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腺病毒介导血管紧张素Ⅱ2型受体基因转染对血管平滑肌细胞生物学行为的影响 被引量：2
1
作者 刘建平 何国祥 +2 位作者 景涛 王旭 史光鉴 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期441-444,共4页
为探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) 2型受体 (AT2R)基因表达对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖、迁移和凋亡等生物学行为的影响 ,用同源重组方法构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体 (AdCMV AT2R) ,体外转染VSMC ,用流式细胞仪检测AT2R转染... 为探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) 2型受体 (AT2R)基因表达对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖、迁移和凋亡等生物学行为的影响 ,用同源重组方法构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体 (AdCMV AT2R) ,体外转染VSMC ,用流式细胞仪检测AT2R转染表达率 ,RT PCR方法检测AT2RmRNA表达 ,VSMC增殖用MTT比色法和 5 溴脲苷 (BrdU)掺入法检测 ,迁移用改良Boyden趋化小室法检测 ,细胞凋亡用流式细胞仪、原位末端标记法检测。结果表明 ,AdCMV AT2R转染后 ,VSMC表达率为 89.5 1% ;AT2R峰值表达时 ,MTT吸光度和BrdU掺入量分别降低 6 1.4%和 5 1.6 % (P <0 .0 1) ,VSMC的跨膜迁移数减少 6 2 .2 % (P <0 .0 5 ) ,细胞凋亡增加约 3.2倍 ,bax表达增加 76 .3% (P <0 .0 5 )。提示AT2R表达可介导抑制VSMC的增殖和迁移 。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ2型受体 血管平滑肌细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 基因转染 腺病毒
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血管紧张素Ⅱ2型受体对AngⅡ诱导成年大鼠心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β的作用 被引量：2
2
作者 蒋小英 高广道 +2 位作者 周娟 国荣 林元喜 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1307-1309,共3页
目的探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype2 receptors,AT2)在成年心肌成纤维细胞分泌肿瘤坏死因子α(α-TNF)和白介素1β(IL-1β)中的作用,明确AT2受体和AT1受体作用的差异。方法差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞,将... 目的探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype2 receptors,AT2)在成年心肌成纤维细胞分泌肿瘤坏死因子α(α-TNF)和白介素1β(IL-1β)中的作用,明确AT2受体和AT1受体作用的差异。方法差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞,将细胞分为4组进行药物干预:对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、AngⅡ+氯沙坦(losartan)组、AngⅡ+PD123319组,应用放射免疫法检测各组细胞分泌α-TNF和IL-1β的水平。结果AngⅡ诱导使心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β明显增加。与AngⅡ组相比,α-TNF在AT1受体阻断后下调了58.7%(P<0.05),AT2受体阻断后下调了65.9%(P<0.05);IL-1β在AT1受体阻断后下调了69.1%(P<0.05),AT2受体阻断后下调了78.7%(P<0.05)。结论AT2受体参与介导心肌成纤维细胞分泌α-TNF和IL-1β。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 血管紧张素ⅱ 血管紧张素ⅱ2型受体 Α肿瘤坏死因子 白介素1Β
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血管紧张素Ⅱ2型受体基因重组腺病毒简便快速的构建方法 被引量：3
3
作者 唐兵 黎军 +1 位作者 何国祥 李德 《医学研究生学报》 CAS 2005年第5期402-403,407,F003,共4页
