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转染血红素氧化酶-1基因大鼠肝细胞系BRL体外抗凋亡作用
1
作者 陈国勇 曲青山 +1 位作者 孙建军 钱建民 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第4期713-715,共3页
目的:探讨血红素氧化酶1(hemeoxygenase,HO1)基因转染对大鼠肝细胞系BRL的抗凋亡作用。方法:体外培养的BRL细胞转染HO1基因后(对照组采用转染空载体pcDNA3的BRL细胞),应用RTPCR检测肝细胞系BRL中HO1基因的表达。用肿瘤坏死因子α(TNFα... 目的:探讨血红素氧化酶1(hemeoxygenase,HO1)基因转染对大鼠肝细胞系BRL的抗凋亡作用。方法:体外培养的BRL细胞转染HO1基因后(对照组采用转染空载体pcDNA3的BRL细胞),应用RTPCR检测肝细胞系BRL中HO1基因的表达。用肿瘤坏死因子α(TNFα)刺激细胞,采用流式细胞仪(FACS)进行细胞计数,TUNEL染色等方法检测细胞的凋亡情况。结果:转染的肝细胞系BRL中均有HO1mRNA表达。转染HO1的BRL细胞经TNFα诱导凋亡后,细胞凋亡率(55.42%±3.12%)明显低于同等刺激下转染pcDNA3的BRL细胞(81.29%±3.08%)(P<0.05)。结论:BRL肝细胞系中HO1表现出较强的抗凋亡能力,为以细胞凋亡为主要病理表现的肝脏缺血再灌注损伤的临床治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 血红素氧化酶-1基因 凋亡 肿瘤坏死因子 转染 大鼠
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p38丝裂素活化蛋白激酶信号传导通路对低氧预处理后心脏成纤维细胞血红素氧化酶-1基因表达的影响
2
作者 林杰 吴岚 +2 位作者 王嫘 张海燕 杨禹娟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期653-655,共3页
目的:探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号传导对低氧预处理(HPC)的细胞保护作用以及HPC后血红素氧化酶-1(HO-1)mRNA表达的影响。方法:选用新生Wistar大鼠心脏进行成纤维细胞培养,给予HPC及低氧/复氧处理(HR)。药物处理组在HPC和HR处... 目的:探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号传导对低氧预处理(HPC)的细胞保护作用以及HPC后血红素氧化酶-1(HO-1)mRNA表达的影响。方法:选用新生Wistar大鼠心脏进行成纤维细胞培养,给予HPC及低氧/复氧处理(HR)。药物处理组在HPC和HR处理过程中向培养液中加入SB203580。测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)浓度和细胞HO-1 mRNA表达量。结果:低氧/复氧后,HPC/SB组LDH浓度显著高于HPC/NSB组(P<0.05)。HR组低氧/复氧后各亚组LDH浓度均显著升高(P<0.01,P<0.01);低氧/复氧处理前HPC组中NSB亚组于低氧预处理后HO-1 mRNA表达显著上升(P<0.001),低氧/复氧处理后其表达有所下降;SB亚组其表达也显著上升(P<0.01)。HR组中各亚组于低氧/复氧处理后HO-1 mRNA表达也显著上升(P<0.01)。结论:对培养的心脏成纤维细胞给予低氧预处理能够减轻其后低氧/复氧对细胞的损伤,低氧预处理较低氧/复氧处理更能够显著诱导心脏成纤维细胞HO-1 mRNA的表达。 展开更多
关键词 血红素氧化酶-1 低氧预处理 心脏成纤维细胞 丝裂素活化蛋白激酶
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血红素氧化酶-1基因启动子多态性与冠心病的相关性
3
作者 陈宋明 李玉光 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第23期2181-2183,共3页
血红素氧化酶-1具有抗氧化、抗炎作用,是体内重要的抗动脉粥样硬化因子之一,因其能抑制血管壁平滑肌生长、促进内皮细胞修复、舒张血管,所以在冠心病的发生、发展中起重要的保护作用。在同等应激水平,血红素氧化酶-1的表达水平主要取决... 血红素氧化酶-1具有抗氧化、抗炎作用,是体内重要的抗动脉粥样硬化因子之一,因其能抑制血管壁平滑肌生长、促进内皮细胞修复、舒张血管,所以在冠心病的发生、发展中起重要的保护作用。在同等应激水平,血红素氧化酶-1的表达水平主要取决于该基因启动子区多态性。近年研究表明,血红素氧化酶-1基因启动子多态性不仅与冠心病的易患性关联,而且与冠心病预后密切相关,可能是冠心病一个重要的遗传标志。调控血红素氧化酶-1基因表达可能成为治疗冠心病新的靶点。 展开更多
