毒复制
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职称材料
题名
HEBP1基因敲除对牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞中增殖的影响
1
作者
付强
陈俊贞
郭妍婷
贺渊秀
董文丽
李泽宇
王万顺
姚刚
冉多良
史慧君
机构
新疆农业大学动物医学学院
出处
《动物医学进展》
北大核心
2021年第10期14-18,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31760742)
新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2017D01A35,2018D01A12)
+1 种基金
自治区青年科技创新人才培养项目(2017Q084)
新疆农业大学畜牧学博士后流动基金项目(168134,168138)。
文摘
为研究血红素结合蛋白1(HEBP1)对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)复制的影响,应用CRISPR/Cas9技术建立HEBP1基因敲除的MDBK细胞系;用BVDV TC株感染HEBP1基因敲除的MDBK细胞,用免疫荧光染色检测BVDV双链RNA(dsRNA)水平,观察BVDV致细胞病变效应(CPE)情况,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测BVDV 5′UTR mRNA水平,Reed-Muench测定病毒滴度变化。结果表明,成功构建HEBP1基因敲除的MDBK稳定细胞系,敲除效率为72.41%;敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV 5′UTR mRNA和dsRNA积累,减弱BVDV感染靶细胞的CPE,降低BVDV滴度。说明敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV的复制,为抗BVDV研究提供新的思路和药物靶点。
关键词
血红素结合蛋白1
牛病毒性腹泻病毒
CRISPR/Cas9基因编辑
病毒复制
Keywords
heme binding protein
1
Bovine viral diarrhea virus
CRISPR/Cas9 gene editing
virus replication
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HEBP1基因敲除对牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞中增殖的影响
付强
陈俊贞
郭妍婷
贺渊秀
董文丽
李泽宇
王万顺
姚刚
冉多良
史慧君
《动物医学进展》
北大核心
2021
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