目的:利用细菌内同源重组法构建含血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因的重组腺病毒。方法:应用PCR技术从质粒PUHD AT2R中克隆出AT2R基因片段,定向克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrackCMV中,PmeⅠ酶切线性化后转化Adeasier1细胞,抽提经鉴定含有目... 目的:利用细菌内同源重组法构建含血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因的重组腺病毒。方法:应用PCR技术从质粒PUHD AT2R中克隆出AT2R基因片段,定向克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrackCMV中,PmeⅠ酶切线性化后转化Adeasier1细胞,抽提经鉴定含有目的基因的重组腺病毒质粒,PacⅠ酶切后用脂质体转染293细胞,包装成重组腺病毒Ad AT2R。用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有GFP报告基因,对病毒滴度进行监测。结果:PCR检测表明重组腺病毒已含有目的基因AT2R,滴度为1.5×1012pfu/ml。结论:细菌内同源重组法构建腺病毒比传统的细胞内同源重组法具有成功率高、方法简便、快捷和实验周期短的优点。AT2R基因重组腺病毒的成功构建为进一步实验研究奠定了基础。 展开更多
关键词 腺病毒 血管紧张素ⅱ2型受体基因 同源重组 细菌
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血管紧张素Ⅱ2型受体的功能及其信号转导 被引量：2
4
作者 李艳芳 杨彦平 刘国树 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期383-384,共2页
血管紧张素 2型受体 (AT2 )的生理功能及其信号转导机制 ,过去所知甚少 ,并存在错误认识。近年来对 AT2的研究进展很快 ,对其功能和信号转导机制又有新的发现和认识。
关键词 血管紧张素ⅱ2型受体 信号转导 生理功能
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血管紧张素Ⅱ2型受体基因对血管平滑肌细胞的促凋亡作用 被引量：1
5
作者 刘建平 何国祥 +3 位作者 景涛 史光鉴 王旭 张小荣 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期216-219,共4页
目的：探索血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）２型（ＡＴ２）受体基因对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）凋亡的影响。 方法：用同源重组技术构建携带ＡＴ２受体基因的复制缺陷型腺病毒载体（ＡｄＣＭＶ－ＡＴ２Ｒ），将ＶＳＭＣ分为对照组及转染组... 目的：探索血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）２型（ＡＴ２）受体基因对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）凋亡的影响。 方法：用同源重组技术构建携带ＡＴ２受体基因的复制缺陷型腺病毒载体（ＡｄＣＭＶ－ＡＴ２Ｒ），将ＶＳＭＣ分为对照组及转染组（体外转染培养的大鼠ＶＳＭＣ），用流式细胞术检测其细胞转染率，逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测ＡＴ２受体、 ｂｃｌ－２和 ｂａｘ ｍＲＮＡ表达，流式细胞术、原位末端标记法检测 ＶＳＭＣ凋亡。 结果：构建的 ＡｄＣＭＶ－ＡＴ２受体体外转染培养的ＶＳＭＣ的表达率为 ８９． ５１％， ＶＳＭＣ表达 ＡＴ２受体后，其凋亡发生率较对照组增加 ４．２倍（Ｐ＜０．０１），ｂａｘ表达增加 ７６．３％， ｂｃｌ－２则无明显变化，原位末端标记法检测结果表明转染组出现大量凋亡细胞。结论：转染ＡＴ２受体基因可显著增加ＶＳＭＣ的凋亡，这对血管再狭窄的防治是有益的。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ2型受体 血管平滑肌细胞 细胞凋亡 血管疾病
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血管紧张素Ⅱ2型受体基因敲除小鼠的构建、繁育和基因型鉴定 被引量：1
6
作者 蒋吉 胡姗姗 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第8期1236-1240,共5页
目的利用CRISPR/Cas9技术构建血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptors,Agtr2)基因敲除(Agtr2^(-/-))小鼠,分析Agtr2^(-/-)小鼠的繁育和基因型。方法与江苏集萃药康公司联合设计执行CRISPR/Cas9技术,获得Agtr2^(-/-)F0代小鼠... 目的利用CRISPR/Cas9技术构建血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptors,Agtr2)基因敲除(Agtr2^(-/-))小鼠,分析Agtr2^(-/-)小鼠的繁育和基因型。方法与江苏集萃药康公司联合设计执行CRISPR/Cas9技术,获得Agtr2^(-/-)F0代小鼠,通过聚合酶链式反应(PCR)对鼠尾基因型进行鉴定。F1代Agtr2^(-/-)小鼠由F0代Agtr2^(-/-)小鼠性成熟后与同窝野生型小鼠交配而得。PCR鉴定结果的可靠性则通过Western blot从蛋白水平上加以验证。结果利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Agtr2^(-/-)小鼠并对所获小鼠进行繁育和基因型鉴定,得到了Agtr2+/+、Agtr2+/-、Agtr2^(-/-)3种基因型稳定的Agtr2基因小鼠。Western blot检测结果证实Agtr2^(-/-)小鼠心脏、脾脏、胸腺、肝脏及肾脏组织中几乎不表达Agtr2蛋白。结论成功构建了Agtr2^(-/-)小鼠模型,并通过可靠的鉴定方法和合适的繁育手段得到纯合Agtr2^(-/-)小鼠。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ2型受体 CRISPR/Cas9 基因敲除 聚合酶链式反应 琼脂糖凝胶电泳 基因型鉴定