关键词 血红素氧化酶-1 基因多态性 冠心病
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环氧化酶和血红素氧合酶1基因多态性与阿司匹林抵抗关系的研究 被引量：11
4
作者 范利 李晓利 +7 位作者 赵莉 马飞 陈荣霞 曹剑 刘霖 王强 陈昕 孙沛 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2012年第8期805-809,共5页
目的探讨环氧化酶1(COX-1)、COX 2和血红素氧合酶1(HO-1)的基因多态性与阿司匹林抵抗(AR)的相关性。方法选择431例老年汉族心脑血管病患者,持续服用(75～100 mg)阿司匹林≥1个月,通过花生四烯酸诱导光比浊法联合二磷酸腺苷诱导光比浊法... 目的探讨环氧化酶1(COX-1)、COX 2和血红素氧合酶1(HO-1)的基因多态性与阿司匹林抵抗(AR)的相关性。方法选择431例老年汉族心脑血管病患者,持续服用(75～100 mg)阿司匹林≥1个月,通过花生四烯酸诱导光比浊法联合二磷酸腺苷诱导光比浊法,筛查出AR患者(AR组)36例,阿司匹林半抵抗患者(semi-AR组)164例和阿司匹林不抵抗患者(non-AR组)231例。并对COX-1 rs1888943、rs1330344、rs3842787、rs5787、rs5789和rs5794,COX-2 rs20417和rs5277,HO-1 rs2071746共9个单核苷酸多态性位点的相关性进行比较。结果与non-AR组和semi-AR组比较,AR组COX-1 rs1330344(1 676A/G)突变的G等位基因增加了发病风险(OR=1.77,95%CI:1.07～2.92,P=0.02)和(OR=1.66,95%CI:0.99～2.77,P=0.05)。HO-1 rs2071746(-413 A>T)突变T等位基因同样增加了发病风险(OR=1.70,95%CI:1.02～2.79,P=0.04)和(OR=1.68,95%CI:1.00～2.80,P=0.05)。结论 COX-1 rs1330344和HO-1 rs2071746与老年汉族人群AR相关,COX-1 rs1888943、rs3842787、rs5787、rs5789、rs5794和COX-2 rs20417、rs5277与AR不相关,在汉族人群中罕见出现。 展开更多
关键词 环氧化酶1 血红素加氧酶1 多态性 单核苷酸 阿司匹林 花生四烯酸 等位基因
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血红素氧化酶-1在离体大鼠心肌缺血预处理中的作用 被引量：13
5
作者 何洁 张敏 +2 位作者 刘俊昌 吴立玲 伍贻经 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期932-934,共3页
目的 :观察缺血预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注后心功能、乳酸脱氢酶 (LDH)活性和丙二醛(MDA)含量及血红素氧化酶 - 1活性的影响。方法 :应用Langendorff离体大鼠等容收缩灌流模型行离体大鼠心脏灌流。缺血预处理方案为停灌 5min后再灌... 目的 :观察缺血预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注后心功能、乳酸脱氢酶 (LDH)活性和丙二醛(MDA)含量及血红素氧化酶 - 1活性的影响。方法 :应用Langendorff离体大鼠等容收缩灌流模型行离体大鼠心脏灌流。缺血预处理方案为停灌 5min后再灌 5min反复 3次 ,持续缺血再灌方案为停灌 4 0min后再灌 2 0min ,监测正常对照组、缺血再灌组 (IR)和缺血预处理组 (IPC)心功能指标的同时 ,测定冠脉流出液LDH活性、心肌MDA含量和HO- 1活性变化。结果 :IPC组再灌 2 0min时的心功能恢复率显著高于IR组 (P <0 0 1) ,心肌血红素氧化酶 - 1活性也明显高于IR组 (P <0 0 5 ) ,而LDH活性及MDA含量显著少于IR组 (均为P <0 0 1)。结论 :血红素氧化酶 - 1活性增高可能与缺血预处理对大鼠缺血再灌心肌的保护作用有关。 展开更多
关键词 局部缺血 心肌缺血再灌注损伤 血红素氧化酶-1 离体大鼠 缺血预处理