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血管紧张素Ⅱ2型受体阻滞剂对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响 被引量：4
7
作者 李升红 万婷 +5 位作者 刘宏伟 程飚 肖丽玲 谢光辉 卢金强 肖静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1255-1259,共5页
目的:观察阻断血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及其2型受体(AT2R)对创面愈合过程的创面愈合率、上皮爬行、肉芽组织形成以及创伤局部生长因子表达的影响,探讨Ang Ⅱ及AT2R影响创伤愈合的机制。方法:建立小鼠背部全层皮肤缺损创面模型,直径6 mm,在... 目的:观察阻断血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及其2型受体(AT2R)对创面愈合过程的创面愈合率、上皮爬行、肉芽组织形成以及创伤局部生长因子表达的影响,探讨Ang Ⅱ及AT2R影响创伤愈合的机制。方法:建立小鼠背部全层皮肤缺损创面模型,直径6 mm,在创面模型建立同时腹腔注射给予特异性AT2R阻断剂PD123319(每天10 mg/kg),于创面形成后第3、5、7、9、11、13和15天切取创面组织标本,采用HE染色观察PD123319对创面愈合过程中创面愈合率、上皮爬行和肉芽组织生长的影响;采用ELISA法检测PD123319对创面内与创伤愈合密切相关的表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。结果:对照组在创面形成后第5天和第7天的愈合率分别为(63.55±2.57)%和(80.78±4.65)%。PD123319处理组在创面形成后第5天和第7天分别为(79.89±4.56)%和(88.98±3.83)%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。在伤后第5天和第7天,对照组创面上皮爬行距离分别为(1.22±0.15)mm和(1.93±0.17)mm,PD123319处理组创面上皮爬行距离分别为(1.65±0.12)mm和(2.36±0.18)mm,两组差异有统计学意义(P<0.05)。在伤后第5天和第7天对照组创面肉芽组织的面积分别为(9.37±0.53)mm2和(7.15±0.42)mm2,PD123319处理组创面肉芽组织面积分别为(11.51±0.98)mm2和(9.32±0.67)mm2,两组差异有统计学意义(P<0.05)。在伤后第5天和第7天,PD123319处理组创面局部EGF、VEGF和bFGF的含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AT2R阻滞剂PD123319能够促进创面愈合。PD123319促进创面愈合可能与其促进创面内上皮爬行、肉芽组织形成及EGF、VEGF、bFGF等生长因子的表达有关。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ 受体 血管紧张素 2型 创面愈合 生长因子
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血管紧张素Ⅱ2型受体介导抑制大鼠颈动脉新生内膜增生的机制 被引量：5
8
作者 唐兵 何国祥 +3 位作者 李德 刘建平 姜大春 黎军 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2006年第2期148-151,共4页
目的:探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)介导抑制新生内膜增生作用的机制。方法:大鼠颈动脉球囊损伤后,局部转染带有大鼠AT2R基因重组腺病毒转染(pAdCMV／AT2R)或空载腺病毒转染 (pAd-GFP),分正常组(6只)、未转染组(18只)、pad-GFP组(18只)... 目的:探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)介导抑制新生内膜增生作用的机制。方法:大鼠颈动脉球囊损伤后,局部转染带有大鼠AT2R基因重组腺病毒转染(pAdCMV／AT2R)或空载腺病毒转染 (pAd-GFP),分正常组(6只)、未转染组(18只)、pad-GFP组(18只)、pAdCMV／AT2R组(18只)。于术后7、14、21天取材,用逆转录一多聚酶链反应、Western印迹杂交检测AngⅡ1型受体(AT1R)、AT2R、胞外调控激酶1和2、基本转录元件结合蛋白2在大鼠颈动脉壁中的表达变化。结果:未转染组和pad-GFP组AT1R、AT2R、胞外调控激酶1和2、基本转录元件结合蛋白2的7、14、21天mRNA及蛋白表达显著高于正常组,pAdCMV／AT2R组AT2R的表达显著高于正常组、未转染组和pAd-GFP组(P<0．01),胞外调控激酶1和2、基本转录元件结合蛋白2的表达显著低于未转染组和pAd-GFP组(P<0．01),而AT1R的表达在未转染组、pAd-GFP组、pAdCMV／AT2R组无显著差异(P>0．05)。结论:AT2R灭活AT1R激活的胞外调控激酶1和2,降低基本转录元件结合蛋白2表达,可能是AT2R介导抑制新生内膜形成的机制之一。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ受体 胞外调控激酶 基本转录元件结合蛋白2 新生内膜增生
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血管紧张素Ⅱ2型受体对大鼠子宫内膜异位症血管生成的影响 被引量：8
9
作者 张真真 戴姝艳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期792-796,共5页
目的探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)对大鼠子宫内膜异位症血管生成的影响。方法 Vernon自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,造模成功后,随机分为实验组(AT2R激动剂CGP42112A 5、15、30μg·kg^(-1)·d^(-1)),阳性对照组(AT1... 目的探讨血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)对大鼠子宫内膜异位症血管生成的影响。方法 Vernon自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,造模成功后,随机分为实验组(AT2R激动剂CGP42112A 5、15、30μg·kg^(-1)·d^(-1)),阳性对照组(AT1R阻滞剂氯沙坦10 mg·kg^(-1)·d^(-1))和阴性对照组(无菌注射用水),分别给药处理。4周后处死大鼠,比较治疗后异位结节体积差异,免疫组化检测异位结节组织中微血管密度(MVD),ELISA法检测大鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果与对照组相比,CGP42112A可剂量依赖性的缩小异位结节体积,降低异位结节的MVD(P<0.01);大鼠血清中VEGF及TNF-α表达水平也明显低于对照组(P<0.05)。结论 AT2R能够明显抑制大鼠子宫内膜异位症血管的生成,为子宫内膜异位症的靶向治疗提供了新的方向。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 血管紧张素ⅱ2型受体 微血管密度 血管生成
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术前血浆血管紧张素Ⅱ2型受体浓度与全膝关节置换术后慢性疼痛的相关性 被引量：10
10
作者 陈帆 王迪 +3 位作者 杨歆璐 高玮 胡继成 柴小青 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期475-479,共5页
目的探讨术前血浆血管紧张素Ⅱ2型受体(AT 2R)浓度与全膝关节置换术(TKA)术后慢性疼痛(CPSP)的相关性。方法选择择期全麻下行首次单侧TKA的患者120例,男46例,女74例,年龄45~70岁,BMI 18~30 kg/m^(2),ASAⅠ—Ⅲ级。所有患者麻醉方法和手... 目的探讨术前血浆血管紧张素Ⅱ2型受体(AT 2R)浓度与全膝关节置换术(TKA)术后慢性疼痛(CPSP)的相关性。方法选择择期全麻下行首次单侧TKA的患者120例,男46例,女74例,年龄45~70岁,BMI 18~30 kg/m^(2),ASAⅠ—Ⅲ级。所有患者麻醉方法和手术方式一致。术后3个月随访患者膝关节VAS疼痛评分,静息和(或)运动时VAS疼痛评分>3分记为CPSP阳性,≤3分记为CPSP阴性,根据CPSP将患者分为阳性组(n=41)和阴性组(n=79)。记录性别、年龄、BMI、ASA分级、膝骨关节炎(KOA)病程等一般情况。记录术前、术后1 d和术后3个月静息、运动时VAS疼痛评分。记录术前paindetect量表(PD-Q)评分、WOMAC评分、焦虑抑郁量表(HAD)评分、K-L分级、术前和术后1 d压力性痛觉阈值(PPT)、术前血浆AT 2R浓度、术中丙泊酚和瑞芬太尼用量、手术时间、止血带使用时间、出血量和术后补救镇痛情况。结果本研究TKA患者CPSP的发生率为34.2%。与阴性组比较,阳性组KOA病程明显延长(P<0.05),术前血浆AT 2R浓度明显升高(P<0.05),术前运动时VAS疼痛评分、PD-Q评分、WOMAC评分、术后3个月静息和运动时VAS疼痛评分均明显升高(P<0.05),术前PPT明显降低(P<0.05)。其余指标两组差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析显示,术前血浆AT 2R浓度和PD-Q评分是CPSP发生的独立危险因素。根据ROC曲线分析,术前血浆AT 2R浓度临界值为1067.3 pg/ml,敏感性为0.607,特异性为0.811,曲线下面积0.751(0.660~0.853);PD-Q评分临界值为18分,敏感性为0.833,特异性为0.716,曲线下面积0.765(0.591~0.896)。结论术前血浆AT 2R浓度是CPSP发生的独立危险因素,术前血浆AT 2R浓度越高,CPSP发生风险越高,对于CPSP诊断有一定的价值。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ2型受体 全膝关节置换术 术后慢性疼痛
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血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA在大鼠心肌生长发育及老龄化中的表达变化