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乌司它丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1的影响 被引量：7
6
作者 金丽艳 徐军美 +2 位作者 贺志飚 阮文燕 柴湘平 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期675-678,共4页
目的:探讨乌司他丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1表达的影响。方法30只成年SD大鼠,随机分为3组(n=10)。正常组(A组)经大鼠尾静脉注射0.2mL/kg生理盐水;急性肺损伤组(B组)、乌司他丁组(C组)经大鼠尾静脉注射油酸0.2mL/kg... 目的:探讨乌司他丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1表达的影响。方法30只成年SD大鼠,随机分为3组(n=10)。正常组(A组)经大鼠尾静脉注射0.2mL/kg生理盐水;急性肺损伤组(B组)、乌司他丁组(C组)经大鼠尾静脉注射油酸0.2mL/kg制成急性肺损伤模型,随后立即给予A组、B组腹腔注射生理盐水10mL/kg,C组100ku/kg的乌司他丁腹腔注射。测取动物4h时间点呼吸频率和左心室动脉血氧分压,并于4h后取右下肺组织行HE染色和HO-1免疫组织化学检查,观察光镜下病理改变以及血红素氧化酶-1的表达。结果:乌司他丁能显著改善油酸所致急性肺损伤所致的呼吸窘迫;肺组织血红素氧化酶-1在对照组仅有少量表达,急性肺损伤组表达增多,乌司他丁干预组表达明显增强。结论:乌司他丁可通过增加肺组织中血红素氧化酶-1的表达而发挥保护作用。 展开更多
关键词 急性肺损伤 血红素氧化酶-1 乌司他丁
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血液透析对终末期肾衰患者血清中血红素氧化酶-1及炎症因子的影响 被引量：5
7
作者 吴凡 喻陆 +1 位作者 张智敏 石海滨 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期368-370,共3页
目的探讨终末期肾衰患者血液透析前后血红素氧化酶-1(HO-1)与C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)等指标的变化及相互之间的关系。方法自动生化分析仪测定血红蛋白、尿素氮、肌酐浓度;采用ELISA方法定量测定血... 目的探讨终末期肾衰患者血液透析前后血红素氧化酶-1(HO-1)与C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)等指标的变化及相互之间的关系。方法自动生化分析仪测定血红蛋白、尿素氮、肌酐浓度;采用ELISA方法定量测定血清HO-1、IL-6,化学发光法测定CRP,硫代硫巴比妥酸比色法测定MDA。结果终末期肾衰患者透析前HO-1、CRP、IL-6、MDA水平明显升高,与对照组相比差别显著;血液透析治疗前后上述指标均有明显改变,血清HO-1、CRP水平较透前升高,IL-6、MDA水平明显下降。结论终末期肾衰患者体内炎症加重,抗氧化防御酶水平随之提高;血液透析能够提高终末期肾衰患者血清中HO-1、CRP水平,同时血液透析能够清除一定的IL-6和MDA。 展开更多
关键词 终末期肾衰 血液透析 血红素氧化酶-1 C反应蛋白 白细胞介素-6 丙二醛
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冠心病患者缺氧诱导因子-1α与血红素氧化酶-1的相关性研究 被引量：9
8
作者 张国红 陈宋明 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1662-1664,共3页
目的探讨冠心病患者外周血单个核细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血红素氧化酶-1(HO-1)的相关性。方法 选择经冠脉造影确诊的冠心病患者为病例组,按照临床表现分为急性心肌梗死组(AMI组)、不稳定型心绞痛组(UAP组)和稳定型心绞痛组(SA... 目的探讨冠心病患者外周血单个核细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血红素氧化酶-1(HO-1)的相关性。方法 选择经冠脉造影确诊的冠心病患者为病例组,按照临床表现分为急性心肌梗死组(AMI组)、不稳定型心绞痛组(UAP组)和稳定型心绞痛组(SAP组);选择冠脉造影未发现冠脉病变的患者为对照组。利用Western blot检测入选对象外周血单个核细胞HIF-1α和HO-1的蛋白表达水平,相关分析方法分析两者表达水平的相关性。结果与对照组相比,AMI和UAP组HO-1和HIF-1α蛋白表达均明显增高,SAP组患者增高不明显。总体水平上,HIF-1α与HO-1呈正相关(r=0.76);在AMI、UAP、SAP组HIF-1α与HO-1表达水平也呈正相关。结论冠心病发生、发展过程中HIF-1α/HO-1通路被激活,HIF-1α可能通过诱导HO-1蛋白表达参与心肌保护作用。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1Α 血红素氧化酶-1 相关性 冠心病