11
作者 李志华 甄志军 李剑 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期446-447,454,共3页
目的　阐明血管紧张素Ⅱ 2型受体 (angiotensinⅡtype 2receptor,AT2 )在大鼠心肌生长发育及老龄化中的地位。方法　采用RT PCR方法观察不同生长阶段大鼠心肌组织AT2受体mRNA的表达及其增龄性变化 ,并经DNA测序验证PCR产物的正确性。结... 目的　阐明血管紧张素Ⅱ 2型受体 (angiotensinⅡtype 2receptor,AT2 )在大鼠心肌生长发育及老龄化中的地位。方法　采用RT PCR方法观察不同生长阶段大鼠心肌组织AT2受体mRNA的表达及其增龄性变化 ,并经DNA测序验证PCR产物的正确性。结果　幼年大鼠心肌组织AT2受体mRNA的表达水平较高 ,而在成年及老年大鼠心肌中的表达水平显著低于幼鼠心肌 (P <0 .0 1,n =4 )。结论　血管紧张素Ⅱ可能参与了心肌细胞的生长发育及老龄化过程 。 展开更多
关键词 心肌 生长发育 增龄 血管紧张素ⅱ2型受体 逆转录聚合酶链反应
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血管紧张素Ⅱ2型受体在体可调控表达对大鼠颈动脉新生内膜增生的影响
12
作者 苗莉 罗先润 +4 位作者 景涛 张辉 刘安丰 娄云霄 何国祥 《医学研究生学报》 CAS 2011年第9期900-903,共4页
目的血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)基因转染可减轻血管损伤后新生内膜的过度增生,但如何主动调控转入体内基因的表达有着重要的临床意义。文中以四环素可调控系统下的AT2R基因转染的骨髓间充质干细胞(m esenc... 目的血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)基因转染可减轻血管损伤后新生内膜的过度增生,但如何主动调控转入体内基因的表达有着重要的临床意义。文中以四环素可调控系统下的AT2R基因转染的骨髓间充质干细胞(m esenchymal stem cell,MSC)为载体,探讨AT2R在体可调控表达及对大鼠颈动脉新生内膜的影响。方法大鼠颈动脉球囊损伤后,分别将PBS液、常规培养的大鼠MSC、四环素可调控系统下的AT2R基因转染的MSC局部灌注,后者又分为给予强力霉素(deoxycyline,Dox)及不给予强力霉素组。于术后14、28 d取材,分析新生内膜增生情况,免疫组化法及逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测AT2R在大鼠颈动脉壁中的表达变化。结果导入转染AT2R-MSC+Dox组大鼠颈动脉新生内膜面积较其他各损伤组显著降低(P<0.01),同时AT2R的表达显著增高;MSC对血管内膜增生无明显影响。结论四环素可调控AT2R基因在体可调控表达系统受到Dox的有效控制,可显著抑制动脉损伤后新生内膜的增生。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ受体 新生内膜 强力霉素
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原发性高血压患者中血管紧张素Ⅱ2型受体基因A1675G多态性与缬沙坦降压疗效的相关性研究 被引量：3
13
作者 李刚强 阎伟 +1 位作者 巢胜吾 樊济海 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第2期185-188,共4页
目的:探讨原发性高血压患者中血管紧张素Ⅱ2型受体基因A1675G单核苷酸多态性与高血压发生及缬沙坦治疗的关系。方法:应用直接测序方法对80例原发性高血压和40例正常人群中血管紧张素Ⅱ2型受体基因作SNP分型。结果:原发性高血压患者A1675... 目的:探讨原发性高血压患者中血管紧张素Ⅱ2型受体基因A1675G单核苷酸多态性与高血压发生及缬沙坦治疗的关系。方法:应用直接测序方法对80例原发性高血压和40例正常人群中血管紧张素Ⅱ2型受体基因作SNP分型。结果:原发性高血压患者A1675G位点上A等位基因频率和正常人群中相比有统计学意义(P<0.05);其与用药后血压的下降幅度有统计学意义(P<0.05)。结论:血管紧张素Ⅱ2型受体基因的A1675G单核苷酸多态性与原发性高血压发病有关,其可能是缬沙坦降压疗效的新的预测因子。 展开更多
关键词 高血压 血管紧张素ⅱ 受体 单核苷酸多态性 缬沙坦
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血管紧张素Ⅱ-1型受体自身抗体-AT1R-Bmal1轴促进血管平滑肌细胞表型转换和血管纤维化
14
作者 薛灵霞 龙瑶琳 +6 位作者 冯佳艳 毛田 郭娇 王卓玺 李杨 王晓晖 王丽 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第11期1155-1164,共10页
目的探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)自身抗体(AT1R autoantibody,AT1-AA)通过促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)生物钟蛋白BMAL1异常表达诱导细胞表型转换以及血管纤维化的作用机... 目的探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)自身抗体(AT1R autoantibody,AT1-AA)通过促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)生物钟蛋白BMAL1异常表达诱导细胞表型转换以及血管纤维化的作用机制。方法将12只6~8周的SD雄性大鼠(体质量180~220 g)按随机数字表法分为2组(n=6):对照组以及使用AT1R细胞外第二环(extracellular loopⅡof angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R-ECLⅡ)主动免疫SD大鼠建立的AT1-AA阳性组。采用HE染色和Masson染色分别观察2组大鼠胸主动脉血管结构变化和纤维化情况(n=3)。采用Western blot检测血管组织以及原代VSMCs中纤维化标志蛋白CollagenⅠ、表型转换相关蛋白SM22、α-SMA、OPN以及MMP2的表达(n=4),此外,还检测了CT0、CT4、CT8、CT12、CT16、CT20时生物钟蛋白BMAL1的表达。通过Transwell实验和划痕实验检测VSMCs的增殖迁移能力(n=3),使用si-RNA技术敲低Bmal1后检测BMAL1、CollagenⅠ、表型转换相关蛋白的表达(n=3)。另外,构建AT1-AA阳性的AT1R敲除(AT1R-KO)大鼠模型使用Western blot检测其胸主动脉血管组织BMAL1的表达(n=4)。结果AT1-AA阳性大鼠胸主动脉血管壁增厚[(140±9)%vs(120±5)%,P<0.05],血管平滑肌细胞排列紊乱,Masson染色蓝染明显,且CollagenⅠ表达较Control组表达上调(P<0.05)。AT1-AA阳性大鼠胸主动脉以及AT1-AA处理的VSMCs中收缩表型相关蛋白α-SMA、SM22表达下降(P<0.05),合成表型相关蛋白OPN、MMP2表达上调(P<0.05);AT1-AA诱导VSMCs划痕愈合能力以及迁移能力都显著增强。进一步发现,Bmal1的mRNA表达(0.67±0.26 vs 1.03±0.17)以及蛋白表达(0.46±0.06 vs 0.85±0.26)均在CT12时显著上调(P<0.05),且Bmal1的节律性消失(P<0.05)。敲低BMAL1后,AT1-AA诱导的VSMCs表型转换现象得到部分改善。与AT1-AA阳性的WT大鼠比较,AT1-AA阳性的AT1R-KO大鼠胸主动脉血管中BMAL1表达明显降低(1.35±0.06 vs 0.86±0.07,P<0.001);细胞水平发现AT1-AA诱导的VSMCs表型转换及胶原蛋白CollagenⅠ高表达的现象在AT1R-KO的VSMCs中得到部分改善。结论AT1-AA通过AT1R-Bmal1轴促进VSMCs表型转换以及血管纤维化。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ-1型受体自身抗体 BMAL1 血管紧张素ⅱ-1型受体 血管平滑肌细胞 表型转换 血管纤维化
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circHIPK2调节miR-7-5p/TCF4轴对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞凋亡的影响
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作者 谷君 任卫东 +4 位作者 李会贤 邓文娟 胡利梅 刘慧颖 蔡裕 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第3期257-261,267,共6页
目的研究环状RNA同源域相互作用蛋白激酶2(circHIPK2)调节miR-7-5p/转录因子4(TCF4)轴对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)随机分为对照组、模型组、阴性对照共转染组、敲低circHIPK2组... 目的研究环状RNA同源域相互作用蛋白激酶2(circHIPK2)调节miR-7-5p/转录因子4(TCF4)轴对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)随机分为对照组、模型组、阴性对照共转染组、敲低circHIPK2组、过表达miR-7-5p组、敲低circHIPK2+敲低miR-7-5p组。除对照组外,其余各组给予10 nmol/L AngⅡ,构建高血压损伤模型,转染后测定circHIPK2、miR-7-5p和TCF4 mRNA表达水平;检测细胞增殖、凋亡、线粒体膜电位、活性氧(ROS)表达、抗氧化酶活性、促炎性细胞因子水平、凋亡相关蛋白和TCF4蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组细胞circHIPK2和TCF4 mRNA表达水平、凋亡率、ROS相对表达、IL-6水平、IL-1β水平、IL-18水平、Bax和TCF4蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞活力、miR-7-5p mRNA表达水平、线粒体膜电位、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶活性、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05);敲低circHIPK2、过表达miR-7-5p均可逆转上述AngⅡ诱导的血管内皮细胞病理变化。敲低miR-7-5p可降低敲低circHIPK2对模型组细胞病理变化的改善作用。结论敲低circHIPK2可通过上调miR-7-5p表达而减弱TCF4表达,进而降低AngⅡ诱导的血管内皮细胞炎症和氧化应激水平,最终抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA同源域相互作用蛋白激酶2 miR-7-5p/TCF4轴 血管紧张素ⅱ 血管内皮细胞 凋亡