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血红素氧化酶-1对高血糖和高血脂诱导血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量：4
9
作者 张艳 陈栋 +2 位作者 贡福盛 刘健 刘晓晴 《实用医学杂志》 CAS 2007年第24期3825-3827,共3页
目的:探讨血红素氧化酶-1(HO-1)在高血糖和高血脂诱导内皮细胞损伤中的保护作用。方法:体外培养人的脐静脉内皮细胞,在D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L的刺激下,分别用氯化血红素和锌原卟啉-9诱导和阻断HO-1的表达,应用逆转录-聚合... 目的:探讨血红素氧化酶-1(HO-1)在高血糖和高血脂诱导内皮细胞损伤中的保护作用。方法:体外培养人的脐静脉内皮细胞,在D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L的刺激下,分别用氯化血红素和锌原卟啉-9诱导和阻断HO-1的表达,应用逆转录-聚合酶链式反应和免疫细胞化学法检测HO-1mRNA和蛋白的表达,酶联免疫法检测培养上清液中碳氧血红蛋白,并检测内皮细胞的存活率、乳酸脱氢酶释放率和脂质过氧化产物丙二醛的含量。结果:D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L条件下,氯化血红素可以促使HO-1的表达,培养上清液中碳氧血红蛋白的含量显著增加(P<0.05),并且显著地提高内皮细胞的存活率(P<0.05),乳酸脱氢酶的释放率和细胞内丙二醛的含量显著减少(P<0.05)。而应用锌原卟啉-9后,HO-1的保护性作用消失。结论:在高血糖和高血脂条件下HO-1可以明显减轻血管内皮细胞的损伤,起到明显的保护性作用。 展开更多
关键词 高脂血症 高血糖 血红素氧化酶-1 内皮细胞
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模拟飞行对血管内皮细胞内源性CO含量、血红素氧化酶-1活力的影响 被引量：3
10
作者 罗惠兰 喻陆 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期502-502,共1页
关键词 血红素氧化酶-1 内源性一氧化碳 模拟飞行
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姜黄素对高糖刺激下大鼠肾脏系膜细胞血红素氧化酶-1表达的影响 被引量：2
11
作者 陈丽 刘晓城 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期178-180,184,共4页
目的观察高糖刺激下大鼠肾脏系膜细胞(mesangial cell,MC)血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达及姜黄素对HO-1表达的影响。方法将MC分为6组,正常对照组给予正常培养液,高糖刺激各组给予含30mmol/L葡萄糖的培养液,分别于培养6... 目的观察高糖刺激下大鼠肾脏系膜细胞(mesangial cell,MC)血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达及姜黄素对HO-1表达的影响。方法将MC分为6组,正常对照组给予正常培养液,高糖刺激各组给予含30mmol/L葡萄糖的培养液,分别于培养6、12、24、48 h后收集细胞,另1组给予含30 mmol/L葡萄糖和33.33 mmol/L姜黄素的培养液共孵育6 h后收集细胞。分别用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western blot分析法检测各组系膜细胞HO-1 mRNA和蛋白的表达情况。结果正常MC有微量的HO-1 mRNA表达,高糖刺激后HO-1 mRNA表达量明显增加,于6 h达到高峰,HO-1蛋白表达的变化趋势与mRNA变化趋势相同。MC加高糖和姜黄素共孵育6 h后,HO-1表达较单纯高糖刺激6 h组显著增强,其mRNA吸光度相对值分别为(1.987±0.236)、(1.195±0.167)(P<0.01),HO-1蛋白吸光度值分别为(23 560±1 867)、(14 072±1 333)(P<0.01)。结论高糖刺激下,系膜细胞HO-1mRNA和蛋白表达呈时间依赖性变化,姜黄素可诱导高糖刺激下系膜细胞HO-1表达增强,从而保护细胞。 展开更多