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血管紧张素Ⅱ-2型受体A1675G基因多态性与家族性高血压的相关性研究 被引量：3
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作者 寇学俊 邢艳秋 +3 位作者 路方红 刘振东 王慧 张会珍 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2012年第2期87-90,共4页
目的:探讨血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2R)A1675G基因多态性与家族性高血压的相关性。方法:选取高血压家系(高血压家系组)30个(120例受试者)和正常血压家系(正常血压家系组)29个(115例受试者)进行对照研究。采用聚合酶链式反应(PCR)技术分析... 目的:探讨血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2R)A1675G基因多态性与家族性高血压的相关性。方法:选取高血压家系(高血压家系组)30个(120例受试者)和正常血压家系(正常血压家系组)29个(115例受试者)进行对照研究。采用聚合酶链式反应(PCR)技术分析AT2R A1675G基因多态性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术测定AT2R的表达。结果:高血压家系组AA型、AG型频率分布(53.3%、16.7%)比正常血压家系组(38.2%、12.2%)均升高,GG型频率分布(30.0%vs 49.6%)降低,高血压家系组比正常血压家系组等位基因A的频率分布(61.7%vs 44.3%)升高、G的频率分布(38.3%vs 55.7%)降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。高血压家系组与正常血压家系组比较,AG型患者和GG型患者的AT2R表达浓度[(43.4±12.4)ng/ml vs(52.4±11.6)ng/ml,(53.2±15.3)ng/ml vs(65.9±16.9)ng/ml]均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AT2R基因A1675G多态性与家族性高血压有明显相关性;G基因和AT2R在家族性高血压的发病中起着重要的保护作用。 展开更多
关键词 高血压 血管紧张素ⅱ-2型受体 基因多态性
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同型半胱氨酸在大鼠血管平滑肌细胞上通过激活ERK1/2信号通路促进血管紧张素Ⅱ受体1表达 被引量：4
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作者 姜衡 于曼丽 +3 位作者 魏勇 欧阳平 梁春 吴宗贵 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期968-973,共6页
目的观察同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)血管紧张素Ⅱ受体1(angiotensinⅡreceptor type 1,AT1R)蛋白表达的影响。方法从大鼠胸主动脉分离、培养VSMCs,并用平滑肌特异性肌纤... 目的观察同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)血管紧张素Ⅱ受体1(angiotensinⅡreceptor type 1,AT1R)蛋白表达的影响。方法从大鼠胸主动脉分离、培养VSMCs,并用平滑肌特异性肌纤蛋白(α-SMA)进行免疫荧光鉴定;用10、100和300μmol/L 3个不同浓度的Hcy孵育VSMCs,或在加入Hcy的同时加入5μmol/L的ERK1/2通路阻断剂U0126,48h后用免疫印迹法检测磷酸化的ERK1/2及AT1R的蛋白表达。结果经鉴定,成功分离、培养VSMCs。10、100和300μmol/L 3个不同浓度的Hcy均可上调VSMC的AT1R蛋白表达量(与溶剂对照组比较,P<0.05)。但3个浓度的Hcy组间差异无统计学意义(P>0.05)。10μmol/L的Hcy可增加VSMC的ERK1/2磷酸化(P<0.05),激活ERK1/2信号通路。ERK1/2通路抑制剂U0126可完全阻断Hcy导致的ERK1/2磷酸化,并取消Hcy导致的AT1R上调。结论 Hcy可通过激活ERK1/2信号通路促进大鼠VSMC AT1R的表达,这一结果可能有助于揭示高Hcy血症与高血压的内在联系。 展开更多
关键词 高血压 同型半胱氨酸 血管平滑肌细胞 ERK1/2 血管紧张素ⅱ受体1
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血管紧张素Ⅱ-2型受体基因A1675G多态性与原发性高血压的相关性研究 被引量：3
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作者 周平 李法琦 马厚勋 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第6期836-839,共4页