关键词 系膜细胞 血红素氧化酶-1 姜黄素
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血红素氧化酶HO-1在鼻咽癌中表达与放疗敏感性的相关性研究
12
作者 施磊 李巍 方军 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期955-956,共2页
明确鼻咽癌中血红素氧化酶-1(HO-1)的表达情况及其与放疗敏感性的关系。
关键词 血红素氧化酶-1 鼻咽癌 放射治疗
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血红素氧化酶-1与非肥胖女性多囊卵巢综合征的关联性研究 被引量：3
13
作者 丁洪波 高慧 +1 位作者 严佩佩 王迪 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期434-439,共6页
目的探讨循环中血红素氧化酶-1（HO-1）是否参与了多囊卵巢综合征（PCOS）的发生。方法获得知情同意后,按照年龄和体重指数（BMI）匹配的原则,检测了80名PCOS患者和80名健康对照者的临床特征、外周血中激素水平以及糖脂代谢情况,提取并... 目的探讨循环中血红素氧化酶-1（HO-1）是否参与了多囊卵巢综合征（PCOS）的发生。方法获得知情同意后,按照年龄和体重指数（BMI）匹配的原则,检测了80名PCOS患者和80名健康对照者的临床特征、外周血中激素水平以及糖脂代谢情况,提取并量化血清中HO-1。分析HO-1与PCOS发病风险的关系,并界定其预测作用。结果PCOS组妇女较对照组存在显著增加的胰岛素抵抗（IR）、氧化应激（OS）和炎症状态,三者共同作用,对PCOS的病理生理过程形成一个恶性循环。复合模型的受试者工作特征曲线（ROC）分析显示,纳入或不纳入HO-1的曲线下面积分别为0.864（95%CI0.808~0.919）与0.953（95%CI0.923~0.982）（P=0.000 5）。结论血清HO-1可能参与了PCOS发生和发展过程,提示HO-1可作为识别女性发生PCOS的一个早期生物学标志物。 展开更多
关键词 血红素氧化酶-1 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 氧化应激 炎症
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血红素氧化酶-1、2及内皮素-1在妊娠高血压综合征患者胎盘组织中的表达及作用 被引量：1
14
作者 王军 帅茨霞 +2 位作者 黄引平 周洁 马天平 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期605-607,I0001,共4页
目的:通过观察妊娠高血压综合征(简称妊高征,PIH)患者胎盘组织血红素氧化酶-1、2(HO-1、2)及内皮素-1(ET-1)的表达,探讨PIH发病机制。方法:采用免疫组化SABC法,检测20例PIH患者及正常孕妇的胎盘绒毛组织中的HO-1、2及ET-1,利用免疫组化... 目的:通过观察妊娠高血压综合征(简称妊高征,PIH)患者胎盘组织血红素氧化酶-1、2(HO-1、2)及内皮素-1(ET-1)的表达,探讨PIH发病机制。方法:采用免疫组化SABC法,检测20例PIH患者及正常孕妇的胎盘绒毛组织中的HO-1、2及ET-1,利用免疫组化图象分析软件测量胎盘大绒毛、微绒毛合体滋养细胞及血管的平均吸光度。结果:妊高征组大绒毛、微绒毛合体滋养细胞及血管部位的HO-2表达显著低于正常孕妇组(P<0.001),HO-1在胎盘合体滋养细胞的表达显著低于正常孕妇组(P<0.001),而妊高征组大绒毛、微绒毛合体滋养细胞及血管部位的ET-1表达显著高于正常孕妇组(P<0.001);且H0-1、2在胎盘大绒毛、微绒毛合体滋养细胞的表达与平均动脉压呈负相关,而ET-1在胎盘大绒毛、微绒毛合体滋养细胞的表达与平均动脉压呈正相关。结论:妊高征患者胎盘组织血红素氧化酶的表达减少可能在妊高征的发生、发展过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 妊娠高血压综合征 血红素氧化酶-1 血红素氧化酶-2 内皮素-1
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大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的表达 被引量：6
15
作者 吴长毅 庞庆丰 +3 位作者 曾因明 王俊科 杨光 高新跃 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期101-104,共4页
目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转... 目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养。用nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE、Westernblot鉴定表达产物,并采用分光光度法测定HO-1活性。结果:表达产物相对分子量约为32kU,表达量约为7.0mg/L,HO-1活性为2.386U/(mg·h)。结论:乳酸乳球菌能够表达具有生物活性的大鼠HO-1。 展开更多
关键词 血红素加氧酶-1 基因克隆表达 乳酸乳球菌
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血红素氧合酶-1基因多态性与冠状动脉支架术后再狭窄的相关性研究 被引量：1
16
作者 杨俊娟 罗奕龙 +3 位作者 高炜 霍勇 刘兆平 周爱儒 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期333-334,共2页
关键词 血红素氧合酶-1 HO-1 基因多态性 冠状动脉支架术 冠心病 核苷酸
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梨品种中矮1号GA20-氧化酶基因正义和反义表达载体的构建 被引量：1
17
作者 宣利利 欧春青 +3 位作者 王斐 王志刚 姜淑苓 郭晓雷 《中国果树》 北大核心 2011年第3期11-13,共3页
通过对已获得的中矮1号GA20-氧化酶基因的cDNA序列全长进行分析,选取Spe I/Bst EⅡ双酶切位点、以pCAMBIA1305为载体构建质粒。成功构建了GA20-氧化酶基因的植物正义和反义表达载体pCAMBIA1305-GAF和pCAMBIA1305-GAR,并成功转入到了农杆... 通过对已获得的中矮1号GA20-氧化酶基因的cDNA序列全长进行分析,选取Spe I/Bst EⅡ双酶切位点、以pCAMBIA1305为载体构建质粒。成功构建了GA20-氧化酶基因的植物正义和反义表达载体pCAMBIA1305-GAF和pCAMBIA1305-GAR,并成功转入到了农杆菌EHA105菌株中;为GA20-氧化酶基因的遗传转化和梨品种中矮1号矮化机理研究奠定了基础。 展开更多
关键词 梨 品种 中矮1号 GA20-氧化酶基因 表达载体 构建
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介导人血红素加氧酶-1基因真核表达质粒的构建及鉴定
18
作者 苏建华 李慧敏 +2 位作者 缪珩 鲁一兵 蒋秀芹 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期47-50,共4页
目的:构建含人血红素加氧酶-1(HO-1)基因的重组pcDNA3.1质粒并进行鉴定。方法:利用分子生物学技术,从人肝脏标本中提取出RNA,进行RT-PCR后,做TA克隆,成功获得pMD/19-HO-1质粒,采用限制性内切酶BamHⅠ、EcoRⅠ从pMD/19-HO-1质粒中将目的... 目的:构建含人血红素加氧酶-1(HO-1)基因的重组pcDNA3.1质粒并进行鉴定。方法:利用分子生物学技术,从人肝脏标本中提取出RNA,进行RT-PCR后,做TA克隆,成功获得pMD/19-HO-1质粒,采用限制性内切酶BamHⅠ、EcoRⅠ从pMD/19-HO-1质粒中将目的基因片段切出,克隆到质粒pcDNA3.1的相应酶切位点中,构建重组质粒pcDNA3.1-HO-1,采用限制性酶切、DNA测序鉴定,将构建好的质粒瞬时转染ECV304细胞株,Western blot测定HO-1表达。结果:酶切、测序鉴定证实插入位点及方向与预期完全一致,测序证实hHO-1与Gene Bank提供的原始序列完全一致,瞬时转染细胞后HO-1蛋白表达明显增高。结论:成功构建了含人血红素加氧酶-1基因的真核表达质粒,为进一步研究该基因在糖尿病血管并发症中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 血红素加氧酶-1 真核表达质粒 基因重组