目的:研究血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2R)基因A1675G单核苷酸多态性(SNPs)与中国汉族人群原发性高血压 (Essential Hypertension,EH)的关系,探讨AT2R基因在EH发病机制中的作用。方法:应用等位基因特异性引物PCR方法检测181例EH患者(EH组)和... 目的:研究血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2R)基因A1675G单核苷酸多态性(SNPs)与中国汉族人群原发性高血压 (Essential Hypertension,EH)的关系,探讨AT2R基因在EH发病机制中的作用。方法:应用等位基因特异性引物PCR方法检测181例EH患者(EH组)和187例健康人(对照组)的AT2R基因型,比较各组间的等位基因频率及基因型分布差异,分析 AT2R基因A1675G多态性与高血压的关系。结果:AT2R基因A1675G的A等位基因频率在EH组明显高于对照组(53．3％ vs 44．4％),但两组间差异无显著性意义(P>0．05)。在男性组中,EH组的A等位基因频率明显高于对照组(53．6％vs 42．9％,P>0．05);而在女性组中,EH组和正常对照组间各基因型(AA,AG,GG)频率及等位基因频率分布的差异均无显著性意义(P>0．05)。结论:AT2R的A等位基因频率在EH组的分布较正常对照组高,但无统计学意义,尚不能确定AT2R基因 A1675G多态性与中国人原发性高血压的发生存在相关性。 展开更多
关键词 高血压 血管紧张素ⅱ-2型受体 基因多态性 PCR
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哇巴因对血管紧张素Ⅱ及其1型和2型受体mRNA在心肌中表达的影响 被引量：3
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作者 郭宁 姜馨 +1 位作者 吕卓人 艾文婷 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期526-529,共4页
目的观察哇巴因(Ouabain)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其1型(AT1)与2型(AT2)受体mRNA在心肌中表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为3组,分别为Ouabain组[27.8 ng/(kg.d)Ouabain腹腔注射]、Losartan组[27.8 ng/(kg.d)Ouabain腹腔注射,同时给予... 目的观察哇巴因(Ouabain)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其1型(AT1)与2型(AT2)受体mRNA在心肌中表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为3组,分别为Ouabain组[27.8 ng/(kg.d)Ouabain腹腔注射]、Losartan组[27.8 ng/(kg.d)Ouabain腹腔注射,同时给予Losartan 30 ng/(kg.d)灌胃]、对照组(生理盐水2 mL/d腹腔注射),每周测定鼠尾血压,共6周。应用放免法测定各组大鼠血浆及心肌中AngⅡ质量浓度,同时采用实时定量荧光PCR(FQ-PCR)观察心肌中AT1和AT2mRNA表达的变化。结果血浆中的AngⅡ质量浓度在Ouabain组及Losartan组均显著高于对照组(P<0.05),而Ouabain组心肌中AngⅡ质量浓度无明显变化。与对照组相比,Ouabain组及Losartan组心肌中AT1mRNA与AT2mRNA的表达明显上调(P<0.05)。结论外周长期、慢性给予Ouabain后可持续升高SD大鼠的血压,并使RAS系统激活,这一作用可能是通过AT1受体介导。给予Ouabain激活AT1受体的同时,AT2活性也增加。 展开更多
关键词 血管紧张素ⅱ 1型受体 2型受体 哇巴因
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1型血管紧张素Ⅱ受体基因多态性与2型糖尿病伴高血压的相关性 被引量：10
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作者 薛耀明 周琳 罗仁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第5期444-446,共3页
目的 探讨1型血管紧张素Ⅱ受体(ATIR)基因多态与2型糖尿病病伴高血压之间的相互关系。方法 以ATIF基因为侯选基因,就用PCR方法,检测132例2型糖尿病伴高血压２型糖尿病无高血压患者的ATIR基因多态性。结果２组研究对象AA基因型分布频率... 目的 探讨1型血管紧张素Ⅱ受体(ATIR)基因多态与2型糖尿病病伴高血压之间的相互关系。方法 以ATIF基因为侯选基因,就用PCR方法,检测132例2型糖尿病伴高血压２型糖尿病无高血压患者的ATIR基因多态性。结果２组研究对象AA基因型分布频率分别为88.79%与96.97%基因型分布频率分别为11.21%3.03%;A等位基因携带率分别为94.39%与98.48%,C等位基因携带率为5.61与1.52%,均有显著性差异(P＜0.05),提示ATIR基因多态性与２M糖尿病伴高血压的发生有相关性,且糖尿病伴高血压患者病程显著延长。正常血压糖尿病患者与单纯舒张压升高糖尿病患者之间ATIR-A1166-C基因多态性无显著差异,而与单纯收缩压升高糖尿病患者之间有显著性差异,结论,ATIR基因参与2型糖尿病伴高血压的发病,并仅与收缩压升高有关。 展开更多
关键词 1型血管紧张素ⅱ受体 糖尿病 高血压 2型糖尿病 AT1R基因 基因多态性
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