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血红素氧合酶-1基因真核表达载体的构建及其在血管内皮细胞中的表达
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作者 杜敦峰 昌盛 +2 位作者 陈必成 周鸿敏 陈忠华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期483-485,489,共4页
目的克隆血红素氧合酶-1(HO-1)基因,并构建真核表达载体,建立重组HO-1蛋白的血管内皮表达细胞系。方法从大鼠脾脏中提取RNA,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),克隆到鼠的HO-1基因,并对该基因片段进行T载体克隆、酶切鉴定和测序分析。将... 目的克隆血红素氧合酶-1(HO-1)基因,并构建真核表达载体,建立重组HO-1蛋白的血管内皮表达细胞系。方法从大鼠脾脏中提取RNA,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),克隆到鼠的HO-1基因,并对该基因片段进行T载体克隆、酶切鉴定和测序分析。将HO-1基因插入到真核表达载体pcDNA3中,利用脂质体介导将重组质粒转染血管内皮细胞ECV304细胞,经G418加压筛选后,对细胞进行间接免疫荧光和Western blot分析。结果DNA测序分析表明克隆的HO-1基因与文献报道一致,酶切鉴定证实基因正确地插入表达载体中。经间接免疫荧光和Westernblot表明重组HO-1蛋白在ECV304细胞中获得高效表达,其分子量约为32 kD。结论HO-1基因真核表达载体的成功构建和重组HO-1蛋白在血管内皮细胞系中的高效表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 血红素氧合酶-1 分子克隆 血管内皮细胞 基因表达
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选择性环氧化酶-2抑制剂调节Egr-1作用机制的研究 被引量：7
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作者 江兵 蒋幼凡 +1 位作者 秦光梅 李良兰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1787-1790,共4页
目的:以肺腺癌细胞株A549为研究对象,观察不同浓度的塞来昔布对A549细胞的生长周期及凋亡率的影响,以及对早期反应基因-1(Early growth response-1,Egr-1)表达的影响,探讨环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂调节Egr-1的具体机制... 目的:以肺腺癌细胞株A549为研究对象,观察不同浓度的塞来昔布对A549细胞的生长周期及凋亡率的影响,以及对早期反应基因-1(Early growth response-1,Egr-1)表达的影响,探讨环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂调节Egr-1的具体机制,从分子水平上寻找COX-2抑制剂抗肿瘤作用的具体机制,进一步指导临床治疗。方法:体外培养肺腺癌细胞A549,经25.0、50.0、100.0μmol/L浓度的塞来昔布处理细胞,24 h后采用流式细胞仪(Flowcytometer,FCM)测定细胞周期,TUNEL法测定细胞凋亡,RT-PCR法检测Egr-1、Fas基因的表达。结果:25.0、50.0、100.0μmol/L赛来昔布作用24 h后,A549细胞不同程度的阻滞在G0/G1期,A549细胞凋亡指数分别是10.67%±1.46%、18.33%±2.54%、25.67%±2.10%,差异具有统计学意义(P<0.05);随着塞来昔布药物浓度的增加,Egr-1和Fas的mRNA表达量逐步增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:高度选择性COX-2抑制剂塞来昔布可通过调节细胞周期和细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其作用机制可能是通过上调细胞中Egr-1的表达,进而上调Fas的表达,使细胞周期阻滞于G0/G1,最终促进细胞凋亡,这可能是环氧化酶抑制剂发挥抗癌作用的分子生物学基础。 展开更多
关键词 环氧化酶-2抑制剂 肺癌 早期反应基因-1
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